本发明涉及一种欧李果实的新用途，具体涉及一种欧李果实在抗氧化方面的新用途，属于医药保健领域。
背景技术：
抗氧化物质与促氧化物质的平衡失调导致机体细胞长期处于氧化应激状态，这种失调会导致细胞内大分子物质(如蛋白质、脂质、糖类、dna)的积累性氧化损伤，加速人体细胞的衰老或病变。有研究总结了体内氧化应激是诱导多种慢性疾病(心血管疾病和癌症等)发生、发展的主要机制，体内(尤其是血液中)所载细胞外脂类物质被自由基氧化后，产生有毒性的氧化产物，干扰细胞正常功能，从而引发炎症(inflammation)，导致各种慢性疾病的发生。如心脏病是由高含量的低密度脂蛋白(ldl)导致高发生率的胆固醇氧化，产生高含量的胆固醇氧化产物改变了胆固醇新陈代谢有关细胞的功能，从而导致心血管板块的形成。而流行病学研究证实，经常摄入富含抗氧化物质的食物(如果蔬、谷物等)可有效降低慢性疾病的发病几率。
欧李[cerasushumilis(bge.)sok.]为蔷薇科樱桃属、落叶小灌木果药兼用野生树种，其茎叶、果实、种仁、根皮具有很高的经济和药用价值。欧李中含有丰富的多酚类物质、氨基酸、维生素、微量元素等保健因子成分，其中钙含量居水果之首，故又称“钙果”。欧李种仁是《中华人民共和国药典》收载的郁李仁药材主要来源，已有2000多年的药用历史，具有润肠通便，下气利水的功效。
技术实现要素：
本发明的一个目的在于提供一种欧李果实在制备具有抗氧化活性的药品或保健品中的应用；
本发明的另一个目的在于提供一种欧李果实的加工方法。
本发明目的是通过如下技术方案实现的：
作为本发明的一个方面，提供一种欧李果实在制备具有抗氧化活性的药品或保健品中的应用。
在一些实施方案中，所述欧李果实按如下方法进行加工：将欧李果加入水和糖类成分，密封保存；为增加欧李果与糖的接触，欧李果在加入糖类成分前进行初加工，例如切制成若干单元，包括切成块状或其他形状。
优选的，所述糖、欧李果和水的比例为1：3：(1～10)；进一步优选，所述糖、欧李果和水的比例为1：3：(1～5)；更进一步优选，所述糖、欧李果和水的比例为1：3：(1～3)；最优选的的，所述糖、欧李果和水的比例为1：3：1或1：3：3。
优选的，所述糖类成分包括丙糖、丁糖、戊糖、己糖、蔗糖、海藻糖、麦芽糖、乳糖、多糖、膳食纤维或蜂蜜中的任意一种或几种；所述蔗糖包括白糖和红糖；优选的，所述糖类成分包括红糖、白糖或蜂蜜；最优选的，所述糖类成分为红糖。
在一些实施方式中，在加工过程中可加入发酵菌种，如酵母菌、醋酸菌、乳酸菌中的任意一种或几种。优选的，加入酵母菌与醋酸菌。
上述加工方法中所述保存环境为15～25℃的避光处，保存时间在3个月以上，在初始阶段(15-25d)要每天搅拌排除容器内的气体。所述“单元”为具有任何空间形态的结构，比如“块”或“片”，所述“块”的最大边长≤2cm；所述“片”的厚度≤1cm。
作为本发明的另一方面，本发明提供一种欧李果实的加工方法，所述方法包括：将欧李果切制成若干单元，加入水和糖类成分，密封保存。
优选的，所述糖、欧李果和水的比例为1：3：(1～10)；进一步优选，所述糖、欧李果和水的比例为1：3：(1～5)；更进一步优选，所述糖、欧李果和水的比例为1：3：(1～3)；最优选的的，所述糖、欧李果和水的比例为1：3：1或1：3：3。
所述糖类成分包括所述糖类成分包括丙糖、丁糖、戊糖、己糖、蔗糖、海藻糖、麦芽糖、乳糖、多糖、膳食纤维或蜂蜜中的任意一种或几种；所述蔗糖包括白糖和红糖；优选的，所述糖类成分包括红糖、白糖或蜂蜜；最优选的，所述糖类成分为红糖。
在一些实施方式中，在加工过程中可加入发酵菌种，如酵母菌、醋酸菌、乳酸菌中的任意一种或几种。优选的，加入酵母菌与醋酸菌。
所述保存环境为15～25℃的避光处，保存时间在3个月以上，在初始阶段(15-25d)要每天搅拌排除容器内的气体。
所述“单元”为具有任何空间形态的结构，比如“块”或“片”，所述“块”的最大边长≤2cm；所述“片”的厚度≤1cm。
本发明欧李果实产品能够显著提高小鼠血清中超氧化物歧化酶(sod)活性，显著降低血清丙二醛(mda)的含量，表明其可以通过提高小鼠血清中sod活性来增强抗自由基反应的酶系统的能力，清除自由基对机体的损害，有较好的抗氧化作用。
具体实施方式
以下实施例中欧李果实采自北京市房山区欧李种植基地，枣花蜜产自河北阜平县太行山区。
实施例1
步骤1：取欧李果实，洗净，去除种子，切成薄片；
步骤2：将蜂蜜、果实、水按1:3:1的比例装入玻璃罐中，一层水果，一层蜂蜜，边加水边搅拌；
步骤3：密封，置放在15至25℃阴凉处，浸泡3-6个月，即可。
实施例2
与实施例1基本相同，区别在于蜂蜜、果实、水的比例为1:3:3。
实施例3
与实施例1基本相同，区别在于蜂蜜、果实、水的比例为1:3:5。
实施例4
与实施例1基本相同，区别在于蜂蜜、果实、水的比例为1:3:10。
实施例5
与实施例3基本相同，区别在于以红糖替换蜂蜜。
实施例6
与实施例3基本相同，区别在于以白糖替换蜂蜜。
实施例7
与实施例3基本相同，区别在于在发酵的初期加入酵母菌。
实施例8
与实施例3基本相同，区别在于在发酵的初期加入醋酸菌。
实施例9
与实施例3基本相同，区别在于在发酵的初期加入酵母菌和醋酸菌。
测定实施例1～9产品总酚和抗氧化活性测定
1材料与方法
1.1材料与试剂
试验试剂：folinciocaltecusphenol试剂购自美国sigma公司；葡萄糖购自中国药品生物制品检定所；碳酸钠、没食子酸、乙醇、磷酸盐、铁氰化钾、三氯醋酸、氯化铁、甲醇、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(dpph)、硫酸亚铁、水杨酸、双氧水和naoh等均为国产分析纯。
1.2实验仪器与设备
电热恒温水浴锅(dk-s22，上海精宏实验设备有限公司)；离心机(g20，北京白洋医疗器械有限公司)；紫外可见分光光度计(uv2300，上海天美科学仪器有限公司)；电子天平(cp224c，奥豪斯仪器有限公司)。
1.3主要试剂的配制
0.1％naoh溶液：准确称量0.5005gnaoh溶解于去离子水中并定容至500ml，得0.1％naoh溶液。
10％碳酸钠溶液：准确称量0.0278g碳酸钠溶解于去离子水中并定容至250ml，得10％碳酸钠溶液。
磷酸盐缓冲液(0.2mol·l-1，ph7.0，由nah2po4与na2hpo4配制而成)：准确称取1.22gnah2po4·2h2o和4.37gna2hpo4·12h2o溶解于去离子水中并定容至1000ml，得0.2mol·l-1，ph7.0的磷酸盐缓冲液。
30.37mmol·l-1铁氰化钾溶液：准确称取5.00g铁氰化钾溶解于去离子水中并定容至500ml，得30.37mmol·l-1铁氰化钾溶液。
0.61mol·l-1三氯醋酸溶液：准确称取24.92g三氯醋酸溶解于去离子水并定容至250ml，得0.61mol·l-1三氯醋酸溶液。
3.70mmol·l-1氯化铁溶液：准确称取4.9834g氯化铁溶解于去离子水并定容至250ml，得3.70mmol·l-1氯化铁溶液。
9mmol·l-1硫酸亚铁溶液：准确称量0.6255g硫酸亚铁溶解于去离子水并定容至250ml，得9mmol·l-1硫酸亚铁溶液。
9mmol·l-1水杨酸溶液：准确称取1.242g水杨酸溶解于去离子水中并定容至1000ml，得9mmol·l-1水杨酸溶液。
没食子酸标准溶液：准确称取没食子酸(分析纯)0.1000g溶解于70％的乙醇中并定容至100ml，得浓度为100μg·ml-1的标准溶液。
1.4总多酚物质含量
取提取液0.1ml，再加入fc试剂0.2ml，混匀后，室温下静置反应3～4min，再加入1.0ml质量浓度10％na2co3溶液，最后加入蒸馏水至8ml体积，摇匀后置于35℃恒温水浴中反应1h；同时以蒸馏水代替样品作做试剂空白，在670nm波长下测定吸光度。每个样品重复测定3次，取平均值。标准曲线以没食子酸标准溶液绘制，精密吸取0.9043mg·ml-1没食子酸标准液，30μl、60μl、90μl、120μl、150μl、180μl于试管中，后续步骤同上。以提取量(mg·g-1)对吸光度(a)进行直线回归，得回归方程：y＝0.005x+0.0054，r2＝0.9987。根据标准曲线计算总酚含量，以每100g鲜样中含有的没食子酸毫克数计。
1.5抗氧化活性
1.5.1还原力
取0.1ml提取液加入含有2.5ml磷酸盐缓冲液(0.2mol·l-1，ph7.0，由nah2po4与na2hpo4配制而成)的试管中，再与2.5ml30.37mmol·l-1的铁氰化钾溶液混合，将混合物混匀后，置于50℃恒温水浴锅中保温20min，然后取0.61mol·l-1三氯醋酸溶液2.5ml加入混合物中，以终止反应。从反应体系中取出2.5ml上清液，加入2.5ml蒸馏水，摇匀后再加入3.70
mmol·l-1的fecl3溶液0.5ml，反应10min，蒸馏水代替提取液作空白，以蒸馏水调零。在700nm波长处测定吸光值，计算还原力，还原力＝(a样–a空)/a空。
1.5.2dpph·自由基的清除
取20μl提取液加入试管中，再加0.5mmol·l-1dpph·甲醇溶液0.4ml，混匀后加入甲醇使最后体积为5ml，在黑暗条件下反应60min。以蒸馏水调零，甲醇代替提取液作对照，在517nm波长处测吸光值,计算酚类物质提取液对dpph·的清除率：dpph·的清除率(％)＝(a对照-a样)/a对照×100％
1.5.3羟基自由基(·oh)的清除
取0.1ml提取液加入试管，然后加入1ml浓度为9mmol·l-1feso4溶液，摇匀后再加入9mmol·l-1水杨酸溶液1ml，2ml浓度为8.8
mmol·l-1h2o2和4.6ml蒸馏水，混匀后，放入37℃条件下反应1h。蒸馏水代替提取液做空白组，蒸馏水代替水杨酸作为对照组。反应结束后，取出冷却，用蒸馏水调零，在510nm处测定吸光值。对·oh的清除率(％)公式：
·oh清除率(％)＝(a空白-(a样-a对照))/a空白×100％
2结果与分析
用excel进行数据录入及图表绘制，用spss16.0进行方差分析、相关性分析。结果见表1-3。
2.1实施例1～4测定结果
表1实施例1～4测定结果
注：同一列不同小写字母表示在p<0.05水平显著差异。
上述结果表明，糖、欧李果实、水按1:3:1的比例组合，得到的终产品其总酚含量以及抗氧化活性均为最高，且显著优于其他组合。
2.2实施例3、5、6测定结果
表2实施例3、5、6测定结果
注：同一列不同小写字母表示在p<0.05水平显著差异。
上述结果表明，以红糖作为糖源，得到的终产品其总酚含量以及抗氧化活性均为最高，且显著优于其他组合。
2.3实施例3、7～9测定结果
表3实施例3、7～9测定结果
注：同一列不同小写字母表示在p<0.05水平显著差异。
上述结果表明，同时加入酵母菌和醋酸菌，得到的终产品其总酚含量以及抗氧化活性均为最高，且显著优于其他组合。
实施例10
步骤1：取欧李果实，洗净，去除种子；
步骤2：将红糖、果实、水按1:3:1的比例装入玻璃罐中，一层水果，一层蜂蜜，同时加入提前活化的酵母菌和醋酸菌(二者量分别占物料的0.5％)，边加水边搅拌；
步骤3：密封，置放在15至25℃阴凉处，浸泡3-6个月，即可。
实施例10制备的产品体内抗氧化研究
1实验材料
1.1药品
实施例10制备的欧李果实产品；
维生素c(vc)(生产批号：1508518-1，每片规格0.1g)给药量250mg·kg-1；
sod试剂盒(南京建成生物工程研究所，规格：100t，生产批号：20160331)；
mda测试盒(南京建成生物工程研究所，规格：100t，生产批号：20160411)。
1.2动物
icr小鼠(斯贝福北京生物技术有限公司，体重20g，雄性，合格证号scxk(京)2016-0002)。
1.3仪器
离心机(上海卢湘仪离心机仪器有限公司，型号：2012123815)，
紫外分光光度计(尤尼柯(上海)仪器有限公司，型号：gr11031104003)。
2实验方法
2.1分组及给药
本次实验共64只小鼠，采用随机分组方法根据小鼠体重范围将小鼠分为4组，每组16只，分别为对照组，欧李20ml·kg-1组，欧李40ml·kg-1组，vc250ml·kg-1组。各给药组组按剂量给予相应药物，对照组给予等量饮用水(给药0.4ml·10g-1)。每日一次，连续给药5次，末次给药后1h取材。
2.2取材及测试方法
末次给药1h后摘眼球取血，在4℃3000rad·min-1离心15min制备血清样本，-20℃冻存，备用。按试剂盒说明书测定血清样品中sod活性，mda含量，计算各组均值、标准差。
2.3数据处理
所有数据分析均在spss(软件版本19.0，spss公司，芝加哥，美国)上进行。
3实验结果
3.1血清中mda测定
结果见表4。结果表明，连续给药5d的欧李果20ml·kg-1、40ml·kg-1能使动物血清中mda含量不同程度下降，其中40ml·kg-1作用明显。
表4欧李果对小鼠血清丙二醛含量的影响
注：不同小写字母表示在p<0.05水平显著差异
3.2血清中sod活性测试
结果见表5。通过研究发现连续给药5d的各剂量的欧李果能使动物血清中sod活性值上升，其中20ml·kg-1、40ml·kg-1可明显提高明显小鼠血清sod活性值。
表5欧李果对小鼠血清sod活性的影响
注：不同小写字母表示在p<0.05水平显著差异
上述研究结果表明本发明产品能够显著提高小鼠血清中sod活性，显著降低血清mda的含量，表明其可以通过提高小鼠血清中sod活性来增强抗自由基反应的酶系统的能力，清除自由基对机体的损害，有较好的抗氧化作用。