鼻用组合物的制作方法

发明的
技术领域：
本发明涉及鼻用组合物。具体地，本发明涉及可以用于抑制肥大细胞的活化的鼻用组合物。更具体地，本发明涉及具有用于预防和/或治疗鼻腔过敏性疾病，如季节性过敏性鼻炎和常年性过敏性鼻炎的功效的抗过敏鼻用组合物。发明背景作为鼻粘膜的疾病，过敏性鼻炎的病因大体上是已知的。免疫反应的发生主要是由于特异性介质引发患者的局部和全身作用。主要是组织肥大细胞受到攻击，其特征尤其在于外部细胞膜中的非特异性和特异性受体(例如免疫球蛋白e)。过敏原与这些受体的结合导致组胺和其他炎性介质如白三烯和前列腺素的释放。由于这些介质的作用，血管的肌肉组织变得松弛，血管和膜的通透性增加，并且发生支气管肌肉组织收缩。过敏性鼻炎的症状由这些反应产生：鼻粘膜和结膜的局部发红和肿胀，以及流体进入组织的发生增加，和所导致的鼻和眼中的分泌物增加。也可能发生全身作用，例如心血管系统的低渗状态。这种效应的级联主要由外源性物质如花粉、室内尘埃、动物毛发、食物成分、药物制剂或螨，或者由在生物体中由于对花粉或其它外来物质的反应而自身形成的抗体触发。这是一种非常频繁遭遇的疾病：1992/1993年对2,400名在校学生进行的一项调查显示，在前一年中13.5％患过枯草热。花粉过敏是首要的特应性疾病。过敏性鼻炎的治疗基于三个主要原则：过敏原限制，药物治疗(仅对症)和特异性免疫治疗(脱敏)。采取因果效应的过敏原限制旨在避免或减少患者对过敏原的暴露，以避免与肥大细胞接触。这包括日常生活行为中的措施，例如保持门窗关闭，在空调系统中安装花粉过滤器，不在露天做运动，在其他气候带度假等。然而，就患者及其周围环境而言，这要求高水平的依从性。该方法特别是在预防方面有效。药物治疗相当复杂和昂贵，并且作为一般规则，还必须进行减少过敏原暴露的尝试。超敏反应是可能的。因果有效的脱敏作用特别需要高水平的诊断工作，其是复杂的，是患者的负担(因为在长时段内定期注射)，并且不证明任何持续的或可靠的可再现的效果。在第ep1343472号欧洲专利中已经提供并描述了使得另外的形式的治疗成为可能的制剂，其显示出低副作用并且其以简单的方式(特别是在预防方面)起效，并且使得过敏原限制成为可能。该专利文献公开了一种触变性制剂，特别是触变性鼻用喷雾剂，其不含活性物质，用于人或动物体中的治疗性处理，特别是用于鼻部疾病的治疗性处理，所述鼻部疾病特别是过敏性鼻炎。由于触变性制剂能够在鼻腔中形成防止过敏原进入其中的物理屏障，所以该组合物在减少受试者暴露于过敏原和避免其与肥大细胞接触方面是有效的。然而，当破坏性鼻炎症状已经存在时，这种触变性制剂可能不那样有效。因此，对于用于鼻腔过敏性疾病如过敏性鼻炎，包括花粉症的，例如具有增强的预防和/或治疗效果的另外的抗过敏组合物存在持续的需求。发明概述本发明目的是提供一种具有活性成分的特定组合的鼻用组合物，所述活性成分包括天然抗过敏物质。在某些实施方案中，本发明的鼻用组合物的目的提供改善的产品性能，特别是其屏障功能以及可喷雾性和改善的喷雾图案，并因此在鼻腔的过敏性疾病，包括季节性过敏性鼻炎和常年性过敏性鼻炎的预防和治疗中产生增强的功效。在某些实施方案中，本发明的鼻用组合物的目的是提供一种具有协同作用的活性成分的特定组合的组合物，以提供增强的抗过敏作用。在某些实施方案中，本发明的鼻用组合物的目的是抑制肥大细胞活化和/或肥大细胞脱粒和/或从肥大细胞释放组胺。根据第一方面，提供了包含源自植物的抗过敏油和油基屏障形成制剂的鼻用组合物。用于鼻用组合物的抗过敏油可以源自紫苏属(perillaspp.)、黑种草属(nigellaspp.)、荨麻属(urticaspp.)、紫云英属(astragalusspp.)、蜂斗叶属(petasitesspp.)、柑橘属(citrusspp.)、钩藤属(uncariaspp.)、熏衣草属(lavandulaspp.)、薄荷属(menthaspp.)、桉属(eucalyptusspp.)、母菊属(matricariaspp.)、迷迭香属(rosmarinusspp.)、姜黄属(curcumaspp.)、葱属(alliumspp.)的植物，或其任意两种或更多种的组合。前面描述中所述的抗过敏油可以从植物的种子、根、叶或整个植物部分获得。组合物的油基屏障形成制剂可以包含三种组分，所述三种组分为油性组分；一种或多种凝胶形成剂，例如，用于触变凝胶的凝胶形成剂；和水基质。第一组分，即油性组分，可以是烃，植物油，蔬菜油，或其水合、聚氧乙基化或聚氧或水合聚氧或分馏的衍生物，或其任意两种或更多种的组合。优选地，所述油性组分为芝麻油。抗过敏油和油性组分可以以1-10:10-1的重量比范围存在。在某些实施方案中，抗过敏油和油性组分优选为不同的物质，即鼻用组合物不包含同一种油既作为抗过敏油又作为油性组分。组合物的油基屏障形成制剂的第二组分是一种或多种凝胶形成剂，例如，一种或多种用于触变凝胶的凝胶形成剂，其可以选自有机悬浮介质和无机悬浮介质，或其组合。优选地，所述一种或多种用于触变凝胶的凝胶形成剂可以包含黄原胶、膨润土、单硬脂酸甘油酯或其任意两种或更多种的组合。第三组分，即水基质，可以是水或具有稳定添加剂的水。在某些实施方案中，鼻用组合物的油基屏障形成制剂为水包油乳液或微乳液。鼻用组合物可以以鼻用喷雾剂的形式制备。优选地，鼻用组合物可以提供基本上环形或圆形的喷雾图案，如可以根据本文所述的可喷雾性测试方法测定的。优选地，在鼻腔中形成的喷雾图案的覆盖面积在约70％至95％的范围内。更优选地，基本上环形的喷雾图案具有0.5cm至12.0cm的环形环宽度范围，喷雾起点与被撞击表面之间的距离为0.1cm至10.0cm。在某些实施方案中，基本上环形的喷雾图案具有0.5cm至12.0cm的环形环宽度范围，喷雾起点与被撞击表面之间的距离为7.0cm。在这样的实施方案中，每次喷雾的单位剂量可以为约120μl至约160μl。根据第二方面，提供了药物组合物，其包含根据第一方面的组合物和药学上可接受的载体、赋形剂、稀释剂和/或添加剂。用于该药物组合物的药学上可接受的载体、赋形剂和/或稀释剂可以选自粘合剂、表面活性剂、防腐剂、着色剂、调味物质、ph调节剂、渗透活性的调节剂和成盐基团。根据第三方面，提供了用于抑制肥大细胞活化的治疗方法的根据第一方面的鼻用组合物或根据第二方面的药物组合物。根据另外的方面，提供了用于抑制肥大细胞活化的治疗方法，其包括使肥大细胞与根据第一方面的鼻用组合物或根据第二方面的药物组合物接触。根据第四方面，提供了用于抑制肥大细胞脱粒的治疗方法的根据第一方面的鼻用组合物或根据第二方面的药物组合物。根据另外的方面，提供了用于抑制肥大细胞脱粒的治疗方法，其包括使肥大细胞与根据第一方面的鼻用组合物或根据第二方面的药物组合物接触。根据第五方面，提供了用于抑制从肥大细胞释放组胺的治疗方法的根据第一方面的鼻用组合物或根据第二方面的药物组合物。根据另外的方面，提供了用于抑制从肥大细胞释放组胺的治疗方法，其包括使肥大细胞与根据第一方面的鼻用组合物或根据第二方面的药物组合物接触。根据第六方面，提供了用于在预防和/或治疗鼻腔的过敏性疾病，包括季节性过敏性鼻炎和常年性过敏性鼻炎的根据第一方面的鼻用组合物或根据第二方面的药物组合物。根据第七方面，提供了用于抑制肥大细胞活化的治疗方法，其包括给予肥大细胞根据第一方面的鼻用组合物或根据第二方面的药物组合物。根据第八方面，提供了用于抑制肥大细胞脱粒的治疗方法，其包括给予肥大细胞根据第一方面的鼻用组合物或根据第二方面的药物组合物。根据第九方面，提供了抑制从肥大细胞释放组胺的治疗方法，其包括给予肥大细胞根据第一方面的鼻用组合物或根据第二方面的药物组合物。在本发明的任何方面的某些实施方案中，在给予根据第一方面的鼻用组合物或根据第二方面的药物组合物后，受试者的组织中的组胺浓度降低至少约20％。在某些实施方案中，在给予根据第一方面的鼻用组合物或根据第二方面的药物组合物后，受试者的组织中的组胺浓度降低至少约40％。在某些实施方案中，在给予根据第一方面的鼻用组合物或根据第二方面的药物组合物后，受试者的组织中的组胺浓度降低至少约50％。根据第十方面，提供了用于预防和/或治疗受试者的鼻腔过敏性疾病，包括季节性过敏性鼻炎和常年性过敏性鼻炎的方法，其包括给予受试者有效量的根据第一方面的鼻用组合物或根据第二方面的药物组合物。根据第十一方面，提供了源自植物的抗过敏油和油基屏障形成制剂在制备用于预防和/或治疗鼻腔的过敏性疾病，包括季节性过敏性鼻炎和常年性过敏性鼻炎的药物、药物组合物或鼻用组合物中的用途。附图简述图1是由如本发明的优选实施方案之一中所述的鼻用组合物形成的喷雾图案的一组照片，其中使用不同比例的抗过敏油和油性组分：(a)仅芝麻油，没有抗过敏油；(b)重量比为1:3的紫苏油和芝麻油；(c)重量比为1:1的紫苏油和芝麻油；(d)重量比为3:1的紫苏油和芝麻油；和(e)紫苏油既作为抗过敏油又作为油性组分。图2是用于如本发明的优选实施方案之一中所述的鼻用喷雾剂组合物的可喷雾性测试的装置设置的示意图。图3是显示用各种化合物处理后组胺释放的图。发明详述在下文中，将根据本发明的优选实施方案并通过参考所附描述和附图来描述本发明。然而，应该理解的是，将描述限制为本发明的优选实施方案仅仅是为了便于讨论本发明，并且设想本领域技术人员可以在不背离所附权利要求的范围的情况下做出各种修改。在上文和下文中通常使用的术语优选具有以下所示的含义，除非另有说明，由此在本发明的优选实施方案中可以相互独立地使用更具体的含义，而不是一般的定义，这些更具体的意义描述了尤其优选的本发明的实施方案。在上文和下文中出现术语“至少一个”或“一个或多个”的情况下，这特别表示一至十个，优选一至三个，且特别是一个或另外两个所列举的特征，例如组分。在显示范围，如重量百分比范围的情况下，这些范围包括所示的极限值；因此，例如，“在x和y之间”表示“从x(含x)直到y(含y)”。术语“产品”应理解为尤其是指在制剂意义上的药品，优选药品，由此该术语不限于适合注册的药品或医疗产品或虚拟药物。“产品”在制剂意义上还特别地指营养品，优选医疗器械、基于天然的产品等类别的营养品产品。术语“抗过敏”应理解为涉及预防、抑制或减轻过敏反应的药剂或措施。术语“触变性制剂”应理解为是指特征在于当经受剪切力(摇动、挤压通过喷嘴、搅拌等)时的低粘度(溶胶状态)的制剂，尤其适合用作滴鼻剂或特别是用作鼻用喷雾剂，所述粘度例如在低剪切下范围为50-300pa.s，并且在高剪切下为<150pa.s。在稳定性测试的实例中，在静止状态下，粘度范围可以为1-15pa.s，例如8-10pa.s。测量是借助旋转粘度计进行的，并且读数可能受设备和方法之间的差异的影响。术语“治疗性处理”还包括预防和减轻受试者的症状，但不是美容性处理。这涉及与肥大细胞活化和/或肥大细胞脱粒相关的鼻腔疾病的治疗性处理，特别是与肥大细胞活化和/或肥大细胞脱粒相关的鼻腔疾病的预防或缓解。这涉及上鼻道，特别是鼻咽和鼻腔的疾病(上下文中的“鼻部疾病”)的治疗性处理，且特别是预防或缓解，并且特别用于治疗和预防位于其中的过敏过程，如特别是过敏性鼻炎，包括季节性过敏性鼻炎(也称为花粉症)，以及由室内尘埃或动物毛发过敏引起的常年性过敏性鼻炎。关于本发明的鼻用组合物或药物组合物，术语“可喷雾性”是指鼻用组合物或药物组合物能够通过喷雾给予。在某些实施方案中，如可根据本文所述的可喷雾性测试方法测定的，“可喷雾性”是指所形成的喷雾图案具有0.5cm至12cm的环形环宽度范围，喷雾起点与被撞击表面之间的距离为0.1cm至10cm，例如7cm，其中被撞击表面是垂直保持在喷雾起点以上的平面。上文和下文中提及的组分特别选自如在药典，例如在美国药典国家处方集、欧洲药典、瑞士药典(pharmacopoeahelvetica)、英国药典或德国药典或增补中，如以法令的形式列出的那些。本发明涉及包含源自植物的抗过敏油和油基屏障形成制剂的鼻用组合物。组合物的油基屏障形成制剂能够通过提供“机械”屏障，提供针对鼻部疾病，特别是过敏性鼻炎的积极作用。不希望仅仅局限于这种解释，看来针对引起过敏性鼻炎的过敏原的作用是基于“机械的”阻断功能(特别是由于含有的油性成分和/或凝胶的粘度)，该功能可以由屏障形成制剂提供，由于凝胶在粘膜上的基本均匀的分布，过敏原因此不再能直接在鼻粘膜上扩散，且因此不与肥大细胞接触。结果，上述过敏反应被完全消除或减弱。阻断功能在给予后直接发生。用于鼻用组合物中的抗过敏油优选是具有抗过敏特性的天然物质。该抗过敏油可以源自以下：紫苏属(例如，白苏(perillafrutescens)，其也被称为紫苏(perilla)、七里香(chinesebasil)、牛排草(beefsteak)等)、黑种草属(例如，黑种草(nigellasativa)，其也被称为黑小茴香(blackcumin)、黑页蒿(blackcaraway)或茴香子(fennelseed))、荨麻属(例如，荨麻)、紫云英属(例如，紫云英)、蜂斗叶属(例如，蜂斗菜)、柑橘属(例如，柠檬)、钩藤属(例如，猫爪草)、熏衣草属(例如，薰衣草)、薄荷属(例如，薄荷)、桉属(例如，蓝桉树(eucalyptusglobulus)，其也被称为塔斯马尼亚蓝桉(tasmanianbluegum)、南部蓝桉(southernbluegum)或蓝桉(bluegum))、母菊属(例如，德国洋甘菊)、迷迭香属(例如，迷迭香)、姜黄属(例如，姜黄)、葱属(例如，大蒜)的植物，或其任意两种或更多种的组合。前面描述中所述的抗过敏油可以从前述描述中列出的植物的种子、根、叶或整个植物部分获得。例如，抗过敏油是源自紫苏属植物种子的紫苏油，和/或源自黑种草属植物种子的黑种草籽油。添加到油基屏障形成制剂或与其组合的抗过敏油能够通过控制能够破坏凝胶屏障的稳定性的症状，改善屏障形成的性能。此外，通过改变油基屏障形成制剂的物理和化学性质，将源自植物的油加至油基屏障形成制剂也能够提高产品特性，特别是其可喷雾性。组合物的油基屏障形成制剂可以包含三种组分，所述三种组分是油性组分，一种或多种凝胶形成剂，例如一种或多种用于触变凝胶的凝胶形成剂，以及水基质。第一组分，即油性组分，可以是烃，植物油，蔬菜油，或其水合、聚氧乙基化或聚氧或水合聚氧或分馏的衍生物，或其任意两种或更多种的组合。适合用作本发明的油性组分的烃的实例包括矿物油，特别是石蜡、石蜡油(特别是白石蜡油，低粘度或在更宽泛的实施方案中的高粘度石蜡油)、鸭子尾脂腺油、全氢鲨烯、硬石蜡或凡士林，由此低粘度石蜡油是非常优选的。另一方面，也可以使用蔬菜油，如留兰香油、扁桃仁油、花生油、小麦胚芽油、菜籽油、亚麻子油、杏仁油、核桃油、棕榈油、开心果油、芝麻油、罂粟子油、松油、蓖麻油、豆油、鳄梨油、可可油、榛子油、橄榄油、葡萄籽油、米糠油、玉米胚芽油、桃仁油、咖啡油、荷荷巴油、葵花籽油、蓟籽油、可可脂等，或其水合、聚氧乙基化或聚氧或水合聚氧衍生物或分馏的衍生物。优选地，油性组分是这些油或其衍生物中的两种或更多种的混合物。优选地，油性组分为芝麻油。根据本发明的某些实施方案，油性组分可以是前述说明中所述的植物油。该植物油可以选自源自以下的油：紫苏属(例如，白苏，其也被称为紫苏、七里香、牛排草等)、黑种草属(例如，黑种草，其也被称为黑小茴香、黑页蒿或茴香子)、荨麻属(例如，荨麻)、紫云英属(例如，紫云英)、蜂斗叶属(例如，蜂斗菜)、柑橘属(例如，柠檬)、钩藤属(例如，猫爪草)、熏衣草属(例如，薰衣草)、薄荷属(例如，薄荷)、桉属(例如，蓝桉树，其也被称为塔斯马尼亚蓝桉、南部蓝桉或蓝桉)、母菊属(例如，德国洋甘菊)、迷迭香属(例如，迷迭香)、姜黄属(例如，姜黄)、葱属(例如，大蒜)的植物，或其任意两种或更多种的组合。在某些实施方案中，油性组分包含源自紫苏属和/或黑种草属植物的植物油，或为源自紫苏属和/或黑种草属植物的植物油。由于源自植物的抗过敏油包含高含量的油性组分并且除了能够提供抗过敏作用之外，还能够作为屏障的组成组分发挥作用，因此其适合用于制剂。此外，这些植物油在理论上可与前面描述中所述的油性组分互换，以形成物理凝胶屏障。根据本发明的实施方案还可以使用的油性组分的另外的实例是动物油、饱和或不饱和酯、高级醇和/或硅油，或这些组分中的两种或更多种的混合物。为了加强在粘膜上的保留，也可以将蜡和一种或多种油，如上文所定义的那些一起使用，以形成油性组分的部分。适合的蜡的实例包括巴西棕榈蜡、白蜂蜡、黄蜂蜡、虫白蜡、日本蜡、小烛树蜡、微晶蜡、羊毛蜡和地蜡。单独地，如在前面的描述中所述的每种类型的油可以作为油性组分促进成品制剂的触变性质。然而，每种油在气味、外观、在20℃下的比重、皂化值、折射率和脂肪酸组成方面具有其独特的规格。由于化学和物理特性(特别是脂肪酸组成)的差异，当以最佳比例使用时，天然种子油(紫苏油和黑草种子油)被认为是触变性制剂的调节剂，因为它们能够改变成品制剂的规格，如粘度、密度、质量均匀性，这最终会影响产品的性能和功效。例如，粘度会影响产品在施用时形成不可渗透的防护屏障的速度或速率；而质量的密度和均匀性将影响在施用到鼻腔中的过程中的产品的分布和喷雾图案。油性组分在成品制剂(即鼻用组合物或药物组合物)中优选具有约10％至约80％，特别是约40％至约70％，或约10％至约60％，或约10％至约50％，或约10％至约40％，或约10％至约30％，或约10％至约25％的按重量计的比例。抗过敏油在成品制剂(即鼻用组合物或药物组合物)中优选具有约10％至约80％，特别是约40％至约70％，或约10％至约60％，或约10％至约50％，或约10％至约40％，或约10％至约30％，或约10％至约25％的按重量计的比例。根据本发明的优选实施方案，抗过敏油和油性组分可以以1:10至10:1，例如，约1:9至约9:1，或约1:8至约8:1，或约1:7至约7:1，或约1:6至约6:1，或约1:5至约5:1，或约1:4至约4:1，或约1:3至约3:1，或约1:2至约2:1，或约1:1的重量比范围存在。在本发明的某些实施方案中，鼻用组合物可以包含紫苏油作为抗过敏油以及芝麻油作为油基屏障形成制剂的油性组分。紫苏油与芝麻油的重量比可以在约1:10至10:1，例如，约1:9至约9:1，或约1:8至约8:1，或约1:7至约7:1，或约1:6至约6:1，或约1:5至约5:1，或约1:4至约4:1，或约1:3至约3:1，或约1:2至约2:1，或约1:1的范围内。在某些实施方案中，紫苏油与芝麻油的重量比在约1:3至3:1的范围内。优选地，鼻用组合物中的油(抗过敏油和油性组分)的总比例的范围可以为组合物的按重量计约10-80％，或按重量计约20-80％，或按重量计约30-70％，或按重量计约30-60％，或按重量计约35-55％，或按重量计约40-55％，或组合物的按重量计的约40-50％。令人惊讶的是，油(抗过敏油和油性成分)的混合物导致改进的喷雾图案。这种改进的喷雾图案在鼻部应用中提供更均匀的成膜，并最终提供更好的针对过敏原的防护。组合物的油基屏障形成制剂的第二组分是用于凝胶，例如触变凝胶的凝胶形成剂(多种凝胶形成剂)。在某些实施方案中，触变凝胶提供了产生悬浮液的作用，这可以赋予制剂触变性质。用于触变凝胶的凝胶形成剂可以选自有机悬浮介质和无机悬浮介质或其组合。有机悬浮介质可以是：(i)多糖，特别是纤维素(特别是微晶纤维素，如(fmccorporation,philadelphia,usa))或纤维素衍生物，如羧甲基纤维素或其盐(特别是碱金属盐，如钠盐)，其单独或以与微晶纤维素、甲基纤维素、瓜尔豆胶、黄蓍胶或糊精酯的混合物的形式；(ii)不属于多糖的聚合物化合物，特别是聚乙烯醇，聚丙烯酸酯，如聚丙烯酸或聚甲基丙烯酸酯(特别是交联的)，具有交替的亲水和疏水性嵌段的聚丙烯酸酯嵌段共聚物，如特别是hypane水凝胶(kingstontechnologyinc.,n.y.,usa)；或(iii)其他有机凝胶形成剂，例如氧乙基化(＝聚氧乙基化)多元醇脂肪酸酯，特别是烷基-(尤其是甲基-)单糖-c6-c24脂肪酸酯或其混合物(单独或以与适宜的非氧乙基化多元醇-脂肪酸酯，特别是甲基-单糖-c6-c24脂肪酸酯或甲基葡糖苷-倍半硬脂酸酯(＝单硬脂酸酯和二硬脂酸酯的混合物)的混合物的形式，或用环氧乙烷氧乙基化的，优选地以2至50mol，或特别是20mol的量用环氧乙烷氧乙基化的，具有20mol添加的环氧乙烷，例如以商品名“giucamatesse”得自amercholcorp.(dupont,edison,nj,usa；casno.68389-70-8)，或其与甲基葡糖苷-倍半硬脂酸酯的混合物(例如以商品名“giucamatesse”(amerchol；casno.68389-70-8)可得)。优选地，这是以按重量计10:1至1:10，特别是3:1至1:3，例如1:1的比例混合的；其他是磷酸二酯的金属盐和有机聚硅氧烷的混合物，其用含硅的磷酸二酯的多价金属盐衍生化。另一方面，可用作用于触变凝胶的凝胶形成剂的无机悬浮介质包括形成胶体的高岭土，特别是(特别是水合的)金属氧化物硅酸盐，如膨润土，或(优选高度分散的胶体的)呈干燥或优选水合形式的二氧化硅，三层粘土材料，如蒙脱石，特别是具有三八面体配位阳离子的合成蒙脱石，其由硅酸镁和碱阳离子制成，或者由合适的胶体镁与硅酸铝制成；或合成锂蒙脱石粘土，如(laporte,london,greatbritain)；或这些组分中的两种或更多种的混合物。根据本发明的优选实施方案之一，如(iii)中所述的有机凝胶形成剂将被用作用于鼻用组合物的触变凝胶的凝胶形成剂。优选地，本发明的鼻用组合物可以含有黄原胶和/或膨润土作为用于触变凝胶的主要凝胶形成组分，以及含有单硬脂酸甘油酯作为用于触变凝胶的乳化剂。凝胶形成剂相对于成品制剂优选以制剂的按重量计约0.1至15％，优选(特别是在有机凝胶形成剂的情况下)按重量计约0.2至10％，如按重量计约0.2至8％，或按重量计约0.2至6％，特别是按重量计约0.25至4％的重量比例存在。触变凝胶的一般优点是其易于使用，例如与热敏凝胶相比，在给予之前不需要任何限定的温度。简单摇动制剂使得凝胶成为适于给予的溶胶状态。油基屏障形成制剂的第三组分是水基质。该水基质可以是水或具有稳定添加剂的水。作为水基质，水是特别适合的，可以向其添加其它水溶性组分。所添加的水溶性组分可以是稳定添加剂，特别是乙二醇，1,2-丙二醇，糖醇，如山梨糖醇、己糖醇或甘露醇，或者特别是甘油，其能够支持和稳定凝胶的形成。具有或没有稳定添加剂的水可以本身、以与根据本发明的实施方案之一的制剂的其它成分的混合物的形式，或作为成品制剂的成分添加到制剂中作为水基质。水优选以成品制剂的按重量计约10至80％，优选约30至70％，更优选约40至60％的比例存在。稳定添加剂可以以一种或多种二元醇或多元醇，特别是甘油的形式包含在水溶性组分中，其含量范围分别优选为成品制剂的按重量计约0.1至10％。水的比例特别适合调节触变性凝胶的基本粘度。稳定剂如甘油也可以用作用于制剂的赋形剂。在某些实施方案中，鼻用组合物的油基屏障形成制剂是水包油乳液或微乳液。可以根据常规和已知的方法制备制剂，所述方法尤其包括组分的混合，如果需要逐步和/或在流体的移动和/或加热下，例如通过搅拌混合组分。首先优选以无菌初始组分开始，并且在无菌条件下进行操作；对不包含所有组分的不完整的中间阶段灭菌。在该过程结束时，如果需要，可以通过适合的常规方法使制剂经受进一步的灭菌程序。可以如上所述实现触变性的测定，并且因此根据本发明的特别有利的实施方案，关于用上述组分制备的混合物是否属于要使用的触变凝胶，可以容易地进行检查。在上下文中，对油基屏障形成制剂中的三种组分的列举不应被理解为使得这些组分必须按顺序接连添加，并且特别是不应被理解为使得水和添加剂分开混合。实际上，为了制备根据本发明的实施方案的制剂，可以以任何想得到的顺序，特别是习惯的顺序和方式混合组分。鼻用组合物可以以鼻用喷雾剂的形式制备。更特别地，触变凝胶可以配制成滴鼻剂(通常在具有吸量管的瓶子中)，或者优选配制成鼻用喷雾剂。在实施例1中进一步详述了根据本发明优选实施方案的鼻用喷雾剂产品制剂的实例。根据本发明的优选实施方案，便携式喷雾装置可以用于鼻用喷雾剂。便携式喷雾装置(或鼻用分配器)可以通过指压手动激活。适合的喷雾装置的实例可以是包括储存容器、喷雾泵和优选用于雾化的装置的那些。对于喷雾装置，还优选包含有助于摇匀作用的未固定的搅拌元件，例如小的金属颗粒或棒。喷雾装置还可以包含分配泵以及与储存容器或预压缩泵组合的简单挤压瓶。适合的泵可以是来自法国的valoissa的vp7/1oos泵(perfectvaloisvp7)和来自德国的aeropumpgmbh,hofheim/taunus的“3-kpumpe”(3-k泵)或comod系统或ap3泵。优选地，喷雾装置的剂量单位总计约1至50ml。在用于鼻用喷雾剂的便携式储存容器的情况下，优选具有约3至40ml，特别是约5至35ml的剂量单位。根据本发明的优选实施方案之一，本发明涉及包含在如上述描述中所述的便携式喷雾装置内的任选的触变性鼻用制剂。除了鼻用组合物的增强的屏障功能之外，组合物的可喷雾性也可以使用标准可喷雾性测试来测量，如实施例2中进一步详述的。抗过敏油和油性成分的不同组合的喷雾图案进一步显示在图1中。当将鼻用组合物给予到鼻腔中时，喷雾的液滴将与鼻粘膜接触以在表面上形成凝胶屏障。形成的凝胶屏障的覆盖取决于喷雾图案和液滴在鼻粘膜表面上接触的位置。因此，鼻用组合物的喷雾图案可以通过影响鼻腔上凝胶屏障的形成和覆盖而直接影响产品的功效。考虑到人体鼻腔的锥形和隧道状结构，对于鼻用组合物而言，期望的喷雾图案将是环形的，具有相对大的环形宽度和基本位于喷雾图案的中心处的小的中空，所述图案然后可以被转变成锥形和隧道状的液滴分布，这可以形成基本上覆盖鼻腔的整个表面区域的凝胶屏障，从而为鼻腔提供针对空气传播的过敏原的基本上完全的覆盖，但是留下小的中空中心，以避免溶液直接阻塞气道，和使呼吸道阻塞的不适感最小化。优选地，在鼻腔中形成的喷雾图案的覆盖面积在约70％至95％的范围内。优选地，鼻用组合物可以提供基本上环形的喷雾图案，具有约0.5cm至12.0cm的环形环宽度范围，喷雾起点与被撞击表面之间的距离为约0.1cm至10.0cm。在某些实施方案中，基本上环形的喷雾图案具有0.5至12.0cm的环形环宽度范围，喷雾起点与被撞击表面之间的距离为10.0cm。在某些实施方案中，基本上环形的喷雾图案具有至少2.5cm，例如，至少3.0cm，或至少3.5cm，或至少4.0cm的环形环宽度。在某些实施方案中，环形环宽度不超过约12.0cm，例如，不超过约10.0cm，或不超过约8.0cm，或不超过约6.0cm。理论上，喷雾图案的环形环宽度与喷雾起点到被撞击表面之间的距离成正比，即该距离越大，喷雾图案的直径越大。如实施例2中的可喷雾性测试中所示的鼻用组合物的喷雾图案的实例是以约7cm的喷雾起点到被撞击表面的距离得到的。在某些实施方案中，喷雾图案的最大直径为约2cm至约15cm，例如约5cm至约10cm。在这样的实施方案中，每次喷雾的单位剂量可以为约120μl至约160μl。如前面描述中所述，抗过敏油和油性组分可以在鼻用喷雾剂组合物中以约1:10至10:1的重量比范围存在。在本发明的优选实施方案中，抗过敏油是紫苏油，并且油性成分是芝麻油。优选地，期望的喷雾图案可以通过这些油以约1:3至3:1的重量比范围的特定组合比获得。更优选地，在鼻用喷雾剂组合物中，紫苏油和芝麻油以约1:1的重量比使用。然而，能够提供优选的环形喷雾图案的其他组合比例的油的其他组合也可以应用于本发明中。根据第二方面，提供了包含根据第一方面的组合物和药学上可接受的载体、赋形剂、稀释剂和/或添加剂的药物组合物。用于药物组合物的药学上可接受的载体、赋形剂和/或稀释剂可以选自粘合剂、表面活性剂、防腐剂、着色剂、调味物质、ph调节剂、渗透活性调节剂和成盐基团。用于本发明的鼻用组合物中的粘合剂(除了凝胶形成剂之外)可以是例如，糊精、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、聚乙烯基吡咯烷酮、明胶、果胶、淀粉或还有羧甲基纤维素钠。根据本发明的某些实施方案，粘合剂还可以提供另外的凝胶形成性质。粘合剂可以以成品制剂的按重量计优选最多约10％，或按重量计最多约5％，优选按重量计约0.1至3.0％的比例存在。表面活性剂在制剂中可以以按重量计最多约2％，例如按重量计约0.2至0.8重量％的量存在。表面活性剂可以是阴离子、阳离子、非离子、两性离子或两性洗涤剂。例如，适合的阴离子洗涤剂可以是磺酸酯，例如烷基苯磺酸酯、烷烃磺酸酯、α(alta)-烯烃磺酸酯、2-酰氧基-烷烃-1-磺酸酯或脂肪酸单甘油酯硫酸酯，硫酸酯，例如烷基硫酸酯、聚氧乙基硫酸酯、脂肪酸单甘油酯硫酸酯，或其盐(例如与碱金属、氨或铵化合物的盐)可用于组合物中。适合的阳离子去污剂的实例包括季铵化合物，例如，烷基芳基醚二甲基苯甲烃铵卤化物、烷基三甲基氯化铵、烷基二甲基乙基卤化铵、烷基吡啶鎓卤化物、烷基二甲基乙基卤化铵、烷基吡啶鎓卤化物、烷基咪唑鎓卤化物、烷基二甲基二氯苄基卤化铵、酰基钴单甲酰基醚吡啶鎓卤化物(acylcolamonoformylinetherpyridiniumhalogenide)或烷基芳基甲基吡啶鎓卤化物。非离子洗涤剂的实例包括烷基酚的聚环氧乙烷缩合物，由环氧乙烷与来自环氧丙烷和乙二胺的产物的反应得到的环氧乙烷缩合产物，脂族醇与环氧乙烷的缩合产物，或酰胺洗涤剂，其含有铵、单乙醇氨基、二乙醇氨基或其他烷醇酰胺基团。两性离子洗涤剂的实例包括含有铵和鏻或锍基团的脂族季化合物(aliphaticquaternarycompound)。适合的两性洗涤剂的实例包括脂族仲胺或叔胺。防腐剂特别是络合物形成剂，例如乙二胺四乙酸；抗氧化剂，如抗坏血酸、丁基化羟基茴香醚(bha)或丁基化羟基甲苯(bht)；或其它防腐剂，如4-羟基苯甲酸的甲酯、乙酯、丙酯或丁酯(对羟基苯甲酸酯)，苯甲酸，溴化十六烷基三甲铵，十六烷基三甲基氯化铵，山梨酸或硫柳汞等。防腐剂可以例如以按重量计最多约5％，且特别是按重量计约0.5重量％至3.5重量％的范围的重量比例(相对于成品制剂)存在。优选地，省去防腐剂以避免对鼻粘膜的自净化机制的负面影响。优选地，本发明中使用的防腐剂可以是乙二胺四乙酸(edta)、氯己定、苯扎氯铵、苯氧乙醇、苯乙醇、辛二醇、乙基己基甘油、对羟基苯甲酸酯、山梨酸钾、苯甲酸钠或聚己缩胍。另外，生育酚可以用作抗氧化剂，其可用于预防和/或减少可能发生的组合物的酸败，且因此延长产品的保质期。作为着色剂，例如可以使用诸如β-角蛋白(betaceratin)、赤藓红、暗橙红s(gelboranges)、靛蓝或柠檬黄(tartrazin)的毒理学上可接受的物质。通过添加着色剂，可以检查例如以确定根据本发明的制剂是否分布在整个鼻粘膜上。着色剂可以以例如按重量计最多约1％，且特别是按重量计约0.001％至0.200重量％的重量比例(相对于成品制剂)存在。调味物质优选不是属于醚油或植物提取物的调味物质，而是如水果调味物质(例如水果酯)或香草醛，其可以以例如成品制剂的按重量计最多约1％，且特别是按重量计约0.001％至0.500％存在。作为ph调节剂，可以使用缓冲剂添加剂，例如磷酸盐缓冲液或基于柠檬酸的缓冲液。优选地，这些用于将ph值调节到3至9，且特别是5至8，并且可以以特别是最多低于约120mm，例如约20至100mm的浓度存在。优选地，用于本发明的缓冲剂是磷酸二氢钾和/或磷酸氢二钾。作为渗透活性调节剂，可以使用例如糖或糖醇(其可以作为添加剂同时使用)或者特别是氯化钠，例如(特别是对于氯化钠)浓度最高约0.9％(按重量计的％)的氯化钠。如果在上述组分或活性物质中存在成盐基团(阴离子，如羧基、磺酰基或硫酸根)或阳离子基团(如氨基)，则它们也可以作为(特别是药学上可接受的)盐(全部或部分)存在，在阴离子基团的情况下，例如作为碱金属盐、碱土金属盐、铵盐、锌盐或锡盐存在，并且在阳离子基团的情况下，例如作为有机或无机酸，如卤化氢烃(hydrogenhalideshydrocarbons)、硫酸、磷酸、有机砜或硫酸盐或羧酸，如乙酸的盐存在，或者如果阴离子和阳离子基团都存在，则作为内盐存在。根据某些实施方案，用于本发明的鼻用喷雾剂组合物的赋形剂可以含有缓冲剂，如甘油、磷酸二氢钾和/或磷酸氢二钾；抗氧化剂，如生育酚；防腐剂，如edta、氯己定、苯扎氯铵、苯氧乙醇、苯乙醇、辛二醇、乙基己基甘油、对羟基苯甲酸酯、山梨酸钾、苯甲酸钠或聚己缩胍；和溶剂，如水。本发明的根据第一方面的鼻用组合物或根据第二方面的药物组合物还可以包含抗过敏药物或药学活性抗过敏物质，例如抗组胺剂或另外的肥大细胞稳定剂(例如色甘酸盐等)。在某些实施方案中，所述鼻用组合物或药物组合物还可以包含抗组胺剂，包括h1-抗组胺剂(例如，氮卓斯汀，奥洛他定，曲普利啶，比拉斯汀，西替利嗪，吡拉明等)、h2-抗组胺剂(例如西咪替丁、法莫替丁等)和h3-抗组胺剂(例如硫丙咪胺等)。抗组胺剂对抗受试者中组胺受体的活性，并进一步增强鼻用组合物或药物组合物中抗过敏油和油性组分(例如紫苏油和芝麻油)的肥大细胞活化抑制作用。在某些实施方案中，氮卓斯汀可用作本发明组合物中的抗组胺剂，因为它具有三重作用模式，即抗组胺剂作用、肥大细胞稳定作用和抗炎作用。例如，鼻用组合物或药物组合物可以包含按本文所述的本发明的组合物的按重量计约0.1重量％至约50重量％，或约0.01重量％至约10重量％，或约10重量％至约40重量％，或约20重量％至约30重量％的抗组胺剂。本领域技术人员了解或可以以简单的实验方式确定所提及的组分中的哪些可以彼此组合以形成根据本发明的制剂，而不会相互产生负面影响(沉淀、不存在触变特性等)。根据另外的方面，提供了根据第一方面的鼻用组合物或根据第二方面的药物组合物，其用于抑制肥大细胞活化(肥大细胞稳定化)的治疗方法。所述方法可以例如，包括使肥大细胞与根据第一方面的鼻用组合物或根据第二方面的药物组合物接触。肥大细胞通过与细胞表面上的ige受体交联由过敏原活化，通过与损伤相关的分子模式分子由物理损伤活化，通过病原体相关分子模式分子由病原体相关试剂活化，由各种化合物及其相关的g-蛋白偶联受体和/或补体蛋白活化。肥大细胞的活化导致复杂的细胞内信号传导途径发生，这导致肥大细胞的脱粒。这是存储在肥大细胞的颗粒中的分子被释放到细胞外的地方。这包括例如丝氨酸蛋白酶(例如类胰蛋白酶)，组胺，血清素和蛋白聚糖(例如肝素)。例如，抑制肥大细胞的活化可以包括这些步骤中的任何一个或多个。例如，本文公开的组合物可用于抑制肥大细胞脱粒。例如，本文公开的组合物可用于抑制从肥大细胞释放组胺。根据第一方面的鼻用组合物或根据第二方面的药物组合物可以例如，使组胺释放降低至少约20％。例如，鼻用组合物或药物组合物可以使组胺释放降低至少约30％，例如至少约40％，例如至少约50％，例如至少约60％，例如至少约70％，例如至少约75％，例如至少约80％，例如至少约85％，例如至少约90％，例如至少约95％。例如，鼻用组合物或药物组合物可使组胺释放降低最多100％，例如最多99％，例如最多98％。根据另外的方面，提供了根据第一方面的鼻用组合物或根据第二方面的药物组合物，其用于预防和/或治疗与肥大细胞活化和/或肥大细胞脱粒相关的鼻腔疾病。根据另外的方面，提供了根据第一方面的鼻用组合物或根据第二方面的药物组合物，其用于预防和/或治疗鼻腔过敏性疾病，包括季节性过敏性鼻炎和常年性过敏性鼻炎。在分别给予鼻用组合物或药物组合物后，根据第一方面的鼻用组合物或根据第二方面的药物组合物可以例如，使受试者的组织中的组胺浓度降低至少约20％。例如，在分别给予鼻用组合物或药物组合物后，鼻用组合物或药物组合物可以使受试者的组织中的组胺浓度降低至少约30％，例如至少约40％，例如至少约50％，例如至少约60％，例如至少约70％，例如至少约75％，例如至少约80％，例如至少约85％，例如至少约90％，例如至少约95％。例如，在分别给予鼻用组合物或药物组合物后，鼻用组合物或药物组合物可以使受试者的组织中的组胺浓度降低最多100％，例如最多99％，例如最多98％。根据实施方案之一，预期组胺释放的降低在给予鼻用组合物之后发生约4-6小时。受试者的组织中的组胺浓度可以通过本领域技术人员已知的任何方法来测量。例如，组胺浓度可以通过微量透析取样然后用市售的elisa试剂盒或通过hplc定量来确定。例如，局部部位的组胺浓度可以使用组织样品例如组织匀浆来测定。例如，可以使用其中过敏原已与肥大细胞接触的鼻组织(例如皮肤或鼻衬里)来确定组胺浓度。根据第三方面，提供了根据第一方面的鼻用组合物或根据第二方面的药物组合物，其用于预防和/或治疗鼻腔过敏性疾病，包括季节性过敏性鼻炎和常年性过敏性鼻炎。用于制备用于鼻部疾病的治疗性处理的产品的用途尤其包括产品(例如，作为广义或狭义意义上的药品)的适当获得；换言之，制剂的制备，尤其是其引入到喷雾装置中，其包装以及相应地提供用于治疗性处理的说明书，例如通过包装说明书和/或在包装上印刷的方式。组合物在预防和/或治疗鼻腔过敏性疾病中是有用的，因为其能够在鼻粘膜上形成机械屏障，所述机械屏障对于常见的过敏原如花粉、动物皮屑和尘螨是不可渗透的。由于乳液的触变性质而形成的屏障包含形成粘膜粘着性形成凝胶的成分(例如黄原胶和膨润土)和乳化剂(单硬脂酸甘油酯)。这种不可渗透的凝胶层可以阻断进入的过敏原颗粒和鼻粘膜之间的接触，从而防止过敏反应的触发和阻止过敏性鼻炎症状的发作。只要凝胶层保留在鼻粘膜表面上，症状的缓解就可持续数小时。在油基屏障形成制剂中添加抗过敏油能够改变组合物的物理和化学性质，例如能够使组合物均匀分散通过喷头的最佳粘度。这将产生如前述描述中所述的喷雾图案，其可以完全且均匀地涂覆鼻腔，向鼻粘膜提供对进入的过敏原的完全阻断。因此，组合物的这种可喷雾性质导致更好的身体保护以及针对由过敏原引起的鼻部疾病如过敏性鼻炎的治疗和预防作用的总体功效。根据另外的方面，提供了用于抑制肥大细胞活化的治疗方法。所述方法可以例如，包括使肥大细胞与根据第一方面的鼻用组合物或根据第二方面的药物组合物接触。根据另外的方面，提供了用于预防和/或治疗受试者的鼻腔过敏性疾病，包括季节性过敏性鼻炎和常年性过敏性鼻炎的方法，其包括给予受试者有效量的根据第一方面的鼻用组合物或根据第二方面的药物组合物。可以以任何期望的方式进行给予。在经鼻给予的情况下，适合治疗疾病的量是指每次喷雾发射(sprayburst)给予的量，特别是每次喷雾动作用鼻喷雾剂释放的制剂的量，其中1次喷雾发射为约3至200μl，且特别是约50至150μl，例如每次喷雾约140μl。在实施方案之一中，适合治疗疾病的量是每个鼻孔大约1-2次喷雾，或遵从医疗保健专业人员的处方。每天进行给予一次或优选数次，特别是间隔几小时，例如间隔约1至8小时，且特别是约4至6小时；优选在醒来之后直接开始，并且如果晚上还需要保护，则在入睡之前立即给予最后一次。优选地，对于常年过敏，可以包括夜间治疗。优选每天数次使用鼻用喷雾剂，特别是在醒来后不久开始并在入睡前立即使用最后一次，间隔数小时，特别是约1至8小时，优选约4至6小时，并且优选每个鼻孔的体积为约3至500μl，特别是约50至150μl。在某些实施方案中，受试者是人。除了用于人应用和治疗以外，本发明还用于一系列也可能受鼻部疾病的影响的哺乳动物。这样的哺乳动物包括例如在动物园中的非人灵长类动物(例如猩猩、猴子和狐猴)，宠物如猫或狗，工作和运动动物如狗、马和小马，农场动物，例如猪、绵羊、山羊、鹿、公牛和家牛，和实验室动物如啮齿动物(例如兔、大鼠、小鼠、仓鼠、沙鼠或豚鼠)。根据另外的方面，提供了源自植物的抗过敏油和油基屏障形成制剂在制备药物、药物组合物或鼻用组合物中的用途。药物、药物组合物或鼻用组合物可以例如，用于预防和/或治疗鼻腔过敏性疾病，包括季节性过敏性鼻炎和常年性过敏性鼻炎。实施例实施例1：鼻用喷雾剂制剂成分按重量计百分比(％)膨润土硅酸铝镁0.8黄原胶0.2磷酸二氢钾0.28磷酸氢二钾0.08无水甘油0.53单硬脂酸甘油酯0.25紫苏籽油22芝麻籽油22留兰香油0.1混合生育酚0.5山梨酸钾0.2苯氧乙醇和辛二醇2纯净水51.06实施例2：可喷雾性和喷雾图案测试使用5种不同的鼻用喷雾剂样品进行可喷雾性测试，所述鼻用喷雾剂样品具有不同的抗过敏油(紫苏油)和油性组分(芝麻油)比例：(a)仅芝麻油，没有抗过敏油；(b)重量比为1:3的紫苏油和芝麻油；(c)重量比为1:1的紫苏油和芝麻油；(d)重量比为3:1的紫苏油和芝麻油；和(e)紫苏油既作为抗过敏油又作为油性组分。在测试之前，释放5次喷雾。将10x10cm的黑色纸盒固定在10x10cm的玻璃板上，并保持垂直于鼻用喷雾剂的喷雾方向，喷雾装置(hdpe瓶，带有来自aeropumpgmbh的ap3喷头)位于距离黑色纸盒/玻璃板7厘米的距离处，如图2中所示。将140μl的一次完整剂量喷在玻璃板上。对于每种产品，描述和量化喷雾图案。释放容器的一个单剂量的时间少于1秒。测试重复3次，以确定结果。实施例3：喷雾图案的定量分析由实施例2获得的具有不同的抗过敏油(紫苏油)和油性组分(芝麻油)比例的5种不同鼻用喷雾剂样品的喷雾图案，以比较各样品的可喷雾性。所有的测量记录到最近为0.5cm。样品(a)-(e)的喷雾图案进一步描述如下：(a)具有2.5cm的环宽度和相对大的中空中心的环形；(b)具有4cm的环宽度和相对中等尺寸的中空中心的环形；(c)具有4.5cm的环宽度和相对小的中空中心的环形；(d)具有3.5cm的环宽度和相对中等尺寸的中空中心的环形；(e)具有2cm的环宽度和相对大的中空中心的环形。包含以重量比1:3、1:1或3:1组合的芝麻油和紫苏油的制剂(样品(b)-(d))的观察到的喷雾图案是令人惊讶的。对于这些制剂，观察到具有小到中等的中空中心的宽的、展开的喷雾图案。由于仅具有芝麻油的样品(样品(a))和仅具有紫苏油的样品(样品(e))的喷雾图案得到具有大的中空中心的展开的喷雾图案，因此具有芝麻油和紫苏油的组合的鼻用组合物的喷雾图案是出乎意料的。实施例4：肥大细胞系hmc-1的体外测试在包含10％胎牛血清(fbs)、2mml-谷氨酰胺、50μm2-巯基乙醇、100u/ml青霉素和100μg/ml链霉素的伊思柯夫改良杜氏培养基(imdm)中培养肥大细胞系，即hmc1细胞(由drjosephh.butterfield；mayoclinic,rochester,mn,usa提供)。将细胞保持在潮湿的气氛中、37℃下、5％co2中。活细胞的百分比通过台盼蓝染色来确定。用50μl细胞悬液和450μl台盼蓝制备1:10稀释液，并在血细胞计数器中计数活细胞和死细胞的数量。将106个活细胞转移到safe-lockeppendorf管中。将细胞悬液离心(200g，5分钟)，并弃去上清液。测定溶媒kolliphorelp(聚氧乙烯35氢化蓖麻油)中的紫苏油、芝麻油和紫苏油与芝麻油的组合(以1:1的组合比例)的效果。还测试了磷酸盐缓冲盐水(pbs)、溶媒pbs和elp中的阳性对照色甘酸，和作为对照的钙离子载体a23187。向细胞团添加100μlige(在pbs/elp中，100ng/ml)后，将细胞在37℃下孵育12小时过夜。将细胞在37℃下用不同浓度的化合物孵育2小时。离心(200g，5分钟)后，弃去上清液，并再次在37℃下用100μl抗ige(1μg/ml，在pbs/elp中)孵育细胞团1小时。对于在37℃下的最后6小时的孵育时间，添加300μlhmc1培养基。将细胞再次离心(200g，5分钟)，并收集上清液，并在-20℃下以300μl等份存储用于elisa测量。将细胞团重悬于100μlhmc1培养基中以测定细胞活力。当化合物测试是钙离子载体a23187时，程序略有不同。在向细胞团添加钙离子载体(100μg/ml)后，将细胞在37℃下孵育30分钟。对于在37℃下的最后6小时的孵育时间，添加300μlhmc1培养基。将细胞再次离心(200g，5分钟)，并收集上清液，并在-20℃下以300μl等份存储用于elisa测量。将细胞沉淀重悬于100μlhmc1培养基中以测定细胞活力。根据制造商的指导，使用从iblinternational获得的试剂盒通过elisa测定收集的上清液中的组胺浓度。每种样品测量两次。由于预期的测量限度，将溶媒(pbs、elp)处理的样品以1:2稀释，并且将钙离子载体处理的样品以1:5稀释。使用非配对的双尾学生t检验，用graphpadprism(5.01版)软件(graphpadsoftwareinc.,sandiego,ca,usa)进行统计分析。p值小于0.05被认为是统计学上显著的。结果如以下图3中所示。如预期的那样，仅用ige/抗-ige(阴性对照)和钙离子载体处理显示最高的组胺产生值。钙离子载体样品释放所有组胺，因为细胞被该处理完全破坏。与pbs和elp对照相比，在所有化合物处理的样品和色甘酸处理的样品中，组胺水平显著降低。用紫苏油或芝麻油单独处理显示非特异性降低，因为不能观察到剂量依赖性。用紫苏油和芝麻油的组合处理或用色甘酸处理显示组胺释放的特异性、剂量依赖性降低。组胺释放降低表明肥大细胞活化的抑制/肥大细胞稳定化。将单独处理的紫苏油和芝麻油的平均组胺释放与紫苏油和芝麻油组合的平均组胺释放进行比较，组合显示在250μg/ml和500μg/ml时组胺释放显著降低(分别为p＝0.0185和p＝0.0092)。这与色甘酸相当。因此，紫苏油和芝麻油的组合协同作用以抑制组胺释放。当前第1页12