本发明涉及水产领域，具体涉及一种富硒虹鳟饲料及其制备方法和应用。
背景技术：
硒，自1817年被瑞典化学家berzelius发现以来，很长一段时间内都被认为是一种有毒元素。直到1957年，schwarz和foltz发现抑制大鼠由进食引发的肝坏死第三因子的主要成分中就含有硒，硒作为动物体内必需的微量元素的身份才逐渐被人们所认识。随后，大量的研究表明，硒在各种正常的机体功能中扮演着重要角色，缺硒将导致克山病，白肌病以及心血管疾病等多种疾病。
硒广泛地分布于土壤中，可由植物吸收转化，通过食物链控制着动物及人类的硒营养状况，因此人类的硒营养状况与硒的分布紧密相关。尽管我国存在有“世界硒都”之称的恩施，但是我国的土壤硒资源分布严重不均，我国存在一条包括黑、吉、辽东北三省地区，北京、河北、山东等华北地区，内蒙古、甘肃等北部及西北部地区，云、贵、川及西藏等西南地区在内的由东北向西南的低硒地带。如何解决低硒地带人民的补硒问题越来越受到关注。
硒的存在形式分为无机硒和有机硒两大类，无机硒包括硒酸盐、亚硒酸盐等，无机硒对于动物及人来说，生物利用率较低，毒性风险大，不当使用极易造成硒中毒。而有机硒则主要指与生物分子形态结合的硒，可由无机硒经动植物、微生物吸收转化而来，包括硒代蛋氨酸、硒代半胱氨酸等，有机硒在动物体内的生物利用率高，毒性小，更适合补硒要求。
随着硒在生物体内各种有益功能的陆续发现，人们补硒的欲望也越来越强烈，随之而来的关于富硒食品的研发也越来越多。鱼类作为一种优质的食物蛋白来源，关于其富硒产品的研究也相对较多，诸如申请号为cn201010579798.1的中国专利所公布的富硒有机鱼及其培育方法，申请号为201110392618.3的中国专利所公布的用于培育富硒鱼的富硒饲料及其制备方法和应用，这些专利所公布的富硒饲料均能培育出富硒鱼，但是各种不同鱼类具有不同的营养需求，因此这些专利并不一定适用于本发明所关注的虹鳟。另外，申请号为201410532760.7的中国专利公布了一种富硒冷水鱼饲料，尽管该发明所提供的饲料能在短期内使虹鳟肌肉达到硒富集，但其饲料硒含量相对较高(5-20mg/kg)，大量研究表明，尽管以有机硒形式存在，较高的饲料硒含量仍会对虹鳟造成毒性作用，降低虹鳟的生长性能、饲料利用及免疫机能等诸多方面，降低产量，而此发明并未对虹鳟本身的健康状况作出评价。因此单纯为了达到富硒目的，而忽略了过高饲料硒含量所带来的减产，将得不偿失。因此，获得一种安全，高效又与虹鳟适配的富硒饲料迫在眉睫。
技术实现要素：
针对上述问题，本发明的目的在于提供一种富硒虹鳟饲料，该饲料在确保在培育出富硒虹鳟的同时不会对虹鳟的生长性能、饲料利用及肌肉品质等造成负面影响，确保合适的硒添加，避免过量添加，从而带来减产及鱼类肉品质的下降。
本发明还有一个目的在于提供一种富硒虹鳟饲料的制备方法，方法简单，易行。
本发明的最后一个目的在于一种富硒虹鳟饲料在制备富硒虹鳟饲料中的应用。
为实现上述目的，本发明的技术方案如下：
一种富硒虹鳟饲料，包括：
秘鲁鱼粉300-350g
猪血粉40-70g
磷虾粉30-50g
鸡肉粉120-180g
玉米蛋白粉40-60g
豆粕50-80g
大豆分离蛋白40-60g
谷朊粉30-50g
预糊化淀粉30-50g
鱿鱼油100-140g
大豆卵磷脂3-7g
甜菜碱3-7g
氯化胆碱0.8-1.2g
矿物质预混料35-50g
维生素预混料2-3g
硒1.65-7.00mg
每1000g矿物质预混料包括：五水乳酸钙350g，磷酸氢二钾250g，一水磷酸二氢钙175g，氯化钠75g，碘化钾0.125g，五水硫酸铜37.5g，一水硫酸锰2.5g，一水硫酸锌14.05g及碳酸钾35g，其余为辅料。
每1000g维生素预混料包括：维生素a60g，维生素b18g，维生素b212g，维生素b38g，维生素b524g，维生素b612g，维生素b70.4g，维生素b120.02g，维生素c600g，维生素d30.04g，维生素e96g，维生素k38g及叶酸4g，其余为辅料。
所述硒为有机硒，优选的以酵母硒的形式添加；
所述的辅料为本领域的常规辅料，优选为α-纤维素。
以上所述的方案中，优选的，富硒虹鳟饲料包括：
秘鲁鱼粉334g
猪血粉50g
磷虾粉40g
鸡肉粉150g
玉米蛋白粉50g
豆粕60g
大豆分离蛋白50g
谷朊粉40g
预糊化淀粉40g
鱿鱼油130g
大豆卵磷脂5g
甜菜碱5g
氯化胆碱1g
矿物质预混料40g
维生素预混料2.5g
硒4mg。
一种富硒虹鳟饲料的制备方法，包括：
1)将以上所有组分粉碎过60目筛；
2)维生素预混料的配制：分别按维生素预混料配比中各组维生素含量的高低，从低到高，逐一向辅料中进行添加原料，每添加一种原料后迅速混匀，再进行下一种原料的添加，直至所有原料添加完毕，充分混匀，既得维生素预混料；
3)矿物质预混料的配制：分别按矿物质预混料中各组维生素含量的高低，从低到高，逐一向辅料中进行添加原料，每添加一种原料后迅速混匀，再进行下一种原料的添加，直至所有原料添加完毕，充分混匀，既得矿物质预混料；
4)根据饲料配方中原料所占比例，除鱿鱼油外，其余原料按饲料配方中各组分含量的高低，从低到高进行添加，每添加一种原料后迅速混匀，再进行下一种原料的添加，直至所有原料添加完毕，充分混匀，得混合物1；
5)向混合物1中加入鱿鱼油，并混合均匀，得混合物2；
6)向每kg混合物2中加入0.25kg清水，混合均匀，得混合物3；
7)将混合物3经75℃膨化，制粒既得饲料颗粒；
8)将得到的饲料颗粒置于通风处摊开，避免阳光照射，自然风干，保证水分＜10％，既得本发明的富硒虹鳟饲料。
一种富硒虹鳟饲料在制备富硒虹鳟饲料中的应用，包括利用本发明提供的饲料喂养虹鳟，或是与其他饲料配合喂养虹鳟。
相比于现有的技术方案，本发明的优点是：
本发明的富硒虹鳟饲料严格按照虹鳟的营养需求而设计，营养均衡，适口性好，能满足虹鳟正常生长的营养需要，并添加磷虾粉及甜菜碱作为诱食剂，促进鱼类摄食。并且，本发明的富硒虹鳟饲料不仅具有保肝护胆之功效，而且还能增强虹鳟的抗氧化能力及非特异性免疫机能。饲料基础营养成分如表1所示：
表1一种富硒虹鳟饲料营养成分表
本发明所添加硒源为新兴有机硒源酵母硒，毒性小，生物利用率高；
本发明严格控制酵母硒的添加量，在培育富硒虹鳟的前提下，保证虹鳟的健康，最大限度确保生长性能、饲料利用及肉品质。
本发明的富硒虹鳟饲料具有保肝护胆功效，并能从一定程度上提升虹鳟的抗氧化能力及非特异性免疫机能。
利用本发明所提供的饲料养殖虹鳟70天，虹鳟肌肉总硒含量(以湿重计)可达到0.57-1.12mg/kg，全鱼硒含量可达到0.58-1.06mg/kg。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明的权利要求做进一步的详细说明，但不构成对本发明的任何限制，任何人在本发明权利要求范围内所做的有限次的修改，仍在本发明的权利要求保护范围之内。本发明所述技术方案，如未特别说明，均为本领域的常规技术；所用试剂或材料，如未特别说明，均来源于商业渠道。
实施例1：
一种富硒虹鳟饲料(饲料1)，包括：
每1000g矿物质预混料包括：五水乳酸钙350g，磷酸氢二钾250g，一水磷酸二氢钙175g，氯化钠75g，碘化钾0.125g，五水硫酸铜37.5g，一水硫酸锰2.5g，一水硫酸锌14.05g及碳酸钾35g，其余为辅料。
每1000g维生素预混料包括：维生素a60g，维生素b18g，维生素b212g，维生素b38g，维生素b524g，维生素b612g，维生素b70.4g，维生素b120.02g，维生素c600g，维生素d30.04g，维生素e96g，维生素k38g及叶酸4g，其余为辅料。
所述硒以酵母硒的形式添加，本发明使用的酵母硒，经电感耦合等离子质谱测定，其硒含量为4000mg/kg；
所述的辅料为α-纤维素。
一种富硒虹鳟饲料(饲料2)，包括：
其余与饲料1相同。
一种富硒虹鳟饲料(饲料3)，包括：
其余与饲料1相同。
一种富硒虹鳟饲料的制备方法，包括：
1)将饲料1、饲料2或饲料3的组分粉碎过60目筛；
2)维生素预混料的配制：分别按维生素预混料配比中各组维生素含量的高低，从低到高，逐一向α-纤维素中进行添加原料，每添加一种原料后迅速混匀，再进行下一种原料的添加，直至所有原料添加完毕，充分混匀，既得维生素预混料；
3)矿物质预混料的配制：分别按矿物质预混料中各组维生素含量的高低，从低到高，逐一向α-纤维素中进行添加原料，每添加一种原料后迅速混匀，再进行下一种原料的添加，直至所有原料添加完毕，充分混匀，既得矿物质预混料；
4)根据饲料配方中原料所占比例，除鱿鱼油外，其余原料按饲料配方中各组分含量的高低，从低到高进行添加，每添加一种原料后迅速混匀，再进行下一种原料的添加，直至所有原料添加完毕，充分混匀，得混合物1；
5)向混合物1中加入鱿鱼油，并混合均匀，得混合物2；
6)向每kg混合物2中加入0.25kg清水，混合均匀，得混合物3；
7)将混合物3经75℃膨化，制粒既得饲料颗粒；
将得到的饲料颗粒置于通风处摊开，避免阳光照射，自然风干，保证水分＜10％，既得富硒虹鳟饲料。
按照上述配方和方法，制得了三种硒含量不同的富硒饲料，分别为饲料1、饲料2和饲料3。用于以下实施例。
实施例2：
一种富硒虹鳟饲料在培育富硒虹鳟中的应用：
本实施例以实施例1中所获得的3种饲料作为实验饲料，进行养殖实验。实验开始前，对饲料1～3的干物质、粗蛋白、粗脂肪、灰分及总硒含量进行了测定，测定结果如表2：
表2实验饲料近似成分及总硒含量
实验开始前，将180尾平均体重为144.87±26.45g的虹鳟随机放入9口环形塑料缸(1000l)中，9口缸随机分为3组，所有鱼饥饿24小时并逐条称重。实验开始后，4组鱼每天分别饱食投喂四种实验饲料两次(9：00和16:00)，详细记录摄食量，水温控制在9-11℃，溶氧6.5±0.5mg/l。经过70天养殖后，停食24小时，并逐条称重，量体长。并每缸随机取6尾鱼，其中3尾取用于肌肉样品采集，并称量肝脏及内脏团重量，其余3尾用于全鱼指标测定。所有结果通过spss19.0(spssinc.,chicago,il,usa)进行单因素方差分析，在具有显著性差异情况下进行duncan’s多重比较，显著性水平设定为0.05。
虹鳟生长性能及饲料利用如表3所示：
表3生长性能及饲料利用
实验结果显示，三个处理组中，虹鳟各项生长及饲料利用相关指标均无显著性差异，说明本发明所提供的一种富硒虹鳟饲料中的酵母硒添加水平在虹鳟能够适应的安全范围内，并未对虹鳟造成毒性作用，从而降低虹鳟生长性能及饲料利用。本实验中，各组虹鳟存活率为100％，说明本发明的基础饲料及富硒饲料能够满足虹鳟的基本需求，均能保证虹鳟的存活；另外，饲料1,2,3的饵料系数均达到了1.4以下，特别是饲料2达到了1.27，说明本发明提供的富硒虹鳟饲料具有较高的饲料转化率，能很好地被虹鳟所消化吸收，而本实验所用养殖温度为9-11℃，相对较低，故而鱼的生长速度较慢，如果在更加理想的水温中使用本发明的富硒虹鳟饲料，饵料系数还能降低。这些结果均说明，本发明的富硒虹鳟饲料均能很好地满足虹鳟的生长需求，并且饲料利用率较高，且所添加酵母硒含量在虹鳟所能承受的安全范围内，对虹鳟无毒性，投喂本发明所提供的一种富硒虹鳟饲料不会影响虹鳟的生长性能、饲料利用及肌肉品质，而带来减产及肌肉品质的下降。
虹鳟肌肉及全鱼总硒含量如表4所示：
表4肌肉及全鱼总硒含量(mg/kg湿重)
每一行中，不同上标字母表示具有显著性差异(p＜0.05)。
经过70天的养殖，本发明所提供的饲料1，饲料2，饲料3显著提高了虹鳟肌肉及全鱼总硒含量，并且肌肉和全鱼的总硒含量的增加具有剂量效应，说明本发明所提供的富硒虹鳟饲料能够有较好的富硒效果。
虹鳟肌肉品质如表5所示
表5肌肉品质
每一行中，不同字母代表显著性差异(p＜0.05)。
结果显示，本实验中，除滴水损失外，其余肌肉品质相关指标均无显著性差异，说明本发明所提供的富硒虹鳟饲料的硒添加量并未降低虹鳟的肌肉品质，本发明所推荐的硒添加量是可接受的。尽管各指标(除滴水损失外)均无显著性差异，从各项指标的数值结果来看，在肌肉品质方面，以4mg硒每kg饲料的添加水平为最优。
综上，本实施例说明本发明所提供的一种富硒虹鳟饲料能够满足虹鳟的正常需求，保证存活率，并且具有较高的饲料转换率，能被虹鳟很好地吸收利用；本发明的富硒虹鳟饲料的硒添加量在虹鳟的安全范围内，并未对虹鳟的生长性能，饲料利用及肌肉品质造成不利影响，并且在以每kg饲料添加4mg硒水平时，虹鳟的肌肉品质达最优。
实施例3：
为了进一步说明本发明所提供的一种富硒虹鳟饲料的饲用效果，本实施例通过养殖实验对本发明的一种富硒虹鳟饲料与一种商业饲料进行了养殖效果的对比。
实验开始前，将480尾平均体重为12.37±0.03g的虹鳟随机放入6口环形塑料缸(1000l)中，6口缸随机分为2组，所有鱼饥饿24小时并逐条称重。实验开始后，2组鱼每天分别饱食投喂一种市售商业饲料及实施例1所制得的饲料2，每日投喂3次(7：00，12:30及18:00)，详细记录摄食量，水温控制在16-17℃，溶氧8.0±0.5mg/l。经过30天养殖后，停食24小时，并逐条称重，量体长。另外每缸随机取5尾鱼，采集血清，测量肝脏及内脏团重量。所有结果通过spss19.0(spssinc.,chicago,il,usa)进行独立样本t检验，显著性水平设定为0.05。
生长及饲料利用结果如表6所示：
表6生长及饲料利用
*表示同一行数据存在显著性差异(p＜0.05)。
生长及饲料利用结果表明，饲料2组中虹鳟的存活率为100％，高于商业饲料组；饲料2显著增加了虹鳟的增重率及特定生长率，说明本发明所提供的饲料所饲养的虹鳟具有更好的生长性能；并且，饲料2的饵料系数比商业饲料更低，且数值上小于1，说明本发明所提供的富硒虹鳟饲料的饲料利用率极高，能很好地被虹鳟所利用。
血清相关酶活性指标结果如表7所示：
表7血清相关酶活性指标
*表示同一行数据存在显著性差异(p＜0.05)。
血清中，谷丙转氨酶与谷草转氨酶活性的变化反应了肝功能的变化，当肝受损时，血清中的谷丙转氨酶活性与谷草转氨酶活性会提升，本实验中，相比于商业饲料，投喂饲料2显著降低了虹鳟血清的谷草转氨酶活性，说明本发明的富硒虹鳟饲料相比于市售商业虹鳟饲料能更好地维护虹鳟肝功能，具有保肝护胆之功效；血清抗氧化相关酶中，饲料2显著提升了虹鳟总超氧化物酶活性，说明本发明的饲料相对于市售商业虹鳟饲料对于虹鳟的抗氧化能力有一定提升，丙二醛含量反映了脂质过氧化水平，投喂饲料2的虹鳟血清中显著降低的丙二醛含量也证实了本发明的富硒虹鳟饲料对于虹鳟抗氧化能力的提升；溶菌酶，碱性磷酸酶和酸性磷酸酶是与非特异性免疫相关的酶，饲料2显著增强了虹鳟血清碱性磷酸酶与酸性磷酸酶活性，说明投喂本发明的富硒虹鳟饲料对于虹鳟的非特异性免疫机能同样存在一定的增强作用。
综上，本实施例进一步说明了本发明所提供的一种富硒虹鳟饲料相比于市售商业饲料具有更加优良的性能。