一种提高北方设施番茄抗根结线虫的栽培方法
【技术领域】：
[0001] 本发明属于农业生产及微生物应用领域，具体涉及一种提高北方设施番茄抗根结 线虫的栽培方法。
【背景技术】：
[0002] 番茄是我国主要的经济作物之一，是农民增收的保障。设施蔬菜番茄集约化程度 越高，番茄根际土壤连作障碍现象日益严重，特别是根结线虫泛滥。目前我国番茄种植土传 病害发生严重，连作造成番茄种植土壤质量下降，每年因根结线虫减产30%，占番茄种植面 积的40%以上，其中以北方地区设施番茄种植过程中根结线虫的影响，制约着番茄集约化 生产。在山东设施蔬菜种植集约化程度较高地区，根结线虫连作障碍现象严重，番茄生产受 到严重制约。农业生产中为了提高番茄的抗根结线虫，目前生产上主要采用焖棚方式进行， 而番茄移苗栽培是主要的栽培方式，番茄土壤连作障碍与番茄种植生产存在较大的矛盾。 [0003]目前研究已表明，接种菌根真菌不但能够提高番茄等蔬菜植物对磷等元素吸收， 同时能够降低病原微生物的等病害的影响，已引起较广泛的学术兴趣。但是由于菌根真菌 不能直接离体培养，严重制约了菌根真菌在番茄上的应用，目前将菌根真菌与番茄接种育 苗是番茄育苗化的首选方式，但是菌根真菌在大田中作用表现并不十分突出，表明菌根真 菌在根际微生物态环境中独立贡献作用较低，必须与其他微生物共同作用。番茄基质化育 苗已是番茄生产的重要关键环节，基质化育苗措施是番茄幼苗培育重要一环。
【发明内容】
：
[0004] 本发明的目的是提供一种方法简单、成本较低，不但可以降低根结线虫对番茄侵 染，还能促进番茄生长，提高番茄抗根结线虫能力的提高北方设施番茄抗根结线虫的栽培 方法。
[0005] 本发明首先通过育苗基质的配制，然后培养菌根真菌和番茄幼苗共生，再将菌根 番茄幼苗移栽栽培，在番茄幼苗移栽前，利用根际溶磷菌液体菌剂接种，以使菌根化番茄与 溶磷菌建立共生关系，在番茄营养生殖阶段调控根际微生物环境，可以促进菌根化番茄与 溶磷菌建立共生关系，提高菌根真菌的侵染状况，可大大提高番茄抗根结线虫能力，降低根 结线虫对番茄的侵染，提高番茄生长，从而实现本发明的目的。
[0006] 本发明的提高北方设施番茄抗根结线虫的栽培方法，其特征在于，包括以下步 骤：
[0007]A、育苗基质的制备：所述的育苗基质按体积份计，包括稻壳2-4份、发酵鸡粪1-3 份、河沙1-2份和珍珠岩1份，混合均勾，灭菌后（121°C条件下，灭菌40-60分钟，取出冷却 至30-40°C)，制得育苗基质；
[0008] B、在育苗基质上接种菌根真菌，形成菌根番茄接种剂，然后在此菌根番茄接种剂 上播种番茄种子，培养，生长出番茄幼苗；
[0009] C、在番茄幼苗移栽前，在番茄幼苗根系部位接种溶磷菌，移栽时，连同菌根番茄接 种剂一起移栽番茄幼苗。然后对移栽后的番茄幼苗覆土，对番茄幼苗进行栽培管理。
[0010] 所述的菌根真菌优选为摩西球囊霉（Glomusmosseae)。
[0011] 所述的溶磷菌优选为产碱假单胞菌（Pseudomonasalcaligenes)。
[0012] 所述的在育苗基质上接种菌根真菌，形成菌根番茄接种剂，然后在此菌根番茄接 种剂上播种番茄种子，培养，生长出番茄幼苗优选为：在育苗基质上接种摩西球囊霉，形成 菌根番茄接种剂，然后在此菌根番茄接种剂上播种番茄种子，培养，生长出番茄幼苗，确保 单株番茄幼苗含90~150个摩西球囊霉孢子。
[0013] 优选，以每克含40个摩西球囊霉孢子的摩西球囊霉固体菌剂与育苗基质按照体 积比为1 :25~35的比例混合均匀，形成菌根番茄接种剂，然后填充至泡沫空穴育苗盘中， 在穴中菌根番前接种剂表面下方2~3cm处播种番前种子，培养，生长出番前幼苗。
[0014] 优选，所述的摩西球囊霉固体菌剂是通过以下方法制备的：以过2_筛的河沙为 基质，经高温灭菌后，自然状态下放置10~14天，然后放入盆中，每2kg基质接种100-150g 摩西球囊霉菌原种，拌匀，加入基质重量18~25%的水，播种高粱种子，五个月后收获被摩 西球囊霉侵染的宿主植物和含有摩西球囊霉孢子、根外菌丝的基质原种；然后把高粱地上 部分剪去，剪碎根段，与基质原种混匀，即制得摩西球囊霉固体菌剂。每克摩西球囊霉固体 菌剂含有40个摩西球囊霉孢子。
[0015] 在番茄幼苗移栽前，在番茄幼苗根系部位接种溶磷菌优选为：在番茄幼苗移栽前 2周开始，在番茄幼苗根系部位接种产碱假单胞菌液体菌剂2~4次，每次每株番茄幼苗接 种量为1〇 3~10 5个产碱假单胞菌。
[0016] 所述的产碱假单胞菌液体菌剂是通过以下方法制备的：在每1000ml含有5. 0~ 16. 0g碳酸钙的麦麸浸汁中，接入产碱假单胞菌，常规条件下培养，得到产碱假单胞菌液体 菌剂。
[0017] 按照本发明的方法培养的番茄苗（育苗基质及接种菌根真菌和溶磷菌培养的番 茄苗），经过大田和盆栽试验验证，能够显著降低根结线虫对番茄根系侵染，增强番茄抗根 结线虫能力，减轻细胞膜脂过氧化程度，稳定了细胞膜结构，降低了细胞膜渗透性，显著提 高移栽后番茄对根结线虫抗侵染能力，减轻病原微生物伤害，对北方设施番茄生产具有重 要意义。与常规番茄育苗相比，本发明能够提高番茄生物量10-15%，提高或显著提高番茄 产量，采用本方法对番茄根结线虫防治效果可以达到38-56%，番茄生产达到高产优质的基 本要求。
[0018] 通过番茄幼苗接种菌根真菌，使番茄育苗过程的菌根化，菌根化番茄幼苗再接种 溶磷菌，使番茄根系与菌根真菌、溶磷菌建立共生关系，不但改善根际微生态环境，提高菌 根真菌侵染，而且提高番茄抗根结线虫能力，增强番茄根系抵抗外界其他病原微生物侵染， 达到控制番茄根结线虫的功效，从而有效提高番茄抗根结线虫的能力。本发明的方法，工艺 简单，便于操作，因而易于进行工厂化番茄育苗生产。
[0019] 本发明中使用的产碱假单胞菌（Pseudomonasalcaligenes)和摩西球囊 霉（Glomusmosseae)为现有技术中公开的菌株。其中产喊假单胞菌（Pseudomonas alcaligenes)已经在文献中公开记载（参考文献：LinZhang&JiequnFan&Xiaodong Ding&XinhuaHe&FusuoZhang&GuFeng.Hyphosphereinteractionsbetweenan arbuscularmycorrhizalfungusandaphosphatesolubilizingbacteriumpromote phytatemineralizationinsoil);摩西球囊霉（Glomusmosseae)已经在文南犬中公开 记载（参考文南犬：XiaodongDing&XinhuaSui&Fangffang&JunhuaGao&XinhuaHe&Fusuo Zhang&JunchengYang&GuFeng.SynergisticinteractionsbetweenGlomusmosseaeand Bradyrhizobiumjaponicuminenhancingprotonreleasefromnodulesandhyphae. Mycorrhiza, 2012, 22:51-58)，上述两微生物本申请人也持有，并且保证可以在本发明申请 日起20年内向公众提供。
【具体实施方式】：
[0020] 以下实施例是对本发明的进一步说明，而不是对本发明的限制。
[0021] 实施例1
[0022] 1、番茄育苗基质的制备：按照体积比取3份稻壳、2份发酵鸡粪（堆肥发酵法制 备：在通风好、地势高的地方，将带垫料的鸡粪堆积成堆，外面用泥浆封闭；发酵时间为夏 季15天左右，冬季50天左右）、2份粒径为1mm的河沙和1份粒径为1mm的珍珠岩（稻壳： 发酵鸡粪：河沙：珍珠岩=3:2:2:1)，混合均匀，形成混合物，后将混合物在121°C条件下， 灭菌50分钟，取出冷却至40°C，制得育苗基质，备用。
[0023] 2、摩西球囊霉固体菌剂的制备方法：以过2_筛的河沙为基质，经高温灭菌后（每 次121°C高压蒸汽灭菌45min)，自然状态下放置10天，然后装两公斤放入塑料盆中，接种 100g摩西球囊霉菌原种，拌匀，加入基质重量25 %的自来水，播种高粱种子，保持正常生 长，六个月后即可得到被摩西球囊霉菌侵染的宿主植物和含有摩西球囊霉菌孢子、根外菌 丝的基质原种；把高粱地上部分剪去，剪碎根段，并与含有摩西球囊霉菌孢子、根外菌丝的 基质混匀，即制得摩西球囊霉固体菌剂。每克摩西球囊霉固体菌剂含有40个摩西球囊霉孢 子。
[0024] 3、将此摩西球囊霉固体菌剂按照体积比1 :25与育苗基质混合均匀，而得到菌根 番茄接种剂；以基质育苗法进行番茄育苗，将菌根番茄接种剂填充至泡沫孔穴育苗盘的孔 穴中，然后在菌根番前接种剂表面下方2~3cm处播种番前种子，培养，生长出番前幼苗。
[0025] 4、产碱假单胞菌液体菌剂的制备与接种：培养基：每1000ml麦麸浸汁中含有5g 碳酸钙（CaC03)，pH6. 5 ;将产碱假单胞菌接种到1000ml上述培养基中，200rpm，28°C，培养 24小时，得到产碱假单胞菌液体菌剂，每毫升菌液的菌数达到1.OX109个/mL。在番茄幼 苗移栽前2周开始，在番茄幼苗根系部位接种两次产碱假单胞菌液体菌剂，每次每株番茄 幼苗接种量