治疗早发性卵巢功能不全的中药组合物的制作方法

本发明涉及一种治疗早发性卵巢功能不全的药物组合物，特别是涉及一种以植物中草药为原料制成的治疗早发性卵巢功能不全的中药组合物。本发明还涉及由该中药组合物制成的药物。

背景技术：

早发性卵巢功能不全(prematrueovarianinsufficiency，poi)指女性在40岁之前卵巢功能衰竭，以月经紊乱(如停经或稀发月经)伴有高促性腺激素(促卵泡激素(fsh)、促黄体生成素(lh))和低雌激素(雌二醇(e2))为特征。其临床表现为：停经或月经稀发；不孕；潮热、盗汗、阴道干涩等雌激素缺乏症状。绝经后发生骨质疏松、心血管疾病的风险增加，而且未经治疗可能因这些风险影响患者的生命质量和寿命。

目前早发性卵巢功能不全的治疗方法主要是激素治疗(homonetreatment，ht)。ht对改善低雌激素症状、预防绝经后骨质疏松及心血管疾病是有益的，但其阴道不规则出血、头痛、肠胃不适等不良反应和血栓形成及长期应用潜在致癌的风险也限制了其应用，尤其对有生育要求的患者。目前ht的研究仍然缺乏延缓卵巢衰退及卵泡复苏的临床证据，故相关指南建议采用赠卵体外受精一胚胎移植方案。

中医药治疗poi有一定优势，尤其在早期干预对衰退卵巢的卵泡复苏、延缓卵巢的衰退可能有潜在的作用。2015年2月中华医学会生殖医学分会制定的《卵巢低反应专家共识》中明确指出中药治疗卵巢功能低下的有效性，但由于缺乏高级别的循证证据，目前尚没有一种能有效治疗poi的中药组合物。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供了一种用于治疗早发性卵巢功能不全的中药组合物，以解决上述问题中的至少一个。

根据本发明的一个方面，提供了一种治疗早发性卵巢功能不全的中药组合物，包括下述重量份数的各原料：

黄芪150份、当归30～45份、淮山30～45份、熟地30～45份、仙灵脾30～45份、菟丝子30～45份和沙参30～45份。

本发明的中药组合物中，黄芪大补脾肺之气，淮山健脾益气，两者合用加强健脾补后天之功效，取以后天养先天之意，后天之本得养，先天之本随之而充；当归补血活血调经，与黄芪合用，以资化源，阳生阴长，气旺血生；熟地补血养阴、填精益髓，仙灵脾补肾助阳，两者合用肾阴阳并补，加强补先天之肾之功效；菟丝子滋补肝肾，沙参养阴生水，增强调补肾精之功。全方兼顾先后天之本，气血同调，共奏“健脾补肾，益气养血”之功效，可改善对早发性卵巢功能不全患者月经情况，对早发性卵巢功能不全患者的血清内分泌水平有一定的调节作用。

在一些具体的实施方式中，本发明治疗早发性卵巢功能不全的中药组合物由下述重量份数原料组成：

黄芪150份、当归30份、淮山30份、熟地30份、仙灵脾30份、菟丝子30份和沙参30份。

根据本发明的另一个方面，还提供了一种治疗早发性卵巢功能不全的药物，包括上述中药组合物的水提物和药学上可接受的载体组成。其中，这种药物可以被制成水剂、颗粒剂、散剂、片剂、胶囊剂、膏滋剂、合剂或丸剂等剂型，实现运输、贮存和使用的方便、快捷。

附图说明

图1为本发明中药在vcd诱导衰老模型中促进卵泡复苏的作用。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步详细的说明。

本发明中药组合物主要针对早发性卵巢功能不全的患者，下面列举了本发明实施例1～4的组分和重量。

实施例1：黄芪150g、当归30g、淮山30g、熟地30g、仙灵脾30g、菟丝子30g和沙参30g。

实施例2：黄芪150g、当归35g、淮山40g、熟地45g、仙灵脾30g、菟丝子35g和沙参40g。

实施例3：黄芪150g、当归40g、淮山35g、熟地30g、仙灵脾45g、菟丝子30g和沙参35g。

实施例4：黄芪150g、当归45g、淮山40g、熟地35g、仙灵脾30g、菟丝子35g和沙参40g。

本发明中药组合物可以采用中药的常规使用方法使用，使用过程如下：

(1)按比例称取组合物中各组分放入干净的容器中，加入3～5升凉水浸泡，一般浸泡半小时至一小时左右，这时候中药原料吸掉了很多水分。

(2)将浸泡好的中药组合物连同泡中药组合物的水一起倒入砂锅内，大火煮开后，小火煎熬，煎煮至砂锅内仅剩1升水。

(3)第一遍煎药，煎开之后还要小火煎熬10～15分钟，用双层干净的纱布贴在砂锅的开口边缘处，通过纱布将煎好的药水倒出来，药渣留在砂锅内。

(4)用2～3升凉开水或者温水继续浸泡刚刚煎过的药渣半小时。然后，小火煎熬至砂锅内仅剩0.5升水，用双层干净的纱布滤出煎好的药水，药渣基本就没有什么药性了，可以倒掉。

(5)将两次煎熬的药液混合在一起，然后分为六份，分三天服用，每天分早晚两次服用，第二次喝的时候应该加热一下。

此外，还可以将上述中药水剂和药学上可接受的载体(如：玉米粉、淀粉、明胶、糖衣等)混合做成颗粒剂、散剂、片剂、胶囊剂、膏滋剂、合剂或丸剂等形式的药物，即各种中成药。含活性成分的药液与载体的重量份配比为1:19～19:1。制备的药物方便运输、储存和使用。使用时，水剂、颗粒剂、散剂或合剂可以放入开水中，待药剂溶解并搅拌均匀后服用，而丸剂、片剂或胶囊剂则可以直接用温水服用。

1、为了验证本发明药物用于治疗早发性卵巢功能不全的效果，进行如下临床观察试验。

1.1月经及妊娠情况

对纳入门诊的46名早发性卵巢功能不全患者按其临床表现分类：月经稀发或闭经患者31例，月经频发患者7例，月经量少患者25例，口服该中药组合物并进行临床观察。服用量及方法如下：实施例1中的中药组合物，按照上述常规使用方法煎煮中药组合物，每剂药分成6份，所有患者每天早、晚各口服一份，月经来潮停药3天继续服用，持续口服该方药3个月经周期后，统计月经情况的变化及所有患者的病情改善情况。统计结果见表1。(备注：参照中华中医药学会制定的《中医妇科常见病诊疗指南》中的患者月经情况观察表，将月经紊乱分为月经频发、月经稀发或闭经、月经量少三种状态，按程度的不同分等级，其中，月经频发分为21～25天一潮、16～20天一潮、小于15天一潮三个等级，月经稀发或闭经分为35～50天一潮、51～65天一潮、66～90天一潮、91天以上一潮四个等级，月经量少分为经量偏少、经量非常少两个等级。根据患者治疗前后月经情况进行疗效判定，若治疗后患者月经周期或经量程度好转一个等级或以上，则为改善，若治疗后患者月经周期或经量均无变化或下降一个等级或以上则为无效)。

治疗前，统计所有接受本中药水剂治疗的患者中有生育要求的人数。治疗后，统计成功妊娠的人数。统计结果见表2。

表1治疗前后月经情况比较

表2治疗后月经改善及妊娠结果

1.2比较治疗前后血清性激素水平

对上述纳入门诊的46名早发性卵巢功能不全患者进行如下激素检测(1)接受本发明中药组合物治疗前，抽取2ml的静脉血，用于进行常用的性激素(fsh、lh、e2)检查工作。(2)接受本发明中药水剂治疗后，抽取2ml的静脉血，用于进行常用的性激素(fsh、lh、e2)检查。治疗前后，46名早发性卵巢功能不全患者的性激素检查统计数据见表3。

表3治疗前后血清性激素水平比较

*表示差异有统计学意义。▽表示经正态性检验服从正态分布，▼表示经正态性检验不服从正态分布。

比较表3中治疗前后血清fsh、lh、e2、fsh/lh的变化，可见：本发明中药组合物可降调升高的fsh、lh和e2，轻微升高fsh/lh，对降调e2差异显著，有统计学意义。

2、为了进一步证明本发明中药能用于治疗早发性卵巢功能不全，还进行了如下对比性研究：

以月经失调或闭经为主诉且符合纳入标准的早发性卵巢功能不全患者共28例，其中治疗组15例，对照组13例。治疗组给予本方药治疗，每个月经周期第3天开始服用，月经来潮停药，每日早、晚各一次温服实施例1制备的中药水剂一份(150-200ml)；对照组不予药物治疗。观察治疗组、对照组月经情况的变化及病情改善情况，对治疗组和对照组患者进行治疗前后的性激素检查。观察3个月经周期，分析治疗前、后患者月经变化情况及血清内分泌(包括血清amh、fsh、e2、lh)的变化，并比较两组疗效，结果如下：

2.1基线资料分析

对治疗组和对照组的基线资料进行比较，比较内容包括：年龄、月经初潮年龄和病程三个方面，经独立样本检验和独立样本秩和检验，两组病例年龄、月经初潮年龄、病程差异无统计学意义(p>0.05)具有可比性，详见表4。

表4两组基线资料比较

2.2两组月经情况比较

中药组月经稀发者7例，治疗后月经周期缩短一个等级以上者5例；月经频发者5例，治疗后月经周期延长一个等级以上者4例；月经量少者6例，治疗后经量增加一个等级以上者4例；15例患者中治疗后月经总体情况改善者12例，改善率为80％。

空白组月经稀发者6例，观察期结束后5例月经周期无明显改变，1例月经周期缩短；月经频发者4例，观察结束后月经周期均无明显改变；月经量少者5例，观察期结束后月经量均无明显改变。13例患者中仅1例月经改善，改善率为7.7％，经卡方检验，差异有统计学意义(p<0.05)，中药组效果明显优于空白组，详见表5。

表5两组治疗后月经改善情况比较

*表示差异有统计学意义

2.3治疗前后血清内分泌水平比较

2.3.1治疗前后血清内分泌水平组内比较

中药组治疗前后血清e2、amh组内比较差异有统计学意义(p<0.05),空白组治疗前后血清内分泌水平无明显变化，差异无统计学意义(p>0.05)，治疗前后血清内分泌水平组内比较情况见表6。

表6治疗前后血清内分泌水平组内比较

*表示差异有统计学意义

2.3.2治疗前后血清内分泌水平差值组间比较

对治疗前后血清内分泌水平进行组间比较，治疗前后血清fsh、e2、lh差值组间差异有统计学意义(p<0.05)，治疗前后血清amh差值组间差异无统计学意义(p>0.05)，治疗前后血清内分泌水平差值的组间比较见表7。

表7治疗前后血清内分泌水平差值的组间比较

*表示差异有统计学意义

3、动物试验研究

本实验选择去氧乙烯基环己烯(vcd)诱导的大鼠模型，给予本方药的干预，在卵巢衰退的不同阶段动态检测大鼠卵巢内各级卵泡的数目的变化，以观察本方药改善卵巢功能的作用；并选取本方两组不同剂量进行干预，以比较两个剂量组的效果。

实验方法：spf级sd大鼠，21天大小，雌性，共44只，二级实验室喂养，室温22℃±2℃，湿度50％，予普通饲料喂养，自由摄水，照明昼夜明暗交替时间为12：12，适应性喂养7天。在28天龄时开始用vcd造模。

44只大鼠共分为以下4组：①对照组(11只)：按剂量为每kg小鼠腹腔注射160mg的芝麻油，每天一次，共15天；②vcd组(11只)：与对照组一样，按剂量160mg/kg(芝麻油:vcd＝40:1)，每天腹腔注射一次，共15天；③中药剂量ⅰ组(11只，对应图1中的50g50天)：按vcd组方案每天腹腔注射一次vcd，共15天。在造模结束10天后开始给予剂量ⅰ中药，每天早晚各一次，共25天，故从造模第一天开始计算，取材日为造模后50天；④中药剂量ⅱ组(11只，对应图1中150g50天)：按vcd组方案每天腹腔注射一次vcd，共15天。在造模结束10天后开始给予剂量ⅱ中药，每天早晚各一次，共25天，故从造模第一天开始计算，取材日为造模后50天。

3.1药物制备：

①中药剂量ⅰ组：黄芪50g、当归15g、淮山15g、熟地15g、仙灵脾15g、菟丝子15g、沙参15g。按照上述常规使用方法用去离子水水煎，旋转蒸发浓缩，制得一剂中药水剂(每日共服用一剂中药)。中药剂量ⅰ组11只小鼠按体重及公式换算每次灌胃量进行给药，每日早晚各一次。

②中药剂量ⅱ组：黄芪150g、当归30g、淮山30g、熟地30g、仙灵脾30g、菟丝子30g、沙参30g。按照上述常规使用方法用去离子水水煎，旋转蒸发浓缩，制得一剂中药水剂(三天共服用一剂中药)。中药剂量ⅱ组11只小鼠按体重及公式换算每次灌胃量进行给药，每日早晚各一次。

大鼠给药量计算方法：

每天称重计算给药，人的体重考虑妇女为主要人群，按60kg换算，人的剂量为(140/60)g/kg、(330/60)g/kg。

若大鼠体重<200g，按照折算系数换算，60kg人与大鼠的折算系数为5.98。

中药剂量ⅰ组鼠的剂量＝人的剂量*折算系数＝(140/60*5.98)mg/kg

中药剂量ⅱ组鼠的剂量＝人的剂量*折算系数＝(330/60*5.98)mg/kg

若大鼠体重>200g，按照鼠的体表面积换算，能够减少误差，人的体表面积为1.55，不同体重鼠的体表面积不同。

大鼠的剂量＝大鼠的体表面积/人的体表面积*人的剂量*人的体重/鼠的体重。

药物干预结束后分别在造模后50天取材，观察卵巢形态观察和卵泡分级计数：在照相显微镜下观察、采集图像，选取卵巢最大横切面的三张切片，对整个卵巢最大横切面进行图像分析，以卵母细胞核作为标记，计算各种卵泡数目，每个卵巢分析3张切片，同一切片计算3次，取平均值。

实验结果提示：本方药可以有效增加衰老卵巢中窦卵泡、成熟卵泡的数量，而减少闭锁卵泡数量，与模型组相比有显著性的差异，提示本方有促进衰退卵巢中卵泡复苏的作用(见图1)。两个不同剂量组比较，结果显示，中药剂量ⅱ组增加衰老卵巢中窦卵泡、成熟卵泡的数量的效果优于中药剂量ⅰ组。

综合分析具体实施方式中的试验结果可得出：

1、经该方药治疗可改善早发性卵巢功能不全患者月经情况；

2、该方药对早发性卵巢功能不全患者的血清内分泌水平有一定的调节作用；

3、在早发性卵巢功能不全的早期阶段，该方药通过降调升高的e2来改善月经状况，在早发性卵巢功能不全的晚期阶段，该方药通过降调升高的fsh来改善月经状况；

4、该方药通过增加衰老卵巢中成熟卵泡的数量、减少闭锁卵泡的数量来改善卵巢功能，促进衰退卵巢中卵泡的复苏。

以上所述的仅是本发明的一些实施方式。对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明创造构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。