本申请涉及一种锁阳中浸取皂苷和多糖方法，属于天然产物有效成分的分离提取领域。
背景技术：
：锁阳始载于《本草衍义补遗》，《本草纲目》也有记载，锁阳又名不老药、锈铁棒、地毛球、黄古狼、羊锁不拉，为锁阳科锁阳属植物锁阳的干燥肉质茎，生长于干燥多沙地区，多寄生于蒺藜科植物白刺的根上，主要分布于内蒙古、宁夏、新疆、甘肃、青海等西北地区。锁阳味甘，性温，具有补肾阳、益精血，润肠通便之功效，是中药和蒙药中的常用药物。临床主治尿频、便秘、阳痿早泄、腰膝酸软、失眠脱发，对于中老年尿频和早泄有着独特的效果，目前没有替代药物。锁阳中含有多糖、糖苷、有机酸、黄酮类、酚类、甾体类、三萜类、鞣质等多种化学成分，其中皂苷具有抗菌、解热、镇静、抗癌等多种功效。目前生物物质的提取和分离经常采用双水相萃取方法，该方法虽然具有条件温和、容易放大和可连续操作的优点，但是由于采用与水互溶的有机溶剂和盐构成的双水相萃取体系，存在溶剂易挥发、环境污染大、以及选择性低的缺点。技术实现要素：根据本申请的一个方面，提供一种浸取皂苷和多糖的方法或者一种皂苷和多糖粗品的制备方法，以锁阳片为原料，先用冷水对锁阳片进行预处理，再用热水提取皂苷和多糖。该方法具有简单、易操作、提取分离速度快、不需要挥发性有机溶剂、环境污染小、对皂苷和多糖选择性高的优点。所述浸取皂苷和多糖的方法，其特征在于，先将锁阳片置于0℃～30℃的冷水中预处理后，再用80～100℃的热水进行浸取。优选地，所述冷水中预处理和热水浸取过程在超声下和/或微波下进行。所述冷水中预处理和热水浸取过程，在采用配备有微波装置和超声探头的容器中进行。冷水中预处理和热水浸取过程中，微波装置和超声探头可同时打开、同时关闭或者仅打开其中的一个。作为一个优选的实施方式，所述方法为先将锁阳片置于0℃～30℃的冷水中用超声波预处理后，再用80～100℃的热水进行浸取。作为一个优选的实施方式，所述方法为先将锁阳片置于0℃～30℃的冷水中预处理后，再用80～100℃的热水中在超声波下进行浸取。作为一个进一步优选的实施方式，所述方法为先将锁阳片置于0℃～30℃的冷水中用超声波预处理后，用80～100℃的热水中在超声波下进行浸取。作为一个优选的实施方式，所述方法为先将锁阳片置于0℃～30℃的冷水中用微波预处理后，再用80～100℃的热水进行浸取。作为一个优选的实施方式，所述方法为先将锁阳片置于0℃～30℃的冷水中预处理后，再用80～100℃的热水中在微波下进行浸取。作为一个优选的实施方式，所述方法为先将锁阳片置于0℃～30℃的冷水中用微波预处理后，用80～100℃的热水中在微波下进行浸取。作为一个优选的实施方式，所述方法为先将锁阳片置于0℃～30℃的冷水中用超声预处理后，用80～100℃的热水中在微波下和超声下进行浸取。优选地，所述超声波频率范围为20kHz～50kHz。进一步优选地，所述超声波频率范围为22kHz～30kHz。优选地，所述超声功率密度为5W/L～100W/L。进一步优选地，所述超声功率密度为20W/L～40W/L。优选地，所述微波频率范围为2GHz～3GHz。进一步优选地，所述微波频率范围为2.4GHz～2.5GHz。优选地，所述微波功率密度为100W/L～500W/L。进一步优选地，所述微波功率密度为200W/L～300W/L。本申请中，所述功率密度为单位重量处理物料(液固相总重量)上施加的超声或微波的功率，单位为W/kg。优选地，对锁阳片进行预处理的冷水的温度为0～25℃。进一步优选地，对锁阳片进行预处理的冷水的温度为0～10℃。优选地，对锁阳片进行浸取的热水的温度为80～95℃。进一步优选地，对锁阳片进行浸取的热水的温度为80～90℃。作为一种实施方式，所述浸取皂苷和多糖的方法，至少包括以下步骤：(a)将锁阳片置于0℃～30℃的水中，直接浸泡或者于超声中浸泡不少于30min，得到体系I；(b)加热步骤(a)所得体系I至80℃～100℃，并于超声和/或微波下保持体系温度80℃～100℃不少于30min，得到体系II；(c)分离体系II中的固相和液相，液相记为提取液I，固相记为固体I；将提取液I置于2～8℃不少于24h后经滤渣、真空旋转蒸发至膏状，即得皂苷和多糖粗品。作为一种实施方式，所述浸取皂苷和多糖的方法，至少包括以下步骤：(a)将锁阳片置于0℃～30℃的水中，直接浸泡或者于超声中浸泡不少于30min，得到体系I；(b)加热步骤(a)所得体系I至80℃～100℃，并于超声和/或微波下保持体系温度80℃～100℃不少于30min，得到体系II；(c)分离体系II中的固相和液相，液相记为提取液I，固相记为固体I；(d)将固体I置于80～100℃的水中，并于超声和/或微波下保持不少于20min，得到体系III；(e)分离体系III中的固相和液相，液相记为提取液II，固相记为固体II；将提取液II与步骤(c)所得的提取液I混合并置于2～8℃不少于24h后经滤渣、真空旋转蒸发至膏状，即得皂苷和多糖粗品。作为一种实施方式，所述浸取皂苷和多糖的方法，至少包括以下步骤：(a)将锁阳片置于0℃～30℃的水中，直接浸泡或者于超声中浸泡不少于30min，得到体系I；(b)加热步骤(a)所得体系I至80℃～100℃，并于超声和/或微波下保持体系温度80℃～100℃不少于30min，得到体系II；(c)分离体系II中的固相和液相，液相记为提取液I，固相记为固体I；(d)将固体I置于80～100℃的水中，并于微波中保持不少于20min，得到体系III；(e)分离体系III中的固相和液相，液相记为提取液II，固相记为固体II；(f)将固体II置于80～100℃的水中，并于微波中保持不少于10min，得到体系IV；(g)分离体系IV中的固相和液相，液相记为提取液III，固相记为固体III；将提取液III与步骤(c)所得的提取液I、步骤(e)所得提取液II混合并置于2～8℃不少于24h后经滤渣、真空旋转蒸发至膏状，即得皂苷和多糖粗品。优选地，步骤(a)中锁阳片与水的质量比例＝1:5～7。进一步优选地，步骤(a)中锁阳片与水的质量比例＝1:6。优选地，步骤(d)中固体I与水的质量比例＝1:4～6。进一步优选地，步骤(d)中固体I与水的质量比例＝1:5。优选地，步骤(f)中固体II与水的质量比例＝1:3～5。进一步优选地，步骤(f)中固体II与水的质量比例＝1:4。优选地，步骤(b)、步骤(d)和步骤(f)中水的温度为80～95℃。步骤(b)、步骤(d)和步骤(f)中水的温度为80～90℃。优选地，步骤(a)中浸泡时间为30min～2h。作为一种具体的实施方式，步骤(a)中的浸泡时间为1小时。优选地，步骤(b)中的保持时间为30min～2h。作为一种具体的实施方式，步骤(b)中的保持时间为60min。优选地，步骤(d)中的保持时间为20min～1h。作为一种具体的实施方式，步骤(b)中的保持时间为40min。优选地，步骤(f)中的保持时间为10min～1h。作为一种具体的实施方式，步骤(b)中的保持时间为30min。作为一种实施方式，所述浸取皂苷和多糖的方法，采用多级错流浸取，至少包括以下步骤：(a)将锁阳片置于0℃～30℃的水中，直接浸泡或者于超声中浸泡不少于30min，得到体系I；(b)加热步骤(a)所得体系I至80℃～100℃，并于超声和/或微波下进行多级错流浸取，每级浸取时间不少于30min；(c)收集并混合步骤(b)中多级浸取后的各级液相，并置于2～8℃不少于24h后经滤渣、真空旋转蒸发至膏状，即得皂苷和多糖粗品。优选地，所述多级错流浸取为三级错流浸取，其中，第一级浸取中锁阳片与水的质量比例＝1:5～7；第二级浸取中锁阳片与水的质量比例＝1:4～6；第三级浸取中锁阳片与水的质量比例＝1:3～5。进一步优选地，所述多级错流浸取为三级错流浸取，其中，第一级浸取中锁阳片与水的质量比例＝1:6；第二级浸取中锁阳片与水的质量比例＝1:5；第三级浸取中锁阳片与水的质量比例＝1:4。作为一种实施方式，所述浸取皂苷和多糖的方法，采用连续浸取，至少包括以下步骤：(a)将锁阳片置于0℃～30℃的水中，直接浸泡或者于超声中浸泡不少于30min，得到体系I；(b)加热步骤(a)所得体系I至80℃～100℃，并于超声和/或微波下中进行连续浸取，锁阳片和水的加料质量比为1:3～7；(c)步骤(b)得到的液相提取液置于2～8℃不少于24h后经滤渣、真空旋转蒸发至膏状，即得皂苷和多糖粗品。优选地，连续浸取中固相和液相的加料质量比为1:4～6。优选地，所述连续浸取为连续逆流浸取，在逆流移动床浸取器中进行；进一步优选地，所述连续浸取为连续逆流浸取，在肯尼迪式浸取器中进行。优选地，步骤(a)中锁阳片的厚度为2～8mm。进一步优选地，步骤(a)中锁阳片的厚度为3～6mm。优选地，步骤(a)中锁阳片的含水量为1～15wt％。进一步优选地，步骤(a)中锁阳片的含水量为5～10wt％。优选地，步骤(a)中水的温度为0～25℃。进一步优选地，步骤(a)中的水温度为0～10℃。优选地，所述真空旋转蒸发为连续真空旋转蒸发。进一步优选地，所述真空旋转蒸发为在温度为80～85℃下，保持体系沸腾。更进一步优选地，所述真空旋转蒸发为在温度84℃下，保持体系沸腾。所述滤渣为过滤液相体系中的残渣，以降低皂苷和多糖粗品的涩味。所述皂苷和多糖粗品的密度为1.0～1.5g/cm3。优选地，所述皂苷和多糖粗品的密度为1.3～1.5g/cm3，如1.458g/cm3。皂苷和多糖粗品的出膏率不低于36％。作为本申请一个具体的实施方式，所述浸取皂苷和多糖的方法包括以下步骤：称取锁阳片(厚片)500g，第一次加冷水3000mL，浸泡1小时后，加热煮沸后保持微沸提取60分钟，将提取液倒出(得到提取液1100mL)；第二次加水2500mL，加热煮沸后保持微沸提取40分钟，将提取液倒出(得到提取液2000mL)；第三次加水2000mL，加热煮沸后保持微沸提取30分钟，将提取液倒出(得到提取液1600mL)。合并三次提取液，将其放置在温度为2～8℃的环境中静置24小时以上，抽取上清液，用布袋过滤除去沉淀。将部分滤液加入旋转蒸发器的烧瓶中，在温度为84℃,保持微沸的情况下，连续抽真空(降低温度可保持其中的有效成分不被破坏)，将所有滤液浓缩至粘稠状倒出，得到重量为182g的浸膏，测其密度为1.458g/cm3，浸膏中总固体为85.12％，出膏率为36.4％。根据本申请的又一方面，提供一种蜜膏，由皂苷和多糖粗品与蜂蜜混合得到。该蜜膏加水冲调，颜色呈透亮红色，口感好，并具有润肠通便、抗菌、解热、镇静、抗癌等多种功效。所述蜜膏，其特征在于，含有皂苷和多糖粗品和蜂蜜；所述皂苷和多糖粗品上述任意方法制备得到。优选地，所述皂苷和多糖粗品与蜂蜜的质量比为1:0.5～2。作为一种具体的实施方式，所述皂苷和多糖粗品与蜂蜜的质量比为1:1。本申请的有益效果包括但不限于：本申请所提供的浸取皂苷和多糖的方法，具有简单、易操作、提取分离速度快、不需要挥发性有机溶剂、环境污染小、对皂苷和多糖选择性高的优点。本申请所提供的蜜膏，口感好，并具有润肠通便、抗菌、解热、镇静、抗癌等多种功效。具体实施方式下面结合实施例详述本申请，但本申请并不局限于这些实施例。实施例中，皂苷和多糖粗品中的总皂苷含量，采用保健食品中总皂苷的方法(高效液相色谱法)测定。实施例中，皂苷和多糖粗品中的多糖含量，采用苯酚硫酸比色法测定。实施例1称取1重量份的锁阳片加冷水，于超声波或微波下(具体见表1)浸泡一段时间后，加热体系至某一温度，于超声波或微波下(具体见表1)保持一段时间(第一次热水提取)，离心分离得到固体I和提取液I；向固体I中加入一定量的水，加热至某一温度并保持一段时间(第二次热水提取)，离心分离得到固体II和提取液II；向固体II中加入一定量的水，加热至某一温度并保持一段时间(第三次热水提取)，离心分离得到固体III和提取液III。合并提取液I、提取液II和提取液III，将其放置在温度为2～8℃的环境中静置24小时以上，用布袋过滤除去沉淀后加入旋转蒸发器的烧瓶中，在某一温度下，保持微沸的情况下，连续抽真空，将所有滤液浓缩至粘稠状倒出，得到所述皂苷和多糖粗品。所得皂苷和多糖粗品的样品编号与具体超声波、微波处理的条件见表1所示，其中，样品编号G4的第二次热水提取采用同第一次热水提取相同的微波处理条件，样品编号G5的第二次和第三次热水提取采用同第一次热水提取相同的微波处理条件。表1样品编号预处理方式热水处理方式G1超声波(20kHz，100W/kg)微波(2GHz，100W/kg)G2超声波(22kHz，40W/kg)微波(2.4GHz，200W/kg)G3超声波(25kHz，30W/kg)微波(2.45GHz，250W/kg)G4超声波(30kHz，20W/kg)微波(2.5GHz，300W/kg)G5微波(3GHz，250W/kg)超声波(30kHz，20W/kg)G6超声波(50kHz，5W/kg)-G7-微波(2.45GHz，500W/kg)所得皂苷和多糖粗品的样品编号与具体反应条件的关系、所得皂苷和多糖粗品的参数详见表2。表2实施例2称取1重量份的锁阳片加冷水于10℃于超声波(22kHz，40W/kg)中浸泡1h后，加热至85℃开始在肯尼迪式浸取器中进行连续逆流浸取，固相和液相的加料质量比为1:5，所得样品记为G8。实施例3对样品G1～G7中的总皂苷和总皂苷和多糖含量进行了测定，结果如表3所示。表3样品编号总皂苷(wt％)多糖(wt％)G10.25245.28G20.23738.59G30.22836.27G40.24138.31G50.23435.45G60.20931.15G70.19827.57由表3数据可以看出，根据本申请所述方法浸取得到的皂苷和多糖粗品中，总皂苷和多糖含量高，本方法对皂苷和多糖有很好的选择性。以上所述，仅是本申请的几个实施例，并非对本申请做任何形式的限制，虽然本申请以较佳实施例揭示如上，然而并非用以限制本申请，任何熟悉本专业的技术人员，在不脱离本申请技术方案的范围内，利用上述揭示的技术内容做出些许的变动或修饰均等同于等效实施案例，均属于技术方案范围内。当前第1页1 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