本发明涉及植物提取物的制备技术领域,特别是涉及红枣与玛卡的提取物,及其制备方法及应用。
背景技术:
红枣,又名大枣,多项研究表明红枣中含有丰富的蛋白质、矿物质、糖类、氨基酸,具有促进免疫、抗衰老、抗肿瘤、清除自由基、抗疲劳、抗辐射、保肝、生殖功能保护和改善等作用。
玛卡是一种十字花科植物,含有多种均衡合理的营养成份以及多种具有生物活性的次生代谢产物,还含有生物碱、芥子油苷、玛卡酰胺等功效成分,因此,玛卡具备多种保健和治疗功效与作用,传统上可用于增强精力、提高生育力、治疗更年期综合症、风湿症、抑郁症、贫血症,另外,它还具有抗癌和抗白血病等作用。
近年来,越来越多的研究者关注到红枣与玛卡的对于提高人体免疫力、平衡人体荷尔蒙分泌及促进生育能力的效用,但对于其起效机理知之甚少。目前市场上红枣与玛卡的产品有几种加工形式,如微粉(粉末,片剂),冷冻干燥,水醇提取物等。但现有技术提取效率较低,产品有效成分流失严重,人体吸收率低,难以发挥这类产品的多种功效。
技术实现要素:
基于此,有必要针对上述问题,提供一种红枣与玛卡的提取物的制备方法,工艺简单,大大提高了红枣和玛卡中氨基酸、生物碱、玛卡酰胺及芥子油苷等有效成份的提取效率,保留了产品有效成份,红枣与玛卡的提取物应用于提高免疫力药物、促进生育能力药物中,效果显著。
一种红枣与玛卡的提取物的制备方法,包括以下步骤:
步骤1:称取红枣和玛卡,制成红枣与玛卡的混合粉末;
步骤2:加入乙醇和醋酸混合溶液,超声回流,获得粗提液;
步骤3:将步骤2中的粗提液浓缩至原体积1/3~1/5倍,获得浓缩粗提液;
步骤4:将步骤3中的浓缩粗提液用树脂吸附;
步骤5:依次用水、20%乙醇、50%乙醇、80%乙醇、95%乙醇洗脱,收集洗脱液;
步骤6:将洗脱液进行超低温冷冻干燥处理,获得红枣与玛卡的提取物。
上述红枣与玛卡的提取物的制备方法,提取物中的有效成份主要为中氨基酸、生物碱、玛卡酰胺及芥子油苷,相较于以往的提取工艺,本发明制备方法获得氨基酸、生物碱、玛卡酰胺及芥子油苷产出率均获得很大的提高,且工艺简单,价格低廉,适合大规模工艺生产;所获得的提取物应用于提高免疫力药物、促进生育能力药物中,效果显著。
在其中一个实施例中,红枣与玛卡的混合粉末的质量与乙醇和醋酸混合溶液的体积的比值为1:4~7。
在其中一个实施例中,乙醇和醋酸混合溶液由浓度为40%~70%的乙醇与浓醋酸混合制成。
在其中一个实施例中,浓度为40%~70%的乙醇与浓醋酸的体积比为98~99:1~2。
在其中一个实施例中,步骤2所述乙醇和醋酸混合溶液分两次加入,每次超声回流40~60min。
在其中一个实施例中,树脂为lsi004大孔树脂。
在其中一个实施例中,树脂与红枣与玛卡的混合粉末的质量比为1~1.5:1。
在其中一个实施例中,步骤5中加入的水、20%乙醇、50%乙醇、80%乙醇、95%乙醇的量分别为水200ml、20%乙醇600~700ml、50%乙醇800~900ml、80%乙醇600~700ml、95%乙醇200~300ml。
在其中一个实施例中,超低温的温度为低于-263℃。
一种红枣与玛卡的提取物,含有72~75mg/g的氨基酸、4~5mg/g的玛卡酰胺、5.7~6.0mg/g的总生物碱及5~6mg/g的芥子油苷。
红枣与玛卡的提取物的应用,上述制备方法所获得的红枣与玛卡的提取物可应用于提高免疫力或促进生育能力的药物或食品,如饮料、保健品等。
附图说明
图1为实施例1的红枣与玛卡的提取物的cck-8测定细胞存活率的测试结果;
图2为实施例1的红枣与玛卡的提取物的atp含量测定的测试结果。
具体实施方式
为了便于理解本发明,下面将对本发明进行更全面的描述。但是,本发明可以以许多不同的形式来实现,并不限于本文所描述的实施例。相反地,提供这些实施例的目的是使对本发明的公开内容的理解更加透彻全面。
除非另有定义,本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的,不是旨在于限制本发明。
实施例1
本实施例红枣与玛卡的提取物的制备方法,包括以下步骤:
步骤1:称取红枣和玛卡共200g,其中,红枣与玛卡的质量比为1:2,洗干净,沥干,制成红枣与玛卡的混合粉末;需要说明的是,可以将红枣与玛卡混合后一起研磨成粉,制成混合粉末,也可以将红枣制成红枣粉末,玛卡制成玛卡粉末,然后再混合。
步骤2:用浓度为60%的乙醇与冰醋酸以体积比为98:2配制成乙醇和醋酸混合溶液,作为提取液;将红枣与玛卡的混合粉末装入回流装置,往红枣与玛卡的混合粉末中加入乙醇和醋酸混合溶液,乙醇和醋酸混合溶液分两次加入,第一次加入500ml,超声回流60min,再加入300ml,再超声回流50min,使有效成份充分溶解入提取液中,获得粗提液;
步骤3:将步骤2中的粗提液转入旋转蒸发仪,旋转蒸发浓缩至200ml,获得浓缩粗提液;
步骤4:称取lsi004大孔树脂200g,装柱,柱体积约200ml,将步骤3中的浓缩粗提液过柱,吸附2小时;
步骤5:依次用200ml水、600ml20%乙醇、800ml50%乙醇、600ml80%乙醇、200ml95%乙醇洗脱步骤4中的lsi004大孔树脂柱,以100毫升/瓶的量收集洗脱液,则获得不同组分层析液的24份样品,水分层析液的样品2份,20%乙醇分层析液的样品6份,50%乙醇分层析液的样品8份,80%乙醇分层析液的样品6份,95%乙醇分层析液的样品2份,根据收集次序对应编号为水-1,水-2,20%乙醇-1,20%乙醇-2,20%乙醇-3,20%乙醇-4,20%乙醇-5,20%乙醇-6,50%乙醇-1,50%乙醇-2,50%乙醇-3,50%乙醇-4,50%乙醇-5,50%乙醇-6,50%乙醇-7,50%乙醇-8,80%乙醇-1,80%乙醇-2,80%乙醇-3,80%乙醇-4,80%乙醇-5,80%乙醇-6,95%乙醇-1,95%乙醇-2。
步骤6:将步骤5中的24份样品每份分别用旋转蒸发仪减压蒸馏浓缩至10ml,获得浓缩洗脱样品,然后将浓缩洗脱样品在低于-263℃的超低温下进行冷冻干燥处理,获得红枣与玛卡的提取物。
分别取24份样品对应的红枣与玛卡的提取物进行氨基酸、总生物碱、玛卡酰胺及芥子油苷的含量测定,及对样品进行毒性及药性分析。
红枣与玛卡的提取物中氨基酸含量的测定
采用茚三酮比色法测定氨基酸含量,准确吸取200μg/ml氨基酸标准溶液0.0ml,0.6ml,0.8ml,1.0ml,1.2ml,1.5ml,2.0ml,分别置于25ml容量瓶,加入茚三酮及磷酸缓冲液各1ml,混合均匀,水浴加热15min,取出冷却至室温,再摇匀,定容至25ml,获得7个标准样品。静置15min后,在560nm吸收光波长下,以加入0.0ml氨基酸标准溶液的溶液为空白参比液,分别测定7个标准液样品,以吸光度为纵坐标,氨基酸的浓度为横坐标,绘制标准曲线,获得回归方程为y=4.1730x-0.1406,r2=0.9978,并且氨基酸在0.4-4.5mg/ml浓度范围内与吸光度呈良好的线性关系。
然后以加入0.0ml氨基酸标准溶液的溶液为空白参比液,分别测试步骤5中的24份样品,获得氨基酸的平均含量为73.604mg/g,即每1g红枣与玛卡的提取物中含有73.604mg氨基酸。
红枣与玛卡的提取物中总生物碱含量的测定
本实施例采用溴麝香草酚蓝比色法测定红枣与玛卡的提取物中总生物碱的含量。
样品溶液的制备
对应24份样品,分别取24份0.1g红枣与玛卡的提取物,用2%的hc1溶液洗涤溶解3次后合并酸液。然后用10%的氢氧化钠溶液调节ph至10,采用等体积氯仿萃取3次后合并萃取液,最后蒸发浓缩,定容至10ml,即为样品溶液。
对照溶液的制备
称取氧化苦参碱0.1g,溶于氯仿溶液中,定容至100ml,即为对照溶液。
溴麝香草酚蓝显色剂的配制
称取0.1g溴麝香草酚蓝,溶于1000ml磷酸缓冲溶液中。缓冲溶液由
0.2mol/lna2hpo4·12h2o与0.2mol/lnah2po4·2h2o配制而成。
制作标准曲线
精确吸取0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6ml苦参碱对照溶液,分别加入氯仿至1.0ml,再加入溴麝香草酚蓝显色剂5.0ml、氯仿4.0ml,测定不同浓度的对照溶液的吸光度,以溶液浓度为横坐标,吸光度为纵坐标制作标准曲线。
然后后按标准曲线制作方法操作测试样品溶液,再将测试结果代入回归方程计算总生物碱的含量,获得总生物碱的平均含量为5.9725mg/g,即每1g红枣与玛卡的提取物中含有5.9725mg总生物碱。
红枣与玛卡的提取物中玛卡酰胺含量测定
本实施例采用hplc测定玛卡酰胺的含量。
hplc的设置参数如下:
c-18反相柱(250mm×4.6mm,5μm);
进样体积10μl;
流速1.0ml/min;
柱温35℃;
流动相a为水,流动相b为乙腈;
波长210nm进行梯度洗脱,洗脱参数如表1所示。
表1
n-苄基-十六碳酰胺标准曲线绘制
准确配制1mg/ml的n-苄基-十六碳酰胺标准品溶液,再分别配制浓度为1、5、25、50、100、150g/ml的标准品溶液,采用hplc在210nm处测定峰面积,绘制标准曲线。
红枣与玛卡的提取物中玛卡酰胺测定
取1g红枣与玛卡的提取物,加入甲醇(色谱级)溶解定容至50ml,7000r/min离心10min,取上层清液,用0.45μm滤膜过滤,采用hplc在210nm处测定峰面积,代入回归方程得红枣与玛卡的提取物中玛卡酰胺含量。测得平均玛卡酰胺含量为4.7625mg/g,即每1g红枣与玛卡的提取物中含有4.7625mg玛卡酰胺。
红枣与玛卡的提取物中芥子油苷测定
本实施例采用比色法测定芥子油苷的含量。
芥子油苷标准曲线:准确吸取0.50mmol/l黑芥子苷标准溶液0.0,0.4,0.8,1.2,1.6,2.0ml于10ml比色管中补加水到2.0ml,再加入0.15%羧甲基纤维素钠溶液4.0ml,充分摇匀,加入2ml的pdcl2显色溶液,盖上塞子,再充分摇匀并于25℃下放置4h,以水-pdcl2-羧甲基纤维素钠空白溶液为参比,在540nm波长下测定吸光值,绘制标准曲线。
取1g红枣与玛卡的提取物用50%甲醇溶解定容至25ml,然后取其中1.0ml,按标准曲线处理方法于540nm测吸光度,代入回归方程得红枣与玛卡的提取物中芥子油苷含量,获得芥子油苷的平均含量为5.884mg/g,即每1g红枣与玛卡的提取物中含有5.884mg芥子油苷。
cck-8测定细胞存活率
cck-8(cellcountingkit-8)试剂可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析,其基本原理为:cck-8试剂中含有wst-8【2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2h-四唑单钠盐】,它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物,生成的甲瓒产物的数量与活细胞的数量成正比,因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。
用dmem(dulbecco'smodifiedeaglemedium)配置成含9%马血清,6%牛血清,0.5%青霉素-链霉素双抗溶液的培养液,在96孔板内以每孔1.5万个pc-12细胞接种,在细胞培养箱中孵育24小时后加入上述24个样品的红枣与玛卡的提取物,红枣与玛卡的提取物与培养液比例为1:9;72小时后检测细胞存活率。
实验结果如图1所示,c表示未加入红枣与玛卡的提取物的培养液,作为对照组。检测结果表明,红枣与玛卡的提取物毒性小,尤其是由20%乙醇洗脱液对应于样本20%乙醇-4,20%乙醇-6和50%乙醇洗脱液对应于样本50%乙醇-1,50%乙醇-2,50%乙醇-3,50%乙醇-5,50%乙醇-6,50%乙醇-7,50%乙醇-8,其不仅无毒性,且具有较明显的促进细胞生长的作用。
atp含量测定
用dmem配置成含8%马血清,5.5%牛血清,0.6%青霉素-链霉素双抗溶液的培养液,在96孔板内以每孔15万个pc-12细胞接种。在细胞培养箱中孵育24小时后加入上述24个样品的红枣与玛卡的提取物,红枣与玛卡的提取物与培养液的体积比为1:8;在细胞培养箱中孵育24小时后检测atp(腺嘌呤核苷三磷酸)和蛋白质浓度。以罗氏(roche)atp检测试剂盒和bca试剂,利用酶标仪检测样品的吸光度值,绘制标准曲线并计算出样品中atp增加的量。
实验结果如图2所示,c表示未加入红枣与玛卡的提取物的培养液,作为空白组。检测结果表明,经含有红枣与玛卡的提取物的营养液孵育24小时后的细胞其atp含量超空白组1倍以上,尤其是由20%乙醇对应于样本20%乙醇-4,20%乙醇-6和50%乙醇提取物对应于样本50%乙醇-1,50%乙醇-2,50%乙醇-3,50%乙醇-5,50%乙醇-7,50%乙醇-8使细胞的atp含量增加约2倍,高于市场上增加能量代谢药物,该样本对应的红枣与玛卡的提取物有望应用在制备提高免疫力药物、促进生育能力药物中。
根据上述cck-8测定细胞存活率及atp含量测定可知,最有药用价值的红枣与玛卡的提取物是由20%乙醇第四、六柱和50%乙醇洗脱液制备得到。
实施例2
本实施例红枣与玛卡的提取物的制备方法,包括以下步骤:
步骤1:称取红枣和玛卡共200g,其中,红枣与玛卡的质量比为2:5,洗干净,沥干,然后制成红枣与玛卡的混合粉末;
步骤2:用浓度为40%的乙醇与冰醋酸以体积比为98:2配制成乙醇和醋酸混合溶液,作为提取液;将红枣与玛卡的混合粉末装入回流装置,往红枣与玛卡的混合粉末中加入乙醇和醋酸混合溶液,乙醇和醋酸混合溶液分两次加入,第一次加入600ml,超声回流40min,再加入400ml,再超声回流40min,使有效成份充分溶解入提取液中,获得粗提液;
步骤3:将步骤2中的粗提液转入旋转蒸发仪,旋转蒸发浓缩至200ml,获得浓缩粗提液;
步骤4:称取lsi004大孔树脂约200g,装柱,柱体积约200ml,将步骤3中的浓缩粗提液过柱,吸附2小时;
步骤5:依次用200ml水、700ml20%乙醇、900ml50%乙醇、700ml80%乙醇、300ml95%乙醇洗脱步骤4中的lsi004大孔树脂柱,以100毫升/瓶的量收集洗脱液,则获得不同组分层析液的28份样品,水分层析液的样品2份,20%乙醇分层析液的样品7份,50%乙醇分层析液的样品9份,80%乙醇分层析液的样品7份,95%乙醇分层析液的样品3份,根据收集次序对应编号为水-1,水-2,20%乙醇-1,20%乙醇-2,20%乙醇-3,20%乙醇-4,20%乙醇-5,20%乙醇-6,20%乙醇-7,50%乙醇-1,50%乙醇-2,50%乙醇-3,50%乙醇-4,50%乙醇-5,50%乙醇-6,50%乙醇-7,50%乙醇-8,50%乙醇-9,80%乙醇-1,80%乙醇-2,80%乙醇-3,80%乙醇-4,80%乙醇-5,80%乙醇-6,80%乙醇-7,95%乙醇-1,95%乙醇-2,95%乙醇-3。
步骤6:将步骤5中的28份样品每份分别用旋转蒸发仪减压蒸馏浓缩至10ml,获得浓缩洗脱样品,然后将浓缩洗脱样品在低于-263℃的超低温下进行冷冻干燥处理,获得红枣与玛卡的提取物。
实施例3
本实施例红枣与玛卡的提取物的制备方法,包括以下步骤:
步骤1:称取红枣和玛卡100g,其中,红枣与玛卡的质量比为8:7,洗干净,沥干,然后制成红枣与玛卡的混合粉末;
步骤2:用浓度为50%的乙醇与冰醋酸以体积比为99:1配制成乙醇和醋酸混合溶液,作为提取液;将红枣与玛卡的混合粉末装入回流装置,往红枣与玛卡的混合粉末中加入乙醇和醋酸混合溶液,乙醇和醋酸混合溶液分两次加入,第一次加入400ml,超声回流60min,再加入300ml,再超声回流60min,使有效成份充分溶解入提取液中,获得粗提液;
步骤3:将步骤2中的粗提液转入旋转蒸发仪,旋转蒸发浓缩至原体积200ml,获得浓缩粗提液;
步骤4:称取lsi004大孔树脂约100g,装柱,柱体积约100ml,将步骤3中的浓缩粗提液过柱,吸附2小时;
步骤5:依次用200ml水、700ml20%乙醇、900ml50%乙醇、700ml80%乙醇、300ml95%乙醇洗脱步骤4中的lsi004大孔树脂柱,以100毫升/瓶的量收集洗脱液,则获得不同组分层析液的28份样品,水分层析液的样品2份,20%乙醇分层析液的样品7份,50%乙醇分层析液的样品9份,80%乙醇分层析液的样品7份,95%乙醇分层析液的样品3份,根据收集次序对应编号为水-1,水-2,20%乙醇-1,20%乙醇-2,20%乙醇-3,20%乙醇-4,20%乙醇-5,20%乙醇-6,20%乙醇-7,50%乙醇-1,50%乙醇-2,50%乙醇-3,50%乙醇-4,50%乙醇-5,50%乙醇-6,50%乙醇-7,50%乙醇-8,50%乙醇-9,80%乙醇-1,80%乙醇-2,80%乙醇-3,80%乙醇-4,80%乙醇-5,80%乙醇-6,80%乙醇-7,95%乙醇-1,95%乙醇-2,95%乙醇-3。
步骤6:将步骤5中的28份样品每份分别用旋转蒸发仪减压蒸馏浓缩至10ml,获得浓缩洗脱样品,然后将浓缩洗脱样品在低于-263℃的超低温下进行冷冻干燥处理,获得红枣与玛卡的提取物。
实施例4
本实施例红枣与玛卡的提取物的制备方法,包括以下步骤:
步骤1:称取红枣和玛卡150g,其中,红枣与玛卡的质量比为7:9,洗干净,沥干,然后制成红枣与玛卡的混合粉末;
步骤2:用浓度为55%的乙醇与冰醋酸以体积比为98:1配制成乙醇和醋酸混合溶液,作为提取液;将红枣与玛卡的混合粉末装入回流装置,往红枣与玛卡的混合粉末中加入乙醇和醋酸混合溶液,乙醇和醋酸混合溶液分两次加入,第一次加入500ml,超声回流50min,再加入300ml,再超声回流50min,使有效成份充分溶解入提取液中,获得粗提液;
步骤3:将步骤2中的粗提液转入旋转蒸发仪,旋转蒸发浓缩至原体积200ml,获得浓缩粗提液;
步骤4:称取lsi004大孔树脂约150g,装柱,柱体积约150ml,将步骤3中的浓缩粗提液过柱,吸附2小时;
步骤5:依次用200ml水、600ml20%乙醇、800ml50%乙醇、600ml80%乙醇、200ml95%乙醇洗脱步骤4中的lsi004大孔树脂柱,以100毫升/瓶的量收集洗脱液,则获得不同组分层析液的24份样品,水分层析液的样品2份,20%乙醇分层析液的样品6份,50%乙醇分层析液的样品8份,80%乙醇分层析液的样品6份,95%乙醇分层析液的样品2份,根据收集次序对应编号为水-1,水-2,20%乙醇-1,20%乙醇-2,20%乙醇-3,20%乙醇-4,20%乙醇-5,20%乙醇-6,50%乙醇-1,50%乙醇-2,50%乙醇-3,50%乙醇-4,50%乙醇-5,50%乙醇-6,50%乙醇-7,50%乙醇-8,80%乙醇-1,80%乙醇-2,80%乙醇-3,80%乙醇-4,80%乙醇-5,80%乙醇-6,95%乙醇-1,95%乙醇-2。
步骤6:将步骤5中的24份样品每份分别用旋转蒸发仪减压蒸馏浓缩至10ml,获得浓缩洗脱样品,然后将浓缩洗脱样品在低于-263℃的超低温下进行冷冻干燥处理,获得红枣与玛卡的提取物。
实施例5
本实施例红枣与玛卡的提取物的制备方法,包括以下步骤:
步骤1:称取红枣和玛卡100g,其中,红枣与玛卡的质量比为2:1,洗干净,沥干,然后制成红枣与玛卡的混合粉末;
步骤2:用浓度为70%的乙醇与冰醋酸以体积比为99:1配制成乙醇和醋酸混合溶液,作为提取液;将红枣与玛卡的混合粉末装入回流装置,往红枣与玛卡的混合粉末中加入乙醇和醋酸混合溶液,乙醇和醋酸混合溶液分两次加入,第一次加入600ml,超声回流60min,再加入300ml,再超声回流60min,使有效成份充分溶解入提取液中,获得粗提液;
步骤3:将步骤2中的粗提液转入旋转蒸发仪,旋转蒸发浓缩至原体积200ml,获得浓缩粗提液;
步骤4:称取lsi004大孔树脂约100g,装柱,柱体积约100ml,将步骤3中的浓缩粗提液过柱,吸附2小时;
步骤5:依次用200ml水、600ml20%乙醇、800ml50%乙醇、600ml80%乙醇、200ml95%乙醇洗脱步骤4中的lsi004大孔树脂柱,以100毫升/瓶的量收集洗脱液,则获得不同组分层析液的24份样品,水分层析液的样品2份,20%乙醇分层析液的样品6份,50%乙醇分层析液的样品8份,80%乙醇分层析液的样品6份,95%乙醇分层析液的样品2份,根据收集次序对应编号为水-1,水-2,20%乙醇-1,20%乙醇-2,20%乙醇-3,20%乙醇-4,20%乙醇-5,20%乙醇-6,50%乙醇-1,50%乙醇-2,50%乙醇-3,50%乙醇-4,50%乙醇-5,50%乙醇-6,50%乙醇-7,50%乙醇-8,80%乙醇-1,80%乙醇-2,80%乙醇-3,80%乙醇-4,80%乙醇-5,80%乙醇-6,95%乙醇-1,95%乙醇-2。
步骤6:将步骤5中的24份样品每份分别用旋转蒸发仪减压蒸馏浓缩至10ml,获得浓缩洗脱样品,然后将浓缩洗脱样品在低于-263℃的超低温下进行冷冻干燥处理,获得红枣与玛卡的提取物。
按照实施例1中所述的氨基酸、总生物碱、玛卡酰胺及芥子油苷的含量测定方法,分别测定实施例2至5所获得红枣与玛卡的提取物中的氨基酸、总生物碱、玛卡酰胺及芥子油苷的平均含量,并取一例采用传统的制备方法制备的红枣与玛卡的提取物中的氨基酸、总生物碱、玛卡酰胺及芥子油苷的平均含量,测定结果如表2。
表2
从表2的测试结果可知,相较传统方法制备的红枣与玛卡的提取物,本发明的实施例1至5所制备的红枣与玛卡的提取物中的有效成份氨基酸、总生物碱、玛卡酰胺基芥子油苷的平均含量均获得很大提高,分别是传统方法的将近1.5倍,有效提高原材料的利用率及生产效率,且工艺简单,易于推广,适合大规模工艺生产。
按照实施例1的cck-8测定细胞存活率及atp含量测定方法分别测定实施例2至5的毒性和药性,测试结果与实施例1的结论相同,即红枣与玛卡的提取物的毒性小,尤其是由20%乙醇洗脱液对应于样本20%乙醇-4,20%乙醇-6和50%乙醇洗脱液对应于样本50%乙醇-1,50%乙醇-2,50%乙醇-3,50%乙醇-5,50%乙醇-6,50%乙醇-7,50%乙醇-8,其不仅无毒性,且具有较明显的促进细胞生长的作用。而由20%乙醇对应于样本20%乙醇-4,20%乙醇-6和50%乙醇提取物对应于样本50%乙醇-1,50%乙醇-2,50%乙醇-3,50%乙醇-5,50%乙醇-7,50%乙醇-8使细胞的atp含量增加约2倍,对提高免疫力、促进生育能力有一定的作用。总之,最有药用价值的红枣与玛卡的提取物由20%乙醇第四、六柱和50%乙醇洗脱液制备获得,可应用于提高免疫力、促进生育能力领域的药物或食品。
以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合,为使描述简洁,未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述,然而,只要这些技术特征的组合不存在矛盾,都应当认为是本说明书记载的范围。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式,其描述较为具体和详细,但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是,对于本领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明构思的前提下,还可以做出若干变形和改进,这些都属于本发明的保护范围。因此,本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。