青蒿素类化合物在制备治疗神经病理性疼痛和/或并发症的药物中的应用的制作方法

本申请涉及一种青蒿素类化合物的新制药用途，特别是在制备治疗神经病理性疼痛和/或其并发症药物中的制药用途。

背景技术：

神经病理性疼痛是一种由神经系统的原发损害或功能障碍引发的疼痛。流行病学研究显示，神经病理性疼痛的人群患病率高达8％，中国约有9000万患者急需安全有效的针对性治疗。因病因复杂，神经病理性疼痛难以在疾病早期得到重视，待就医时，约有50％的患者已并发诸如重性抑郁、焦虑等严重的精神类症状。导致痛敏症状延绵反复，严重影响患者生活质量，给患者及社会带来巨大的经济负担与压力。

鉴于以上病理特点，神经病理性疼痛急需高效镇痛，长效镇痛，兼顾疼痛诱发的精神症状，毒性低，耐药性低的针对性药物。虽同属于慢性疼痛，神经病理性疼痛与炎症性疼痛存在本质上的差别。现有技术中治疗神经病理性疼痛的临床一线药物有普瑞巴林(pregabalin,pgb)、三环类抗抑郁药、阿片类镇痛药物。然而现有的药物普遍存在各种问题，药效不能令人满意。

普瑞巴林(pregabalin,pgb)为食品与药品监督管理局批准并大量应用于临床的一线药品。临床研究显示，即便高剂量使用(600mg)也仅对部分患者(约38％)有短暂的镇痛效果。并且，高剂量的使用大大增加了患者头晕、嗜睡、共济失调、意识模糊、乏力、思维异常、视物模糊、运动失调、口干、水肿、体重增加及、注意困难等副反应症的出现，并对抑郁等并发性精神类症状无显著效果。三环类抗抑郁药副反应强烈，具有严重的心脏毒性，导致临床停药率高达15-20％。阿片类镇痛药物则具有耐药性及成瘾的风险，不适合长期使用。

由此可见，稳定有效地缓解痛敏症状及并发精神系统症状、降低毒副作用将是神经病理性疼痛新药的研发目标。

中国中医科学研究院中药研究所自七十年代开始，在屠呦呦研究员的带领下，进行了对青蒿素类药物的深入研究。现已证明青蒿素类药物具有毒性低、安全性高的特点，已被广泛应用于炎症性疾病中，包括疟疾、系统性红斑狼疮等。除了上述广泛应用的治疗或制药用途以外，青蒿素及其类似物还用于以下与本申请相关的制药用途。

cn1561994a(公开日2009年01月12日)公开了青蒿素类药物在治疗类风湿性关节炎中具有一定效果。然而，神经病理性疼痛不同于一般的炎症性疼痛。在诸如类风湿性关节炎等炎症性疼痛中，其中枢敏化过程是依赖于外周损伤性刺激，即依赖于外周炎症的存在及伤害感受神经元的异常激活的，其痛觉症状会伴随外周损伤或炎症的治愈而自然消失。因此，对于炎症性疼痛，外周炎症的缓解在疼痛感的治疗中具有显著的疗效；而神经病理性疼痛在外周损伤或炎症消失后，痛觉症状仍持续而强烈。其内在机理为，初期外周炎症或损伤引发脊髓背角神经元、上行传入神经元及多个脑核团内神经元异常放电，造成外周及中枢敏化，在炎症或外周损伤愈合后，中枢敏化过程依然持续。神经病理性疼痛中，中枢敏化过程虽起源于外周但不依赖于外周损伤，因此在神经病理性疼痛中，仅针对外周损伤或炎症治疗并无显著的疗效。由于病理机理不同，本领域技术人员难以基于青蒿素类药物对风湿性关节炎的效果联想到神经病理性疼痛。

cn102884428a(公开日2013年01月16日)记载了青蒿琥酯与抑郁的相关性，然而该表述是由于其中文译文错误地将artn基因的英文缩写翻译为青蒿琥酯而产生的，事实上该文件并不包含任何关于青蒿琥酯与抑郁的研究性内容。目前，尚未有任何报道指出青蒿素类药物对神经病理性痛诱发抑郁具有治疗效果。

cn103948585a(公开日2014年07月30日)公开了青蒿素类药物在神经退行性疾病中的潜在应用价值。虽然神经退行性疾病和神经病理性疼痛均为涉及神经的疾病。但首先，神经推行性疾病与神经病理性疼痛的病理机制完全不同，因而本领域技术人员难以基于青蒿素类药物对神经退行性疾病的效果联想到神经病理性疼痛。其次，该文件中所有实施例均仅限于细胞水平，本领域技术人员无法由细胞水平的实验效果推断出其在整体动物中的药效，尤其是对于神经病理性疼痛及其并发精神症状，这种病理机理涉及整个神经系统的病症。

技术实现要素：

本申请要解决的技术问题为提供一种具有治疗神经病理性疼痛和/或其并发症状性能的化合物、其产品、及其在治疗和制药中的用途。

本申请技术方案的第一方面为提供一种用于治疗神经病理性疼痛和/或其并发症状的青蒿素类化合物。

所述青蒿素类化合物为：

a)：青蒿素，

b)：以青蒿素为结构母核，在体内以双氢青蒿素为活性形式的青蒿素衍生物，

或c)：a)或b)药学上可接受的盐。

进一步地，所述青蒿素类化合物包括但不限于青蒿素、双氢青蒿素、去氧青蒿素、青蒿素甲酯、青蒿素乙酯、蒿甲醚、蒿乙醚和/或青蒿琥酯。

进一步地，所述药学上可接受的盐包括但不限于与盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、对甲苯磺酸、碳酸、甲酸、乙酸、草酸、琥珀酸、酒石酸、扁桃酸、富马酸、乳酸、柠檬酸、谷氨酸、天冬氨酸反应而获得的盐。

所述青蒿素类化合物是商业上可获得的，并且也可使用本领域技术人员已知的常规方法进行制备。

本申请技术方案的第二方面为提供一种用于治疗神经病理性疼痛和/或其并发症状的含青蒿素类化合物的组合物。

进一步地，所述组合物包括药物组合物。

进一步地，所述药物组合物包含一种或多种可接受的载体、助剂、和/或辅料。

进一步地，所述组合物进一步包含已知的治疗神经病理性疼痛和/或其并发精神症状的其他活性成分。

本申请技术方案的第三方面为提供一种用于治疗神经病理性疼痛和/或其并发症状的青蒿素类化合物的生产原料。

进一步地，所述青蒿素类化合物的生产原料包括青蒿素类化合物的原料药、中药药材、生物合成载体。优选所述青蒿素类化合物的生产原料为中药青蒿。

本申请技术方案的第四方面为前述青蒿素类化合物、含青蒿素类化合物的组合物和/或青蒿素类化合物的生产原料在制备治疗、预防和/或缓解神经病理性疼痛和/或其并发症状的药物中的用途。

进一步地，所述药物包括常规的多种剂型，包括但不限于口服剂、栓剂、注射剂、涂敷剂。

进一步地，所述药物包括常规的多种剂型，包括但不限于脂质体制剂、纳米颗粒制剂、固体分散剂、自乳化剂、经皮给药剂、β-环糊精包合物、磷脂复合物。

进一步地，所述药物的给药途径包括静脉内、经皮、皮内、皮下、肌内、腹膜内、口腔、直肠、鼻内或其组合。

本申请技术方案的第五方面为前述青蒿素类化合物、含青蒿素类化合物的组合物和/或青蒿素类化合物的生产原料的在治疗、预防和/或缓解神经病理性疼痛和/或其并发症状中的用途。

本申请技术方案的第六方面为一种治疗、预防和/或缓解神经病理性疼痛和/或其并发症状中的方法，使用了前述青蒿素类化合物、含青蒿素类化合物的组合物和/或青蒿素类化合物的生产原料。

本申请所述神经病理性疼痛为由神经系统原发性损害和功能障碍所激发或引起的疼痛。其属于一种慢性疼痛，临床表现包括但不限于自发性疼痛、痛觉过敏、异常疼痛、感觉异常。

本申请所述神经病理性疼痛并发症状包括精神症状，其包括但不限于抑郁、焦虑、认知功能障碍和/或上述症状的组合。

有益效果

本申请相较现有针对神经病理性疼痛和/或其并发症的一些药物具有以下效果：

1)对神经病理性疼痛具有确定、显著的治疗效果；

2)能够同时抑制神经病理性疼痛和抑制其并发症；

2)对神经病理性疼痛中的慢性疼痛疗效持久，耐药性低；

3)毒副作用低，用药安全；

4)成本低廉，制备简单。

附图说明

图1双氢青蒿素早期(造模后第4天)给药的镇痛疗效。

图2a双氢青蒿素早期(造模后第4天)给药的抗抑郁疗效。

图2b双氢青蒿素早期(造模后第4天)给药的抗焦虑疗效。

图3双氢青蒿素晚期(造模后第18天)给药的镇痛疗效。

图4a双氢青蒿素晚期(造模后第18天)给药的抗抑郁疗效(强迫游泳)。

图4b双氢青蒿素晚期(造模后第18天)给药的抗抑郁疗效(悬尾检测)。

图4c双氢青蒿素晚期(造模后第18天)给药的抗焦虑疗效(旷场检测)。

图5青蒿琥酯早期(造模后第4天)给药的镇痛疗效。

图6a青蒿琥酯早期(造模后第4天)给药的抗抑郁疗效。

图6b青蒿琥酯早期(造模后第4天)给药的抗焦虑疗效。

图7蒿甲醚早期(造模后第4天)给药的镇痛疗效。

图8a蒿甲醚早期(造模后第4天)给药的抗抑郁疗效。

图8b蒿甲醚早期(造模后第4天)给药的抗焦虑疗效。

具体实施方式

以下实施例通过证实双氢青蒿素、青蒿琥酯、蒿甲醚在降低小鼠snl模型中神经病理性疼痛的机械痛敏、抑制焦虑和/或抑郁中均具有确切而显著的治疗效果，以证明青蒿素类化合物具有治疗神经病理性疼痛和/或其并发症状的效果，能够用于治疗所述疾病或制备相关药物。

其中选择小鼠snl模型的理由在于其为公认较好的神经病理性疼痛模型，其痛觉症状稳定，个体差异小，诱发抑郁、焦虑、认知功能障碍的症状也较稳定。

实验例1：实验准备、模型构建及检测方法

1、实验动物

清洁级8周成年雄性c57/bl6小鼠，体重24-26g,由北京市维通利华实验动物技术有限公司提供，动物合格证编号syxk-2010-0034.

2、实验分组

小鼠在适应环境4天后，称量体重，并进行旷场检测、强迫游泳检测及悬尾检测，剔除体重低于23克，旷场试验中心场停留时间小于15秒，强迫游泳不动时间超过160秒，或悬尾检测不动时间在50-100秒以外的个体，而后随机分组，即假手术组，模型snl组、及用药组，每次平行实验中的每组大于12只。

3、小鼠神经病理性疼痛模型的建立方法

本申请采用脊神经结扎的方法(thespinalcordligation,snl)制备小鼠神经病理性疼痛模型。

具体方法如下：模型组合用药组以戊巴比妥钠麻醉，解剖镜下暴露第六腰椎横突，将横突剪去，分离第6、5、4脊神经，以6号眼科线对第5脊神经进行结扎，术后缝合。假手术组在以戊巴比妥钠麻醉后，仅暴露第六腰椎横突，将横突剪去，分离第6、5、4脊神经，直接术后缝合。观察所有小鼠术后行动状态，剔除运动行为受损个体。由于造模成功率一般在70％左右，在造模稳定的第4天对小鼠模型进行鉴定。对所有动物进行机械痛阈检测，在模型组及用药组小鼠中剔除对vonfrey探针0.16g及以上有痛敏反应的个体，在假手术组中剔除对vonfrey探针0.16g及以下有痛敏反应的个体。

4、机械痛阈检测

以vonfrey法进行机械痛阈值检测。有感探针压力越高表示痛阈越高。

5、强迫游泳检测：抑郁行为

于实验前一天进行游泳训练，将小鼠放入深度高于16cm，温度为20℃的深水区中，游泳12分钟。实验当天，将小鼠放入深度高于16cm,温度为20℃的有限空间中，进行6分钟强迫游泳实验，并记录后4分钟内，小鼠停止挣扎的总时长。该时长越长表示抑郁程度越重。

6、悬尾检测：抑郁行为

将小鼠尾部尖端2cm处以胶带固定，悬挂于检测箱内。总计悬挂时间为6分钟，记录后4分钟内，小鼠停止挣扎的总时长。该时长越长表示抑郁程度越重。

7、旷场检测：焦虑行为

准备底面四边长50cm,高30cm的正方形纯黑色旷场检测箱，在底面标记距箱壁20cm的边长30cm的正方形中心区域。将小鼠头朝箱壁的方向，放入旷场检测箱，记录4分钟内，小鼠在中心区域停留的总时长。该时长越长表示焦虑程度越轻。

8、给药方法

造模/假手术操作当日记为d0。用药组按照40mg/kg(青蒿素类似物/小鼠体重)的比例灌胃，药液体积为150μl；假手术组和模型snl组的给药时间及途径同用药组，以等体积的溶剂载体替代药液。

早期给药为第4天起灌胃给药，记为d4(1)。灌胃给药于每天于下午5点进行，连续给药14天，最后一天记为d17(14)。

晚期给药为第18天起灌胃给药，记为d18(1)。灌胃给药于每天于下午5点进行，连续给药5天，最后一天记为d22(5)。

实验例2：双氢青蒿素对神经病理性疼痛中机械痛敏、抑郁及焦虑的治疗效果

1、药物制备、给药方案

造模/假手术操作当日记为d0。用药组按照40mg/kg(青蒿素类似物或阳性药物普瑞巴林/小鼠体重)的比例灌胃，药液体积为150μl；双氢青蒿素或普瑞巴林预先悬溶于150μl的食用油中制成药液；假手术组与模型snl组使用等体积食用油代替药液，给药时间及途径同用药组。

早期给药实验中，第4天起灌胃给药，记为d4(1)。灌胃给药于每天于下午5点进行，连续给药14天，最后一天记为d17(14)。

晚期给药实验中，第18天起灌胃给药，记为d18(1)。灌胃给药于每天于下午5点进行，连续给药5天，最后一天记为d22(5)。

2、观察指标

早期给药实验中，在造模后d4、d7、d10、d13进行机械痛阈值检测,检测时间点分别在灌胃给药后的第1.5小时、3小时及24小时。在造模后d9、d17天分别进行悬尾检测和旷场检测。

晚期给药实验中，在造模后d1-d17天中的隔天和d17-d22的每天进行机械痛阈值检测,检测时间点分别在灌胃给药后的第1.5小时。在造模后d22天分别进行强迫游泳检测、悬尾检测和旷场检测。

3、实验结果

3.1双氢青蒿素能够提高机械痛阈值，降低痛敏

双氢青蒿素对机械痛阈值影响的检测结果如图1和图3显示：

在早期给药实验中：模型snl组相对于假手术组机械痛阈值显著降低，证明神经病理性疼痛模型造模成功。在给药1.5小时的检测结果中，与模型snl组相比，在造模后d4、d7、d10、d13、d17(造模后d4为首次给药日)，双氢青蒿素均显示出显著的镇痛效果(^&&&p<0.001)；在给药3小时和24小时(次日给药前)的检测结果中，与模型snl组相比，在造模后d10、d13、d17天均显示出显著的镇痛效果(^***p<0.001)。

在晚期给药实验中：模型snl组相对于假手术组机械痛阈值显著降低，证明神经病理性疼痛模型造模成功。与模型snl组相比，阳性药普瑞巴林组在给药期间d1-d22显示出显著的镇痛效果(^&&&p<0.001)，其中d1-d3可恢复痛阈至与假手术组相当的水平，但从d4起逐渐下降。双氢青蒿素用药组自d18开始给药，与模型snl组相比，d19-d22可显著恢复痛阈值(^***p<0.001)，至给药第4天d22镇痛效果已超过普瑞巴林组。

3.2双氢青蒿素能够缓解抑郁

在早期给药实验中：双氢青蒿素对抑郁行为影响的悬尾实验检测结果如图2a结果显示：在造模/假手术处理之前的d0，模型snl组/假手术组/用药组的停止挣扎时间相似。在造模后的d9及d17(造模后d4首次给药)，模型snl组与假手术组小鼠相比(^&&&p<0.001)，停止挣扎时间显著增加，显示出抑郁样症状，证明神经病理性疼痛模型并发抑郁。双氢青蒿素用药组小鼠与模型snl组相比(^***p<0.001)，停止挣扎时间显著降低，已达到和假手术组相同的水平，证明双氢青蒿素具有对神经病理性疼痛并发的抑郁的疗效。

在晚期给药实验中：

强迫游泳检测:在d22(给药第4天)，模型snl组相对于假手术组，的停止挣扎时间明显增加(^***p<0.001)，表明模型组显示抑郁状态；双氢青蒿素用药组相对于模型snl组，停止挣扎时间明显缩短(^***p<0.001)，证明双氢青蒿素具有对神经病理性疼痛并发的抑郁的疗效；然而普瑞巴林组相较模型snl组并未显示出抗抑郁效果。

悬尾检测:在d22(给药第4天)，模型snl组相对于假手术组，的停止挣扎时间明显增加(^***p<0.001)，表明模型组显示抑郁状态；双氢青蒿素用药组相对于模型snl组，停止挣扎时间明显缩短(^***p<0.001)，证明双氢青蒿素具有对神经病理性疼痛并发的抑郁的疗效；然而普瑞巴林组相较模型snl组并未显示出抗抑郁效果。

3.3双氢青蒿素能够缓解焦虑

在早期给药实验中：双氢青蒿素对焦虑行为影响的旷场实验检测结果如图2b显示：在造模/假手术处理之前的d0，模型组/假手术组/用药组的中心区域停留时间相似。在造模后的d9及d17(造模后d4首次给药)，模型snl组与假手术组小鼠相比(^&&&p<0.001)，中心区域停留时间显著降低，显示出焦虑样症状,证明神经病理性疼痛模型并发焦虑；用药组小鼠与模型snl组相比(^***p<0.001)，中心区域停留时间显著升高，证明双氢青蒿素具有对神经病理性疼痛并发的焦虑的疗效。

在晚期给药实验中：双氢青蒿素对焦虑行为影响的旷场实验检测结果如图4c显示：在d22(给药第4天)，模型snl组相对于假手术组，中心区域停留时间明显缩短(^***p<0.001)，表明模型组显示焦虑状态；双氢青蒿素用药组相对于模型snl组，中心区域停留时间明显延长(^***p<0.001)，证明双氢青蒿素具有对神经病理性疼痛并发的焦虑的疗效；然而普瑞巴林组相较模型snl组并未显示出抗焦虑效果。

实验例3：青蒿琥酯对神经病理性疼痛中机械痛敏、抑郁及焦虑的治疗效果

1、药物制备

青蒿琥酯预先悬溶于150μl的5％医用碳酸氢钠注射液中制成药液；假手术组与模型snl组使用5％医用碳酸氢钠注射液为溶剂载体。

2、观察指标

在造模后d4、d7、d10、d13进行机械痛阈值检测,检测时间点分别在灌胃给药后的第1.5小时、3小时及24小时。

在造模后d9、d17天分别进行悬尾检测和旷场检测。

3、实验结果

3.1青蒿琥酯能够提高机械痛阈值，降低痛敏

青蒿琥酯对机械痛阈值影响的检测结果如图5显示：模型snl组相对于假手术组机械痛阈值显著降低，证明神经病理性疼痛模型造模成功。在给药1.5小时的检测结果中，与模型snl组相比，在造模后d4、d7、d10、d13、d17(造模后d4为首次给药日)，青蒿琥酯均显示出显著的镇痛效果(^&&&p<0.001)；在给药3小时和24小时(次日给药前)的检测结果中，与模型snl组相比，在造模后d10、d13、d17天均显示出显著的镇痛效果(^***p<0.001)。

3.2青蒿琥酯能够缓解抑郁

青蒿琥酯对抑郁行为影响的悬尾实验检测结果如图6a结果显示：在造模/假手术处理之前的d0，模型snl组/假手术组/用药组的停止挣扎时间相似。在造模后的d9及d17(造模后d4首次给药)，模型snl组与假手术组小鼠相比(^&&&p<0.001)，停止挣扎时间显著增加，显示出抑郁样症状，证明神经病理性疼痛模型并发抑郁。用药组小鼠与模型snl组相比(^***p<0.001)，停止挣扎时间显著降低，证明青蒿琥酯具有对神经病理性疼痛并发的抑郁的疗效。

3.3青蒿琥酯能够缓解焦虑

青蒿琥酯对焦虑行为影响的旷场实验检测结果如图6b结果显示：在造模/假手术处理之前的d0，模型组/假手术组/用药组的中心区域停留时间相似。在造模后的d9及d17(造模后d4首次给药)，模型snl组与假手术组小鼠相比(^&&&p<0.001)，中心区域停留时间显著降低，显示出焦虑样症状,证明神经病理性疼痛模型并发焦虑；用药组小鼠与模型snl组相比(^***p<0.001)，中心区域停留时间显著升高，证明青蒿琥酯具有对神经病理性疼痛并发的焦虑的疗效。

实验例4：蒿甲醚对神经病理性疼痛中机械痛敏、抑郁及焦虑的治疗效果

1、药物制备

蒿甲醚预先悬溶于150μl的食用油中制成药液；假手术组与模型snl组使用食用油为溶剂载体。

2、观察指标

在造模后d4、d7、d10、d13进行机械痛阈值检测,检测时间点分别在灌胃给药后的第1.5小时、3小时及24小时。

在造模后d9、d17天分别进行悬尾检测和旷场检测。

3、实验结果

3.1蒿甲醚能够提高机械痛阈值，降低痛敏

蒿甲醚对机械痛阈值影响的检测结果如图7显示：模型snl组相对于假手术组机械痛阈值显著降低，证明神经病理性疼痛模型造模成功。在给药1.5小时的检测结果中，与模型snl组相比，在造模后d4、d7、d10、d13、d17(造模后d4为首次给药日)，蒿甲醚均显示出显著的镇痛效果(^&&&p<0.001)；在给药3小时和24小时(次日给药前)的检测结果中，与模型snl组相比，在造模后d10、d13、d17天均显示出显著的镇痛效果(^***p<0.001)。

3.2蒿甲醚能够缓解抑郁

蒿甲醚对抑郁行为影响的悬尾实验检测结果如图8a结果显示：在造模/假手术处理之前的第0天，模型snl组/假手术组/用药组的停止挣扎时间相似。在造模后的d9及d17(造模后d4首次给药)，模型snl组与假手术组小鼠相比(^&&&p<0.001)，停止挣扎时间显著增加，显示出抑郁样症状，证明神经病理性疼痛模型并发抑郁。用药组小鼠与模型snl组相比(^***p<0.001)，停止挣扎时间显著降低，证明蒿甲醚具有对神经病理性疼痛并发的抑郁的疗效。

3.3蒿甲醚能够缓解焦虑

蒿甲醚对焦虑行为影响的旷场实验检测结果如图8b结果显示：在造模/假手术处理之前的d0，模型组/假手术组/用药组的中心区域停留时间相似。在造模后的d9及d17(造模后d4首次给药)，模型snl组与假手术组小鼠相比(^&&&p<0.001)，中心区域停留时间显著降低，显示出焦虑样样症状,证明神经病理性疼痛模型并发焦虑；用药组小鼠与模型snl组相比(^***p<0.001)，中心区域停留时间显著升高，证明蒿甲醚具有对神经病理性疼痛并发的焦虑的疗效。