本发明涉及比伐卢定药物制剂制备技术领域，特别是一种提高比伐卢定药物稳定性的方法。
背景技术：
比伐卢定(bivalirudin)是一种近年来应用于临床的直接凝血酶抑制剂，其有效抗凝成分为水蛭素衍生物片段，通过直接并特异性抑制凝血酶活性而发挥抗凝作用，作用可逆而短暂。早期的临床研究显示：比伐卢定抗凝治疗效果确切，且出血事件的发生率较低，和传统的肝素抗凝治疗相比使用更为安全。对于接受经皮冠状动脉介入治疗（PCI）的患者，比伐卢定可用于替代肝素。
比伐卢定制剂于2000年批准在美国上市，上市品种为AngiomaxTM，国内有两家获批，由于比伐卢定原料药对热敏感，对酸碱敏感，制备过程中极不稳定，主要体现在料液的配制和产品的冻干工艺上。公开专利文献CN100586422C中采用0.5mol/L的碳酸钠调整pH，需要加入大量的pH调节剂，不易控制；公开专利文献CN104146969A中报道了用氢氧化钠作为pH调节剂，由于比伐卢定原料对碱敏感，调整过程中易产生Asp9比伐卢定杂质及片段杂质；公开专利文献CN104338117A中所采用的冻干法预冻温度为-30℃，预冻缓慢，产品溶解速度慢；公开专利文献CN102813908A采用了退火的方法提高制剂的稳定性，虽然有一定的改善，但操作复杂，改善不明显。
技术实现要素：
本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供一种新的提高比伐卢定药物稳定性的方法，该方法操作简单，能大大提高其稳定性。
本发明所要解决的技术问题是通过以下的技术方案来实现的。本发明是一种提高比伐卢定药物稳定性的方法，其特点是：将比伐卢定原料药制成冻干液，然后通过超低温真空冷冻干燥法制备得到比伐卢定冻干粉针；干燥前用1.0~2.0 mol/L的碳酸氢钠溶液调整冻干液的pH至5.0~6.0；超低温真空冷冻干燥过程中：预冻温度为-188℃~-55℃，升华干燥温度为-40℃~10℃，解析干燥温度为10℃~60℃。
本发明所述的提高比伐卢定药物稳定性的方法技术方案中，进一步优选的技术方案或者技术特征是：干燥前用1.0~2.0 mol/L的碳酸氢钠溶液调整冻干液的pH至5.3~5.7。
本发明所述的提高比伐卢定药物稳定性的方法技术方案中，进一步优选的技术方案或者技术特征是：干燥前用1.5 mol/L的碳酸氢钠溶液调整冻干液的pH至5.5。
本发明所述的提高比伐卢定药物稳定性的方法技术方案中，进一步优选的技术方案或者技术特征是：干燥时，预冻阶段采用液氮作预冻料液。
本发明所述的提高比伐卢定药物稳定性的方法技术方案中，进一步优选的技术方案或者技术特征是：超低温真空冷冻干燥过程中：预冻温度-180℃~-60℃，升华干燥温度-20℃~1℃，解析干燥温度20℃~45℃。
本发明所述的提高比伐卢定药物稳定性的方法技术方案中，进一步优选的技术方案或者技术特征是：超低温真空冷冻干燥过程中：预冻温度-180℃~-80℃。
本发明所述的提高比伐卢定药物稳定性的方法技术方案中，进一步优选的技术方案或者技术特征是：超低温真空冷冻干燥过程中：真空度设定为极限真空~1.0 mbar。
本发明所述的提高比伐卢定药物稳定性的方法技术方案中，进一步优选的技术方案或者技术特征是：制成冻干液的步骤如下：将比伐卢定原料药用水与/或甘露醇溶解，加入适量的稳定剂，加入1.0~2.0 mol/L的碳酸氢钠溶液调整其pH至5.0~6.0；再经0.22um滤膜过滤，装瓶即得。
本发明所述的提高比伐卢定药物稳定性的方法技术方案中，进一步优选的技术方案或者技术特征是：比伐卢定原料药与甘露醇的质量比为2.0－2.5：1；比伐卢定原料药与水的质量体积比为(250－300)g：（900－5000）mL。
本发明所述的提高比伐卢定药物稳定性的方法技术方案中，进一步优选的技术方案或者技术特征是：比伐卢定原料药与甘露醇的质量比为2.19：1；比伐卢定原料药与水的质量体积比为274g：（900－5000）mL。
与现有技术相比，本发明方法针对比伐卢定易降解这一特点，采用碳酸氢钠作为pH调整剂，其更温和，pH调节降低料液配制过程中产生的降解，能有效降低降解几率；采用超低温冷冻干燥提高产品溶解速度，降低产品水分含量，提高产品稳定性。经实验验证，本发明方法经冻干后的即为注射用比伐卢定制剂，该制剂的质量及稳定性有了显著的提高。提高了产品的均一性，降低了用药风险。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行详细描述，本部分的描述仅是示范性和解释性，不应对本发明的保护范围有任何的限制作用。
实施例1，一种提高比伐卢定药物稳定性的方法：将比伐卢定原料药制成冻干液，然后通过超低温真空冷冻干燥法制备得到比伐卢定冻干粉针；干燥前用1.0 mol/L的碳酸氢钠溶液调整冻干液的pH至5.0；超低温真空冷冻干燥过程中：预冻温度为-188℃~-55℃，升华干燥温度为-40℃~10℃，解析干燥温度为10℃~60℃。
实施例2，一种提高比伐卢定药物稳定性的方法：将比伐卢定原料药制成冻干液，然后通过超低温真空冷冻干燥法制备得到比伐卢定冻干粉针；干燥前用2.0 mol/L的碳酸氢钠溶液调整冻干液的pH至6.0；超低温真空冷冻干燥过程中：预冻温度为-188℃~-60℃，升华干燥温度为-30℃~5℃，解析干燥温度为20℃~50℃。
实施例3，一种提高比伐卢定药物稳定性的方法：将比伐卢定原料药制成冻干液，然后通过超低温真空冷冻干燥法制备得到比伐卢定冻干粉针；干燥前用1.5 mol/L的碳酸氢钠溶液调整冻干液的pH至5.5；超低温真空冷冻干燥过程中：预冻温度为-188℃~-70℃，升华干燥温度为-20℃~5℃，解析干燥温度为10℃~50℃。
实施例4，一种提高比伐卢定药物稳定性的方法：将比伐卢定原料药制成冻干液，然后通过超低温真空冷冻干燥法制备得到比伐卢定冻干粉针；干燥前用1.2 mol/L的碳酸氢钠溶液调整冻干液的pH至5.7；超低温真空冷冻干燥过程中：预冻温度为-180℃~-80℃，升华干燥温度为-25℃~5℃，解析干燥温度为20℃~40℃。
实施例5，实施例1－4任何一项所述的一种提高比伐卢定药物稳定性的方法中：干燥时，预冻阶段采用液氮作预冻料液。
实施例6，实施例1所述的一种提高比伐卢定药物稳定性的方法中：超低温真空冷冻干燥过程中：预冻温度-180℃~-60℃，升华干燥温度-20℃~1℃，解析干燥温度20℃~45℃。其余与实施例1相同。
实施例7，实施例1－6任何一项所述的一种提高比伐卢定药物稳定性的方法中：超低温真空冷冻干燥过程中：真空度设定为极限真空~1.0 mbar。
实施例8，实施例1－7任何一项所述的一种提高比伐卢定药物稳定性的方法中：制成冻干液的步骤如下：将比伐卢定原料药用水与/或甘露醇溶解，加入适量的稳定剂，加入碳酸氢钠溶液调整pH；再经0.22um滤膜过滤，装瓶即得。
实验例1，1 ml注射用比伐卢定(Bivalirudin)的制备实验：
取274g比伐卢定原料药加入900mL水中，加入甘露醇125g,充分溶解，使用2mol/L的碳酸氢钠溶液，调整料液pH至5.5，然后定容至1000 mL，0.22um滤膜过滤后分装于10 mL西林瓶中，每支1 mL，冻干得到比伐卢定制剂。
冻干方法为：预冻：开启冻干机，液氮预冻，将板层温度设定为-60℃，维持预冻3小时；升华干燥：真空设定0.3 mbar，温度设定为0℃，维持8 h；解析干燥：设定温度30℃，真空度0.1 mbar，时间为6 h。
实验例2，2 ml注射用比伐卢定的制备实验：
取274g比伐卢定原料药加入1900mL水中，加入甘露醇125g,充分溶解，使用2 mol/L的碳酸氢钠溶液，调整料液pH至5.5，然后定容至2000 mL，0.22um滤膜过滤后分装于10 mL西林瓶中，每支2 mL，冻干得到比伐卢定制剂。
冻干方法为：预冻：开启冻干机，液氮预冻，将板层温度设定为-60℃，维持预冻3小时；升华干燥：真空设定0.3 mbar，温度设定为0℃，维持9 h；解析干燥：设定温度30℃，真空度0.1 mbar，时间为6 h。
实验例3：3 ml注射用比伐卢定的制备：
取274g比伐卢定原料药加入2900mL水中，加入甘露醇125g,充分溶解，使用2 mol/L的碳酸氢钠溶液，调整料液pH至5.5，然后定容至3000 mL，0.22um滤膜过滤后分装于10 mL西林瓶中，每支3 mL，冻干得到比伐卢定制剂。
冻干方法为：预冻：开启冻干机，液氮预冻，将板层温度设定为-60℃，维持预冻3小时；升华干燥：真空设定0.3 mbar，温度设定为0℃，维持10 h；解析干燥：设定温度30℃，真空度0.1 mbar，时间为6 h。
实验例4：5 ml注射用比伐卢定的制备方法实验：
取274g比伐卢定原料药加入4900mL水中，加入甘露醇125g,充分溶解，使用2 mol/L的碳酸氢钠溶液，调整料液pH至5.5，然后定容至5000 mL，0.22um滤膜过滤后分装于10 mL西林瓶中，每支5 mL，冻干得到比伐卢定制剂。
冻干方法为：预冻：开启冻干机，液氮预冻，将板层温度设定为-60℃，维持预冻3小时；升华干燥：真空设定0.3 mbar，温度设定为0℃，维持12 h；解析干燥：设定温度30℃，真空度0.1 mbar，时间为6 h。
对比例1：采用氢氧化钠调整pH制备注射用比伐卢定对比实验
取274g比伐卢定原料药加入2900mL水中，加入甘露醇125g,充分溶解，使用2 mol/L的氢氧化钠溶液，调整料液pH至5.5，然后定容至3000 mL，0.22um滤膜过滤后分装于10 mL西林瓶中，每支3 mL，冻干得到比伐卢定制剂。
冻干方法为：预冻：开启冻干机，液氮预冻，将板层温度设定为-60℃，维持预冻3小时；升华干燥：真空设定0.3 mbar，温度设定为0℃，维持10 h；解析干燥：设定温度30℃，真空度0.1 mbar，时间为6 h。
对比例2：采用常规低温冻干法制备注射用比伐卢定对比实验：
取274g比伐卢定原料药加入2900mL水中，加入甘露醇125g,充分溶解，使用2 mol/L的碳酸氢钠溶液，调整料液pH至5.5，然后定容至3000 mL，0.22um滤膜过滤后分装于10 mL西林瓶中，每支3 mL，冻干得到比伐卢定制剂。
冻干方法为：预冻：开启冻干机，硅油加热，将板层温度设定为-30℃，维持预冻3小时；升华干燥：真空设定0.3 mbar，温度设定为0℃，维持12 h；解析干燥：设定温度30℃，真空度0.1 mbar，时间为6 h。
对比实验例1~4和对比例1~2，测试结果如下：
实验结果标明，选择碳酸氢钠作为pH调节剂，可以降低降解杂质的产生，采用超低温冻干法，可以降低产品水分含量，提高复溶速度。
对比实验例3和对比例2，做加速试验，6个月加速试验参见中国药监局网站“化学药物稳定性研究技术指导原则”。稳定性结果如下：
结果标明，采用超低温冻干法冻干注射用比伐卢定，冻干水分含量低，稳定性好。