幼蟹复方多肽混合养殖饵料及其制备方法
【专利说明】
所属技术领域
[0001]本发明涉及中药领域，尤其涉及幼蟹复方多肽混合养殖饵料及其制备方法。
【背景技术】
[0002]现有水产动物的饲料，品种众多，大多营养丰富，但不能有效提高水产动物的免疫力和抗病能力。
【发明内容】
[0003]本发明提供了幼蟹复方多肽混合养殖饵料及其制备方法。
[0004]为实现上述目的，本发明的技术方案实施如下:
[0005]幼蟹复方多肽混合养殖饵料及其制备方法，其特征在于:由下列原料组成及重量份数为:
[0006]豆柏15?20%、棉籽柏6?7%、菜柏20?30%、花生柏8?12%、鱼粉3?5%、水产用发酵蛋白肽5?9%、乌贼膏2?3%、虾头粉2?3%、磷脂油I?3%、鱼油I?2%、磷酸二氢钙I?2%、面粉15?20%、脱壳素0.05?0.2%、蟹用微量元素0.5?1.5%、蟹用复合维生素0.1?0.3%,50%氯化胆碱0.1?0.3%、基因重组蛋白0.05?0.2%、营养免疫型水产诱食剂0.4?0.6%，上述各组分用量之和为100% ；
[0007]蟹用复合维生素是复合维生素和载体的混合物，载体为次粉，且每1000克蟹用复合维生素中含有维生素A10000000IU、维生素D32000000IU、维生素E75000IU、维生素K37500mg、维生素 B120000mg、维生素 B225000mg、维生素 B620000mg、维生素 B1220mg、烟酸60000mg、泛酸钙 25000mg、叶酸 2500mg、生物素 200mg、维生素 C150000mg、肌醇 10000mg ；
[0008]蟹用微量元素添加剂由微量元素与载体的混合物，载体为沸石，且每1000克蟹用微量元素添加剂中含有铁15000mg、锰3000mg、铜2000mg、锌6000mg、钴500mg、碘lOOOmg、硒 10mgJM 50000mg、钾 25000mg。
[0009]所述水产用发酵蛋白肽由下列方法制成:
[0010]I)配置枯草芽孢杆菌、酵母菌、乳酸链球菌、发酵乳杆菌用四种培养基，用于发酵罐发酵培养；其中枯草芽孢杆菌培养基配方为:蛋白胨lwt%，酵母膏0.5wt%,氯化钠0.5wt%,磷酸氢二钾0.5wt%,其余为水，酵母培养基配方为:麦芽汁20wt%，其余为水，乳酸链球菌和发酵乳杆菌的培养基配方为:蛋白胨10重量份、牛肉粉5重量份、酵母粉4重量份、葡萄糖20重量份、吐温801重量份磷酸氢二钾2重量份、乙酸钠5重量份、朽1檬酸三铵2重量份硫酸镁0.2重量份、硫酸猛0.05重量份、琼脂粉15重量份、蒸懼水1000重量份；上述各培养基均经121 °C高压灭菌15?20min ；
[0011]2)发酵罐灭菌，冷却后进行接种:分别从罐口用火焰方法，于1、2号罐中接入乳酸链球菌、发酵乳杆菌，进行厌氧培养，每一小时对罐体内培养基进行搅拌一次，分别于3、4号罐中接入酵母菌、枯草芽孢杆菌，进行好氧培养，转速175r/min,通气量为0.8m3/min,罐压 0.03 ?0.05Mpa ；
[0012]3)培养12?24小时后发酵结束，通过计量罐从四个发酵罐中放出菌液到混合罐中进行混合，混合菌液贮存于贮液罐中，从贮液罐中通入菌液到固体混合机中，使菌液与豆柏进行混合，混合比例为1:2，混合时间为5分钟；
[0013]4)将混合后的物料均匀堆积布于固体发酵间地面，高度为0.6米，上盖薄膜，四周封闭，进行厌氧发酵100?150小时，再将发酵后的物料进行30?80°C低温干燥、粉碎得到水产用发酵蛋白肽。
[0014]所述基因重组蛋白由下列方法制成:
[0015]I)在发酵罐内分别配置胰岛素样生长因子基因工程菌⑶-001和腺苷酸环化酶基因工程菌GD-002培养基:胰岛素样生长因子基因工程菌GD-001及腺苷酸环化酶基因工程菌⑶-002培养基配方均为:蛋白胨lwt%，酵母膏0.5wt%，氯化钠0.5%，磷酸氢二钾0.5wt%，其余为水，培养基经121°C高压灭菌20min处理；
[0016]2)在发酵内各加入相当于培养基重量0.02?0.05%的食用油，以消除发酵泡沫；
[0017]3)对发酵罐培养基灭菌消毒并冷却，然后进行接种:于I号罐中接入胰岛素样生长因子基因工程菌⑶-001好氧培养20?30小时，转速175r/min，通气量为lm3/min，罐压0.03?0.05Mpa,于2号罐中接入腺苷酸环化酶基因工程菌⑶-002好氧培养20?30小时，转速175r/min,通气量为lm3/min,罐压0.03?0.05Mpa,向I号发酵罐中加入0.2%葡萄糖和0.lmmol/LIPTG进行诱导8?12小时，向2号发酵罐中加入0.2%葡萄糖和0.1mmol/LIPTG进行诱导8?12小时；
[0018]4)对I号罐发酵液进行离心处理，离心机转速为16000r/min，进料速度为300L/min,得到菌泥，用生理盐水洗出菌泥，在超声波细胞破碎机中破碎30min，然后再次高速离心，离心机转速为16000r/min，进料速度为200L/min，得到上清液I，对2号罐发酵液中进行离心处理，离心机转速为8000r/min，进料速度为200L/h，得到菌泥，用TE缓冲液洗出菌泥，在超声波细胞破碎机中破碎30min，然后再次高速离心，离心机转速为8000r/min，进料速度为150L/h，得到上清液2，上清液1、2与500kg的细度为40目的麸皮混合lOmin，混合物转入烘干料盘，置于风干循环干燥箱内，干燥温度为45±2°C，干燥24h，得成品。
[0019]所述营养免疫型水产诱食剂由下列方法制成:
[0020]I)取鱼肉200重量份，四角蛤蜊肉50重量份、自来水500重量份，采用胶磨机进行胶磨20?40分钟，得胶磨液；
[0021]2)向胶磨液中加入NaOH溶液，并搅拌，用NaOH溶液进行酸碱度的调节，直到pH值为 7.0 ;
[0022]3)过筛120目，去除大颗粒物料，并将去除大物质的液体物料加至酶解罐中，然后加温到60°C，同时不断搅拌；
[0023]4)称取6000IU/G的胰蛋白酶0.004重量份，木瓜蛋白酶0.004重量份，用水溶解，加于酶解罐中，酶解过程中不断搅拌，酶解3小时，升温到88°C，保持15分钟，再降温到600C，再用氨肽酶P酶解5小时，去除物料中的苦味；
[0024]5)再加入以下的成份:0.6重量份腺苷二磷酸、0.25重量份DMPT、0.2重量份谷胱甘肽、0.4重量份甜菜碱，搅拌均匀，在风干干燥机上进行干燥，使最终水份小于12%，得成品O
[0025]本发明与现有技术相比，具有以下有益效果:本发明利用基因重组蛋白生长免疫促进剂、营养免疫型水产诱食剂和高抗菌肽含量的发酵蛋白肽，是新型饲用抗生素的替代产品。应用三种添加剂生产的幼蟹安全饲料，具有安全、高效、环保的性能，能有效抑制多种肠道致病菌，提高饲料营养成分的消化吸收率，促进蟹的生长，并能增强蟹机体免疫力，显著提高幼蟹成活率(达80%以上)；饲料中不使用抗生素，饲料药物残留量为零。
【具体实施方式】
[0026]下面结合具体实施例对本发明做进一步阐述。
[0027]实施例1
[0028]幼蟹复方多肽混合养殖饵料及其制备方法，其特征在于:由下列原料组成及重量份数为:
[0029]豆柏15.9%、棉籽柏6%、菜柏26.5%、花生柏10%、鱼粉3.5%、水产用发酵蛋白肽8%、乌贼膏2.5%、虾头粉2.5%、磷脂油2%、鱼油1.5%、磷酸二氢钙1.5%、面粉18%、脱壳素0.1%、蟹用微量元素1%、蟹用复合维生素0.2%,50%氯化胆碱0.2%、基因重组蛋白0.1%、营养免疫型水产诱食剂0.5% ；
[0030]蟹用复合维生素是复合维生素和载体的混合物，载体为次粉，且每1000克蟹用复合维生素中含有维生素A10000000IU、维生素D32000000IU、维生素E75000IU、维生素K37500mg、维生素 B120000mg、维生素 B225000mg、维生素 B620000mg、维生素 B1220mg、烟酸60000mg、泛酸钙 25000mg、叶酸 2500mg、生物素 200mg、维生素 C150000mg、肌醇 10000mg ；
[0031]蟹用微量元素添加剂由微量元素与载体的混合物，载体为沸石，且每1000克蟹用微量元素添加剂中含有铁15000mg、锰3000mg、铜2000mg、锌6000mg、钴500mg、碘lOOOmg、硒 10mgJM 50000mg、钾 25000mg。
[0032]所述水产用发酵蛋白肽由下列方法制成:
[0033]I)配置枯草芽孢杆菌、酵母菌、乳酸链球菌、发酵乳杆菌用四种培养基，用于发酵罐发酵培养；其中枯草芽孢杆菌培养基配方为:蛋白胨lwt%，酵母膏0.5wt%,氯化钠
0.5wt%，磷酸氢二钾0.5wt%，其余为水；酵母培养基配方为:麦芽汁20wt%，其余为水；乳酸链球菌和发酵乳杆菌的培养基配方为:蛋白胨10重量份、牛肉粉5重量份、酵母粉4重量份、葡萄糖20重量份、吐温801重量份磷酸氢二钾2重量份、乙酸钠5重量份、朽1檬酸三铵2重量份硫酸镁0.2重量份、硫酸锰0.05重量份、琼脂粉15重量份、蒸馏水1000重量份；上述各培养基均经121 °C高压灭菌15?20min ；
[0034]2)发酵罐灭菌，冷却后进行接种:分别从罐口用火焰方法，于1、2号罐中接入乳酸链球菌、发酵乳杆菌，进行厌氧培养，每一小时对罐体内培养基进行搅拌一次；分别于3、4号罐中接入酵母菌、枯草芽孢杆菌，进行好氧培养，转速175r/min,通气量为0.8m3/min,罐压 0.03 ?0.05Mpa ；
[0035]3)培养12?24小时后发酵结束。通过计量罐从四个发酵罐中放出菌液到混合罐中进行混合，混合菌液贮存于贮液罐中，从贮液罐中通入菌液到固体混合机中，使菌液与豆柏进行混合，混合比例为1:2，混合时间为5分钟；
[0036]4)将混合后的物料均匀堆积布于固体发酵间地面，高度为0.6米，上盖薄膜，四周封闭。进行厌氧发酵100?150小时；再将发酵后的物料进行30?80°C低温干燥、粉碎得到水产用发酵蛋白肽。
[0037]所述基因重组蛋白由下列方法制成:
[0038]I)在发酵罐内分别配置胰岛素样生长因子基因工程菌⑶-00