的深层发酵和发酵产物干粉提取制备方法： 1、菌种制备：菌种：酿酒酵母菌种。活细胞数> 30亿个/g，用量：按重量比的0. 1%。 酿酒酵母菌种斜面培养基：麦芽浆汁1000 mU脱脂奶粉30g、葡萄糖30g、琼脂30g、蛋白胨 30g、酵母膏10g、硫酸镁0. 2g、酸水解干酪素15g，pH自然。120°C高压灭菌15 min，室温IC 存。
[0015] 2、斜面菌种培养：将优质菌种接种在固体斜面培养基上，放于26-28Γ下培养 5-7d，菌丝体长满斜面，微带白色，菌种生长旺盛。
[0016] 3、三角瓶摇瓶培养：将斜面菌种移入盛200ml液体培养基的三角瓶中，采用摇床 转速80-100r/min，冲程7-8cm往复震荡，28-32°C振荡培养2-3d，长满白色的菌丝，制成种 子悬浮液。
[0017] 4、配制深层发酵培养基。按以下重量百分比配制液体培养基：深层发酵培养基 (按重量百分比）:青梅15%、蓝莓15%、余甘子10%、木瓜10%、低聚糖5. 0%、硫酸镁0. 2%、氯化 钠0. 2%、磷酸氢二钾0. 3%、酸水解干酪素1. 0%、山茶油0. 3%，糖化酶（10万u/ g )0. 1%。余 量：水，pH :6-7,青梅蓝莓余甘子木瓜果粒经清洗、破碎、去核、打浆，配制液体培养基。培养 基在120-125°C条件下灭菌30min，冷却后备用。
[0018] 按上述重量百分比，取青梅300kg、蓝莓300kg、余甘子200kg、木瓜200kg，果粒经 清洗、破粹、去核、打浆，低聚糖l〇〇kg、硫酸镁4kg、氯化钠4kg、磷酸氢二钾6kg、酸水解干 酪素20kg、山茶油6kg，糖化酶（10万u/g) 2kg。余量：水，pH :6-7。配制液体培养基，在 120-125°C条件下灭菌30min，冷却后备用。
[0019] 5、种子罐种子扩大培养：种子罐采用500L不锈钢罐，投料300L。将种子悬浮液 移入种子罐，进行种子扩大培养，按种量17. 5%、温度28-32Γ，光照条件：连续黑暗条件，搅 拌速度60-100r/min，无菌空气通气量为每分钟1:0. 4m3v/v，min，罐压0. 04MPa，发酵培养 56h ;pH降至4. 7,种子罐菌种培养成熟。
[0020] 6、发酵罐深层发酵培养：发酵罐采用5000L不锈钢罐，投料3000L。按种量22. 5%、 温度28-32°C，光照条件：连续黑暗条件，搅拌速度30-60r/min，无菌空气通气量为每分钟 1:0. 4m3v/v，min，罐压0. 04MPa，发酵培养72h ;pH降至3. 3,残糖量降至0. 25%，发酵结束， 形成深层发酵菌丝液。
[0021] 7、酶解：按重量百分比，加入果胶酶1. 0%，蛋白酶0. 75%，脂肪酶0. 5%，果胶酶酶活 力为3 X 105u/kg，蛋白酶酶活力为2 X 105u/kg，脂肪酶酶活力为I. 5 X 105u/kg。温度保持在 55-60°C，酶解时间 3-4h。
[0022] 8降酸：按重量百分比，加入碳酸钙1%，温度保持在20_30°C，降酸时间2_3h，pH降 至3. 0-3. 5。总酸度为2. 8-3. 0。碳酸钙细度100目。
[0023] 9、高压均质处理：经酶解处理的发酵液先经胶体磨均质，旋转磨转速800_1000r/ min。使菌丝体等物料颗粒崩解，达到均质，再经高压均质机（40MPa-60MPa)，使发酵液在高 压作用下通过200目板框过滤。
[0024] 10、超临界CO2萃取，温度33°C，压力7. 15MPa，利用超临界二氧化碳的溶解能力与 其密度的关系，在超临界状态下，将超临界二氧化碳与待分离的物质接触，使其有选择性地 把沸点高低和分子量大小不同的成分依次萃取析出有效活性物质。
[0025] 11、发酵液浓缩，采用双效浓缩器，蒸发温度55-70°C，蒸汽压力0· 25MPa，将发酵 液液体浓缩至浓度Brix=2〇-25%。
[0026] 12、采用低温喷雾干燥，温度< 70°C，获得发酵产物果蔬酵素等活性物质干粉制 品。
[0027] 实施例1 一种果蔬酵素的制备方法：采用酿酒酵母，以多种果蔬为培养基，结合深层发酵、酶解 和降酸、高压均质、超临界CO2萃取、浓缩、低温喷雾干燥，制得果蔬酵素。
[0028] 具体步骤如下： 1) 菌种制备：菌种：酿酒酵母菌种，活细胞数> 30亿个/g，用量：斜面培养基重量的 0. 1% ； 2) 斜面菌种培养：将酿酒酵母菌种接种在固体斜面培养基上，于26°C下培养5d ; 斜面培养基：麦芽浆汁1000 mU脱脂奶粉30g、葡萄糖30g、琼脂30g、蛋白胨30g、酵母 膏l〇g、硫酸镁〇. 2g、酸水解干酪素15g，pH自然；120°C高压灭菌15 min，室温贮存； 3) 三角瓶摇瓶培养：摇床转速80r/min，冲程7cm往复震荡，28 °C振荡培养2d ; 4) 配制深层发酵培养基：按重量百分数计，青梅15%、蓝莓15%、余甘子10%、木瓜10%、低 聚糖5. 0%、硫酸镁0. 2%、氯化钠0. 2%、磷酸氢二钾0. 3%、酸水解干酪素1. 0%、山茶油0. 3%、 糖化酶〇. 1%，余量为水，pH=6-7,120°C灭菌30min，冷却后备用； 其中青梅、蓝莓、余甘子和木瓜经清洗、破碎、去核、打浆； 5) 种子罐扩大培养：接种量15%、温度28°C，连续黑暗条件，搅拌速度60r/min，无菌空 气通气量为每分钟1: 〇. 4m3v/v，min，罐压0. 04MPa，发酵培养48h，pH降至4. 5-5. 0 ; 6) 发酵罐深层发酵培养：接种量20%，温度28°C，搅拌速度30r/min，无菌空气通气量为 每分钟 1: 0· 5m3v/v，min，罐压 0· 05MPa，培养 72h，pH 降至 4. 0-4. 5,残糖量降至 0· 2-0. 3% ; 7) 酶解：加入果胶酶1.0 wt. %、蛋白酶0. 75 wt. %和脂肪酶0. 5 wt. %，55°C酶解3h ; 8) 降酸：加入碳酸钙lwt. %，20°C降酸2h，pH降至3. 0-3. 5,总酸度为2. 8-3. O ; 9) 高压均质：发酵液先经胶体磨均质，再经高压均质，过200目板框过滤； 10) 超临界CO2萃取：温度33°C，压力7. 15MPa ; 11) 浓缩：将发酵液浓缩至浓度Brix=20% ; 12) 低温喷雾干燥，温度< 70 °C。
[0029] 步骤4)中糖化酶酶活力为10万u/ g。
[0030] 步骤7)中果胶酶酶活力为3X 105u/kg，蛋白酶酶活力为2X 105u/kg，脂肪酶酶活 力为 I. 5X105u/kg。
[0031] 步骤8)中碳酸钙细度为100目。
[0032] 实施例2 一种果蔬酵素的制备方法：采用酿酒酵母，以多种果蔬为培养基，结合深层发酵、酶解 和降酸、高压均质、超临界CO2萃取、浓缩、低温喷雾干燥，制得果蔬酵素。
[0033] 具体步骤如下： 1) 菌种制备：菌种：酿酒酵母菌种，活细胞数> 30亿个/g，用量：斜面培养基重量的 0. 1% ； 2) 斜面菌种培养：将酿酒酵母菌种接种在固体斜面培养基上，于28°C下培养7d ; 斜面培养基：麦芽浆汁1000 mU脱脂奶粉30g、葡萄糖30g、琼脂30g、蛋白胨30g、酵母 膏l〇g、硫酸镁〇. 2g、酸水解干酪素15g，pH自然；120°C高压灭菌15 min，室温贮存； 3) 三角瓶摇瓶培养：摇床转速100r/min，冲程8cm往复震荡，32°C振荡培养3d ; 4) 配制深层发酵培养基：按重量百分数计，青梅15%、蓝莓15%、余甘子10%、木瓜10%、低 聚糖5. 0%、硫酸镁0. 2%、氯化钠0. 2%、磷酸氢二钾0. 3%、酸水解干酪素1. 0%、山茶油0. 3%、 糖化酶〇. 1%，余量为水，pH=6-7,125°C灭菌30min，冷却后备用； 其中青梅、蓝莓、余甘子和木瓜经清洗、破碎、去核、打浆； 5) 种子罐扩大培养：接种量20%、温度32°C，连续黑暗条件，搅拌速度100r/min，无菌空 气通气量为每分钟1: 〇. 4m3v/v，min，罐压0. 04MPa，发酵培养72h，pH降至4. 5-5. 0 ; 6) 发酵罐深层发酵培养：接种量25%，温度32°C，搅拌速度6