一种复合微生物饲料添加剂及其制备方法与流程

本发明属于饲料添加剂技术领域，具体涉及一种复合微生物饲料添加剂及其制备方法。

背景技术：

由于夏秋季节气温普遍偏高，茶树的碳代谢水平高，氮代谢水平低，使得夏秋茶中的多酚类物质含量高，维生素、氨基酸以及芳香成分的含量偏低，制成的茶叶往往口感较差，苦涩味重，缺乏清香气味，品质上远远达不到春茶的水平。同时，茶叶本身采摘的劳动强度较大，成本高，茶农采摘后无利可图，使得夏秋茶的鲜叶采摘少甚至不采，不仅造成了资源极大浪费，同时还消耗土地肥力，以及带来了植保的问题。因此，如何利用夏秋茶资源，对于提高茶叶的生产整体效益，增加茶农的收入具有积极作用。

技术实现要素：

本发明的目的是克服现有技术中存在的不足，提供一种复合微生物饲料添加剂，即可将难以利用的夏秋茶发酵成为符合营养要求的饲料添加剂，同时其中的活性益生菌-植物乳杆菌在改善养殖动物肠道菌群方面也有积极作用。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：

一种复合微生物饲料添加剂，所述复合微生物饲料添加剂由植物乳杆菌和冠突散囊菌发酵夏秋茶的产物按10-15:1的比例复配而成，其中植物乳杆菌的有效活菌数≥2×10⁸cfu/g。

所述复合微生物饲料添加剂的生产方法，包括以下步骤：

（1）混合粉碎：将植物乳杆菌发酵夏秋茶的产物与冠突散囊菌发酵夏秋茶的产物按10-15:1的比例混合复配，并对混合产物进行粉碎；

（2）沸腾干燥：对粉碎后的产物进行干燥，获得含水量在10%以下的饲料添加剂产品，产品中植物乳杆菌的有效活菌数≥2×10⁸cfu/g。

所述植物乳杆菌发酵产物中菌含量为（2.5-5.0）×10¹⁰cfu/g鲜基质。

所述冠突散囊菌发酵产物的生产采用以下步骤：

将冠突散囊菌菌株从斜面接种至一级种子培养基中培养4-5d，洗下孢子后制成孢子悬液，将孢子悬液涂布于二级种子培养基中培养基4-5d，洗下孢子后制成孢子悬液，将孢子悬液按10³-10⁴cfu/g基质的接种量接种至固态发酵培养基中，培养7-8d，获得冠突散囊菌的发酵产物；

所述一级、二级种子培养基相同，按质量分数计，配方为1.5%-2%淀粉，1%-1.5%尿素，k2hpo4、edta、cacl2•2h2o、mgcl2•6h2o、znso4•7h2o、feso4•7h2o、mncl2•4h2o、na2moo4•2h2o、cocl2•2h2o组成的微量元素液，1.5%-2%琼脂，ph为5.0-5.5；

所述固态发酵培养基以夏秋茶叶为唯一碳源及发酵基质，按质量分数计，配方为1%-1.5%葡萄糖+1%-1.5%蔗糖以及由kh2po4+k2hpo4、zncl2、mgso4、cacl2、mnso4、fecl3组成终浓度为0.5%的无机盐；

所述固态发酵条件为温度为20-25℃，初始ph值为5.0-5.5，初始含水量为70%-75%。

所述冠突散囊菌发酵产物中的粗蛋白、酸溶蛋白和蛋白质消化率较发酵前分别提高了5%-12%、3%-7%和2%-10%。

与现有技术相比，本发明具有以下优点：

本发明所述复合微生物饲料添加剂，由植物乳杆菌（lactobacillusplantarum）和冠突散囊菌（eurotiumcristatum）发酵夏秋茶的产物复配而成，本发明能够将难以利用的夏秋茶发酵成为符合营养要求的饲料添加剂，同时其中的活性益生菌-植物乳杆菌在改善养殖动物肠道菌群方面也有积极作用，具有广泛的应用前景。

附图说明

图1为本发明所述复合微生物饲料添加剂的生产方法流程图。

具体实施方式

下面结合具体附图和实施例对本发明作进一步说明。

实施例1

一种复合微生物饲料添加剂的生产方法，包括以下步骤：

（1）植物乳杆菌发酵产物的生产：

1）摇瓶培养：将植物乳杆菌菌株从保藏的斜面接种至摇瓶培养基内，静置、32℃条件下活化培养10h，其中摇瓶培养基的配方为蛋白胨20g，葡萄糖20g，水1000ml，ph7.0；

2）种子培养：按1.6%的接种量将摇瓶培养物接种至种子培养基内，30r/min转速、32℃条件下培养10h得到种子液，对种子液中的植物乳杆菌进行计数，种子培养基配方为糖蜜30g、粉碎后的茶叶50g，水1000ml，ph7.0；

3）固态发酵：种子液接种至茶叶固态发酵培养基中，培养60h即可得到发酵产物，固态发酵培养基以茶叶为唯一氮源和发酵基质，按质量分数计，配方为3%糖蜜、0.5%营养液（由kh2po41g/l、k2hpo41g/l、caco30.5g/l、mgso41g/l、cacl20.1g/l、mnso40.1g/l、fecl30.5g/l和edta2g/l组成），初始含水量58%，初始ph7.2，固态发酵的条件为植物乳杆菌的接种量6.4×10⁴cfu/g基质、每隔6h翻料一次；

4）按上述条件进行生产，最终获得植物乳杆菌发酵产物的菌含量为3.74×10¹⁰cfu/g鲜基质，同时发酵产物中，粗蛋白、酸溶蛋白和蛋白质消化率较发酵前分别提高了3.12%、1.65%和3.87%。

（2）冠突散囊菌发酵产物的生产：

将冠突散囊菌菌株从斜面接种至一级种子培养基中培养5d，洗下孢子后制成孢子悬液，将孢子悬液涂布于二级种子培养基中培养基4d，洗下孢子后制成孢子悬液，将孢子悬液按4×10³cfu/g基质的接种量接种至固态发酵培养基中，培养8d，获得冠突散囊菌的发酵产物，最终冠突散囊菌发酵产物中的粗蛋白、酸溶蛋白和蛋白质消化率较发酵前分别提高了8.83%、6.19%和4.30%。

其中，一级、二级种子培养基相同，按质量分数计，配方为1.5%淀粉，1.5%尿素，微量元素液（2.0g/lk2hpo4、1.0g/ledta、0.1g/lcacl2•2h2o、0.1g/lmgcl2•6h2o、0.2g/lznso4•7h2o、0.5g/lfeso4•7h2o、0.1g/lmncl2•4h2o、0.02g/lna2moo4•2h2o、0.04g/lcocl2•2h2o），琼脂1.8%，ph为5.0。

固态发酵培养基以夏秋茶叶为唯一碳源及发酵基质，按质量分数计，配方为1%葡萄糖+1.5%蔗糖以及由kh2po4+k2hpo4、zncl2、mgso4、cacl2、mnso4、fecl3组成终浓度为0.5%的无机盐；固态发酵条件为温度为25℃、初始ph值为5.5、初始含水量为75%。

（3）将植物乳杆菌发酵产物与冠突散囊菌发酵产物按15:1的比例混合复配，采用挤压式粉碎的方式对混合产物进行粉碎，降低混合产物的颗粒大小。

（4）采用高效沸腾干燥器对粉碎后的产物进行干燥，获得含水量8.1%的饲料添加剂产品，产品中植物乳杆菌的有效活菌数为7.4×10⁸cfu/g。

实施例2

一种复合微生物饲料添加剂的生产方法，包括以下步骤：

（1）植物乳杆菌发酵产物的生产：

1）摇瓶培养：将植物乳杆菌菌株从保藏的斜面接种至摇瓶培养基内，静置、32℃条件下活化培养10h，摇瓶培养基的配方为蛋白胨20g，葡萄糖20g，水1000ml，ph7.0；

2）种子培养：按1.6%的接种量将摇瓶培养物接种至种子培养基中，30r/min转速、32℃条件下培养10h得到种子液，对种子液中的植物乳杆菌进行计数，种子培养基配方为糖蜜30g、粉碎后的茶叶50g，水1000ml，ph7.0；

3）固态发酵：种子液接种至茶叶培养基中，培养60h即可得到发酵产物，固态发酵培养基以茶叶为唯一氮源和发酵基质，按质量分数计，配方为3%糖蜜、0.5%营养液（由kh2po41g/l、k2hpo41g/l、caco30.5g/l、mgso41g/l、cacl20.1g/l、mnso40.1g/l、fecl30.5g/l和edta2g/l组成），初始含水量58%，初始ph7.2，固态发酵的条件为植物乳杆菌的接种量6.4×10⁴cfu/g基质、每隔6h翻料一次；

4）按上述条件进行生产，最终获得植物乳杆菌发酵产物的菌含量为3.74×10¹⁰cfu/g鲜基质，同时发酵产物中，粗蛋白、酸溶蛋白和蛋白质消化率较发酵前分别提高了3.12%、1.65%和3.87%。

（2）冠突散囊菌发酵产物的生产：

将冠突散囊菌菌株从斜面接种至一级种子培养基中培养5d，洗下孢子后制成孢子悬液，将孢子悬液涂布于二级种子培养基中培养基4d，洗下孢子后制成孢子悬液，将孢子悬液按5.2×10³cfu/g基质的接种量接种至固态发酵培养基中，培养8d，获得冠突散囊菌的发酵产物；冠突散囊菌发酵产物中的粗蛋白、酸溶蛋白和蛋白质消化率较发酵前分别提高了7.90%、4.71%和7.23%。

其中，一级、二级种子培养基相同，按质量分数计，配方为2%淀粉，1%尿素，微量元素液（2.0g/lk2hpo4、1.0g/ledta、0.1g/lcacl2•2h2o、0.1g/lmgcl2•6h2o、0.2g/lznso4•7h2o、0.5g/lfeso4•7h2o、0.1g/lmncl2•4h2o、0.02g/lna2moo4•2h2o、0.04g/lcocl2•2h2o），琼脂1.5%，ph为5.0。

固态发酵培养基以夏秋茶叶为唯一碳源及发酵基质，按质量分数计，配方为1.5%葡萄糖+1.5%蔗糖以及由kh2po4+k2hpo4、zncl2、mgso4、cacl2、mnso4、fecl3组成终浓度为0.5%的无机盐，固态发酵条件为温度为25℃、初始ph值为5.2、初始含水量为70%。

（3）将植物乳杆菌发酵产物与冠突散囊菌发酵产物按20:1的比例混合复配，采用挤压式粉碎的方式对混合产物进行粉碎，降低混合产物的颗粒大小。

（4）采用高效沸腾干燥器对粉碎后的产物进行干燥，获得含水量7.2%的饲料添加剂产品，产品中植物乳杆菌的有效活菌数为9.38×10⁸cfu/g。

以上所述，仅是本发明的较佳实施例，并非对本发明作任何限制。凡是根据本发明实质对以上实施例所作的任何简单修改、变更以及等效变化，均仍属于本发明技术方案的保护范围内。