一种用于修复应激性肠道粘膜损伤的生物制剂及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种保健食品领域，具体涉及一种生物制剂，尤其涉及一种用于修复 应激性肠道粘膜损伤的生物制剂及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 肠道，不仅是人体内营养物质消化和吸收的主要场所，而且是多脏器功能障碍综 合征、全身炎症反应综合征中最易受损的靶器官。正常人体的肠道粘膜屏障由机械屏障、生 物膜屏障以及免疫屏障组成。完善的肠道粘膜防御体系可以有效阻止肠道内的有害物质进 入体循环。
[0003]目前来看，当人体在应激状态下，其肠道会产生大量的自由基，从而会导致肠道粘 膜损伤。进一步地，在大量使用抗生素、出血、休克、持续全胃肠外营养、创伤、严重烧伤、急 性重症胰腺炎、肝硬化、放化疗等情况下也均有可能出现肠粘膜屏障损伤的临床表现。
[0004] 在现有技术中，关于修复肠道粘膜损伤的研究及技术方案也有很多，其中， CN103349153A公开了一种具有动物肠道修复功能的菌体复合物及其生产方法； CN100502940公开了一种肠粘膜损伤修复剂及其制备方法。事实上，益生菌可以改变肠道健 康是本领域技术人员已知的，其中，具体包括改善肠道中菌群比例并转化某些肠内物质、拮 抗结合位点从而阻止致病菌定植、调节抗炎与生炎因子之间的平衡进而促进肠道损伤上皮 的修复以及增强上皮紧密连接、加强肠道粘膜屏障保护作用从而阻止细菌移位等。以上现 有技术及相关研究成果都是采用益生菌群来对一般性的胃肠道损伤进行保护或修复，而针 对氧化应激所造成的肠道损伤，尤其对于大量自由基的产生所造成的肠道粘膜损伤，目前 来看尚没有很好的修复方法。
【发明内容】
[0005] 基于上述【背景技术】，本发明提供了一种用于修复应激性肠道粘膜损伤的生物制剂 及其制备方法，通过微生物复合发酵技术对植物的有效成分进行转化，使制备得到的所述 生物制剂具有更易吸收和利用、治疗效果显著等特点，尤其能够清除自由基，调节肠道菌群 平衡，促进修复应激性肠道粘膜损伤，是一种用于对应激性肠道粘膜损伤进行生态修复的 天然生物制剂。
[0006] 本发明的技术方案包括一种用于修复应激性肠道粘膜损伤的生物制剂的制备方 法，其特征在于，包括：
[0007] 步骤1:按照酿酒酵母20-35份、嗜酸乳杆菌25-40份、植物乳杆菌20-35份的重量配 比混合得到混合菌，将其添加到红糖水培养基中，于28-32Γ条件下密闭培养至pH小于 3.60-4.00，然后继续培养20-30天，得到复合菌；
[0008] 步骤2:按照葛根10-25份、沙棘15-25份、葡萄籽20-30份、红糖1-3份、水40-60份的 重量配比混合得到复合培养基；
[0009] 步骤3:将所述复合菌添加到所述复合培养基中，于28-32Γ条件下密闭培养30-45 天，得到复合发酵物；
[0010] 步骤4:对所述复合发酵物进行浸泡、淋洗、浓缩、灭菌、成型，得到所述生物制剂。
[0011] 在本发明的一个实施例中，其中：
[0012] 所述酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)为保藏编号为ACCC20065的菌种；
[0013] 所述嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)为保藏编号为ACCC10637的菌种；
[0014] 所述植物乳杆菌(Lactobaci 1 lus plantarum)为保藏编号为ACCC11118的菌种。
[0015] 在本发明的一个优选实施例中，所述制备方法还包括菌种的培养，具体为：
[0016] 将酿酒酵母菌种接入马铃薯液体培养基中进行振荡培养，其中，培养温度为28-32 °C，振荡培养的转数为180-220rpm，振荡时间为48-72小时，待培养基浑浊后取出，放入2-4 °(：冰箱保存待用；
[0017] 将嗜酸乳杆菌菌种、植物乳杆菌菌种分别接入MRS液体培养基中进行静置培养，其 中，培养温度为35-39°C，培养时间为48-72小时，待培养基浑浊后取出，放入2-4°C冰箱保存 待用。
[0018] 在一个实施例中，关于步骤1，优选地，所述混合菌按照1:80-120的重量配比添加 到红糖水培养基中，其中，所述红糖水培养基的组分及其重量配比为红糖5-10份、水90-98 份。
[0019] 在另一个实施例中，关于步骤2,优选地，所述葛根、沙棘、葡萄籽通过粉碎机粉碎， 得到30-50目颗粒。
[0020] 在一个实施例中，优选地，关于步骤3,所述复合菌按照1:15-20的重量配比添加到 所述复合培养基中。
[0021 ]在又一个实施例中，优选地，关于步骤4，其中：
[0022]将所述复合发酵物中添加水至固液重量配比为1:1，浸泡1-2天；
[0023]然后淋洗，并将淋洗液在40-50°C条件下浓缩至20-30%，得到浓缩液；
[0024] 进一步地，在60_70°C条件下灭菌10-30分钟，得到浓缩灭菌液；
[0025] 所述成型是进一步的加工过程，其中，所述生物制剂可以是固态制剂，也可以是液 态制剂，如口服液；
[0026] 其中，关于固态制剂的进一步地加工步骤为:按照浓缩灭菌液15-30份、赤藓糖醇 15-30份、乳糖30-60份、保护剂3-5份的重量配比进行称取，先将所述赤藓糖醇和乳糖依次 加入喷雾干燥一步制粒机中，然后开始喷入所述浓缩灭菌液，流量为10_20ml/min，最后喷 入溶解于水中的保护剂，其中，所述制粒机的进风温度为60-80°C，出风温度为40-60°C，待 喷雾器内温度降到25-35Γ时出料，得到所述固态制剂；
[0027]其中，所述口服液的进一步地加工步骤为:按照浓缩灭菌液45-50份、赤藓糖醇45-50份、保护剂5-10份的重量配比进行称取，先将所述赤藓糖醇和保护剂中加入适量热水搅 拌溶解，待冷却至25-35 °C后，加入所述浓缩灭菌液，搅拌至澄清，得到所述口服液。
[0028] 本发明的技术方案还包括一种上述所述制备方法制备得到的所述生物制剂，用于 修复应激性肠道粘膜损伤。
[0029] 本申请发明人发现，抗氧化剂可调控氧化应激动物的自由基代谢，而且通过上述 技术方案得到的所述生物制剂中所含有的有效成分可以有效地发挥其作用，尤其对于修复 应激性肠道粘膜损伤，尤其适用。
[0030] 本发明采用国家卫计委公告的《可用于食品的菌种名单》中的菌种，采用常用的植 物和果实为原料，进行复合发酵制备得到一种天然生物制剂。本发明综合了现有保健品中 的第一类和第二类的有效成分，产品中富含大量抗氧化能力的活性成分，例如：黄酮类 (4.43%)、皂甙类（82.411^/10(^)、氨基酸（4.21%)、谷胱甘肽（88611^/10(^)、维生素〇 (322mg/100g)、维生素 E(908μg/100g)、S0D(194000U/100g)，乳酸盐(5·04%)以及多种微量 元素(铁:503mg/kg;硒:0 · 18mg/kg等)等。
[0031] 本发明的技术方案具有促进应激性肠道粘膜损伤修复的功能，通过微生物复合发 酵技术对植物的有效成分进行转化，使其具有更易吸收利用，效果显著等特点，是一种能够 对应激性肠道粘膜损伤进行生态修复的天然生物制剂。
【具体实施方式】
[0032] 本发明提供了一种用于修复应激性肠道粘膜损伤的生物制剂的制备方法，其特征 在于，包括：
[0033] 步骤1:按照酿酒酵母20-35份、嗜酸乳杆菌25-40份、植物乳杆菌20-35份的重量配 比混合得到混合菌，将其添加到红糖水培养基中，于28-32Γ条件下密闭培养至pH小于 3.60-4.00，然后继续培养20-30天，得到复合菌；
[0034] 步骤2:按照葛根10-25份、沙棘15-25份、葡萄籽20-30份、红糖1-3份、水40-60份的 重量配比混合得到复合培养基；
[0035]步骤3:将所述复合菌添加到所述复合培养基中，于28-32Γ条件下密闭培养30-45 天，得到复合发酵物；
[0036]步骤4:对所述复合发酵物进行浸泡、淋洗、浓缩、灭菌、成型，得到所述生物制剂。 [0037]在本发明的一个实施例中，其中：
[0038] 所述酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)为保藏编号为ACCC20065的菌种；
[0039] 所述嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)为保藏编号为ACCC10637的菌种； [0040] 所述植物乳杆菌(Lactobaci 1 lus plantarum)为保藏编号为ACCC11118的菌种。
[0041] 在本发明的一个优选实施例中，所述制备方法还包括菌种的培养，具体为：
[0042] 将酿酒酵母菌种接入马铃薯液体培养基中进行振荡培养，其中，培养温度为28-32 °C，振荡培养的转数为180-220rpm，振荡时间为48-72小时，待培养基浑浊后取出，放入2-4 °(：冰箱保存待用；
[0043] 将嗜酸乳杆菌菌种、植物乳杆菌菌种分别接入MRS液体培养基中进行静置培养，其 中，培养温度为35-39°C，培养时间为48-72小时，待培养基浑浊后取出，放入2-4°C冰箱保存 待用。
[0044]在一个实施例中，关于步骤1，优选地，所述混合菌按照1:80-120的重量配比添加 到红糖水培养基中，其中，所述红糖水培养基的组分及其重量配比为红糖5-10份、水90-98 份。
[0045] 在另一个实施例中，关于步骤2,优选地，所述葛根、沙棘、葡萄籽通过粉碎机粉碎， 得到30-50目颗粒。
[0046] 在一个实施例中，优选地，关于步骤3,所述复合菌按照1:15-20的重量配比添加到 所述复合培养基中。
[0047] 在又一个实施例中，优选地，关于步骤4,其中：
[0048] 将所述复合发酵物中添加水至固液重量配比为1:1，浸泡1-2天；
[0049] 然后淋洗，并将淋洗液在40-50°C条件下浓缩至20-30%，得到浓缩液；
[0050] 进一步地，在60_70°C条件下灭菌10-30分钟，得到浓缩灭菌液；
[0051] 所述成型是进一步的加工过程，其中，所述生物制剂可以是固态制剂，也可以是液 态制剂，如口服液；
[0052] 其中，关于固态制剂的进一步地加工步骤为:按照浓缩灭菌液15-30份、赤藓糖醇 15-30份、乳糖30-60份、保护剂3-5份的重量配比进行称取，先将所述赤藓糖醇和乳糖依次 加入喷雾干燥一步制粒机中，然后开始喷入所述浓缩灭菌液，流量为10_20ml/min，最后喷 入溶解于水中的保护剂，其中，所述制粒机的进风温度为60-80°C，出风温度为40-60°C，待 喷雾器内温度降到25-35Γ时出料，得到所述固态制剂；
[0053]其中，所述口服液的进一步地加工步骤为:按照浓缩灭菌液45-50份、赤藓糖醇45-50份、保护剂5-10份的重量配比进行称取，先将所述赤藓糖醇和保护剂中加入适量热水搅 拌溶解，待冷却至25-35 °C后，加入所述浓缩灭菌液，搅拌至澄清，得到所述口服液。
[0054]本发明提供了一种上述所述制备方法制备得到的所述生物制剂，用于修复应激性 肠道粘膜损伤。
[0055]其中，需要注意的是，在没有特殊说明的情况下，本发明涉