一种细胞冻存液及其制备方法与应用与流程

文档序号:26049773发布日期:2021-07-27 15:24阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种细胞冻存液,其特征在于,包括甘露糖赤藓糖醇脂、海藻糖和磷酸盐缓冲液。

2.根据权利要求1所述的细胞冻存液,其特征在于,所述的细胞包括红细胞。

3.根据权利要求1所述的细胞冻存液,其特征在于,所述的细胞冻存液中,甘露糖赤藓糖醇脂与海藻糖按摩尔浓度比1~10:0.2~0.3计算。

4.根据权利要求3所述的细胞冻存液,其特征在于,所述的细胞冻存液中,甘露糖赤藓糖醇脂的摩尔浓度为1~10mol/l,海藻糖的摩尔浓度为0.2~0.3mol/l。

5.根据权利要求1所述的细胞冻存液,其特征在于,所述的磷酸盐缓冲液的ph为7.4、摩尔浓度为0.01mol/l。

6.一种细胞冻存液的制备方法,其特征在于,通过将甘露糖赤藓糖醇脂、海藻糖混匀,然后再加入磷酸盐缓冲液搅拌混匀得到。

7.权利要求1~5任一所述的细胞冻存液在细胞冻存中的应用。

8.一种细胞冻存液的使用方法,其特征在于,包括如下步骤:

(1)细胞冻存:将待冻存细胞加入到盛有细胞冻存液的容器中,将上述盛有待冻存细胞和细胞冻存液的容器浸入液氮中,即可实现对细胞的保存;

其中,待冻存细胞与细胞冻存液按体积比15~25:85~75计算;

(2)细胞解冻:将盛有待冻存细胞和细胞冻存液的容器从液氮中取出,水浴加热,直至细胞解冻复苏,得到解冻复苏后的细胞,然后加入生理盐水离心去上清,洗涤,将洗涤后的细胞用生理盐水配置成细胞盐水悬液,即得解冻去冻存液且复苏的红细胞。

9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,步骤(2)中所述的水浴加热的条件为:37℃水浴加热0.5~1.5min。


技术总结
本发明公开了一种细胞冻存液及其制备方法与应用,属于细胞保存技术领域。所述的细胞冻存液,包括甘露糖赤藓糖醇脂和海藻糖,还包括磷酸盐缓冲液。本发明将甘露糖赤藓糖醇脂作为细胞冻存液组分,能够促进细胞对海藻糖的吸收,增强细胞膜及骨架抵抗低温损伤的能力,稳定蛋白质及生物大分子,显著提高细胞的存活率。采用本发明的细胞冻存液,方便快速,将细胞和细胞冻存液混匀后可以不用常规的“慢冻”过程,直接置于液氮中保存即可保持较高的细胞存活率。

技术研发人员:魏伟;嵐山芮;刘松
受保护的技术使用者:广州瑞铂茵健康科技有限公司
技术研发日:2021.03.31
技术公布日:2021.07.27
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