一种熊蜂饲料的制备方法
【专利说明】一种熊蜂饲料的制备方法发明领域
[0001 ] 本发明涉及一种熊蜂饲料，具体地说，涉及熊蜂(Bombus terresris)饲料的制备方法，属于生物技术领域。
【背景技术】
[0002]熊蜂属蜜蜂总科昆虫，熊蜂属，是一类多食性的社会性昆虫，具有采集力强、耐光照、趋光性差，对低温适应性强等特点和优势，在恶劣条件下仍然能够授粉，因熊蜂没有蜜蜂那样灵敏的信息交流系统，能专心在室温内的作物上采集授粉，从而成为温室中比蜜蜂更理想的授粉昆虫。万军等研究了不同授粉处理方式对番茄产量和品质的影响，表明熊蜂授粉处理平均单果重与激素处理、自然授粉比分别增加了26.84%和29.27%。随着经济的发展和人们生活水平的提高，对反季蔬菜和瓜果的需求日益增多，推动了大棚种植面积的逐年扩大，由于种植季节的差异以及棚膜和墙体等，室内种植作物很难接受自然授粉，传统农业常采用人工、机械振动和激素等授粉，劳动强度大，成本和畸形果高，影响了果实的产量和质量，而利用熊蜂为室内作物授粉已经发展成一项现代农业必备的配套措施。西方一些农业发达国家从上世纪初就开始研究熊蜂人工繁殖技术，并于80年代就实现了熊蜂的工厂化生产，提供室内农业授粉应用。我国有许多大型的规模化温室，尤其是冬季，温室内缺乏自然授粉昆虫，所以利用熊蜂授粉可以显著提高蔬菜作物的产量和质量，并节省劳动力和药物的使用。由于我国熊蜂培育技术起步晚，目前尚没有成熟有效的熊蜂培育技术，世界上只有少数国家，如英国，荷兰等掌握了熊蜂的人工繁育技术，因此从国外进口优质熊蜂成为一些蔬果种植企业的迫切需求，然而，由于国内外环境和培养作物以及花粉原料的差异，进境熊蜂在饲料配方上若喂养不好，容易喂养饲料成本高，抗病能力弱，饲料利用率低，工蜂生命周期短，蜂王产卵少，熊蜂采集花粉动力缺失等缺点，间接拉高了熊蜂授粉的成本，降低了熊蜂授粉效率，影响了授粉作物的产量。
【发明内容】
[0003]本发明要解决的技术问题是提供一种熊蜂饲料的制备方法，采用本方法所得饲料生产熊蜂，实现了以下目的:
1、成本低。
[0004]2、工蜂存活期长。
[0005]3、蜂王产卵稳定，繁殖力强。
[0006]4、熊蜂活跃度高。
[0007]5、出巢时间长。
[0008]6、授粉率高。
[0009]7、减少了人工授粉成本，提高了作物的产量。
[0010]为解决以上问题，本发明采用以下技术方案:一种熊蜂饲料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤: a、菌种选取:酵母菌和乳酸片球菌，4°C斜面冰箱保存；
b、酵母菌培养基:土豆去皮切块，每200g加入500 mL水，煮沸30 min，双层纱布过滤至烧杯中，加入20 g蔗糖和5g玉米花粉，加水至I L，每10mL溶液分装入250mL三角瓶，121°C高压灭菌20 min；
C、乳酸片球菌培养基:取大豆蛋白胨5.0g、牛肉膏粉5.0g、酵母浸膏5.0g、葡萄糖20g和乳糖20g，加水至I L，每10mL溶液分装入250mL三角瓶，121°C高压灭菌20 min。
[0011 ] 2、如权利要求1所述的一种熊蜂饲料的制备方法，其特征在于，还包括以下步骤:
d、基础培养基:取葡萄糖35g、果糖35g、蔗糖10g、豆粉100g、黄芪粉5g、大枣粉10g、山药粉5g、蜂蜜20g和水200mL，搅拌均勾，装入500mL烧杯，121 °C高压灭菌30 min。
[0012]3、如权利要求1所述的一种熊蜂饲料的制备方法，其特征在于，还包括以下步骤:
e、发酵培养基:取荷花粉150g、茶花粉150g，在0.8ppm臭氧/立方米下杀菌30min，与降温到60°C的基础培养基混匀，用无菌水控制混合物水分含量在30%，保温30min后，冷却到室温置冰箱4°C保存。
[0013]4、如权利要求1所述的一种熊蜂饲料的制备方法，其特征在于，还包括以下步骤:
f、种子培养1:取冰箱4°C保藏的酵母菌种在超净台接种到酵母菌培养基，28°C，转速160转/分钟摇床培养3天;获得酵母菌菌种；
种子培养2:取冰箱4°C保藏的乳酸菌在超净台接种到一瓶乳酸片球菌培养基，37°C，转速140转/分钟摇床培养2天，获得乳酸片球菌菌种。
[0014]5、如权利要求1所述的一种熊蜂饲料的制备方法，其特征在于，还包括以下步骤:
g、将步骤f培养好的酵母菌菌种取20mL接种到发酵培养基，无菌搅拌均匀，温度28°C真菌培养箱培养2天。
[0015]6、如权利要求1所述的一种熊蜂饲料的制备方法，其特征在于，还包括以下步骤:
h、将步骤g培养后的发酵培养基升温到50°C保温3小时，降低温度到35°C;
再添加步骤f所得乳酸片球菌菌种20mL，搅拌均匀后35°C培养I天后将瓶口密封，继续35 °C培养2天；
1、将步骤h所得物升温到55°C保持3小时；
j、将步骤i所得物降温到室温后，无菌操作分制成柱状饲料，4°C冰箱保存。
[0016]乳酸菌的发酵，可以显著抑制单核细胞增多性李斯特菌(见专利2015102547559)，熊蜂主要以糖水和花粉为食，若温室种植中植物花粉较少时，需要给其添加饲料辅料。熊蜂工蜂的生命周期一般4-12周，长短取决于花粉的数量和质量。
[0017]本发明采用以上技术方案，具有以下优点:
1、成本低，降低1/3。
[0018]2、工蜂存活期长，生命周期4-6周占21%，7-9周占24%，10-12周占55%。
[0019]3、熊蜂的活性、抗病力强，熊蜂抗病能力提高，熊蜂活跃度高;每小时平均5.4次出入蜂巢，比自主采集草莓花粉的高8%，比自主采集花粉并在蜂巢直接辅助喂食花粉的高20%。
[0020]4、工艺操作简便，适于商品化生产。
[0021 ] 5、出巢时间长，平均每天4.8小时/蜂，比第二组直接辅助喂食花粉的提高26.3%。
[0022]6、熊蜂繁殖力比只采集草莓花粉的提高60%，比自主采集花粉并在蜂巢直接辅助喂食花粉的提尚14.3%。
[0023]7、本发明所得熊蜂授粉处理平均单果重与激素处理、自然授粉比分别增加了29.69%和33.98%。
[0024]下面结合实施例对本发明作进一步说明。
【具体实施方式】
[0025]实施例1，一种熊蜂饲料的制备方法，包括以下步骤:
a、菌种:酵母菌(食用安琪酵母)，4°C斜面冰箱保存；乳酸片球菌(菌种保藏号CGMCCN0.10574),4°C斜面冰箱保存。
[0026]b、酵母菌培养基(种子培养基):土豆去皮切块，每200 g加入500 mL水，煮沸30min。双层纱布过滤至烧杯中，加入20 g鹿糖，5g玉米花粉，加水至I L，每10mL溶液分装入250mL三角瓶，121°C高压灭菌20 min。
[0027]c、乳酸片球菌培养基(种子培养基):取大豆蛋白胨5.0g、牛肉膏粉5.0g、酵母浸膏
5.(^、葡萄糖2(^、乳糖2(^，加水至1 L，每10mL溶液分装入250mL三角瓶，121°C高压灭菌20min。
[0028]d、基础培养基:取葡萄糖35g、果糖35g、蔗糖10g、豆粉100g、黄芪粉5g、大枣粉10g、山药粉5g、蜂蜜20g、水200mL，搅拌均勾，装入3000mL三角瓶，121 °C高压灭菌30 min。
[0029]e、发酵培养基:取荷花粉150g、茶花粉150g，在0.8ppm臭氧/立方米下杀菌30min，与降温到60 °C的基础培养基混匀，用无菌水控制混合物水分含量在30%，保温30min后，冷却到室温置冰箱4°C保存。
[0030]f、将配制的酵母菌培养基和乳酸片球菌种子培养基，分别10mL/瓶分装，121°C高