本发明属于食品、保健品、药品及医疗领域，具体涉及地黄与地灵配伍治疗口腔溃疡的组合物及其制备方法。
技术背景
复发性口腔溃疡(recurrent oral ulcer,ROU)又称为复发性阿弗他溃疡(recurrent aphthous ulcer,RAU)或复发性阿弗他口炎(recurrent aphthous stomatitis,RAS)，民间又称为“口疮”“上火”，是最常见的口腔黏膜病，其患病率居口腔黏膜病之首，各国流行病学调查显示每5人中至少有1人发生过口腔溃疡。该病以口腔黏膜各部位反复发作的溃疡局限性溃疡损伤为特征，好发于唇、舌、颊、软腭等角化差的部位。大小可从米粒至黄豆大小、表面覆盖灰白或蓝色假膜溃疡，边界清楚，周围粘膜红而微肿，局部灼痛，流口水，一般一至两个星期可以自愈。常伴口臭、口干、尿黄、大便干结等症状为主要特征，不伴有其他疾病体征，具有周期性、复发性、自限性特征，溃疡灼痛明显，重的口疮可扩展到整个口腔，甚至引起发烧和全身不适。
西医认为其病因主要为：一是内因：内分泌失调，自身免疫力降低等。二是外因：遗传因素、精神压力及刺激、工作疲劳、失眠，大部分女性患者月经来潮前后而诱发此病，或使病情加重，或潜伏着机体内严重疾病。多数医生认为，口腔溃疡与以下因素有关：(1)消化系统疾病及功能紊乱：如腹胀、腹泻或便秘等情况。(2)内分泌变化：有些女性患者往往在月经期发生，可能与体内雌激素量下降有关。(3)精神因素：有的患者在精神紧张、情绪波动、睡眠状况不佳的情况下发病，可能与植物神经功能失调有关。(4)遗传因素：如父母双方均患有复发性口腔溃疡时，其子女约有80—90％患病，若双亲之一患此病时其子女约有50—60％患病。(5)其他因素：如缺乏微量元素锌、铁、叶酸、维生素B12等，可降低免疫功能，增加复发性口腔溃疡发病的可能性。总之,复发性口腔溃疡的发病常常和病毒感染、细菌感染、消化系统疾病及功能紊乱、内分泌变化、精神神经因素、遗传因素及免疫功能的变化等密切相关。
中医认为：阴虚火旺，热毒燔灼，内夹湿热，上蒸于口以及情志不遂而损及心脾，均可致上述诸症。中医分析复发性口腔溃疡有如下几种情况：(1)血虚性口腔溃疡：此病多发生在口唇、舌根、两颊部，溃疡面常呈灰白色，周围轻微红肿，此愈彼起，绵延不断，愈后无痕迹，伴溃疡处疼痛难忍及头部疼痛，并头痛牵拉眉棱骨疼痛，月经量增多，神疲乏力，心悸、夜寝不安等症状，系由于身体血虚，加之月经周期血更虚甚，是因血不能濡养头脑产生头痛。通过中药辩证施治可达到治愈目的。(2)肝火旺型口腔溃疡：此型常好发生口唇、牙龈、舌尖及两颊部，溃疡呈黄白色，周围红肿，数量多时甚至融合成片，疼痛剧烈，同时可出现头顶部痛、头晕、目眩、易怒、口苦等症。属人体素质肝阳偏亢，经行阴血下注冲住，使阴血亏虚而不能上抑肝阳而致头痛及口腔溃疡，平时注意加强降肝火，服龙胆泻肝汤治疗有痹益之效。(3)血瘀型口腔溃疡：溃疡面色泽呈淡灰白色，有发展快、愈合慢之特点。女性往往在月经前及月经期间，口腔粘膜中突然发生数枚溃疡，局部剧烈疼痛，头痛位置固定不变，月经色呈紫黯，有瘀斑，如长期不治，易导致病情加重。在防治女性月经期口腔溃疡过程中，还需要保持心情愉快，注意劳逸结合，坚持按疗程服药，避免过度疲劳，饮食要清淡，多吃水果、新鲜饭菜，多饮水。治疗过程中，以不吃辛、辣、发味类食品为上策。有些复发性溃疡与胃肠功能紊乱、某些营养缺乏、机体免疫力降低、口腔卫生不良或精神因素有关，治疗可采取综合性措施。除外敷、内服药物外，还需要注意口腔卫生，保持心情愉快，避免过度劳累，多喝开水，多吃新鲜蔬菜、水果，饮食宜清淡，易消化，不要食用辛辣、刺激性食物。
地黄为玄参科植物地黄(Rehm anniaglutinasa Liboschde.)的新鲜块茎。鲜地黄味甘苦，性微寒，无毒。归心；肝；肾经(《本草再新》)。入足少阴及足太阴(《本草新编》)。功能清热凉血；生津润燥。主急性热病；高热神昏；斑疹；津伤烦渴；血热妄行之吐血；衄血；崩漏；便血；口舌生疮；咽喉肿痛；劳热咳嗽；跌打伤痛；痈肿。临床常用六味地黄丸、六味地黄汤加减、桂附地黄汤、知柏地黄汤加减治疗口腔溃疡。上述中药复方制剂中筛选出都含有地黄，说明地黄为治疗口腔溃疡的主要药物。梓醇为地黄滋阴作用的主要成分，机制为双向调控阴虚(模型)机体β肾上腺受体C-AMP系统功能相对偏亢和M胆碱受体C-GMP系统功能相对偏衰，可以重现地黄的滋阴作用。
地灵，学名银苗，银条菜等，在西北地区俗称”地灵”。属唇形科水苏属多年生草本植物，为草石蚕类以地下茎作为食用部分的一种蔬菜。地灵味苦；性寒。功能清热利尿；消食健胃。主湿热尿淋；肝炎；消化不良(《中华本草》)。地灵又称地环，地下茎白色，肉质脆嫩，无纤维，含水分较多，营养丰富，可炒食、煮食、凉拌,水煮等。对人体有多种保健效果，延年益寿作用明显，在《中国蔬菜品种志》中已有详细的记载。河南偃师地区的“偃师银条”最为有名，具有悠久的食用历史。它富含一种被世界食品医药界誉为“健康宝贝”和“超强双歧因子”的物质——“水苏糖”。作为天然四糖之一的水苏糖，简单的结构表示为半乳糖–半乳糖-葡萄糖-果糖。是目前发现功效最优越的益生元，是已获得美国FDA认证的寡糖产品。
综上文献记载结合现代研究成果，采用先进提取工艺，对地黄与地灵配伍中的有效成分加以最大程度提取与保留，以梓醇和水苏糖为指标性成分，对地黄与地灵配伍提取物进行了质量评价，以保证地黄与地灵配伍的制剂质量与疗效。
本发明的目的就是为了提供一种标本兼治、整体调节且毒副作用低的治疗口腔溃疡的地黄与地灵配伍处方及其制剂。
技术实现要素：
本发明提供一种治疗口腔溃疡的组合物，所述组合物以地黄与地灵作为原料药制备而成：两者的重量比例为1-2:1-2。
本发明所述的组合物，所述组合物以地黄与地灵作为原料药制备而成：两者的重量比例为1:1。
本发明所述的组合物，为适合服用的任何剂型。
所述剂型选自：液体制剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、滴丸剂、丸剂、散剂、膏剂。
本发明所述的组合物，所述剂型中，必要时含有辅料，所述辅料选自：微晶纤维素、淀粉、糊精、蔗糖、水苏糖、羧甲基淀粉钠、低取代羟丙基纤维素、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、滑石粉、硬脂酸镁、山梨醇酐单油酸酯、甘氨酸、明胶、甘油、水、对羟基苯甲酸乙酯。
本发明还包括所述的组合物的制备方法，包括将地黄与地灵进行提取得到药物提取物再与辅料混合的步骤，其中所述地黄与地灵提取方法如下：
取鲜地黄与鲜地灵各等分，粉碎，加5～10倍量水,超声提取2～3次，每次0.5～2小时，合并提取液，滤过，低温减压浓缩至相对密度为1.25～1.30(60℃)的稠膏，加3倍体积95％乙醇沉淀，取上清液，减压浓缩至相对密度为1.30～1.35(60℃)的稠膏，真空干燥，粉碎，得水提醇沉提取物。
或
取鲜地黄与鲜地灵各等分，粉碎，加2～4倍量70～95％乙醇超声提取2～3次，每次0.5～2小时，合并提取液，滤过，减压浓缩，真空干燥，粉碎，得乙醇提取物。
本发明还包括所述的组合物在制备治疗口腔溃疡或相关性疾病的药物中的应用。所述口腔溃疡或相关性疾病为：牙龈肿痛、牙龈出血、口腔癌、口腔粘膜病口腔黏膜白斑、口腔念珠菌病。
本发明中，有效成分梓醇为地黄滋阴作用的主要成分，机制为双向调控阴虚(模型)机体β肾上腺受体C-AMP系统功能相对偏亢和M胆碱受体C-GMP系统功能相对偏衰，可以重现地黄的滋阴作用。有效成分水苏糖对人体胃肠道内的双歧杆菌、乳酸杆菌等有益菌群有着极明显的增殖作用，能迅速改善人体消化道内环境，调节微生态平衡，控制产气、产酸梭状杆菌等腐败菌的生产，分解衍生出多重免疫功能因子，提高机体免疫力。梓醇与水苏糖功能相加，具有协同增效作用，对治疗阴虚火热、消化系统疾病及功能紊乱、内分泌变化等引起的口腔溃疡效果显著。
以下通过实验数据说明本发明的有益效果：
按如下方法制备地黄与地灵配伍水提醇沉提取物、乙醇提取物；并进行药理实验研究，其药理实验研究结果如下：
1.试验用药的制备：
(1)水提醇沉提取物：取鲜地黄与地灵各等分，粉碎，加水超声提取3次，第1、2次每次1小时，第3次超声0.5小时。第1次加5倍量水,第2、3次加6倍量水，合并提取液，滤过，低温减压浓缩至相对密度为1.25～1.30(60℃)的稠膏，加3倍体积95％乙醇沉淀，取上清液，减压浓缩至相对密度为1.25～1.30(60℃)的稠膏，真空干燥，粉碎，得水提醇沉提取物。
(2)乙醇提取物：取鲜地黄与地灵各等分，粉碎，加乙醇超声提取2次，每次1小时，第1次加2倍量95％乙醇，第2次加3倍量70％乙醇，合并提取液，滤过，减压浓缩，真空干燥，粉碎，得乙醇提取物。
2.药理实验研究：
研究选用Wistar大鼠40只，雌雄各半，，每只体重180—200g，先进行口腔溃疡造模：用一根6cm长滴管，下端内径2mm，内置小棉球，使小棉球底部与滴管下口平，继而在管内滴入90％苯酚溶液至刚浸透小棉球，然后将滴管下端平置于大鼠右侧口角约3mm处30％左右，即见该区有直径约2mm的白色损伤。最后将大鼠分模型对照组(生理盐水)、左旋咪唑对照组(0.01g/kg)、水提醇沉提取物组(0.5g/kg)和乙醇提取物组(0.5g/kg)，分别灌胃给药1次/天，连续7天。实验中每日观察并记录大鼠溃疡愈合情况和进食量，第8天将大鼠脱颈处死，取右侧口角组织用10％甲醛溶液固定，进行病理学检查，根据病理形态改变程度进行分级。
重度病变：切缘见溃疡面，上皮缺损，溃疡达肌层深部，固有膜大量炎细胞浸润，肌层水肿，肌层组织变性坏死；轻度病变：固有膜水肿，血管扩张充血，肌层水肿，炎细胞浸润，结缔组织增生，肌层组织轻度变性坏死；正常：未见病理病变。结果见表1，表2。
采用Student’s t检验进行两组间均数的差异显著性检验。当P＜0.05时，差异有统计学意义。
表1、各组给药后口腔溃疡组织病理改变比较
*与模型对照组组比较：*P＜0.05
表2、各组给药后对大鼠口腔溃疡的影响比较
*与模型对照组组比较：*P＜0.05
结论：在本实验条件下，左旋咪唑、水提醇沉提取物、乙醇提取物对大鼠口腔溃疡模型均有较好的治疗作用，水提醇沉提取物作用最佳，与模型对照组比较有显著性差异。说明地黄与地灵配伍提取物能改善口腔溃疡症状，促进组织再生，缩短溃疡愈合时间，为实际应用提供了依据。
具体实施方式
[实施例1]梓醇的含量测定方法
照高效液相色谱法(《中国药典》2015年版四部0512法)测定。
色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水(1.2:98.8)为流动相；检测波长为210nm。理论板数按梓醇峰计算应不低于5000。
对照品溶液的制备 精密称取梓醇对照品适量，加流动相制成每1ml含180ug的溶液，摇匀，即得。
供试品溶液的制备 取地黄提取物约25mg，精密称定，置25ml量瓶中，加流动相溶解并稀释到刻度，摇匀，即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
表3样品中梓醇含量测定结果
[实施例2]水苏糖的含量测定方法
本检测方法采用《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)方法测定。
色谱条件与系统适用性试验 反相氨基柱，粒径5μm。柱温45℃，检测室40℃。乙腈:水(76:24)为流动相，流量为1.5mL/min，灵敏度为64。
对照品标准曲线的制备 精密称取水苏糖0.0600g，用去离子水溶解并定容至4.0mL。将此液逐级稀释成3.0、6.0、9.0、12.0、15.0mg/mL，将各标准系列注入高效液相色谱仪进行测定，绘制标准工作曲线。
供试品溶液的制备 称取2.000g地黄提取物，放入200mL烧杯中，加去离子水15.0mL溶解，再加45.0mL无水乙醇，搅匀，放置5min，离心，取上清液30.0mL在沸水浴上挥发近干，残液用去离子水溶解并定容至一定体积，溶液过0.45μm滤膜，滤液用于HPLC测定。
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
表4样品中水苏糖含量测定结果
[实施例3]乙醇提取方法
乙醇提取物：取鲜地黄与地灵各等分，粉碎，加乙醇超声提取2次，每次1小时，第1次加2倍量95％乙醇，第2次加3倍量70％乙醇，合并提取液，滤过，减压浓缩，真空干燥，粉碎，得乙醇提取物。出膏率为20-25％，其中梓醇含量为6.77％，水苏糖含量为50.28％。
[实施例4]水提醇沉提取方法
水提醇沉提取物：取鲜地黄与地灵各等分，粉碎，加水超声提取3次，第1、2次每次1小时，第3次超声0.5小时。第1次加5倍量水,第2、3次加6倍量水，合并提取液，滤过，低温减压浓缩至相对密度为1.25～1.30(60℃)的稠膏，加3倍体积95％乙醇沉淀，取上清液，减压浓缩至相对密度为1.25～1.30(60℃)的稠膏，真空干燥，粉碎，得地黄水提醇沉提取物。出膏率为15-20％，其中梓醇含量为16.58％，水苏糖含量为56.32％。
[实施例5]液体制剂的制备
取地黄与地灵配伍提取物10㎏，用1000升纯化水溶解，加蜂蜜2㎏，混匀，滤过，即得口服液体制剂。
[实施例6]固体饮料制备
取地黄与地灵配伍提取物10㎏，加微晶纤维素0.2㎏，甜蜜素适量，混匀，过30目筛，即固体饮料制剂。
[实施例7]颗粒剂制备
取地黄与地灵配伍提取物，加入适量糊精、蔗糖，混匀，用90％乙醇适量制成颗粒，干燥，整粒，即得颗粒剂。
[实施例8]片剂的制备
取地黄与地灵配伍提取物，加入适量淀粉，糊精，糖粉，制备颗粒，压片即得片剂。
[实施例9]胶囊剂的制备
取地黄与地灵配伍提取物，加入适量淀粉，糊精，聚乙烯吡咯烷酮，制备颗粒，装胶囊即得胶囊剂。
[实施例10]乙醇提取方法
乙醇提取物：取鲜地黄1份与地灵2份，粉碎，加乙醇超声提取2次，每次1小时，第1次加2倍量95％乙醇，第2次加3倍量70％乙醇，合并提取液，滤过，减压浓缩，真空干燥，粉碎，得乙醇提取物。
[实施例11]水提醇沉提取方法
水提醇沉提取物：取鲜地黄2份与地灵1份，粉碎，加水超声提取3次，第1、2次每次1小时，第3次超声0.5小时。第1次加5倍量水,第2、3次加6倍量水，合并提取液，滤过，低温减压浓缩至相对密度为1.25～1.30(60℃)的稠膏，加3倍体积95％乙醇沉淀，取上清液，减压浓缩至相对密度为1.25～1.30(60℃)的稠膏，真空干燥，粉碎，得地黄水提醇沉提取物。