本发明属于植物繁殖领域，涉及石斛繁殖技术，具体涉及野生石斛的繁殖方法。
背景技术：
石斛属资源是我国ⅰ级保护植物，属于濒危植物资源，资源较少，自然繁殖率低，在驯化栽培中易发生病毒病，导致植株死亡，造成资源材料流失。我国有石斛资源76种，目前仅有少数石斛品种通过无菌组培方法扩大繁殖，比如铁皮石斛、春石斛、铜皮石斛等。在实现本发明过程中，发明人发现现有技术中至少存在如下问题：1、组培繁殖石斛需要相对应的设施及无菌系操作，虽然出苗量较大，但幼苗较弱,出苗后直接移栽易发生病害，导致死亡率较高,成活率较低；2、通过组培扩繁的瓶苗出苗后定植前还需炼苗技术优化培育壮苗，周期长，成本高。技术实现要素：鉴于此，本发明目的在于提供一种成活率高、繁殖周期短、成本低的野生石斛繁殖方法。发明人通过长期的探索和尝试，以及多次的实验和努力，不断的改革创新，为解决以上技术问题，本发明提供的技术方案是，提供一种野生石斛繁殖方法，包括以下步骤：步骤a）整床选择便于沥水的育苗床，在育苗床上铺设经过杀菌的发酵脱脂树皮层，在所述发酵脱脂树皮层上设置经过杀菌的第一保湿层；步骤b）剪茎将野生石斛直立茎剪切成段，阴干至伤口干燥；步骤c）捂芽将阴干后的野生石斛茎段平铺在第一保湿层上，再在野生石斛茎节上方覆盖第二保湿层，开始捂芽；步骤d）移栽捂芽20-30天后，选用腋芽直接移栽。根据本发明野生石斛繁殖方法的一个较佳实施方式，所述步骤a）中，发酵脱脂树皮块径为8-18mm。根据本发明野生石斛繁殖方法的一个较佳实施方式，所述第一保湿层为干水苔或干苔藓铺设而成，所述第二保湿层为干水苔或干苔藓铺设而成。根据本发明野生石斛繁殖方法的一个较佳实施方式，所述第一保湿层厚度为3cm，所述第二保湿层厚度为2cm。根据本发明野生石斛繁殖方法的一个较佳实施方式，所述步骤b）中，健康的植株，将野生石斛直立茎剪成10-15cm长的段，株型小的资源品种可剪成5cm长或直接使用直立茎，阴干1-2天。根据本发明野生石斛繁殖方法的一个较佳实施方式，所述步骤b）中，根部坏死或茎部病变的植株，先将病变部位剪除，再将茎浸泡杀菌，杀菌后阴干2-3天。根据本发明野生石斛繁殖方法的一个较佳实施方式，所述步骤c）中，捂芽温度为28℃-35℃，捂芽湿度为80%-90%。捂芽温度是在28℃至35℃中的任一温度，包括但不限于28℃、29℃、30℃、31℃、32℃、33℃、34℃或35℃，优选捂芽温度为30℃。捂芽湿度为80%-90%，是指该区间内的任意湿度，包括但不限于80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%，优选地捂芽湿度为85%。根据本发明野生石斛繁殖方法的一个较佳实施方式，所述步骤c）中，捂芽5天后喷施生根剂。根据本发明野生石斛繁殖方法的一个较佳实施方式，所述杀菌采用杀菌剂浸泡杀菌。根据本发明野生石斛繁殖方法的一个较佳实施方式，所述野生石斛包括金钗石斛、大苞鞘石斛、玫瑰石斛、肿节石斛、美花石斛、铁皮石斛、细茎石斛和叠鞘石斛。根据本发明野生石斛繁殖方法的一个较佳实施方式，所述野生石斛为金钗石斛、大苞鞘石斛或玫瑰石斛。与现有技术相比，上述技术方案中的一个技术方案具有如下优点：a)采用本发明的繁殖方式，成本低，操作简单。b)采用本发明的繁殖方式，还可利用根部坏死或茎部病变的植株继续繁殖。c)与组培快繁殖比较，本发明捂芽繁殖腋芽萌发苗粗壮，可直接移栽，无需炼苗，方法简单，成本低。移栽后的成活率高，能有效地保护濒危野生石斛资源，扩大野生石斛资源种群数量。d)本发明繁殖方法的一个实施例中，石斛茎段阴干至伤口干燥，有利于避免伤口感染病害。由于捂芽繁殖环境温度较高，湿度较大，所以需要阴干使伤口干燥，避免伤口感染病害。e)本发明繁殖方法的一个实施例中，根部坏死或茎部病变的植株，杀菌后需阴干2-3天，可以有效降低后期感染病害。f)本发明繁殖方法的一个实施例中，选用干水苔作为保湿材料，干水苔有较好的保湿性，保湿时间较长，透气性较好，能维持石斛茎段处于高湿的状态，促进腋芽分化。g)本发明繁殖方法的一个实施例中对保湿层厚度进行了限制，厚度过低则容易导致基质水分不够，易干，不利于腋芽催化；保湿层厚度过高则湿度太高，容易导致病害。h)用捂芽繁殖的金钗石斛、肿节石斛、大苞鞘石斛、玫瑰石斛萌芽率达到90%以上，美花石斛、铁皮石斛、细茎石斛、叠鞘石斛萌芽率达到85%以上。i)用捂芽繁殖的金钗石斛、肿节石斛、大苞鞘石斛、玫瑰石斛成活率达到90%以上；美花石斛、铁皮石斛、细茎石斛、叠鞘石斛成活率达到88%以上。具体实施方式下面结合具体实施例进行说明。为使本发明实施方式的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施方式，对本发明实施方式中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施方式是本发明一部分实施方式，而不是全部的实施方式。基于本发明中的实施方式，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施方式，都属于本发明保护的范围。因此，以下对本发明的实施方式的详细描述并非旨在限制要求保护的本发明的范围，而是仅仅表示本发明的选定实施方式。在温室棚内设置离地面高度为50cm的架子，便于沥水和日常的管理，将育苗平盘水平放置在架子上，搭建育苗床。育苗平盘上设置有漏水孔，便于沥去多余的水。将发酵脱脂树皮用50%多菌灵可湿性粉剂500倍液浸泡3小时杀菌，杀菌后将其平铺在育苗平盘上。发酵脱脂树皮块径为8-18mm。未经处理的树皮含有油脂及有害病菌等，发酵可以去除有害病菌及虫卵，脱脂主要是采用高温高压蒸煮，去除发酵中未能去除掉的不利于植物生长的脂类物质，同时增强树皮的保水性和保肥力。脱脂发酵后的树皮不易腐烂，不酸化，透气性也较好，未脱脂发酵处理的树皮基质易导致植株软腐等病害。将干水苔或干苔藓用50%多菌灵可湿性粉剂500倍液浸泡1小时，杀菌后平铺在发酵脱脂树皮上，作为第一保湿层。干水苔或干苔藓是指保湿层所用的材料，并非捂芽过程中的真实状态。捂芽过程中，需要向干水苔或干苔藓喷水，保持干水苔或干苔藓的湿度。本实施例中，使用干水苔作为第一保湿层材料。干水苔有较好的保湿性，保湿时间较长，透气性较好，能维持直立茎条高湿的状态，促进腋芽分化。发酵脱脂树皮上平铺的干水苔或干苔藓厚度以为3cm为宜。干水苔或干苔藓厚度低于3cm则容易导致保湿材料水分不够，易干，不利于腋芽催化；厚度高于3cm则保湿材料内湿度会很高，容易导致病害发生。干水苔是指经过干燥处理的水苔，已经丧失了生理机能，在本发明实施例中仅仅作为保湿材料。干苔藓是指经过干燥处理的的苔藓，已经丧失了生理机能，在本发明实施例中仅仅作为保湿材料。将野生石斛直立茎剪成长为10-15cm的段，剪后直立茎需无病害。株型小的资源品种可剪成5cm左右或直接使用直立茎。剪切好的野生石斛直立茎段阴干1-2天，致剪切处的伤口干燥。由于捂芽繁殖环境温度较高，湿度较大，所以需要阴干使伤口干燥，避免伤口感染病害。若材料中包括根部坏死或茎部病变的植株，将病变部位剪掉后的茎段浸泡于70%甲基硫菌灵粉剂500倍液中杀菌，杀菌后阴干2-3天，以降低后期感染病害。将阴干处理后的野生石斛茎段平铺在第一保湿层上，野生石斛茎段上方再覆盖1-2cm厚的第二保湿层。第二保湿层与第一保湿层的材料及材料杀菌方式相同。向保湿层喷水，保持保湿层湿润，开始捂芽。捂芽温度为28℃-35℃，捂芽湿度为80%-90%。捂芽温度是在28℃至35℃中的任一温度，包括但不限于28℃、29℃、30℃、31℃、32℃、33℃、34℃或35℃，本实施例中捂芽温度为30℃。捂芽湿度为80%-90%，是指该区间内的任意湿度，包括但不限于80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%，本实施例中捂芽湿度为85%。本实施例是在温室棚内捂芽，基质的温度和湿度控制具有良好的设施保证。捂芽开始5天后喷施生根剂，生根剂主要成分包括萘乙酸、吲哚丁酸钠、微量元素等。生根剂喷施方法为每1g生根剂兑水400ml。生根剂属于市售产品，可在中国农药信息网及相关网站上用主成分查询到相关商品。捂芽20-30天后即可选用腋芽直接移栽，不需炼苗。采用本发明的繁殖方式，成本低，操作简单，还可利用根部坏死或茎部病变的植株继续繁殖。与组培快繁殖比较，本发明捂芽繁殖方式成本更低，方法简单，无需炼苗，腋芽萌发苗粗壮，可直接移栽，移栽后的成活率高，能有效地保护濒危野生石斛资源，扩大野生石斛资源种群数量。为进一步说明本发明的技术效果，以下结合对比试验数据进行说明。试验一：不同炼苗方法的移栽成活率试验。以金钗石斛组培苗为试验材料，设计四种炼苗处理作为对照。以下处理中，处理一至处理四为对照组，处理五为实验组。处理一：移栽前17天出至大棚，封瓶炼苗15天，再开瓶炼苗2天。处理二：移栽前直接从组培室移至大棚，不进行大棚炼苗，直接移栽。处理三：接种后在组培室生长40天，移至大棚条件下30天后出瓶移栽。处理四：接种后在组培室生长30天，移至大棚条件下40天后出瓶移栽。处理五：以金钗石斛为试验材料，采用本发明实施例捂芽繁殖的腋芽直接移栽。试验调查项目及调查记载标准：a成活率：每5天观测一次，连续观测8次，每次均对全小区的成活苗数进行纪录，凡没有彻底死亡的植株均视为成活苗，但茎基部已经枯死或病死但上部尚未死亡的苗要认定为死亡苗。b性状调查：移栽后第5天调查，每小区随机测量10株植株的茎粗，取平均值作为小区观测值。实验数据见表1。从表1可以看到，组培后的炼苗试验成活率低，成活率最好的处理一也只有46%。处理二不炼苗，直接从组培室出瓶移栽，试管苗很难适应环境的变化，易发软腐等病害，也极易脱水枯萎死亡。处理三和处理四由于在大棚粗放的环境下，污染严重，而且在瓶盖密封的情况下，瓶内易升温，造成瓶苗脱水枯萎或叶尖部分枯萎，大大降低了抗性和成活率。处理五采用本发明的捂芽繁殖的腋芽直接移栽后的成活率最高。表1：不同炼苗方法和捂芽繁殖的移栽成活率不同炼苗方法和捂芽繁殖的茎粗数据统计见表2。从表2可知，采用不同炼苗方式中处理一的植株茎粗最高，为2.13cm。采用捂芽繁殖的腋芽萌发苗茎粗3.43cm，捂芽繁殖得到的腋芽萌发苗植株明显比组培苗粗壮。表2：不同炼苗方法和捂芽繁殖的茎粗试验二：不同品种捂芽繁殖的萌芽率。以8种不同的石斛的直立茎为试验材料，通过本实施例1捂芽繁殖方法，统计萌芽率，统计结果见表3。通过表3统计结果可知，采用直立茎捂芽繁殖，繁殖量多，每段直立茎可发生2-5个腋芽，腋芽萌芽率都较高。其中，用捂芽繁殖的金钗石斛、肿节石斛、大苞鞘石斛、玫瑰石斛萌芽率达到90%以上。美花石斛、铁皮石斛、细茎石斛、叠鞘石斛萌芽率达到85%以上。表3：萌芽率品种直立茎条数萌发腋芽的直立茎条数萌芽率（%）金钗石斛727097%肿节石斛605592%大苞鞘石斛625894%玫瑰石斛424095%美花石斛564886%铁皮石斛383387%细茎石斛423686%叠鞘石斛686088%试验三：不同品种捂芽繁殖的成活率。以8种不同的石斛的直立茎为试验材料，通过本实施例捂芽繁殖方法，移栽后第30天对成活苗数进行纪录，凡没有彻底死亡的植株均视为成活苗，但茎基部已经枯死或病死但上部尚未死亡的苗要认定为死亡苗，数据统计结果见表4。通过表4可以看出，用捂芽繁殖的金钗石斛、肿节石斛、大苞鞘石斛、玫瑰石斛成活率达到90%以上；美花石斛、铁皮石斛、细茎石斛、叠鞘石斛成活率达到88%以上。表4：成活率品种腋芽萌发总量移栽后的成活苗数成活率金钗石斛18618097%肿节石斛11110494%大苞鞘石斛12011293%玫瑰石斛888091%美花石斛13812288%铁皮石斛686088%细茎石斛787089%叠鞘石斛19617589%以上仅是本发明的优选实施方式，应当指出的是，上述优选实施方式不应视为对本发明的限制，本发明的保护范围应当以权利要求所限定的范围为准。对于本
技术领域：
的普通技术人员来说，在不脱离本发明的精神和范围内，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。当前第1页12