一种防治植物白粉病的大黄游离蒽醌组合物及纳米乳制剂的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于农药领域，特别是涉及一种用于防治植物白粉病的大黄游离蒽醌组合 物及其纳米乳制剂。
[0002]
【背景技术】
[0003] 植物白粉病广泛存在于各种作物、蔬菜、花卉、树木等植物茎叶上，主要由植物白 粉菌引起。白粉菌潜育期短，一个生长季节可繁殖多代，且繁殖率高，产生的孢子可借助空 气大范围传播，并多次重复侵染寄主植物。寄主被白粉菌侵染后，呼吸作用增强，蒸腾强度 增加，光合效能降低，严重阻碍植物的正常生长发育，并造成巨大的经济损失。目前主要使 用化学杀菌剂如三唑酮、苯并咪唑类、有机磷类、羟基嘧啶类、甲氧基丙烯酸酯类和苯氧基 喹啉类防治植物白粉病。但随着化学药剂的长时间使用，各地白粉病病原菌对其产生了不 同程度的抗性，防治效果大幅度降低，而且化学药剂环境污染及高残留等弊端的日益显现。 因此，研制毒性小、污染小、残留少、能避免耐药性的生物农药是当务之急。
[0004] 植物源杀菌剂具有对人畜安全，环境友好，能自然降解而无残留等优点。大黄是常 用的植物源中药之一，其提取物具有抗感染作用，对多种革兰氏阳性和阴性细菌均有抑制 作用，但未见其对植物真菌的抑杀作用研究。大黄素、芦荟大黄素与大黄酚组合物，大黄酚 与大黄素甲醚组合物用于白粉病的防治已有报道，这些化合物可来源于不同种属的植物。 但从植物中分离、纯化大黄素、芦荟大黄素、大黄酚和大黄素甲醚等蒽醌单体后，再进行组 合，生产成本很高，且这些组合物建议使用的形式（剂型）如可湿性粉剂、乳油、微乳剂、悬 浮剂并未见具体的文献报道。药物剂型对药物的防治效果可产生显著的影响，如可湿性粉 剂和混悬剂仅通过固体药物颗粒与植物体表面的病原微生物的接触而呈现抑杀活性，对植 物内部的病原微生物抑杀效果差；乳油在植物表面的粘附性、延展性不佳，不能最大程度的 发挥药物的作用；微乳剂的粒径通常在微米级，不能有效透过植物茎叶的表皮而抑杀植物 内部组织的病原微生物。纳米乳因起粒径更小，具有很好的流动性，能更有效地渗入至植物 叶茎内，发挥药物的生物活性，而且制备工艺简单、能与水以任意比例混合，不堵塞喷头，使 用方便。迄今为止，未发现大黄游离蒽醌以天然配比形式存在的纳米乳制剂及其抗白粉病 活性的技术公开。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种以中药材大黄（Rheumpalmatum U作为原材料，通过酸解、分离和纯化得到的具有天然配比范围的大黄游离蒽醌（包括大 黄素、芦荟大黄素、大黄酚、大黄素甲醚和大黄酸）为原料药，研发一种专用于防治植物白 粉病的的纳米乳制剂。
[0006] 本发明的技术方案：一种用于防治植物白粉病的大黄游离蒽醌及其纳米乳制 齐U，用如下原料制成：以纳米乳中所含各组分的质量百分比计，大黄游离蒽醌含量为 0.01-0. 15%，其中大黄素占总游离蒽醌的15. 46-16. 71%，芦荟大黄素10. 38-11. 48%，大 黄酚50. 90-52. 95 %，大黄素甲醚15. 28-17. 94 %，大黄酸3. 60-4. 62 % ;油相占纳米乳的 24. 7-26. 9%、乳化剂 21. 6-26. 4%、助乳化剂 10. 8-13. 2%、水 34. 6-40. 7%、稳定剂L0%、 防腐剂〇. 1%、附着剂〇. 1%。
[0007] 所述油相选自肉豆蘧酸异丙酯、丙二醇单辛酸酯、油酸乙酯、棕榈酸异丙酯、辛酸 癸酸甘油三酯、蓖麻油及其组合。其中，进一步优选了丙二醇单辛酸酯及其与油酸乙酯的混 合物，油相浓度小于30 %。所述乳化剂选自聚氧乙烯-40-氢化蓖麻油、辛酸癸酸聚乙二醇 甘油酯、月桂酸聚乙二醇甘油酯、吐温-80、泊洛沙姆-188及其组合。其中，进一步优选了 聚氧乙烯-40-氢化蓖麻油；所述助乳化剂选自二乙二醇单乙基醚、聚乙二醇600、聚乙二醇 400、1，2-丙二醇、丙三醇及其组合。其中进一步优选了二乙二醇单乙基醚，助乳化剂的量小 于20% ;乳化剂与助乳化剂的质量比例为2:1。所述水为溶媒，稳定剂为油酸或油酸钠或 枸橼酸钠，优选油酸；防腐剂为苯甲酸钠和尼泊金乙酯，优选苯甲酸钠；附着剂为三氧化二 硅。
[0008] 本发明所述的一种用于防治植物白粉病的大黄游离蒽醌纳米乳制剂，其制备方法 为：将大黄游离蒽醌溶解于油相中，加入稳定剂，乳化剂/助乳化剂混合物，搅拌均匀。逐滴 加水，搅拌，自乳化形成澄清透明的纳米乳制剂，超声处理15_30min后，用lmol/LNaOH调 节系统pH至6. 0-7. 0,再按比例加入防腐剂和附着剂。乳化剂使用前需在35-40°C加热融 化，磁力搅拌速度200-300rpm。所得纳米乳制剂分装时直接用0. 22iim孔径的水系微孔滤 膜过滤至已灭菌的棕色塑料容器中。
[0009] 本发明的纳米乳剂粒径介于20-100nm，€电位介于-20~-50mV，黏度介于 8-12。卩，口11介于6.0-7.0。
[0010] 本发明的大黄游离蒽醌组合及其纳米乳具有防治植物白粉病的用途，且效果优 良。
[0011] 本发明的有益效果是： 其一是本发明产品所用原料药为中药材大黄中具有天然配比范围的游离蒽醌提取物， 不再经历先分离、纯化单体和再进行组合的原料药制备过程，简化了制备工艺、降低了原料 药经济成本； 其二是本发明产品能够以任意比例的水混合而呈现为透明稳定的均一体系，制备工艺 简单，易于大批量生产，乳滴粒径小，粘度小，田间喷洒不堵塞喷雾器，使用方便； 其三是本发明产品对黄瓜、辣椒及花卉的白粉病有显著的防治效果，其效果等同或优 于大黄素、芦荟大黄素和大黄酚的组合物，以及大黄酚和大黄素甲醚的组合物。
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【附图说明】
[0013] 图1大黄游离蒽醌纳米乳的透射电镜图片（X15000) 图2大黄游离蒽醌纳米乳防治植物白粉病的照片
【具体实施方式】
[0014] 以下结合实施例对本发明做进一步说明，但不限于此。其中乳化剂聚氧乙 烯-40-氢化蓖麻油在巴斯夫化工有限公司有售；丙二醇单辛酸酯、二乙二醇单乙基醚、月 桂酸聚乙二醇甘油酯、辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯在法国Gattefosse公司有售；泊洛沙姆 188在瑞士Adamas公司有售。其他各原料组分均可市场购得。
[0015] 实施例1 :大黄游离蒽醌的提取 实验条件 大黄购自礼县鑫晨源生物科技开发有限公司，取粉碎过筛的大黄粉末，加入20%硫酸 加热酸解，药渣水洗至中性后烘干。大黄水解干粉按原料药：90%乙醇=I:30(w/v)混合， 超声提取，趁热抽滤，滤液减压浓缩至无醇味，用氯仿萃取，氯仿萃取液再用5%NaOH萃取 至上层液无色，合并碱提液，调pH约至2,离心取沉淀，并水洗至中性，即得大黄游离蒽醌 粗品。粗品干燥后，按原料药：甲醇=1 :1〇加入甲醇超声溶解，离心取上清液减压旋干， 得大黄游离蒽醌（其中五种游离蒽醌占总质量的98%以上，其中大黄素：芦荟大黄素：大 黄酚：大黄素甲醚和大黄酸的含量为：2. 49±0. 23，1.71±0. 15,8. 06±0. 80,2. 61±0. 25，