r>实施例2小鼠护肝实验模型建立 试验材料 河蝴复合物,高、中、低S个浓度(1 Omg/mL、5mg/mL、Img/mL); 市售解酒护肝药,W牡颇粉为主要成分; 北京红星二锅头,酒精度60%( v/v); 小鼠(实验室清洁级.ICR),体重22~25g,雄性; 试剂与设备:乙醇脱氨酶(Sigma: 9031-72-5)、NA护辅酶(Sigma: 53-84-9)、谷草转氨酶 (AST)试剂盒(南京建成COlO-I )、谷丙转氨酶(ALT)试剂盒(南京建成C009-1)、谷脫甘肤过 氧化物酶(GSH-PX)试剂盒(南京建成A005)、高速冷冻离屯、机,紫外-可见分光光度计、水浴 锅、动物天平、分析天平。
[0033] 生理盐水 (2) 小鼠醒酒护肝模型建立 取雄性健康小鼠60只,分组:空白组、白酒组、阳性对照组、高浓度组、中浓度组、低浓度 组,除空白组每天喂动物饲料及正常饮水,不灌胃白酒和药物外,其他各组均相应给酒给 药,连续灌胃30天,每组给酒给药情况如表3所示,先给小鼠进行灌药,30min后按0.15mL/ IOg体重灌胃白酒,化后眼球取血用于测定血醇含量,化后取血取肝测定酶活指标,实验前 I化禁食不禁水。
各组小鼠给药后30min按体重灌胃白酒,给酒后化眼眶取血测定血醇含量变化,6h后取 血取肝测定酶活指标。酶活力定义:指酶催化一定化学反应的能力。单位:在特定条件下,1 分钟内转化1微摩尔底物所需的酶量为一个活力单位(U)。溫度规定为25°C,其他条件为反 应最适条件。
[0035] 实验结果如表4所示
注:所有表中数据均W均值±标准方差表示,数据处理采用SAS统计软件进行方差分 析,根据数据结果判定不同醒酒药间的效果。卡口氏单位定义:ImL血清,反应液总容量3mL, 波长340加1,Icm光径,25°C,Imin内所生成的丙酬酸,使NADH氧化成NAD+而引起吸光度每下 降0.001为一个单位(1卡口氏单位=0.482IU/L,25°C)。组织中GSH-PX活力定义:规定为每毫 克蛋白质,每分钟扣除非酶反应的作用,使反应体系中G甜浓度降低1皿ol/L为一个酶活力 单位。
[0036] (3)结果讨论 通过表2数据可W看出,与白酒组比较,其他给药四组的醉酒时间均延长,且醒酒时间 均有缩短,且实验组组,高、中、低=个浓度之间也有明显的数据差异,高浓度组显示出的数 据最优;白酒组的醉酒时间为18.22±7.4min,醒酒时间为307.5± 27.9min;阳性对照组的 醉酒时间为34.6 ± 14.59min,醒酒时间为235.1 ± 44.6min;高浓度组的醉酒时间为37.8 ± 11.22min,醒酒时间为235.7±49111111。通过表4数据可^看出,与空白组(15.33±3.23111邑/ mL)相比,其他各组血醇浓度均明显升高,因为空白组没有灌胃酒精,其他各组均灌胃白酒; 与白酒组(60.81 ±0.91mg/mL)比较,给药各组中的血醇浓度均有所降低,且河蝴复合物高 浓度组(42.68 ± 7.93mg/mL)与阳性对照组(45.97 ±9.83mg/mL)之间差异不大;此两组数据 表明河蝴复合物有醒酒效果。
[0037] 当肝脏受损时,肝脏中的谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)含量会急剧升高, 并释放到血液中,从而使血清中的运两种酶活性升高,而谷脫甘肤过氧化物酶的活性降会 降低。通过表4数据可W看出,与空白组相比,其余五组小鼠血清中AST、ALT的卡口活力值均 高,肝脏中GSH-ra值均降低,表明阳性对照组和河蝴复合物均有保护肝脏的作用。
[0038] 实施例3复合产品对人体的防醉醒酒效果观察 试验人员:20、30、40、50左右不同年龄段的人员各2名,不分性别,身体健康,无酒精过 敏者,符合试验人员要求。
[0039] 试验材料:本发明的河蝴复合产品、60°北京二锅头白酒; 本实验采用单因素对比法,分两次实验完成,每周一次,记录每次实验时喝酒人的肤色 变化,感觉到有醉酒状态的酒量、时间、感觉体验等变化,W及对产品的口感评价。
[0040] 第一周时让此8人同时喝白酒,记录各自能够感觉到有些酒精上头时的喝酒量及 所用时间,共八组数据,同时观察记录每个人面色变化W及头脑清醒时所用时间,且是否有 出现恶屯、、呕吐或者睡觉等现象的人。
[0041] 实验结果表明,此8人中有2人出现呕吐现象,4人面色潮红,感觉酒精上头时的平 均喝酒量为IOOmL,平均所用时间为20min,头脑完全清醒时的平均时间为60min。
[0042] -周后的同样时间,让运8人再次同时喝白酒,30min后服用河蝴复合产品50mL,按 照上一次的方法记录相同的实验指标。
[0043] 实验结果表明,此8人中无人出现呕吐现象,仅有1人面色出现潮红,感觉酒精上头 时的平均喝酒量为130mL,平均所用时间为30min,头脑完全清醒时的平均时间为35min。且 对于该产品的口感评价而言,有1人不喜欢有生姜的味道,有1人感觉甜度不够,其他人都表 示此种口感是可W接受的。
[0044] 两次的实验结果对比发现,此复合产品在人试验上也是有较好的醒酒效果。
【主权项】
1. 一种河蚬提取物复合的醒酒护肝功能产品,其特征在于:其原料包括:河蚬提取物 (河蚬汤汁浓缩液或河蚬酶解液或两者的混合液,但不局限于这两种制备形式的河蚬提取 液),糖姜汁提取液,牛磺酸复合液,调味液。2. 根据权利要求1所述的河蚬提取物复合的醒酒护肝功能产品,所述河蚬提取物800~ 2000份,所述糖姜汁提取液500~1000份,所述牛磺酸复合液5~30份,所述调味液10~50份。3. 根据权利要求1或2所述的河蚬提取物复合的醒酒护肝功能产品,所述牛磺酸复合 液是由牛磺酸和L-丙氨酸组合液复合而成,所述牛磺酸和L-丙氨酸组合液的比例为1:0.25 ~1:0 · 5〇4. 一种如权利要求1~3任一项所述的河蚬提取物复合的醒酒护肝功能产品的制备方 法,其特征在于河蚬汤汁浓缩液与河蚬蛋白酶解液的混合液经过滤除杂后低温冷冻干燥制 成冻干粉即河蚬提取物,将所用原料按比例称量,混合溶解后再次调味,过滤分装。5. 根据权利要求4所述的河蚬提取物复合的醒酒护肝功能产品的制备方法,所述河蚬 提取物是河蚬汤汁浓缩液与酶解液混合(河蚬肉先经碱性蛋白酶酶解,再经风味蛋白酶和 木瓜蛋白酶双酶酶解),经离心或过滤除杂后冷冻干燥成冻干粉。6. 根据权利要求5所述的河蚬提取物复合的醒酒护肝功能产品的制备方法,其特征在 于河蚬提取物的制备步骤如下:51. 新鲜河蚬经流水反复清洗后静养吐沙,通过传输带运输至高温管道内经100°C水 蒸汽使蚬壳打开,获得新鲜肉质并收集水蒸汽预冷后的冷凝液,旋转蒸发浓缩,使之于 280nm处吸光度值为10~20的浓缩液;52. 去壳后的蚬肉用绞碎机绞碎后,调节pH值,加入碱性蛋白酶调节温度、功率和时间 用微波助提;53. 再次调节pH值后加入风味蛋白酶和木瓜蛋白酶的复合酶,在最适温度下酶解,同 时用超声波辅助继续酶解,得到混合酶解液,然后使酶失活;54. 离心或纱布过滤得酶解液滤液,与S1中的浓缩液以1:3(v/v)比例混合均匀后冷冻 干燥制得冻干粉保存备用。7. 根据权利要求5~6所述的河蚬提取物复合的醒酒护肝功能产品的制备方法,其特征 在于所述碱性蛋白酶酶解条件为:最适pH9.0~11.0,最适温度为40~60°C,底物浓度为5%~ 15%,酶量为1000~2000U/g,酶解时间为10~30min;所述复合蛋白酶酶解条件为:木瓜蛋白 酶:风味蛋白酶=1:1~1:2,最适pH值为5.5~7.0,最适温度为50~70°C,加酶量为1000~2000U/ g,酶解时间为20~40min;所述微波助提条件为:微波功率500~800W,温度40~60°C;所述超声 波助提条件为:超声波功率50~500W,温度50~70°C,超声波频率25KHz,超声时间为5~ 10min〇8. 根据权利要求4或5所述的河蚬提取物复合的醒酒护肝功能产品的制备方法,其特征 在于: 所述糖姜汁提取液的制备过程如下: 生姜切碎后与绵白糖按1:1~1:5比例放入5~10倍体积水中,慢火熬制1~3h,得到生姜汁 提取液后再旋转蒸发浓缩,得到2/5倍体积的浓缩型糖姜汁提取液; 所述调味液中所含蜂蜜为纯洋槐蜂蜜,蜂蜜是用来调节甜度和掩盖蚬汁特有的腥味, 其加入量为10~50份;所述低温冷冻干燥时的温度为-60°C;所述离心酶解液时的离心条件 为转速12000r/min,时间10~20min;所述的旋转蒸发时所用的压力为-Ο. IPa。9.根据权利要求4~5所述的河蚬提取物复合的醒酒护肝功能产品的制备方法,其特征 在于该醒酒护肝产品的制备步骤如下: 51001. 用电子分析天平精密称取河蚬提取物冻干粉,溶解于糖姜汁溶液中; 51002. 按比例精确量取牛磺酸复合液,加到S1001所得的混合液中并搅拌均匀; 51003. 向S1002所得混合液中加入调味液调节口感,使具有大众人群易于接受的风 味。
【专利摘要】本发明公开了一种河蚬提取物复合的醒酒护肝功能产品及其制备方法,该产品是以河蚬提取物、牛磺酸复合液、蜂蜜等制成的功能性产品。产品组分如下:河蚬提取物800~2000份,糖姜汁提取液500~1000份,牛磺酸复合液5~30份,调味液10~50份。制备工艺流程为:河蚬汤汁浓缩液与河蚬蛋白酶解液混合经过滤除杂,低温冷冻干燥成冻干粉,即河蚬提取物;生姜与绵白糖一起熬制成浓姜汁;将所用原料调配混合溶解,过滤分装。本发明目的在于确立一种具有醒酒护肝功能的河蚬提取物复合产品及其加工方法。该发明的河蚬复合产品不仅具有理想的防醉醒酒护肝功效,且制备简便经济,还具有让人容易接受的口感,适合长期服用。
【IPC分类】A23L33/00
【公开号】CN105533708
【申请号】CN201511001923
【发明人】李相前, 徐亚茹, 谭中标
【申请人】淮阴工学院
【公开日】2016年5月4日
【申请日】2015年12月29日