一种抗疲劳的蛹虫草石榴酵素的制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于生物制剂技术领域，特别是设及一种抗疲劳的蛹虫草石恼酵素的制备 方法。
【背景技术】
[0002] 酵素又称为"酶"，是具有生物催化功能的高分子物质。几乎所有的细胞活动进程 都需要酵素的参与。现代社会，随着人们生活节奏的加快和环境污染的加剧，人们体内酵素 的含量日益减少，进而降低了人体免疫力和代谢速率，使人们患病的几率大增。目前，日常 食品中的酵素含量太低，无法满足人们的正常需要。为了符合现代人对营养需要的多样性、 平衡性和易于吸收性，高效的酵素产品的生产迫在眉睫。
【发明内容】
[0003] 本发明为了克服现有技术存在的缺陷，本发明的目的是提供一种抗疲劳的蛹虫草 石恼酵素的制备方法。
[0004] 本发明所采用的技术解决方案是一种抗疲劳的蛹虫草石恼酵素的制备方法，所需 步骤如下： 步骤1:制备酵母菌种液： 种液罐扩大培养基:YTO液体培养基，其质量百分数为1%酵母提取物，2%蛋白腺，2%葡萄 糖，2%琼脂，其余为水，将Yro液体培养基放入0.5M3种子罐内，115°C的30-50分钟高溫灭菌； 无菌操作条件下将1.5公斤酵母菌干菌粉溶于3倍的无菌水中，形成菌液，将所述的菌液装 入血清瓶并接种到0.5M 3种子罐，在28-30°C下通入无菌压缩空气，通气量为0.2-0.3立方 米/分钟，培养20-30 h，待菌体生长至对数期末期时停止培养，重复上述步骤可制得所需质 量的酵母菌液的种液； 步骤2:制备乳酸菌种液： 种液罐扩大培养基:麦芽复合汁增菌培养基，其质量百分数为10%麦芽汁，0.5%大豆蛋 白腺，0.5%酵母膏，1%牛肉膏，0.2% K2HPO4,其余为水，将麦芽复合汁增菌培养基放入0.5M3 种子罐内，115°C的30-50分钟高溫灭菌;无菌操作条件下将1.5公斤乳酸菌的干菌粉溶于3 倍的无菌水中，菌液装入血清瓶并接种到0.5M 3种子罐，37°C恒溫静置培养24-36 h，待菌体 生长至对数期末期时停止培养，可重复上述步骤可制得所需乳酸菌的种液； 步骤3:培养发酵液： 先将质量比为132:28:21:18:1:1000的石恼:番茄:哈密瓜:桃:葡萄:水混合打碎过滤 取滤液，用所述滤液制成培养基，在115°C下高溫灭菌30-50分钟，将所述培养基加入发酵罐 中，然后按质量为所述滤液的5%-10%的接种量接种步骤1制得的酵母菌的种液，在28°C的溫 度下培养4她，所述的发酵罐的体积为V立方米，通气量为(0.4-0.6)V立方米/分钟，揽拌转 速100-120 rpm/min;然后按质量为所述滤液的5%-10%的接种量接种步骤2制得的乳酸菌种 液，在37°C的溫度下继续培养5-7d(静置培养，无揽拌，让罐保持正压W防染菌）至发酵结 束，得到发酵液； 步骤4:将发酵液离屯、处理获得酵素原液： 将步骤3得到的发酵液导入离屯、机，经6000 rpm离屯、lOmin，所得上清液即为酵素原液； 步骤5: 将质量比为:蛹虫草提取物:酵素原液=28:1000的蛹虫草提取物和步骤4得到的酵素原 液混合，在115°C环境下维持30-50分钟，进行高溫灭菌，然后进行分装。
[0005] 所述的步骤2中的乳酸菌为0.2公斤双歧杆菌，O . 8公斤地衣芽抱杆菌，0.5公斤嗜 热链球菌。
[0006] 与现有技术相比，本发明所具有的有益效果为： 蛹虫草具有和冬虫夏草相似的活性成分和药理作用，被称为可人工培养的"冬虫夏 草"。2009年，蛹虫草被批准为新资源食品，且其价格远低于冬虫夏草，因而越来越受到广大 消费者的青睐。中医认为，蛹虫草入肺肾二经，既补肺阴，又补肾阳，功能主治为补肺益肾， 止咳化疲。现代医学研究其具有细胞免疫和体液免疫调节作用，还具有抗疲劳作用。因此， 若能开发W蛹虫草为主要原料的产品，不仅能推动蛹虫草产业的进一步发展，更能为广大 人民群众的健康带来福祉。尽管市场上已有蛹虫草相关的产品，但市场规模小，附加值低， 功效不明确，亟需开发高效的、高附加值的蛹虫草系列产品。
[0007] 本发明结合酵素和蛹虫草的各自特点，将两者进行混合发酵或复配，再配W其它 活性成分，创新性地开发出蛹虫草酵素产品。该发明集合酵素和蛹虫草的功效于一身，具有 抗疲劳的功效。
[0008] 蛹虫草酵素受试物能明显对抗疲劳，增强肌肉耐力，抵抗运动性疲劳，对抗疲劳， 增强精力、体力，改善贫血症状。使肤色看起来更年轻，精气神更足。
【具体实施方式】
[0009] 实施例1: 步骤1:制备酵母菌种液： 种液罐扩大培养基:YTO液体培养基，其质量百分数为1%酵母提取物，2%蛋白腺，2%葡萄 糖，2%琼脂，其余为水，将YTO液体培养基放入0.5M3种子罐内，115°C的30分钟高溫灭菌;无 菌操作条件下将1.5公斤酵母菌干菌粉溶于3倍的无菌水中，形成菌液，将所述的菌液装入 血清瓶并接种到0.5M 3种子罐，在28°C下通入无菌压缩空气，通气量为0.2立方米/分钟，培 养20 h，待菌体生长至对数期末期时停止培养，重复上述步骤可制得所需质量的酵母菌液 的种液； 步骤2:制备乳酸菌种液： 种液罐扩大培养基:麦芽复合汁增菌培养基，其质量百分数为10%麦芽汁，0.5%大豆蛋 白腺，0.5%酵母膏，1%牛肉膏，0.2% K2HPO4,其余为水，将麦芽复合汁增菌培养基放入0.5M3 种子罐内，115°C的30分钟高溫灭菌;无菌操作条件下将1.5公斤乳酸菌的干菌粉溶于3倍的 无菌水中，菌液装入血清瓶并接种到0.5M 3种子罐，37°C恒溫静置培养24 h，待菌体生长至 对数期末期时停止培养，可重复上述步骤可制得所需乳酸菌的种液;所述的步骤2中的乳酸 菌为0.2公斤双歧杆菌，0.8公斤地衣芽抱杆菌，0.5公斤嗜热链球菌。
[0010] 步骤3:培养发酵液： 先将质量比为132:28:21:18:1:1000的石恼:番茄:哈密瓜:桃:葡萄:水混合打碎过滤 取滤液，用所述滤液制成培养基，在115°C下高溫灭菌30分钟，将所述培养基加入发酵罐中， 然后按质量为所述滤液的5%的接种量接种步骤1制得的酵母菌的种液，在28°C的溫度下培 养4她，所述的发酵罐的体积为V立方米，通气量为0.4V立方米/分钟，揽拌转速100 rpm/ min;然后按质量为所述滤液的5%的接种量接种步骤2制得的乳酸菌种液，在37°C的溫度下 继续培养5d(静置培养，无揽拌，让罐保持正压W防染菌)至发酵结束，得到发酵液； 步骤4:将发酵液离屯、处理获得酵素原液： 将步骤3得到的发酵液导入离屯、机，经6000 rpm离屯、lOmin，所得上清液即为酵素原液； 步骤5: 将质量比为:蛹虫草提取物:酵素原液=28:1000的蛹虫草提取物和步骤4得到的酵素原 液混合，在115°C环