一种新品系猪的培育方法及其应用与流程

1.本发明属于动物杂交繁殖和生物制品制备技术领域。具体涉及到一种新品系猪的培育方法及其应用。


背景技术：

2.猪的品种有非常多，根据资料统计，我国地方品种猪超过50种。猪脾转移因子(tf)是一种多核苷酸和多肽小分子物质，是介导细胞免疫的重要淋巴因子之一。能将供体的细胞免疫能力，特异地转移给受体，使受体具有供体的细胞免疫能力。tf在体外能增强pha和cona等对淋巴细胞、nk细胞、k细胞和的刺激作用，提高淋巴细胞转化率和e玫瑰花结形成率，促进中性粒细胞和单核细胞的趋化作用；在体内能传递或转移迟发型超敏反应(dth)。tf也能触发淋巴细胞和释放ifn、tnf及ili，刺激b细胞产生抗体，是一种很好的免疫增强剂。但是，每年各种猪疾病时有发生，其中又以猪流行性腹泻、猪传染性胃肠炎、猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征感染的病猪占较大比例，约占所有病猪的40％以上，猪疾病已经成为导致农场严重经济损失的重要问题。如何有效预防猪病毒感染成为了亟待解决的技术问题。


技术实现要素：

3.本发明的目的在于提供一种新品系猪的培育方法及其应用，该品系的猪抗病性好，可作为制备转移因子的原料，有效预防猪疾病。
4.为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
5.本发明提供本发明提供了一种新品系猪的培育方法，包括以下步骤：
6.以乐平猪为亲本连续6代横交，每代横交使用疫苗诱导受孕乐平猪，得到lp6猪；
7.以杭猪为亲本连续6代横交，每代横交使用疫苗诱导受孕杭猪，得到hz6猪；
8.以所述lp6猪为父本，以所述的hz6猪为母本进行杂交，后代为f1代杂交猪；
9.以所述f1代杂交猪为亲本进行3代横交，得新品系猪。
10.优选的，所述疫苗包括猪细小病疫苗、猪伪狂犬病疫苗、猪口蹄疫疫苗、猪传染性胃肠炎疫苗、猪轮状病毒病疫苗、猪圆环病毒疫苗、猪瘟疫苗、猪流行性腹泻疫苗和猪繁殖与呼吸综合征疫苗中的一种或多种。
11.优选的，所述疫苗包括弱毒疫苗、灭活疫苗、多肽疫苗或基因工程疫苗。
12.优选的，所述横交或杂交的方式包括人工授精。
13.优选的，所述诱导的方式均包括将所述疫苗注射至受孕母猪的后海穴。
14.优选的，所述疫苗的体积为4ml/头。
15.本发明还提供了上述培育方法得到的新品系猪在制备转移因子中的应用。
16.本发明提供了一种转移因子的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
17.分别在上述培育方法得到的新品系猪的3～5日龄和3～4周龄进行疫苗免疫，饲养至成年，取脾脏，破碎，分离得转移因子。
18.优选的，在所述新品系猪的3～5日龄进行疫苗免疫时，使用以乐平猪为亲本或以杭猪为亲本进行横交时使用的疫苗；在所述新品系猪的3～4周龄进行疫苗免疫时，使用以杭猪为亲本或以乐平猪为亲本进行横交时使用的疫苗。
19.本发明还提供了上述制备方法得到的转移因子在制备预防猪疾病的药物中的应用。
20.本发明提供了一种新品系猪的培育方法，以乐平猪为祖代亲本连续6代横交，每代横交使用疫苗诱导受孕乐平猪，得到lp6猪；以杭猪为祖代亲本连续6代横交，每代横交使用疫苗诱导受孕杭猪，得到hz6猪；以所述lp6猪为父本，以所述的hz6猪为母本进行杂交，后代为f1代杂交猪；以所述f1代杂交猪为亲本进行3代横交，得新品系猪。本发明培育得到的新品系猪抗性高，能够抵抗猪疾病，并且也可作为制备转移因子的原料，制备得到的转移因子免疫性好，能够预防猪疾病的发生。
附图说明
21.为了更清楚地说明本发明实施例中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍。
22.图1为新品系猪的培育方法流程图。
具体实施方式
23.本发明提供了一种新品系猪的培育方法，包括以下步骤：
24.以乐平猪为亲本连续6代横交，每代横交使用疫苗诱导受孕乐平猪，得到lp6猪；
25.以杭猪为亲本连续6代横交，每代横交使用疫苗诱导受孕杭猪，得到hz6猪；
26.以所述lp6猪为父本，以所述的hz6猪为母本进行杂交，后代为f1代杂交猪；
27.以所述f1代杂交猪为亲本进行3代横交，得新品系猪。
28.本发明以乐平猪为祖代亲本连续6代横交，每代横交使用疫苗诱导受孕乐平猪，得到lp6猪。本发明所述乐平猪是一种肉猪，肉质鲜美，生长快。本发明所述乐平猪购自江西农业大学。
29.本发明以杭猪为祖代亲本连续6代横交，每代横交使用疫苗诱导受孕杭猪，得到hz6猪。本发明所述杭猪繁殖性能高。本发明所述杭猪购自江西农业大学。
30.本发明在使用疫苗诱导受孕乐平猪或者诱导受孕杭猪时，优选将所述疫苗注射至受孕乐平猪或者受孕杭猪的后海穴，即受孕乐平猪或者受孕杭猪尾根与肛门中间凹陷的小窝部位。本发明所述疫苗的体积优选为4ml。本发明优选将乐平猪饲养至成年发情，经过横交确认受孕后，立即注射疫苗。本发明所述lp6猪和所述hz6猪均能够产生大量的猪疾病抗体，抗病性强。
31.在本发明中，所述疫苗优选包括治疗猪细小病、猪伪狂犬病、猪口蹄疫、猪传染性胃肠炎、猪轮状病毒病、猪圆环病毒、猪瘟、猪流行性腹泻和猪繁殖与呼吸综合征中的一种或多种的疫苗，进一步优选为二联疫苗。本发明对所述疫苗没有严格要求，针对想要预防和/或治疗的猪疾病，选择相应的疫苗诱导受孕乐平猪和受孕杭猪即可，例如，当想要预防和/或治疗的猪疾病为猪流行性腹泻、猪传染性胃肠炎、猪瘟和猪繁殖和呼吸综合征感染时，任意选择治疗其中两种猪疾病的疫苗，制成二联疫苗，诱导受孕乐平猪；选择治疗剩余
两种猪疾病的疫苗，制成二联疫苗，诱导受孕杭猪即可。本发明对所述疫苗的类型没有严格要求，优选包括包括弱毒疫苗、灭活疫苗、多肽疫苗或基因工程疫苗。本发明使用的疫苗购自兆丰华(福州)生物技术有限公司。
32.得到lp6猪和hz6猪后，本发明以所述lp6猪为父本，以所述的hz6猪为母本进行杂交，后代为f1代杂交猪。本发明以lp6猪为父本，以hz6猪为母本，lp6猪肉质鲜美，生长快，hz6猪繁殖性能高，是最好的良种繁育的杂交方式，杂交后代f1代杂交猪继承了lp6猪和hz6猪的抗性，能够产生大量的猪疾病抗体。
33.本发明以f1代杂交猪为亲本进行3代横交，得新品系猪。以所述f1代杂交猪作为亲本横交时，本发明优选根据性状挑取用于横交的父本f1代杂交猪和用于横交的母本f1代杂交猪，具体的，用于横交的父本f1代杂交猪和用于横交的母本f1代杂交猪生长性能良好四肢健壮，体重≥150kg，两眼有神。
34.在本发明中，所述杂交和横交的方法优选均为人工授精，本发明对所述人工授精的方法并没有特殊限定，利用本领域的常规方法即可。
35.本发明培育的新品系猪能够产生大量的抗体，有效预防猪疾病，也可作为制备转移因子的原料，制备得到的转移因子免疫性好，能够预防猪疾病。
36.本发明还提供了一种利用上述培育方法得到的新品系猪在制备转移因子中的应用。以本发明培育的新品系猪为原料制备转移因子，得到的转移因子免疫性好，能够预防猪疾病。
37.本发明还提供了一种制备转移因子的方法，优选包括分别在新品系猪的3～5日龄和3～4周龄进行疫苗免疫，饲养至成年，取脾脏，破碎，分离得转移因子的步骤。
38.本发明在所述新品系猪的3～5日龄和3～4周龄进行疫苗免疫，得免疫猪。本发明优选在3～5日龄进行疫苗免疫时，使用以乐平猪为亲本进行横交时使用的疫苗，在3～4周龄进行疫苗免疫时，使用以杭猪为亲本进行横交时使用的疫苗，或者在3～5日龄进行疫苗免疫时，使用以杭猪为亲本进行横交时使用的疫苗，在3～4周龄进行疫苗免疫时，使用以乐平猪为亲本进行横交时使用的疫苗。
39.得免疫猪后，本发明优选将所述免疫猪饲喂至成年，进一步优选为将所述免疫猪饲喂至220～250斤，取猪脾，破碎，分离得转移因子。本发明对所述破碎的方式没有严格要求，优选为搅碎。本发明所述分离的方式没有严格要求，优选包括离心和过滤。
40.本发明还提供了一种利用上述培育方法得到的制备方法得到的转移因子在制备预防和/或治疗猪疾病的药物中的应用。本发明得到的转移因子免疫性好，能够预防和/或猪疾病。
41.下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
42.实施例1
43.一种转移因子的制备方法，由以下步骤组成：
44.1.新品系猪的培育
45.1.1lp6的选育
46.选取乐平猪作为1代父母本，饲养至成年发情经过配种确认受孕后，对母猪后海穴位(即尾根与肛门中间凹陷的小窝部位)注射4ml猪流行性腹泻-猪传染性胃肠炎二联疫苗
进行诱导；当仔猪出生后，作为2代父母本，饲养至成年发情，经配种确认受孕后，对母猪后海穴位注射4ml猪流行性腹泻-猪传染性胃肠炎二联疫苗进行诱导；用同样的方法经过6代诱导，得对猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒可以产生高抗体的lp6种猪群；
47.1.2hz6的选育
48.选取杭猪作为1代父母本，饲养至成年发情经过配种确认受孕后，对母猪后海穴位(即尾根与肛门中间凹陷的小窝部位)注射4ml猪瘟-猪繁殖与呼吸综合征二联疫苗进行诱导；当仔猪出生后，作为2代父母本，饲养至成年发情，经配种确认受孕后，对母猪后海穴位注射4ml猪瘟-猪繁殖与呼吸综合征二联疫苗进行诱导；用同样的方法经过6代诱导，得对猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒可以产生高抗体的hz6种猪群；
49.1.3以lp6的公猪为父本，以hz6为母本进行杂交得到的f1代杂交猪，挑选生长性能良好，四肢健壮，体重＞150kg，两眼有神的f1代杂交公猪和f1代杂交母猪为亲本进行3代横交选育固定，即得到新品系猪。
50.2.免疫
51.在所得新品系猪3～5日龄进行4ml猪流行性腹泻-猪传染性胃肠炎二联疫苗免疫、在3～4周龄进行4ml猪瘟-猪繁殖与呼吸综合征二联疫苗免疫，得免疫猪。
52.3.将免疫猪饲养至体重220斤时，取猪脾脏，经过清洗、绞碎、冻融、离心、过滤，得2l转移因子，其中，每l转移因子中包括多肽2.56ml，核糖含量65.24ug。
53.实施例2
54.同实施例1，区别在于步骤1.1注射4ml猪伪狂犬疫苗进行诱导，步骤2在所得新品系猪3～4周龄进行猪伪狂犬疫苗免疫。
55.实施例3
56.同实施例1，区别在于步骤1.2注射4ml猪圆环病毒疫苗进行诱导，步骤2在所得新品系猪3～4周龄进行猪圆环病毒疫苗免疫。
57.测试例1
58.攻毒保护试验
59.本试验分为试验组和对照组，实验组和对照组的品种为大白猪，每组12头新生仔猪，在饲养至3～5日龄时，分别在试验组大白猪左右两侧颈部肌肉注射4ml本发明实施例1制备的转移因子(左右两侧各2ml，避免引起局部红肿等炎症)，对照组大白猪注射等量的生理盐水；待饲养至1月龄断奶时，分别在试验组大白猪左右两侧颈部肌肉注射4ml本发明实施例1制备的转移因子，对照组大白猪注射等量的生理盐水。饲养一周以后，将各组的12头猪再分为4个小组，每个小组3头，每个小组分别进行猪流行性腹泻、猪传染性胃肠炎、猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征攻毒保护试验，攻毒方式均采用对应口服2ml猪流行性腹泻、猪传染性胃肠炎、猪瘟、猪繁殖或呼吸综合征病毒，连续7日观察各猪的发病情况，结果如下表1。
60.表3攻毒保护试验结果
61.组别试验组对照组猪流行性腹泻0/3发病3/3发病猪传染性胃肠炎0/3发病3/3发病猪瘟0/3发病3/3发病猪繁殖与呼吸综合征0/3发病3/3发病
62.由表3可知，试验组2次免疫本发明的培育方法得到的新品系猪制备转移因子后，进行攻毒，猪均无发病，对照组均3/3发病。说明本发明实施例得到的转移因子对猪疾病的抗病性好，可以有效预防猪疾病。
63.由以上实施例可知本发明提供的培育方法得到的新品系猪抗性高，能够抵抗猪疾病，并且可作为制备转移因子的原料，预防猪疾病。
64.尽管上述实施例对本发明做出了详尽的描述，但它仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部实施例，人们还可以根据本实施例在不经创造性前提下获得其他实施例，这些实施例都属于本发明保护范围。