一种富硒饲料添加剂的制备方法与流程

1.本发明涉及生物工程制造领域，具体涉及一种富硒饲料添加剂的制备方法。


背景技术：

2.硒是人体以及动物体必需的微量元素，但硒也是一种超剂量使用对人体和动物产生毒害副作用的营养素，安全范围较窄，在强化过程中必须注意硒的强化剂量，添加量必须以相关国标为依据。
3.硒在生产中起着重要的作用，作为机体必需微量元素，它的添加形式已经受到了广泛的关注。现有技术中对动物饲喂时，常常以无机硒为硒源作为饲料添加剂，以增加动物对硒的吸收量。但是无机硒具有较大毒性，添加量有限制，且不易被吸收，因此使用无机硒饲喂动物，对动物体内含硒量的增加并不明显。
4.因此，亟需一种富硒饲料添加剂，来满足动物的饲喂需求。


技术实现要素：

5.本发明的目的就在于克服硒元素在动物饲料添加剂中应用的难题，将更多的无机硒转化为有机硒，提供一种富硒饲料添加剂的制备方法。
6.为达到上述目的，本发明是按照以下技术方案实施的：
7.一种富硒饲料添加剂的制备方法，包括以下步骤，
8.s1植物乳杆菌种子液制备，将植物乳杆菌加入到液体培养基中发酵，获得植物乳杆菌种子液；
9.s2富硒植物乳杆菌发酵液制备，将步骤s1获得的植物乳杆菌种子液接种到液体培养基中发酵，接种后继续发酵10
‑
15h，加入亚硒酸钠后得到发酵液，亚硒酸钠在发酵液中的终浓度为5
‑
10mmol/l；随后继续发酵20
‑
36h，得到富硒植物乳杆菌发酵液；
10.s3混合，将富硒植物乳杆菌发酵液送入固体发酵罐中，加入黄粉虫粉充分搅拌均匀，得到水分含量为35
‑
50wt％的混合料；
11.s4固体发酵，将步骤s3获得的混合料在30
‑
45℃固体发酵24
‑
48h，当混合料ph值小于4时，停止发酵，得到发酵混合物；
12.s5干燥粉碎，将步骤s4获得的发酵混合物干燥后粉碎，获得富硒饲料添加剂。
13.优选的，所述植物乳杆菌来源为cicc，菌株编号为cicc20263。
14.优选的，步骤s1中，植物乳杆菌通过活化扩培制成植物乳杆菌种子液，植物乳杆菌种子液的菌体浓度为1
×
106‑1×
107cfu/ml。
15.优选的，所述步骤s1中，每升液体培养基中包含：葡萄糖15
‑
20g、蛋白胨5
‑
15g、牛肉粉5
‑
15g、硫酸镁0.1
‑
0.3g、硫酸锰0.03
‑
0.06g、柠檬酸三铵1
‑
3g、磷酸氢二钾1
‑
3g，其余为纯水。
16.优选的，所述步骤s1中，发酵条件为：ph值为6.0
‑
6.8，发酵温度为35
‑
40℃，发酵时间为48
‑
60h。
17.优选的，所述步骤s2中，植物乳杆菌种子液以5
‑
10％的接种量接种至液体培养基，所述液体培养基与步骤s1的液体培养基一致；
18.步骤s2的发酵条件为：ph值为6.0
‑
6.8，发酵温度为35
‑
40℃。
19.优选的，所述步骤s5中，发酵混合物在85
‑
90℃的温度下，烘干至水分含量≤10％；然后粉碎至60
‑
80目。
20.优选的，所述步骤s5获得的富硒饲料添加剂中，总硒中的有机硒含量≥98wt％。
21.本发明的作用原理：
22.本发明先将植物乳杆菌与亚硒酸钠进行发酵，获得富硒植物乳杆菌发酵液；将富硒植物乳杆菌发酵液与黄粉虫粉混合进行固体发酵后，干燥粉碎获得富硒饲料添加剂。
23.本发明使用植物乳杆菌的生物活性转化，将无机硒(亚硒酸钠)转化为能够被动物体吸收的有机硒；然后采用富硒植物乳杆菌发酵液与黄粉虫粉进行固体发酵，硒元素与黄粉虫粉经过植物乳杆菌的固体发酵，促进有机硒与黄粉虫蛋白结合，形成稳定的硒蛋白结构。
24.本发明获得的富硒饲料添加剂中，总硒中有机硒含量≥98wt％。本发明中的有机硒含量检测方法按照标准sn/t 4526
‑
2016进行。
25.本发明的工艺简单转化率高，环境友好，适合在畜牧养殖行业进行推广，助力绿色养殖产业。本发明获得的富硒饲料添加剂，有机硒含量高具有很强的抗氧化性；此外富硒饲料添加剂中还含有益生菌(植物乳杆菌)的多种代谢产物，对动物肠道健康有极好保护，更容易被畜禽吸收和利用，达到了预防疾病的功效。
26.与现有技术相比，本发明的有益效果为：
27.1)本发明通过控制亚硒酸钠的浓度，使得无机硒(亚硒酸钠)能够在植物乳杆菌发酵过程中转化为大量的有机硒；将富硒植物乳杆菌发酵液与黄粉虫粉固体发酵，使得有机硒能够在植物乳杆菌的作用下与黄粉虫的蛋白结合形成硒蛋白；
28.2)本发明的富硒饲料添加剂有机硒含量高，使用更加安全，更有利于动物吸收利用；
29.3)采用固体发酵罐的形式可以连续生产，操作简单，环境友好，有利于大规模产业化生产。
附图说明
30.图1为本发明的工艺流程图。
具体实施方式
31.下面将结合实施例对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。
32.下述实施例中使用的设备型号如下：固体发酵设备为上海保兴生物设备工程有限公司生产的型号为biotech
‑
50ss的机器；万能粉碎机为广州金富机械设备有限公司生产的型号为wf
‑
40b的机器；卧式干燥机为常州市尔诺干燥设备有限公司生产的型号为zlg 3*0.3的机器。
33.实施例1
34.如图1所示，一种富硒饲料添加剂的制备方法，包括以下步骤，
35.s1植物乳杆菌种子液制备，将植物乳杆菌加入到液体培养基中发酵，植物乳杆菌通过活化扩培制成植物乳杆菌种子液，得到菌体浓度为2.3
×
106cfu/ml的植物乳杆菌种子液，发酵条件为：ph值为6.0，发酵温度为35℃，发酵时间为48h；
36.其中植物乳杆菌来源为cicc，菌株编号为cicc20263；
37.每升液体培养基中包含：葡萄糖15g、蛋白胨5g、牛肉粉5g、硫酸镁0.1g、硫酸锰0.03g、柠檬酸三铵1g、磷酸氢二钾1g，其余为纯水；
38.s2富硒植物乳杆菌发酵液制备，将步骤s1获得的植物乳杆菌种子液以5％的接种量接种到液体培养基中发酵，接种后继续发酵10h，加入亚硒酸钠后得到发酵液，亚硒酸钠在发酵液中的终浓度为5mmol/l；随后继续发酵20h，得到富硒植物乳杆菌发酵液；发酵条件为：ph值为6.0，发酵温度为35℃；液体培养基与步骤s1的液体培养基一致；
39.s3混合，将富硒植物乳杆菌发酵液送入固体发酵罐中，加入黄粉虫粉充分搅拌均匀，得到水分含量为35wt％的混合料；
40.s4固体发酵，将步骤s3获得的混合料在30℃下固体发酵24h，当混合料ph值小于4时，停止发酵，得到发酵混合物；
41.s5干燥粉碎，将步骤s4获得的发酵混合物使用卧式干燥机在85℃进行烘干，烘干至水分含量为9％；然后使用万能粉碎机至60目，获得富硒饲料添加剂。
42.本实施例获得富硒饲料添加剂中，总硒中的有机硒含量为99.1wt％。有机硒含量检测方法按照标准sn/t 4526
‑
2016进行。
43.实施例2
44.一种富硒饲料添加剂的制备方法，包括以下步骤，
45.s1植物乳杆菌种子液制备，将植物乳杆菌加入到液体培养基中发酵，植物乳杆菌通过活化扩培制成植物乳杆菌种子液，得到菌体浓度为3.5
×
106cfu/ml的植物乳杆菌种子液，发酵条件为：ph值为6.8，发酵温度为40℃，发酵时间为60h；
46.其中植物乳杆菌来源为cicc，菌株编号为cicc20263；
47.每升液体培养基中包含：葡萄糖20g、蛋白胨15g、牛肉粉15g、硫酸镁0.3g、硫酸锰0.06g、柠檬酸三铵3g、磷酸氢二钾3g，其余为纯水；
48.s2富硒植物乳杆菌发酵液制备，将步骤s1获得的植物乳杆菌种子液以10％的接种量接种到液体培养基中发酵，接种后继续发酵15h，加入亚硒酸钠后得到发酵液，亚硒酸钠在发酵液中的终浓度为10mmol/l；随后继续发酵36h，得到富硒植物乳杆菌发酵液；发酵条件为：ph值为6.8，发酵温度为40℃；液体培养基与步骤s1的液体培养基一致；
49.s3混合，将富硒植物乳杆菌发酵液送入固体发酵罐中，加入黄粉虫粉充分搅拌均匀，得到水分含量为50wt％的混合料；
50.s4固体发酵，将步骤s3获得的混合料在45℃固体发酵48h，当混合料ph值小于4时，停止发酵，得到发酵混合物；
51.s5干燥粉碎，将步骤s4获得的发酵混合物使用卧式干燥机在90℃进行烘干，烘干至水分含量为8％；然后使用万能粉碎机至80目，获得富硒饲料添加剂。
52.本实施例获得富硒饲料添加剂中，总硒中的有机硒含量为99.5wt％。有机硒含量检测方法按照标准sn/t 4526
‑
2016进行。
53.本发明的技术方案不限于上述具体实施例的限制，凡是根据本发明的技术方案做出的技术变形，均落入本发明的保护范围之内。