X19cmX12cm的发芽盒中，至约2/3高度；将浸泡过的棉花 种子均匀摆放于发芽盒中，约50粒种子/盒，重复4次；然后在种子上覆盖约1. 5cm厚的松 散砂，盖上盖子后置于光照培养箱中培养。
[0030] 光照培养箱的溫度设定为30°C，湿度60%~80%，光照8小时/黑暗16小时，光 照强度为60001X。
[0031] 4、统计和计算
[0032] 砂培7天后，分别统计清水对照处理组和草胺麟处理组的棉花种子的出苗数，计 算出苗率，统计胚根长，并计算胚根生长抑制率；其中种子出苗的判断标准为子叶破上。胚 根生长抑制率的计算公式为： W33] 胚根生长抑制率％=(清水对照处理组的胚根长-草甘麟处理组的胚根 长）X100/清水对照处理组的胚根长
[0034] 按照上述方法，选用抗草胺麟棉花材料ZYA1、ZYA2、ZYA3和非抗草胺麟棉花材料 中棉所52、中棉所65作为待鉴定棉花材料。分别配制有效成分浓度为0. 5g/L、l.Og/l、 2.Og. /L的草胺麟溶液，同时设清水对照组作备用。分别用配制好的草胺麟溶液W及清水于 不同浸泡时间（0. 5小时、1小时、2小时）对已露白的待测棉花种子浸泡，砂培后进行抗草 胺麟棉花的判定。实验结果见表1。
[0035] 表1经不同浓度的草胺麟处理后待测棉花种子的出苗率和胚根生长抑制率
[0036]
[0038] S:胚根生长抑制率为负值表示草胺麟处理组的胚根长大于清水对照组，说明草胺 麟处理对胚根生长有促进作用。
[0039] 由表1可知，用有效成分浓度为0. 5~2.Og/L的草胺麟溶液浸泡待测棉种0. 5小 时后，3种抗草胺麟棉花的出苗率为89. 0 %~94. 2 %，与清水对照巧3. 5 %~98. 0 % )相比 差异不大，胚根生长抑制率均不高于4. 8%;而两种非抗草胺麟棉花的出苗率仅为35. 9%~ 72. 3%，与清水对照巧1. 3%~92. 3% )相比差异大，胚根生长抑制率为63. 2~83. 2%。
[0040] 用有效成分浓度为0.5~2.Og/L的草胺麟溶液浸泡待测棉种1.0小时后，3种抗 草胺麟棉花的出苗率为76. 0%~98. 7%，与清水对照（89. 2%~92. 6%)相比差异不大， 胚根生长抑制率均不高于15. 0% ;而两种非抗草胺麟棉花的出苗率仅为23. 6%~42. 3%， 与清水对照巧3. 1%~95.4% )相比差异大，胚根生长抑制率为78. 5~87.4%。
[0041] 用有效成分浓度为0. 5~2.Og/L的草胺麟溶液浸泡待测棉种2. 0小时后，3种抗 草胺麟棉花的出苗率为75. 5%~95. 3%，与清水对照（84. 8%~91.8% )相比差异不大， 胚根生长抑制率均不高于38. 5% ;而两种非抗草胺麟棉花的出苗率仅为0%~18. 4%，与 清水对照（88. 7%~96. 3% )相比差异大，胚根生长抑制率高达85. 1~91. 3%。
[0042] 由此可见，在有效成分浓度为0. 5~2.Og/L的草胺麟溶液中，随着浸泡时间增加， 对抗草胺麟棉花的影响不大，对非抗草胺麟棉花的影响很大。本发明采用的草胺麟处理方 法对抗草胺麟棉花与非抗草胺麟棉花的影响有明显区别，因此，本发明的鉴别方法能够有 效地区分抗草胺麟棉花与非抗草胺麟棉花。
[0043] 实施例2抗草胺麟棉花的快速鉴定方法 W44] 按照实施例1的方法，选用抗草胺麟棉花材料狂YA4、ZYA5、ZYA6)和非抗草胺麟棉 花材料（中棉所52、中棉所65、中棉所83)作为待鉴定棉花材料，用有效成分浓度为1.Og/ L的草胺麟溶液浸泡处理1小时，实验结果见表2。
[0045]表2处理后待测棉花种子的出苗率、胚根长和胚根生长抑制率
[0046]
[0047] 从表2可W看出，对于抗草胺麟棉花材料，草胺麟处理对出苗率影响不大（出苗 率从91. 7%~98. 2%降至89. 7%~92. 3% )，胚根生长抑制率仅为5%W下，对有些材料 还有促进胚根生长作用。对于非抗草胺麟棉花材料，草胺麟处理显著影响出苗率（出苗率 从91. 1 %~98. 5%降至8. 7%~16. 2% )，胚根生长抑制率高达79. 2%~90. 2%;由此可 见，本发明使用的草胺麟处理对非抗草胺麟棉花与抗草胺麟棉花的影响有显著区别，因此， 本发明的鉴别方法能够有效地区分抗草胺麟棉花与抗非草胺麟棉花。
[0048] 虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在 本发明基础上，可W对之作一些修改或改进，运对本领域技术人员而言是显而易见的。因 此，在不偏离本发明精神的基础上所做的运些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。
【主权项】
1. 一种抗草胺膦棉花的快速鉴定方法，其特征在于，所述方法包括：将已露白的待测 棉花种子用草胺膦溶液浸泡；清水冲洗后，将所浸泡过的种子置于光照培养箱中进行砂培； 分别统计出苗数及培根长，计算出苗率和胚根生长抑制率；根据出苗率和胚根生长抑制率 判断待测棉花是否为抗草胺膦棉花，其中出苗率多80%或胚根生长抑制率< 40%的为抗 草甘膦棉花，而出苗率< 40%或胚根生长抑制率多80%的为非抗草胺膦棉花。2. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，待测棉花种子预先进行硫酸脱绒处理，然 后将种子于清水中浸泡24小时，获得已露白的种子。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，将已露白的待测棉花种子用有效成分浓 度0. 5~2.Og/L的草胺膦溶液浸泡0. 5~2小时，随后用水冲洗，即草胺膦处理组；同时， 设清水对照处理组，即用清水浸泡待测样本。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，砂培的具体操作为：将细砂过筛后置于 干燥箱中，180°C干热灭菌4小时，晾凉后将细砂和水按照25:4的重量比混匀，装入规格为 13cmX 19cmX 12cm的发芽盒中，至2/3高度；将浸泡过的棉花种子均勾摆放于发芽盒中，50 粒种子/盒，重复4次；然后在种子上覆盖1. 5cm厚的松散砂，盖上盖子后置于光照培养箱 中培养。5. 根据权利要求4所述的方法，其特征在于，光照培养箱的温度设定为30°C，湿度 60%~80%，光照8小时/黑暗16小时，光照强度为60001x。6. 根据权利要求5所述的方法，其特征在于，砂培7天后，分别统计清水对照处理组和 草胺膦处理组的棉花种子的出苗数，计算出苗率，统计胚根长，并计算胚根生长抑制率；其 中种子出苗的判断标准为子叶破土。7. 根据权利要求1-6任一项所述的方法，其特征在于，胚根生长抑制率的计算公式为： 胚根生长抑制率％ =(清水对照处理组的胚根长-草甘膦处理组的胚根长）X100/清 水对照处理组的胚根长。
【专利摘要】本发明提供一种抗草胺膦棉花的快速鉴定方法，所述方法包括：将已露白的待测棉花种子用草胺膦溶液浸泡；清水冲洗后，将所浸泡过的种子置于光照培养箱中进行砂培；分别统计出苗数及培根长，计算出苗率和胚根生长抑制率；根据出苗率和胚根生长抑制率判断待测棉花是否为抗草胺膦棉花，其中出苗率≥80％或胚根生长抑制率≤40％的为抗草甘膦棉花，而出苗率≤40％或胚根生长抑制率≥80％的为非抗草胺膦棉花。本方法具有鉴定周期短，用药量少，工作量小和不受季节限制等优点，为抗草胺膦棉花品种的选育提供依据。
【IPC分类】A01C1/00, A01G7/00
【公开号】CN105379570
【申请号】CN201510784240
【发明人】戚廷香, 邢朝柱, 郭立平, 吴建勇, 王海林, 乔秀琴, 唐会妮, 张学贤
【申请人】中国农业科学院棉花研究所
【公开日】2016年3月9日
【申请日】2015年11月16日