一种黑曲霉微丸的制作方法

文档序号:9584438阅读:669来源:国知局
一种黑曲霉微丸的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及生物技术领域,特别设及黑曲霉(Aspergillusnigerxj)微丸及其制 备方法。
【背景技术】
[0002] 黑曲霉,半知菌亚口,丝抱纲,丝抱目,丛梗抱科,曲霉属真菌中的一个常见种。广 泛分布于世界各地的粮食、植物性产品和±壤中。是重要的发酵工业菌种,可生产淀粉酶、 酸性蛋白酶、纤维素酶、果胶酶、葡萄糖氧化酶、巧樣酸、葡糖酸和没食子酸等。本申请是利 用黑曲霉在生长过程中所产生的次生代谢产物来对白絹病菌、软腐病菌进行抑制。白絹病 又称菌核性根腐病和菌核性苗枯病,危害苗木和幼树的根茎部。该病可危害多种植物,主要 为害油茶、油桐、揪树、相枯、苹果、梧桐、泡桐、核桃、马尾松等多种树种,还可引起花生,大 葱等许多农作物发病。软腐病可使植物的组织或器官发生腐烂。病菌均为弱寄生菌,主要为 害植物的多汁肥厚的器官,如块根、块茎、果实、茎基等。发病不限于田间,运输途中和胆藏 期间也有发生,且为害更重。为害的作物种类甚多。本发明主要针对魔芋白絹病、软腐病。
[0003] 黑曲霉发酵液虽然有良好的抗菌活性,但因其液体的性质不宜大量储存与运输, 长期储存时如保藏不当更会被杂菌污染,对生防效果及植物生长产生未知的危害,因此我 们对黑曲霉发酵液产品进行了进一步的加工和优化。
[0004] 根据魔芋生长及大田生防的具体情况,将黑曲霉发酵液加工成生防微丸缓释剂。 微丸缓释剂,W缓控释理论为基础,应用现代药用新辅料、制备技术和设备制备直径在 0. 5-1. 5mm范围内的球形或类球形制剂,发挥平稳、持久、安全有效的作用。微丸直接施用后 既能满足首剂量要求的抑菌浓度,亦能产生维持剂量的抑菌浓度,且抑菌浓度曲线平稳,有 重演性,缓释时间长达72h。根据白絹菌、软腐病生长繁殖的特点,在雨后高热高湿的环境中 能稳定释放,有效抑制病原菌的增殖,在人力物力有限的情况下能最大限度的防止魔芋白 絹病、软腐病的发生。采用30%黑曲霉发酵产物微丸缓释剂在有效剂量1. 3g/m3下对白絹 病菌、软腐病菌的平均防效分别在77. 52%、95. 92%,具有较强的抑制作用。本发明人目的 在于提供一种易于生产、剂型加工,又利于存活的括抗菌制剂,将其用于魔芋白絹病,软腐 病防治。
[0005] 所述括抗菌为黑曲霉(Aspergillusnigerxj)由贵州大学真菌资源研究所分离, 已经于2006年3月7日保藏于中国典型培养物保藏中屯、,(地址:中国武汉武汉大学),保 藏号:CCTCCNO:M206021

【发明内容】

[0006] 本发明所要解决的技术问题是解决稳定性和药效最优化,并且实现黑曲霉的可控 制释放。
[0007] 本发明提供了一种稳定的黑曲霉微丸。
[0008] 本发明还提供了所述黑曲霉微丸的生产方法。
[0009] 本发明还提供了所述黑曲霉微丸的使用方法。
[0010] 本发明还提供了所述黑曲霉微丸可用于防治白絹病,软腐病。
[0011] 为了实现上述目的,本发明提供了一种括抗菌,所述括抗菌为黑曲霉 (AspergillusnigerXj)由贵州大学真菌资源研究所分离,已经于2006年3月7日保藏于 中国典型培养物保藏中屯、,(地址:中国武汉武汉大学),保藏号:CCTCCN0 :M206021。
[0012] 为实现上述发明目的,本发明采用下述技术方案:
[0013] 一种黑曲霉微丸,其包括下述组分:黑曲霉、微晶纤维素、乳糖、径丙基甲基纤维 素。
[0014] 优选地,黑曲霉为黑曲霉发酵浓缩液粗提物粉剂。
[0015] 优选地,黑曲霉发酵浓缩液粗提物粉剂10~40重量份、微晶纤维素10~45重量 份、乳糖15~50重量份和径丙基甲基纤维素1~10重量份。
[0016] 优选地,黑曲霉发酵浓缩液粗提物粉剂30重量份、微晶纤维素32重量份、乳糖35 重量份和径丙基甲基纤维素3重量份。
[0017] 其中,黑曲霉发酵浓缩液粗提物粉剂是通过下述方法制备得到:
[001引A.取灭菌发酵液过滤,在25°C浓缩至相对密度为1. 12,喷雾干燥,干燥条件为进 风溫度150°C;排气溫度95°C;流速20血/s;
[0019] 或
[0020] B.取灭菌发酵液过滤,在25°C浓缩至相对密度为1. 12,置70°C烘箱中,鼓风干燥 36h,取出后使用高速粉碎机粉碎,过100目筛既得。
[0021] 所述的微丸可用于防治魔芋白絹病和软腐病。
[0022] 当防治防治魔芋白絹病时:将黑曲霉微丸菌剂与基质按1 : 80~120混匀,种植 时将菌剂灌根,之后每隔30天灌根一次,待魔芋收获后,应在大田大面积喷洒3-5次。
[0023] 当防治防治魔芋软腐病时:将黑曲霉微丸菌剂与基质按1 : 400~600混匀,种植 时将菌剂灌根,之后每隔30天灌根一次。 实施例
[0024] 本发明根据下述实施例做进一步的描述,本领域技术人员可W明了的是,下述实 施例对本发明仅仅起到说明的作用。在不背离本发明精神的前提下,对本发明所做的任意 改进和替代均在本发明保护的范围之内。
[00巧]使用的仪器和试药:球型微丸造粒机,华东理工大学机械工业研究院;标准检验 筛,浙江省上虞县纱筛厂;CJY-300脆碎度测定仪,上海黄海药检仪器厂)。微晶纤维素 (MCC),常熟药用辅料厂;乳糖,北京奥博星生物技术责任有限公司;径丙基甲基纤维素 化PMCK4M),山东泰安瑞泰纤维素有限公司;95%乙醇,沈阳试剂一厂;所述括抗菌为黑曲 霉(Aspergillusnigerxj)由贵州大学真菌资源研究所提供,其发酵液按照现有技术中方 法进行制备。
[002引实施例1 :缓释微丸的制备
[0027] 黑曲霉发酵浓缩液粗提物粉剂制备:
[0028] A.取灭菌发酵液过滤,浓缩至相对密度为1. 12 (25°C),喷雾干燥,干燥条件为:进 风溫度150°C;排气溫度95°C;流速20血/s。
[0029] 利用喷雾干燥及在进风溫度150°C;排气溫度95°C;流速20血/s下对黑曲霉发酵 液进行浓缩干燥加工,采用空气经过滤和加热,进入干燥器顶部空气分配器,热空气呈螺旋 状均匀地进入干燥室。料液经塔体顶部的高速离屯、雾化器,(旋转)喷雾成极细微的雾状 液珠,与热空气并流接触在极短的时间内可干燥为成品。产品具有良好的均匀度、流动性和 溶解性,产品纯度高,质量好。生产过程简化,操作控制方便。对于含湿量40-60% (特殊物 料可达90% )的液体能一次干燥成粉粒产品,干燥后不需粉碎和筛选,减少生产工序,提高 产品纯度。对产品粒径,松密度,水份,在一定范围内可通过改变操作条件进行调整,控制和 管理都很方便。
[0030] 或
[0031] B.取灭菌发酵液过滤,浓缩至相对密度为1. 12(25°C),置70°C烘箱中,鼓风干燥 36h,取出后使用高速粉碎机粉碎,过100目筛既得。
[0032] 发酵液高溫鼓风干燥技术:利用鼓风烘箱在烘箱溫度70°C,鼓风干燥时间36h,对 黑曲霉发酵液进行浓缩干燥加工。高溫鼓风干燥箱的采用进口多个大功率风机,双风道式 热循环系统,将不诱钢高溫电加热器通过风循环,快速加热工作室内,使产品迅速干燥,取 出后使用高速粉碎机粉碎,过100目筛既得。
[003引微丸制备:
[0034] 黑曲霉微丸由下列组分按重量百分比组成:
[0035] 黑曲霉发酵浓缩液粗提物粉剂质量 30重量份;
[0036] 乳糖 30重量份; MCC 30重量份; 怒丙基甲基纤维素(HPMCK4M) 10重量份;
[0037] 过筛混匀用适量的质量分数为30%的50mL乙醇水溶液作为黏合剂制粒得到湿度 适中的湿物料,干燥即得。
[003引实施例2 :缓释微丸的制备
[0039] 按照实施例1相同的方法进行制备,不同之处在于采用下述重量份的组分:
[0040] 黑曲霉发酵浓缩液粗提物粉剂质量 30重量份; 乳糖 35重量份; MCC 32重量份;
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