一种小肽营养制剂及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于食品加工领域，主要涉及一种营养制剂，尤其涉及一种小肽营养制剂 及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 由于动物体内存在大量的蛋白酶，过去人们一直认为，动植物蛋白质降解成小肽 后，再降解为游离氨基酸才能被人体吸收利用，所以人们一直把氨基酸作为研究、制作、追 求、服食的主要营养。直到20世纪60年代开始，科学家才逐步提出令人信服的证据，证明小 肽也可以被完整吸收和利用。小肽和氨基酸的混合物在人体的吸收率和吸收速度都比单纯 氨基酸更佳，不仅如此，小肽还能在肠道内保护易被破坏的氨基酸。此外，单纯的氨基酸在 体内根据需要会重新组成肽和蛋白质，而小肽和氨基酸的混合物可省去一部分重新组合的 过程，因此，其生物效价更高。
[0003] 此后，进一步地，人们对动物体内的运转机制进行了大量研究，表明动物体内可以 存在多种小肽的转运体系。目前的研究认为，二、三肽能被完整地吸收，大于二、三肽的小肽 能否被完整吸收尚有疑问，但近来的研究发现4~6寡肽都能被动物直接吸收。
[0004] 虽然现在对于小肽的生理运转机制和功能还不能够全面了解，然而以下功效是非 常明确的，即小肽除了能够为动物提供氨基酸外，还具有多样性的生理活性：
[0005] 1、血液循环中的小肽能直接参与组织蛋白质的合成，此外肝脏、肾脏、皮肤和其它 组织也能完整地利用小肽，其中，肾脏是消化吸收肽和再吸收氨基酸的主要场所；
[0006] 2、促进矿物质的吸收利用，主要以络合物形式与矿物质结合，增加矿物质吸收；
[0007] 3、避免氨基酸间的吸收竞争；
[0008] 4、具有生理调节作用，通过诱导小肠中一些酶活性的提高，使小肠消化功能发育 提前，促进健康和提高其生产性能，促进营养物质的消化吸收。
[0009] 介于以上所述小肽的生物活性优点，小肽营养已成为蛋白质营养研究的热点之 一，人们把获取营养的关注从摄入氨基酸开始转向摄入小肽蛋白。小肽营养食品的出现除 了对普通健康人群适用外，对于消化吸收功能不良、但又急需补充营养的胃肠系统病人、手 术康复病患人群、体弱老人群体、大运动量或重体力劳动后体力恢复者来说，更是深受欢迎 的一种营养补充剂。
[0010] 目前来看，一方面，虽然市场亦开始出现肽蛋白营养补充剂，如"蛋白肽口服液"、 "多肽蛋白粉"、"肽藻营养粉"等，但是这些市售的肽蛋白营养剂大多不能明确保证肽蛋白 的含量，其中肽含量与一般蛋白粉质量并无太大差别，例如"蛋白肽口服液"中的多肽和氨 基酸含量只有lg/l〇〇ml，而更多的产品并没有肽蛋白含量的标注;另一方面，目前生产蛋白 肽的主要原料为大豆、玉米等植物，通过采用水解或酶解提取的方法制备，也有通过纯物理 方法提取植物蛋白的技术，其中，酶法已经得到广泛的应用，但是蛋白质在酶解后经常会产 生苦味，产生的苦味物质通常是一些特殊的寡肽，称为苦味肽，这使得酶解法在食品工业上 的应用受到了严重的限制。
[0011] 因此，寻求一种可靠的有效蛋白肽的生产工艺方法，主要以提高蛋白肽的生产质 量，扩大蛋白肽的生产原材料来源范围，就成为蛋白肽生产的一项本领域技术人员极其重 视并亟待解决的技术问题。
【发明内容】
[0012] 本发明的目的是提高蛋白肽的生产质量，扩大蛋白肽的生产原材料来源范围，为 蛋白小肽的生产提供一种便于实施、扩大生产的生物发酵制作工艺。
[0013] 基于上述目的，本发明提供了一种小肽营养制剂及其制备方法，其中，所述营养制 剂的有效蛋白肽的含量远远大于现有技术，尤其是小肽的含量可以保证在70%以上，而且 由于制备过程中不会有苦味肽的产生，因此，口感适宜、没有腥味和苦味，大大提高了所述 营养制剂的质量。进一步地，对应的营养制剂的制备方法，是本申请发明的创新之处，其中， 选择了鲜鱼肉作为原料，采用微生物驯合培养技术进行培养，使得整个发酵过程易于控制， 发酵转化率高，生物活性成分含量高且多样。
[0014] 本发明的技术方案包括一种小肽营养制剂的制备方法，其特征在于，包括：
[0015] 步骤1:将鲜鱼肉清洗干净，并绞碎至鱼肉酱；
[0016] 步骤2:将由米曲霉、蜡状芽孢杆菌、长双岐杆菌、克鲁维酵母组成的多菌种在驯合 培养基中进行驯合培养，获得驯培发酵菌剂；
[0017] 步骤3:将所述驯培发酵菌剂加入到所述鱼肉酱中进行发酵培养，得到发酵鱼肉 酱；
[0018] 步骤4:将所述发酵鱼肉酱进行干燥、灭菌，得到所述小肽营养制剂。
[0019] 在本发明的一个实施例中，所述多菌种的重量配比为： '长曲霉 25-40重量份： 蜡状芽孢杆菌 25-40重量份；
[0020] 长双岐杆菌 20-30重量份： 克鲁维酵母 20-35重量份。
[0021 ] 进一步地，所述多菌种具体为米曲霉(Aspergillus oryzae，ACCC30155)、錯状芽 抱杆菌（Bacillus cereus，ACCC10603)、长双岐杆菌（Bifidobacterium longum， ACCC03961)、克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis，ACCC21191) 〇
[0022]更优选地，所述多菌种在制备前，需要对各个单独菌种进行菌种扩培，其中，在一 个实施例中，所述菌种扩培具体包括：
[0023] (1)从中国农业微生物菌种保藏管理中心购买菌种：米曲霉（Aspergillus oryzae，ACCC30155)、錯状芽抱杆菌（Bacillus cereus，ACCC10603)、长双岐杆菌 (Bifidobacterium longum，ACCC03961)、克鲁维酵母（Kluyveromyces lactis， ACCC21191)；
[0024] (2)将米曲霉转接入装有Czapeks液体培养基（蔗糖30g、NaN033g、K2HP〇4lg、KCl 0 · 5g、MgS〇4〇 · 5g、FeS〇4〇· 01g、水 1000ml)的锥形瓶中，在25-35°C条件下培养25-40小时，待 培养基浑浊后取出，放入2-4°C冰箱保存待用；
[0025] (3)将蜡状芽孢杆菌转接入装有液体营养肉汁培养基的锥形瓶中，在20-48Γ条件 下培养20-35小时，待培养基浑浊后取出，然后放入2-4°C冰箱保存待用；
[0026] (4)将长双岐杆菌转接入BBL液体培养基（蛋白胨15.0g、酵母粉2.0g、葡萄糖 20.08、可溶性淀粉0.58、氯化钠5.08丄-半胱氨酸0.5 8、番茄浸粉5.08、肝浸粉2.08、吐温80 溶液1.01111、蒸馏水1000.01111、？!17.0)中，在35-40°(：、厌氧条件下180-220印111振荡培养60-80 小时，待培养基浑浊后取出，然后放入2-4°C冰箱保存待用；
[0027] (5)将克鲁维酵母转接入马铃薯液体培养基的锥形瓶中，在28-32Γ条件下180-220rpm振荡培养48-72小时，待培养基浑浊后取出，然后放入2-4°C冰箱保存待用。
[0028]可以理解的是，根据原料的不同或其它原料的添加，可以在所述多菌种的基础上， 额外添加其它本领域技术人员认为可行的菌种，以实现发酵培养的目的。
[0029]进一步地，在一个实施例中，所述驯合培养基的组分及其重量配比为:太古黄糖2-5重量份、酵母粉0.5-1.0重量份、硫酸镁2-10重量份、磷酸二氢钾0.5-5重量份、氯化钠0.5-5重量份、硫酸铁0.01-0.05重量份、纯净水85-98重量份，进一步地，使用14wt. %的氨水调 节pH在7.0-7.5。
[0030]当然，在此基础上，其它本领域技术人员认为必要的培养基组分，也可以通过合理 选择进行适时地添加，以保证驯化培养的顺利进行。例如，可以进一步添加蔗糖、葡萄糖、麦 芽糖、三氯蔗糖、低聚糖、蜂蜜中的任意一种或几种。
[0031] 在驯化培养过程中，所述多菌种按1:80-120的重量配比添加到所述驯合培养基中 进行驯合培养。具体地，所述驯化培养的条件为：先在24-32Γ条件下半密闭培养0.5-2.0 天，然后在28-35°C条件下密闭培养5-15天，ρΗ=5·0-6·5。
[0032] 在本发明中，所述驯化培养技术，可以形成协同繁殖生长、共同作用的微生物环 境，由此用于鱼肉酱的发酵培养中，可以实现蛋白的高效率地转化，提高各个微生物的整体 利用率。
[0033] 在本发明的一个优选实施例中，所述驯合培养具体包括：
[0034] (1)将扩培得到的菌种按以下重量配比进行配取:米曲霉25-40重量份、蜡状芽孢 杆菌25-40重量份、长双岐杆菌20-30重量份、克鲁维酵母20-35重量份，得到所述多菌种； [0035] (2)将所述多菌种按1:80-120重量配比添加到驯合培养基(太古黄糖2-5重量份、 酵母粉〇. 5-1.0重量份、硫酸镁2-10重量份、磷酸二氢钾0.5-5重量份、氯化钠0.5-5重量份、 硫酸铁0.01-0.05重量份、纯净水85-98重量份，使用14wt. %的氨水调节pH在7.0-7.5左右） 中，放入发酵罐，培养温度24-32°C，半密闭培养0.5-2.0天，然后在28-35°(：，密闭培养5-15 天，pH=5.0-6.5,得到驯培发酵菌剂，其呈淡黄至淡褐色，放入2-4°C冰箱保存待用。
[0036] 其中，关于原料，所述鲜鱼肉是指任何新鲜的河鱼或海鱼的肉，包括活鱼、刚死可 食用的鱼、冰冻鱼的可食部分鱼肉；是通过将鱼去除鱼头、内脏、脊骨和鱼鳍得到的。优选 地，经过腌制、风干、烘干等加工的鱼制品是本发明所排斥的。
[0037] 在本发明的一个实施例中，将市售的新鲜河鱼或海鱼，去除鱼头、内脏、脊骨和鱼 鳍，清洗干净，切成块状，用绞肉机将其制成所述鱼肉酱。