本发明提供了影响中枢神经系统(cns)的药物和外周肾上腺素能受体激动剂的组合，所述组合增强这些药物并减轻它们的副作用。本发明还提供了在疗法中使用这些组合的方法。
背景技术：
接受影响cns的药物的患者通常使用这些药物的最低有效剂量来治疗，这是因为假设使用低剂量将最小化或消除与药物相关的副作用。这种基本原理的主要缺点是不能获得最大治疗效果。在这些条件下，在急性或慢性形式的cns障碍的治疗中，cns药物的效能受限。
以前通过使用不同cns药物的组合来增强cns药物特别是在公认的高治疗剂量下的治疗作用，以实现最大治疗效果的尝试，通常导致副作用的提高而不是降低，并因此可能不安全。
属于本发明的发明人之一的美国专利6,833,377和欧洲专利1359939公开了一种增强cns药物的活性的方法，所述方法包括将所述药物与有效量的影响外周化学感受器的化合物并任选地与有效量的渗透压感受器的刺激物一起系统性给药。
美国专利8,729,070涉及一种cns药物组合物，其包含cns活性药剂和优选地至少两种迷走神经调节剂，其中之一是机械刺激感受器刺激物。美国专利8,729,070还公开了降低cns活性药剂副作用的方法。
在cns疗法领域中，对cns药物的安全、低剂量且高度有效的组合物，仍存在需求。
技术实现要素：
本发明涉及通过将cns药物与外周肾上腺素能受体激动剂共同给药来增强所述cns药物的活性和/或降低其副作用的方法。本发明部分是基于cns药物和外周肾上腺素能受体激动剂的某些组合在标准(被称为治疗性)和标准以下(被称为非治疗性)两种剂量下增强cns药物的治疗效能并减轻cns药物的副作用的出人意料的能力。
cns药物和外周肾上腺素能受体激动剂的组合安全地增强cns药物的能力，可以被用于给药迄今为止被认为是标准以下(或非治疗性)剂量的cns药物和外周肾上腺素能受体激动剂，而没有降低所述cns药物的治疗效能或发生药物相关的副作用的风险，正如在本文中所证实的。这种能力可以被进一步用于给药常规剂量的cns药物与外周肾上腺素能受体激动剂的组合，由此获得提高的治疗效能而不发生相关的副作用，正如也在本文中所证实的。
正如下文示例的，抗帕金森氏病药物或镇痛药与外周肾上腺素能受体激动剂并任选地与nmda受体拮抗剂一起以标准以下剂量(fda批准药物产品名单(fdalistofapproveddrugproducts)，第37版，2017)的组合给药，产生安全的抗帕金森氏病或镇痛效果，其至少等于单独的这些药物在标准治疗剂量下的抗帕金森氏病或镇痛效果，而不发生在使用标准的高剂量的这些药物时常规引起的副作用。
正如下文进一步示例的，不同药物以标准剂量的组合给药产生安全且协同的抗帕金森氏病或镇痛效果，超过单独的这些药物在标准治疗剂量下的抗帕金森氏病和镇痛效果，并减轻标准剂量的镇痛药和抗帕金森氏病药物的副作用。
一方面，本发明提供了一种在需要的对象中增强选自抗帕金森氏病药物和镇痛药的cns药物的活性或减轻其至少一种副作用的方法，所述方法包括向所述对象系统性给药：(a)至少一种第一cns药物，其选自抗帕金森氏病药物和镇痛药；(b)至少一种第二cns药物，其是nmda受体拮抗剂；和(c)至少一种外周肾上腺素能受体激动剂。
在某些实施方式中，所述第一cns药物是抗帕金森氏病药物。在某些实施方式中，所述第一cns药物是镇痛药。在某些实施方式中，所述药物在分开的剂型中各自给药。在可选实施方式中，所述药物可以在单一剂型中。在另外的实施方式中，所述药物中的两者可以组合在单一剂型中，并且第三种药物可以在分开的剂型中给药。
在某些实施方式中，所述抗帕金森氏病药物选自：(a)l-3,4-二羟基苯丙氨酸(左旋多巴)；(b)多巴胺激动剂，其选自溴隐亭、卡麦角林、培高利特、普拉克索、罗匹尼罗、吡贝地尔、阿朴吗啡、瑞戈汀(rigotine)、喹高利特、非诺多泮和麦角乙脲；和(c)单胺氧化酶b(maob)抑制剂，其选自司来吉兰、去甲基司来吉兰、帕吉林、雷沙吉兰、拉扎贝胺、米拉醋胺、莫非吉兰、d-丙炔苯丙胺和拉多替吉。在特定实施方式中，所述抗帕金森氏病药物是左旋多巴。
在某些实施方式中，所述镇痛药选自吗啡、阿米替林、安乃近、芬太尼、普罗梅多尔、阿诺普诺(omnoponum)、羟考酮、氢可酮、氢吗啡酮、重酒石酸氢可酮和丁丙诺啡。在某些实施方式中，所述镇痛药是吗啡、阿米替林或安乃近。在某些实施方式中，所述镇痛药是吗啡。在某些实施方式中，所述镇痛药是阿米替林。在某些实施方式中，所述镇痛药是安乃近。
在某些实施方式中，所述nmda受体拮抗剂选自美金刚胺、金刚烷胺、右美沙芬和氯胺酮。在某些实施方式中，所述nmda受体拮抗剂是美金刚胺。
在某些实施方式中，所述外周肾上腺素能受体激动剂选自苯肾上腺素、肾上腺素、米多君和伪麻黄碱。在某些实施方式中，所述外周肾上腺素能受体激动剂是苯肾上腺素或肾上腺素。在某些实施方式中，所述外周肾上腺素能受体激动剂是苯肾上腺素。在某些实施方式中，所述外周肾上腺素能受体激动剂是肾上腺素。
在某些实施方式中，所述第一cns药物选自左旋多巴、吗啡、阿米替林或安乃近；所述nmda受体拮抗剂是美金刚胺；并且所述外周肾上腺素能受体激动剂选自苯肾上腺素或肾上腺素。
在某些实施方式中，所述第一cns药物是左旋多巴，所述nmda受体拮抗剂是美金刚胺，并且所述外周肾上腺素能受体激动剂是苯肾上腺素。在某些实施方式中，所述第一cns药物是吗啡，所述nmda受体拮抗剂是美金刚胺，并且所述外周肾上腺素能受体激动剂是肾上腺素。在某些实施方式中，所述第一cns药物是吗啡，所述nmda受体拮抗剂是美金刚胺，并且所述外周肾上腺素能受体激动剂是苯肾上腺素。在某些实施方式中，所述第一cns药物是阿米替林，所述nmda受体拮抗剂是美金刚胺，并且所述外周肾上腺素能受体激动剂是苯肾上腺素。在某些实施方式中，所述第一cns药物是安乃近，所述nmda受体拮抗剂是美金刚胺，并且所述外周肾上腺素能受体激动剂是苯肾上腺素。
在某些实施方式中，所述副作用选自运动机能亢进、镇静、痛觉过敏、强直性昏厥、运动功能障碍和成瘾。在某些实施方式中，所述副作用是运动机能亢进。在某些实施方式中，所述副作用是镇静。在某些实施方式中，所述副作用是痛觉过敏。在某些实施方式中，所述副作用是强直性昏厥。在某些实施方式中，所述副作用是运动功能障碍。在某些实施方式中，所述副作用是成瘾。
在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象系统性给药5-200mg左旋多巴。在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象系统性给药5、10、30、50、100或200mg左旋多巴。
在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象系统性给药0.1-50mg吗啡。在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象系统性给药0.1、0.2、0.5、1、2、4、5、10、25、30或50mg吗啡。
在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象系统性给药0.5-20mg阿米替林。在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象系统性给药0.5、1或20mg阿米替林。
在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象系统性给药0.1-40mg安乃近。在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象系统性给药0.5、1或40mg安乃近。
在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象系统性给药5-30mg美金刚胺。在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象系统性给药5、10或30mg美金刚胺。
在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象系统性给药0.1-3mg苯肾上腺素。在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象系统性给药0.1、0.2、0.3、0.5、1或3mg苯肾上腺素。
在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象系统性给药0.05-0.1mg肾上腺素。在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象系统性给药0.05或0.1mg肾上腺素。
在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象系统性给药(a)5-200、5、10、30、50、100或200mg左旋多巴，(b)0.1-50、0.1、0.2、0.5、1、2、4、5、10、25、30或50mg吗啡，(c)0.5-20、0.5、1或20mg阿米替林或(d)0.5-40、0.5、1或40mg安乃近；(e)5-30、5、10或30mg美金刚胺；和(f)0.1-3、0.1、0.2、0.3、0.5、1或3mg苯肾上腺素或(g)0.05-0.1、0.05或0.1mg肾上腺素。
在某些实施方式中，所述方法包括以分别0.2-1000:1-300:1的摩尔比向所述对象系统性给药所述第一cns药物、第二cns药物和外周肾上腺素能受体激动剂。
另一方面，本发明还提供了一种在需要的对象中治疗帕金森氏病(pd)或进行性核上性麻痹(psp)或帕金森综合症的方法，所述方法包括向所述对象系统性给药：(a)至少一种第一cns药物，其是抗帕金森氏病药物；(b)至少一种第二cns药物，其是nmda受体拮抗剂；和(c)至少一种外周肾上腺素能受体激动剂。
另一方面，本发明还提供了一种在需要的对象中治疗疼痛或痛觉过敏的方法，所述方法包括向所述对象系统性给药：(a)至少一种第一cns药物，其是镇痛药；(b)至少一种第二cns药物，其是nmda受体拮抗剂；和(c)至少一种外周肾上腺素能受体激动剂。
另一方面，本发明还提供了一种药物组合物，其包含：(a)至少一种第一cns药物，其选自抗帕金森氏病药物和镇痛药；(b)至少一种第二cns药物，其是nmda受体拮抗剂；和(c)至少一种外周肾上腺素能受体激动剂。
在某些实施方式中，上述药物组合物被用于增强所述第一cns药物的活性或减轻其至少一种副作用的方法中。在某些实施方式中，所述第一cns药物是抗帕金森氏病药物，其用于治疗帕金森氏病(pd)或进行性核上性麻痹(psp)或帕金森综合症的方法中。在某些实施方式中，所述第一cns药物是镇痛药，其用于治疗疼痛或痛觉过敏的方法中。
另一方面，本发明还提供了一种单元剂型，其包含如上所述的药物组合物。
另一方面，本发明提供了下述药物的组合：(a)至少一种第一cns药物，其选自抗帕金森氏病药物和镇痛药；(b)至少一种第二cns药物，其是nmda受体拮抗剂；和(c)至少一种外周肾上腺素能受体激动剂，所述组合用于下述方法中：(i)增强所述第一cns药物的活性或减轻其至少一种副作用，(ii)治疗帕金森氏病(pd)或进行性核上性麻痹(psp)或帕金森综合症，或(iii)治疗疼痛或痛觉过敏，所述方法包括所述组合的系统性给药。
另一方面，本发明还提供了一种在需要的对象中增强选自抗帕金森氏病药物和镇痛药的cns药物的活性或减轻其至少一种副作用的方法，所述方法包括向所述对象系统性给药：(a)至少一种cns药物，其中所述cns药物是左旋多巴；和(b)至少一种外周肾上腺素能受体激动剂，其中所述外周肾上腺素能受体激动剂是苯肾上腺素或肾上腺素；其中所述cns药物和外周肾上腺素能受体激动剂的摩尔比分别在1-2000:1的范围内。
在某些实施方式中，所述cns药物是左旋多巴，并且所述外周肾上腺素能受体激动剂是苯肾上腺素或肾上腺素。每种可能性代表本发明的独立实施方式。在某些实施方式中，所述cns药物是左旋多巴，并且所述外周肾上腺素能受体激动剂是苯肾上腺素。在某些实施方式中，所述cns药物是左旋多巴，并且所述外周肾上腺素能受体激动剂是肾上腺素。
在某些实施方式中，所述副作用选自运动机能亢进、镇静、痛觉过敏、强直性昏厥、运动功能障碍和成瘾。在某些实施方式中，所述副作用是运动机能亢进。在某些实施方式中，所述副作用是镇静。在某些实施方式中，所述副作用是痛觉过敏。在某些实施方式中，所述副作用是强直性昏厥。在某些实施方式中，所述副作用是运动功能障碍。在某些实施方式中，所述副作用是成瘾。
在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象系统性给药15-200mg左旋多巴。在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象系统性给药15、30、100或200mg左旋多巴。
在某些实施方式中，所述外周肾上腺素能受体激动剂是苯肾上腺素。在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象系统性给药0.2-3mg苯肾上腺素。在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象系统性给药0.2、1或3mg苯肾上腺素。
在某些实施方式中，所述外周肾上腺素能受体激动剂是肾上腺素。在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象系统性给药0.1-0.3mg肾上腺素。在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象系统性给药0.1、0.2或0.3mg肾上腺素。
在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象系统性给药：(a)15-200、15、30、100或200mg左旋多巴；和(b)0.2-3、0.2、1或3mg苯肾上腺素或(c)0.1-0.3、0.1、0.2或0.3mg肾上腺素。
另一方面，本发明还提供了一种在需要的对象中治疗帕金森氏病(pd)或进行性核上性麻痹(psp)或帕金森综合症的方法，所述方法包括向所述对象系统性给药：(a)至少一种cns药物，其中所述cns药物是左旋多巴；和(b)至少一种外周肾上腺素能受体激动剂，其中所述外周肾上腺素能受体激动剂是苯肾上腺素或肾上腺素；其中所述cns药物和外周肾上腺素能受体激动剂的摩尔比分别在1-2000:1的范围内。
另一方面，本发明还提供了一种药物组合物，其包含：(a)至少一种cns药物，其中所述cns药物是左旋多巴；和(b)至少一种外周肾上腺素能受体激动剂，其中所述外周肾上腺素能受体激动剂是苯肾上腺素或肾上腺素；其中所述cns药物和外周肾上腺素能受体激动剂的摩尔比分别在1-2000:1的范围内。
另一方面，本发明还提供了一种单元剂型，其包含如上所述的药物组合物。
另一方面，本发明还提供了一种包含下述药物的组合：(a)至少一种cns药物，其中所述cns药物是左旋多巴；和(b)至少一种外周肾上腺素能受体激动剂，其中所述外周肾上腺素能受体激动剂是苯肾上腺素或肾上腺素；其中所述cns药物和外周肾上腺素能受体激动剂的摩尔比分别在1-2000:1的范围内，所述组合用于下述方法中：(i)增强所述cns药物的活性或减轻其至少一种副作用，或(ii)治疗帕金森氏病(pd)或进行性核上性麻痹(psp)或帕金森综合症，所述方法包括所述组合的系统性给药。
应该强调的是，与cns药物和/或外周肾上腺素能受体激动剂的摩尔比范围、特定摩尔比、重量范围和特定重量相关的实施方式，涉及所述cns药物和外周肾上腺素能受体激动剂可以在其中组合的药物组合物。还应该明确理解，所述药物可以存在于分开的剂型中。还应该明确理解，在治疗方法中，所述cns药物和外周肾上腺素能受体激动剂可以被分开或一起给药。还应该明确理解，当所述药物在分开的剂型中给药时，它们在基本上相同的时间或以基本上重叠的时间表给药。本发明的其他实施方式和完整的适用性范围将从下文给出的详细描述变得显而易见。然而应该理解，所述详细描述和具体实施例，尽管指明了本发明的优选实施方式，但仅仅是作为说明而提供，因为对于本领域技术人员来说，在本发明的精神和范围之内的各种不同变化和修改将从该详细描述变得显而易见。
具体实施方式
本发明提供了包含cns药物和外周肾上腺素能受体激动剂的协同组合的药物组合物，其与目前用于治疗各种不同人类疾病或障碍的标准cns药物相比提供了治疗优点。本发明的药物组合物的两个主要优点是使用低于标准剂量的cns药物高效治疗对象而无损治疗结果的能力，和使用标准剂量的cns药物以优越的治疗结果治疗对象，同时减轻在以标准剂量使用cns药物时常规引起的与cns药物相关的副作用的能力。
本发明还提供了用于治疗接受或需要接受cns药物疗法的对象的新方法。一种这样的方法包括给药低于标准剂量的cns药物与低于标准剂量的外周肾上腺素能受体激动剂在一起的组合。另一种这样的方法包括给药低于标准剂量的cns药物与标准剂量的外周肾上腺素能受体激动剂在一起的组合。这些方法提供了标准剂量的cns药物的治疗益处，而没有常见的与cns药物相关的副作用或cns药物耐药性的风险。另一种这样的方法包括给药标准剂量的cns药物与标准剂量的外周肾上腺素能受体激动剂在一起的组合。这种方法增强标准剂量的cns药物的治疗效能并减轻其副作用。这种方法可用于安全地治疗耐药对象和/或用于治疗急性形式的cns疾病和障碍。
cns药物被批准以受限的剂量范围用于人类疗法，其中考虑到了实现治疗显著效果所需的最低剂量、不引起有害副作用的最高剂量和患者特异性指标例如体重和年龄。例如，左旋多巴和吗啡在人类中的批准治疗范围分别为50-400mg和5-20mg。阿米替林在人类中的批准治疗范围为25-100mg，安乃近在人类中的批准治疗范围为0.2-1.0mg。例如，美金刚胺在人类中的批准治疗范围为5-20mg。与cns药物相似，外周肾上腺素能受体激动剂也被批准以受限的剂量范围用于人类疗法。例如，苯肾上腺素和肾上腺素在人类中的批准治疗范围分别为5-20mg和0.2-1mg。根据本发明的原理，提供了药物组合物和治疗方法，其包含或利用剂量低于已知的批准的治疗范围的cns药物和外周肾上腺素能受体激动剂的组合，和/或将所述批准的治疗范围的副作用降至最低。
此外，根据本发明的原理，至少一种药物以比其如上所述的标准剂量低10倍至100倍的低剂量给药，或者以比其如上所述的标准剂量低2倍至5倍的标准以下剂量给药。例如，在人类中的批准治疗范围为0.2mg至1mg的肾上腺素，可以以0.05mg至0.1mg的剂量给药，其被认为是低剂量(20倍，1mg相比于0.05mg)或标准以下剂量(2倍，0.2mg相比于0.1mg)。
不受任何理论或机制限制，假定抗帕金森氏病药物和镇痛药的安全增强通过下述两阶段机制实现：在第一阶段中，外周肾上腺素能受体激动剂降低nmda受体拮抗剂的有效剂量并且不产生副作用，并且在第二阶段，这些有效剂量降低的nmda受体拮抗剂增强效能，降低了抗帕金森氏病药物和阿片类和非阿片类镇痛药的有效剂量并消除其副作用。
一方面，本发明提供了一种在需要的对象中增强选自抗帕金森氏病药物和镇痛药的cns药物的活性或减轻其至少一种副作用的方法，所述方法包括向所述对象系统性给药：(a)至少一种第一cns药物，其选自抗帕金森氏病药物和镇痛药；(b)至少一种第二cns药物，其是nmda受体拮抗剂；和(c)至少一种外周肾上腺素能受体激动剂。
另一方面，本发明还提供了一种在需要的对象中治疗帕金森氏病(pd)或进行性核上性麻痹(psp)的方法，所述方法包括向所述对象系统性给药：(a)至少一种第一cns药物，其是抗帕金森氏病药物；(b)至少一种第二cns药物，其是nmda受体拮抗剂；和(c)至少一种外周肾上腺素能受体激动剂。
另一方面，本发明还提供了一种在需要的对象中治疗疼痛或痛觉过敏的方法，所述方法包括向所述对象系统性给药：(a)至少一种第一cns药物，其是镇痛药；(b)至少一种第二cns药物，其是nmda受体拮抗剂；和(c)至少一种外周肾上腺素能受体激动剂。
另一方面，本发明还提供了一种药物组合物，其包含：(a)至少一种第一cns药物，其选自抗帕金森氏病药物和镇痛药；(b)至少一种第二cns药物，其是nmda受体拮抗剂；和(c)至少一种外周肾上腺素能受体激动剂。
另一方面，本发明还提供了一种单元剂型，其包含如上所述的药物组合物。
在某些实施方式中，所述抗帕金森氏病药物选自：(a)l-3,4-二羟基苯丙氨酸(左旋多巴)；(b)多巴胺激动剂，其选自溴隐亭、卡麦角林、培高利特、普拉克索、罗匹尼罗、吡贝地尔、阿朴吗啡、瑞戈汀、喹高利特、非诺多泮和麦角乙脲；和(c)单胺氧化酶b(maob)抑制剂，其选自司来吉兰、去甲基司来吉兰、帕吉林、雷沙吉兰、拉扎贝胺、米拉醋胺、莫非吉兰、d-丙炔苯丙胺和拉多替吉。每种可能性代表本发明的独立实施方式。在某些实施方式中，所述抗帕金森氏病药物是左旋多巴。
在某些实施方式中，所述镇痛药选自吗啡、阿米替林、安乃近、芬太尼、普罗梅多尔、阿诺普诺、羟考酮、氢可酮、氢吗啡酮、重酒石酸氢可酮和丁丙诺啡。在某些实施方式中，所述镇痛药是吗啡、阿米替林或安乃近。每种可能性代表本发明的独立实施方式。在某些实施方式中，所述镇痛药是吗啡。在某些实施方式中，所述镇痛药是阿米替林。在某些实施方式中，所述镇痛药是安乃近。
在某些实施方式中，所述nmda受体拮抗剂选自美金刚胺、金刚烷胺、右美沙芬和氯胺酮。每种可能性代表本发明的独立实施方式。在某些实施方式中，所述nmda受体拮抗剂是美金刚胺。
在某些实施方式中，所述外周肾上腺素能受体激动剂选自苯肾上腺素、肾上腺素、米多君和伪麻黄碱。在某些实施方式中，所述外周肾上腺素能受体激动剂是苯肾上腺素或肾上腺素。每种可能性代表本发明的独立实施方式。在某些实施方式中，所述外周肾上腺素能受体激动剂是苯肾上腺素。在某些实施方式中，所述外周肾上腺素能受体激动剂是肾上腺素。
在某些实施方式中，所述第一cns药物是左旋多巴、吗啡、阿米替林或安乃近，所述nmda受体拮抗剂是美金刚胺，并且所述外周肾上腺素能受体激动剂是苯肾上腺素或肾上腺素。每种可能性代表本发明的独立实施方式。
在某些实施方式中，所述第一cns药物是左旋多巴，所述nmda受体拮抗剂是美金刚胺，并且所述外周肾上腺素能受体激动剂是苯肾上腺素。在某些实施方式中，所述第一cns药物是吗啡，所述nmda受体拮抗剂是美金刚胺，并且所述外周肾上腺素能受体激动剂是肾上腺素。在某些实施方式中，所述第一cns药物是吗啡，所述nmda受体拮抗剂是美金刚胺，并且所述外周肾上腺素能受体激动剂是苯肾上腺素。在某些实施方式中，所述第一cns药物是阿米替林，所述nmda受体拮抗剂是美金刚胺，并且所述外周肾上腺素能受体激动剂是苯肾上腺素。在某些实施方式中，所述第一cns药物是安乃近，所述nmda受体拮抗剂是美金刚胺，并且所述外周肾上腺素能受体激动剂是苯肾上腺素。
在某些实施方式中，所述副作用选自运动机能亢进、镇静、痛觉过敏、强直性昏厥、运动功能障碍和成瘾。每种可能性代表本发明的独立实施方式。在某些实施方式中，所述副作用是运动机能亢进。在某些实施方式中，所述副作用是镇静。在某些实施方式中，所述副作用是痛觉过敏。在某些实施方式中，所述副作用是强直性昏厥。在某些实施方式中，所述副作用是运动功能障碍。在某些实施方式中，所述副作用是成瘾。
在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象系统性给药5-200mg左旋多巴。在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象系统性给药5、10、30、50、100或200mg左旋多巴。每种可能性代表本发明的独立实施方式。
在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象系统性给药0.1-50mg吗啡。在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象系统性给药0.1、0.2、0.5、1、2、4、5、10、25、30或50mg吗啡。每种可能性代表本发明的独立实施方式。
在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象系统性给药0.5-20mg阿米替林。在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象系统性给药0.5、1或20mg阿米替林。每种可能性代表本发明的独立实施方式。
在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象系统性给药0.1-40mg安乃近。在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象系统性给药0.5、1或40mg安乃近。每种可能性代表本发明的独立实施方式。
在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象系统性给药5-30mg美金刚胺。在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象系统性给药5、10或30mg美金刚胺。每种可能性代表本发明的独立实施方式。
在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象系统性给药0.1-3mg苯肾上腺素。在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象系统性给药0.1、0.2、0.3、0.5、1或3mg苯肾上腺素。每种可能性代表本发明的独立实施方式。
在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象系统性给药0.05-0.1mg肾上腺素。在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象系统性给药0.05或0.1mg肾上腺素。每种可能性代表本发明的独立实施方式。
在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象系统性给药：(a)5-200、5、10、30、50、100或200mg左旋多巴，(b)0.1-50、0.1、0.2、0.5、1、2、4、5、10、25、30或50mg吗啡，(c)0.5-20、0.5、1或20mg阿米替林或(d)0.5-40、0.5、1或40mg安乃近；(e)5-30、5、10或30mg美金刚胺；和(f)0.1-3、0.1、0.2、0.3、0.5、1或3mg苯肾上腺素或(g)0.05-0.1、0.05或0.1mg肾上腺素。每种可能性代表本发明的独立实施方式。
在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象系统性给药：(a)5-10、5或10mg左旋多巴，(b)0.1-2、0.1、0.2、0.5、1或2mg吗啡，(c)0.5-1、0.5或1mg阿米替林或(d)0.5-40、0.5、1或40mg安乃近；(e)5-30、5、10或30mg美金刚胺；和/或(f)0.1-1、0.1、0.2、0.3、0.5或1mg苯肾上腺素或(g)0.05-0.1、0.05或0.1mg肾上腺素。每种可能性代表本发明的独立实施方式。
在某些实施方式中，所述方法包括以分别0.2-1000:1-300:1的摩尔比向所述对象系统性给药所述第一cns药物、第二cns药物和外周肾上腺素能受体激动剂。每种可能性代表本发明的独立实施方式。
在某些实施方式中，上述药物组合物被用于增强所述第一cns药物的活性或减轻其至少一种副作用的方法中。在某些实施方式中，所述第一cns药物是抗帕金森氏病药物，其用于治疗帕金森氏病(pd)或进行性核上性麻痹(psp)的方法中。在某些实施方式中，所述第一cns药物是镇痛药，其用于治疗疼痛或痛觉过敏的方法中。
在某些实施方式中，所述抗帕金森氏病药物选自：l-3,4-二羟基苯丙氨酸(l-dopa)；多巴胺激动剂，其选自溴隐亭、卡麦角林、培高利特、普拉克索、罗匹尼罗、吡贝地尔、阿朴吗啡、瑞戈汀、喹高利特、非诺多泮和麦角乙脲；单胺氧化酶b(maob)抑制剂，其选自司来吉兰、去甲基司来吉兰、帕吉林、雷沙吉兰、拉扎贝胺、米拉醋胺、莫非吉兰、d-丙炔苯丙胺和拉多替吉；和nmda受体拮抗剂，其选自美金刚胺、金刚烷胺和氯胺酮。每种可能性代表本发明的独立实施方式。每种可能性代表本发明的独立实施方式。在某些实施方式中，所述抗帕金森氏病药物是l-dopa。
在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药l-dopa和dopa脱羧酶抑制剂(ddci)，所述抑制剂选自苄丝肼、(2s)-3-(3,4-二羟基苯基)-2-肼基-2-甲基丙酸(卡比多巴)、α-二氟甲基-dopa(dfmd)和l-α-甲基-3,4-二羟基苯丙氨酸(甲基多巴)。每种可能性代表本发明的独立实施方式。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药l-dopa和卡比多巴。在某些实施方式中，上述药物组合物包含l-dopa和卡比多巴。
在某些实施方式中，所述镇痛药是选自下述的非阿片类镇痛药：a)非甾类消炎(nsaid)药，其选自安乃近、吡罗昔康、扑热息痛、萘普生、萘丁美酮、酮洛芬、双氯芬酸、布洛芬、萘普生钠和阿司匹林；和b)抗抑郁药，其选自阿米替林、度洛西汀、氟西汀、米那普仑和丙咪嗪。每种可能性代表本发明的独立实施方式。
在某些实施方式中，所述第一cns药物、第二cns药物和外周肾上腺素能受体激动剂的摩尔比分别为至少0.25:至少1:1。在某些实施方式中，所述第一cns药物、第二cns药物和外周肾上腺素能受体激动剂的摩尔比分别为至少0.5:至少2.5:1。在某些实施方式中，所述第一cns药物、第二cns药物和外周肾上腺素能受体激动剂的摩尔比分别为至少0.2:至少1:1。
在某些实施方式中，所述第一cns药物、第二cns药物和外周肾上腺素能受体激动剂的摩尔比分别为0.25-2000:1-600:1。在某些实施方式中，所述第一cns药物、第二cns药物和外周肾上腺素能受体激动剂的摩尔比分别为0.5-1000:2.5-300:1。在某些实施方式中，所述第一cns药物、第二cns药物和外周肾上腺素能受体激动剂的摩尔比分别为0.2-1000:1-300:1。每种可能性代表本发明的独立实施方式。
在某些实施方式中，所述第一cns药物、第二cns药物和外周肾上腺素能受体激动剂的摩尔比分别为4-180:9-30:1。在某些实施方式中，所述第一cns药物是左旋多巴，所述第二cns药物是美金刚胺，并且所述外周肾上腺素能受体激动剂是苯肾上腺素。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.025-12mg苯肾上腺素。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.05-6mg苯肾上腺素。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.1-3mg苯肾上腺素。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.3-1mg苯肾上腺素。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.4-400mg左旋多巴。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.75-300mg左旋多巴。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药1.5-200mg左旋多巴。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药4-30mg左旋多巴。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.4-40mg美金刚胺。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.75-40mg美金刚胺。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药1.5-30mg美金刚胺。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药4-10mg美金刚胺。
在某些实施方式中，第一cns药物:第二cns药物:外周肾上腺素能受体激动剂的摩尔比分别为10-350:50-150:1。在某些实施方式中，第一cns药物:第二cns药物:外周肾上腺素能受体激动剂的摩尔比分别为10-350:103:1。每种可能性代表本发明的独立实施方式。在某些实施方式中，所述第一cns药物是吗啡，所述第二cns药物是美金刚胺，并且所述外周肾上腺素能受体激动剂是肾上腺素。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.004-1.2mg肾上腺素。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.0075-0.6mg肾上腺素。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.015-0.3mg肾上腺素。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.04-0.1mg肾上腺素。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.04-30mg吗啡。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.075-30mg吗啡。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.15-20mg吗啡。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.4-1mg吗啡。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.4-40mg美金刚胺。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.75-40mg美金刚胺。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药1.5-30mg美金刚胺。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药4-10mg美金刚胺。
在某些实施方式中，上述药物组合物包含摩尔比分别为0.2-1000:1-300:1的所述第一cns药物、第二cns药物和外周肾上腺素能受体激动剂。每种可能性代表本发明的独立实施方式。在某些实施方式中，上述药物组合物包含0.15-200mg的所述第一cns药物、1.5-30mg的所述第二cns药物和0.015-5mg的所述外周肾上腺素能受体激动剂。
在某些实施方式中，上述药物组合物被配制成用于系统性给药，其中所述系统性给药对每种药物来说独立地选自肠胃外、静脉内、肌肉内、皮下、舌下、直肠和口服给药。每种可能性代表本发明的独立实施方式。在上述方法的某些实施方式中，所述第一cns药物、第二cns药物和外周肾上腺素能受体激动剂各自通过相同的给药技术或通过不同的给药技术给药。
在某些实施方式中，所述第一cns药物、第二cns药物和外周肾上腺素能受体激动剂的摩尔比分别为0.25-4000:0.25-800:1。在某些实施方式中，所述第一cns药物、第二cns药物和外周肾上腺素能受体激动剂的摩尔比分别为0.5-2000:0.5-400:1。在某些实施方式中，所述第一cns药物、第二cns药物和外周肾上腺素能受体激动剂的摩尔比分别为0.2-1000:1-300:1。
fda指南(工业指南，“在成年健康志愿者中在治疗剂的初始临床试验中估算最大安全起始剂量”(estimatingthemaximumsafestartingdoseininitialclinicaltrialsfortherapeuticsinadulthealthyvolunteers)，2005年7月，第7页)被日常用于将以mg/kg为单位的动物剂量在身体表面积的基础上转变成以mg/kg为单位的人类等效剂量(hed)，其中假设成年人类体重为60kg，儿童体重为20kg。在某些实施方式中，剂量适用于体重为60kg的人类成年对象。在某些实施方式中，剂量对应于体重为60kg的人类成年对象的剂量。当在本文中使用时，短语“对应于体重为60kg的人类成年对象的剂量”是指从为60kg人类成年对象计算的剂量计算或推导的剂量。这些计算/推导在本领域中是已知的(参见上述fda指南)，并被本领域普通技术人员日常采用。在某些实施方式中，“剂量”是指单次给药的剂量。
在某些实施方式中，第一cns药物:第二cns药物:外周肾上腺素能受体激动剂的摩尔比分别为4-180:9-30:1。在某些实施方式中，所述第一cns药物是左旋多巴，所述第二cns药物是美金刚胺，并且所述外周肾上腺素能受体激动剂是苯肾上腺素。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.025-12mg苯肾上腺素。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.05-6mg苯肾上腺素。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.1-3mg苯肾上腺素。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.3-1mg苯肾上腺素。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.3-4mg苯肾上腺素。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.3、0.5或1mg苯肾上腺素。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.5-400mg左旋多巴。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.75-300mg左旋多巴。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药1.5-200mg左旋多巴。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药4-30mg左旋多巴。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.4-40mg美金刚胺。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.75-40mg美金刚胺。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药1.5-30mg美金刚胺。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药4、5、10或30mg美金刚胺。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药4-10mg美金刚胺。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药4、5或10mg美金刚胺。
在某些实施方式中，第一cns药物:第二cns药物:外周肾上腺素能受体激动剂的摩尔比分别为10-350:50-150:1。在某些实施方式中，所述第一cns药物是吗啡，所述第二cns药物是美金刚胺，并且所述外周肾上腺素能受体激动剂是肾上腺素。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.004-1.2mg肾上腺素。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.0075-0.6mg肾上腺素。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.015-0.3mg肾上腺素。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.04-0.1mg肾上腺素。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.04、0.05或0.1mg肾上腺素。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.04-50mg吗啡。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.04-30mg吗啡。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.15-50mg吗啡。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.15-30mg吗啡。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.4、0.5、1、10、25或50mg吗啡。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.4、0.5、1、10、25或30mg吗啡。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.4、0.5或1mg吗啡。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.075-30mg吗啡。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.15-20mg吗啡。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.4-1mg吗啡。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.4-40mg美金刚胺。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.75-40mg美金刚胺。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药1.5-30mg美金刚胺。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药4-10mg美金刚胺。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药4、5或10mg美金刚胺。
在某些实施方式中，上述药物组合物包含摩尔比分别为0.2-1000:1-300:1的所述第一cns药物、第二cns药物和外周肾上腺素能受体激动剂。在某些实施方式中，上述药物组合物包含0.15-200mg的所述第一cns药物、1.5-30mg的所述第二cns药物和0.015-5mg的所述外周肾上腺素能受体激动剂。
在用于系统性肌肉内给药的组合物中活性成分的优选剂量范围如下：对于吗啡来说：0.05mg/kg至5mg/kg；对于肾上腺素来说：0.005mg/kg至0.01mg/kg，对于美金刚胺来说0.5mg/kg至1mg/kg。在人类中，计算剂量对于吗啡来说为0.5mg至50mg，对于肾上腺素来说为0.05mg至0.1mg，对于美金刚胺来说为0.5mg至1.0mg。在某些实施方式中，所述方法包括肌肉内给药0.5mg至50mg吗啡、0.05mg至0.1mg肾上腺素和0.5mg至1.0mg美金刚胺。
在用于系统性肌肉内给药的组合物中活性成分的优选剂量范围如下：对于吗啡来说：0.01mg/kg至5mg/kg；对于肾上腺素来说：0.01mg/kg，对于美金刚胺来说1mg/kg。在人类中，计算剂量对于吗啡来说为0.1mg至50mg，对于肾上腺素来说为0.1mg，对于美金刚胺来说为10mg。在某些实施方式中，所述方法包括肌肉内给药0.1mg至50mg吗啡、0.1mg肾上腺素和10mg美金刚胺。
在用于系统性肌肉内给药的组合物中活性成分的优选剂量范围如下：对于吗啡来说：0.01mg/kg至5mg/kg；对于苯肾上腺素来说：0.02mg/kg，对于美金刚胺来说1mg/kg。在人类中，计算剂量对于吗啡来说为0.1mg至50mg，对于苯肾上腺素来说为0.2mg，对于美金刚胺来说为10mg。在某些实施方式中，所述方法包括肌肉内给药0.1mg至50mg吗啡、0.2mg苯肾上腺素和10mg美金刚胺。
在用于系统性肌肉内给药的组合物中活性成分的优选剂量范围如下：对阿米替林来说：0.05mg/kg至10mg/kg；对于苯肾上腺素来说：0.02mg/kg，对于美金刚胺来说1mg/kg。在人类中，计算剂量对于阿米替林来说为0.5mg至100mg，对于苯肾上腺素来说为0.2mg，对于美金刚胺来说为10mg。在某些实施方式中，所述方法包括肌肉内给药0.5mg至100mg阿米替林、0.2mg苯肾上腺素和10mg美金刚胺。
在用于系统性肌肉内给药的组合物中活性成分的优选剂量范围如下：对于安乃近来说：0.05mg/kg至20mg/kg；对于苯肾上腺素来说：0.02mg/kg，对于美金刚胺来说1mg/kg。在人类中，计算剂量对于安乃近来说为0.5mg至200mg，对于苯肾上腺素来说为0.2mg，对于美金刚胺来说为10mg。在某些实施方式中，所述方法包括肌肉内给药0.5mg至200mg安乃近、0.2mg苯肾上腺素和10mg美金刚胺。
在用于系统性口服给药的组合物中活性成分的优选浓度范围如下：对于左旋多巴来说为0.5mg/kg至20mg/kg，对于苯肾上腺素来说为0.1mg/kg，对于美金刚胺来说为1mg/kg。在人类中，计算剂量对于左旋多巴来说为5mg至200mg，对于苯肾上腺素来说为1mg，对于美金刚胺来说为10mg。在某些实施方式中，所述方法包括口服给药5mg至200mg左旋多巴、1mg苯肾上腺素和10mg美金刚胺。
在用于系统性口服给药的组合物中活性成分的优选浓度范围如下：对于左旋多巴来说为5mg/kg至20mg/kg，对于苯肾上腺素来说为0.3mg/kg，对于美金刚胺来说为1mg/kg。在人类中，计算剂量对于左旋多巴来说为50mg至200mg，对于苯肾上腺素来说为3mg，对于美金刚胺来说为10mg。在某些实施方式中，所述方法包括口服给药50mg至200mg左旋多巴、3mg苯肾上腺素和10mg美金刚胺。
一方面，本发明提供了一种在需要的对象中增强选自抗帕金森氏病药物和镇痛药的cns药物的活性和/或减轻其至少一种副作用的方法，所述方法包括向所述对象系统性给药：至少一种cns药物，其选自抗帕金森氏病药物和镇痛药；和至少一种外周肾上腺素能受体激动剂，其中所述cns药物和外周肾上腺素能受体激动剂的摩尔比分别在1-2000:1的范围内。
另一方面，本发明还提供了一种在需要的对象中增强选自抗帕金森氏病药物和镇痛药的cns药物的活性或减轻其至少一种副作用的方法，所述方法包括向所述对象系统性给药：(a)至少一种cns药物，其中所述cns药物是左旋多巴；和(b)至少一种外周肾上腺素能受体激动剂，其中所述外周肾上腺素能受体激动剂是苯肾上腺素或肾上腺素；其中所述cns药物和外周肾上腺素能受体激动剂的摩尔比分别在1-2000:1的范围内。
另一方面，本发明提供了一种在需要的对象中治疗帕金森氏病(pd)或进行性核上性麻痹(psp)的方法，所述方法包括向所述对象系统性给药：至少一种cns药物，其是抗帕金森氏病药物；和至少一种外周肾上腺素能受体激动剂；其中所述cns药物和外周肾上腺素能受体激动剂的摩尔比分别在1-2000:1的范围内。
另一方面，本发明还提供了一种在需要的对象中治疗帕金森氏病(pd)或进行性核上性麻痹(psp)的方法，所述方法包括向所述对象系统性给药：(a)至少一种cns药物，其中所述cns药物是左旋多巴；和(b)至少一种外周肾上腺素能受体激动剂，其中所述外周肾上腺素能受体激动剂是苯肾上腺素或肾上腺素；其中所述cns药物和外周肾上腺素能受体激动剂的摩尔比分别在1-2000:1的范围内。
另一方面，本发明提供了一种在需要的对象中治疗疼痛或痛觉过敏的方法，所述方法包括向所述对象系统性给药：至少一种cns药物，其是镇痛药；和至少一种外周肾上腺素能受体激动剂；其中所述cns药物和外周肾上腺素能受体激动剂的摩尔比分别在1-2000:1的范围内。
另一方面，本发明提供了一种药物组合物，其包含：至少一种cns药物，其选自抗帕金森氏病药物和镇痛药；和至少一种外周肾上腺素能受体激动剂；其中所述cns药物和外周肾上腺素能受体激动剂的摩尔比分别在1-2000:1的范围内。
另一方面，本发明还提供了一种药物组合物，其包含：(a)至少一种cns药物，其中所述cns药物是左旋多巴；和(b)至少一种外周肾上腺素能受体激动剂，其中所述外周肾上腺素能受体激动剂是苯肾上腺素或肾上腺素；其中所述cns药物和外周肾上腺素能受体激动剂的摩尔比分别在1-2000:1的范围内。
另一方面，本发明还提供了一种单元剂型，其包含如上所述的药物组合物。
在某些实施方式中，所述cns药物是左旋多巴，并且所述外周肾上腺素能受体激动剂是苯肾上腺素或肾上腺素。每种可能性代表本发明的独立实施方式。在某些实施方式中，所述cns药物是左旋多巴，并且所述外周肾上腺素能受体激动剂是苯肾上腺素。在某些实施方式中，所述cns药物是左旋多巴，并且所述外周肾上腺素能受体激动剂是肾上腺素。
在某些实施方式中，所述副作用选自运动机能亢进、镇静、痛觉过敏、强直性昏厥、运动功能障碍和成瘾。在某些实施方式中，所述副作用是运动机能亢进。在某些实施方式中，所述副作用是镇静。在某些实施方式中，所述副作用是痛觉过敏。在某些实施方式中，所述副作用是强直性昏厥。在某些实施方式中，所述副作用是运动功能障碍。在某些实施方式中，所述副作用是成瘾。
在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象系统性给药15-200mg左旋多巴。在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象系统性给药15、30、100或200mg左旋多巴。
在某些实施方式中，所述外周肾上腺素能受体激动剂是苯肾上腺素。在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象系统性给药0.2-3mg苯肾上腺素。在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象系统性给药0.2、1或3mg苯肾上腺素。
在某些实施方式中，所述外周肾上腺素能受体激动剂是肾上腺素。在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象系统性给药0.1-0.3mg肾上腺素。在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象系统性给药0.1、0.2或0.3mg肾上腺素。
在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象系统性给药：(a)15-30、15或30mg左旋多巴；和(b)0.2-3、0.2、1或3mg苯肾上腺素或(c)0.1mg肾上腺素。
在某些实施方式中，所述方法包括向所述对象系统性给药：(a)15mg左旋多巴；和/或(b)0.2-1、0.2或1mg苯肾上腺素和/或(c)0.1mg肾上腺素。
在某些实施方式中，上述药物组合物被用于增强所述cns药物的活性或减轻其至少一种副作用的方法中。在某些实施方式中，所述药物组合物用于治疗帕金森氏病(pd)或进行性核上性麻痹(psp)的方法中。
当在本文中使用时，短语“增强活性”通常意味着增强cns药物的生物活性和/或提高其治疗效能。当在本文中使用时，短语“减轻至少一种副作用”通常意味着降低与cns药物相关或由cns药物引起的至少一种副作用的出现概率、延迟其出现和/或降低其严重性。当在本文中使用时，术语“cns药物”通常是指作用于人类中枢神经系统的药物和药物类别。
当在本文中使用时，术语“抗帕金森氏病药物”是指预防、减轻或治疗帕金森氏病(pd)或进行性核上性麻痹(psp)或帕金森综合症的至少一种症状的任何药物。当在本文中使用时，术语“镇痛药”是指阻止或减轻疼痛的任何药物。当至本文中使用时，术语“外周肾上腺素能受体激动剂”是指作用于一种或多种外周肾上腺素能受体的任何药物。当在本文中使用时，术语“对象”是指需要预防或治疗pd、psp、疼痛或痛觉过敏的动物，优选为哺乳动物，最优选为人类。当在本文中使用时，术语“治疗”意味着阻止或改善与所指称的症状、障碍、疾病或病症相关的一种或多种症状。当在本文中使用时，术语“药物组合物”是指包含至少一种药物活性成分和至少一种其他成分的任何组合物，以及直接或间接由两种或更多种成分的组合、复合或聚集或由一种或多种成分的解离得到的任何产品。因此，当在本文中使用时，术语“药物组合物”可以尤其涵盖通过将药物活性成分与一种或多种可药用载体混合而制造的任何组合物。药物活性成分的非限制性实例是cns药物和外周肾上腺素能受体激动剂。术语“可药用载体”是指用于治疗剂的给药的载体。这些载体包括但不限于盐水、缓冲盐水、右旋糖、水、甘油、乙醇及其组合。
当在本文中使用时，术语“摩尔比”是指存在于同一药物组合物中或分开给药到对象的至少一种cns药物与至少一种外周肾上腺素能受体激动剂之间的相应摩尔比。
当在本文中使用时，术语“系统性给药”是指例如肠内或肠胃外的给药途径，其引起活性药剂的系统性分布，导致活性药剂在血流中的系统性吸收或积累，随后分布到整个身体。适合的单元剂型部分取决于用途或进入的途径，例如口服、透皮或通过注射。导致系统性循环的给药途径包括但不限于口服、肌肉内、静脉内、皮下、腹膜内、吸入和肺内给药。
在某些实施方式中，所述系统性给药是口服或肌肉内给药。在某些实施方式中，所述系统性给药是口服给药。在某些实施方式中，所述系统性给药是肌肉内给药。
在用于系统性口服给药的组合物中活性成分的优选浓度范围如下：对于左旋多巴来说，1.5mg/kg至20mg/kg；对于苯肾上腺素来说，0.1mg/kg至0.3mg/kg。在人类中，计算剂量范围对于左旋多巴来说为15mg至200mg，对于苯肾上腺素来说为1mg至3mg。在某些实施方式中，所述方法包括口服给药15mg至200mg左旋多巴和1mg至3mg苯肾上腺素。
在用于肌肉内给药的组合物中活性成分的优选剂量范围如下：对于吗啡来说：0.2mg/kg至5mg/kg；对于肾上腺素来说：0.01mg/kg至0.03mg/kg。在人类中，计算剂量对于吗啡来说：2mg至50mg；对于肾上腺素来说：0.05mg至0.3mg。在某些实施方式中，所述方法包括肌肉内给药2mg至50mg吗啡和0.05mg至0.3mg肾上腺素。
在用于口服给药的组合物中活性成分的优选剂量范围如下：对于吗啡来说：0.1mg/kg至3mg/kg；对于苯肾上腺素来说：0.02mg/kg至0.1mg/kg。在人类中，计算剂量对于吗啡来说：1mg至30mg；对于苯肾上腺素来说：0.2mg至1mg。在某些实施方式中，所述方法包括口服给药1mg至30mg吗啡和0.2mg至1mg苯肾上腺素。
在用于肌肉内给药的组合物中活性成分的优选剂量范围如下：对于吗啡来说：0.2mg/kg至5mg/kg；对于肾上腺素来说：0.01mg/kg。在人类中，计算剂量对于吗啡来说：2mg至50mg；对于肾上腺素来说：1mg。在某些实施方式中，所述方法包括肌肉内给药2mg至50mg吗啡和1mg肾上腺素。
在用于肌肉内给药的组合物中活性成分的优选剂量范围如下：对于美金刚胺来说：1mg/kg至15mg/kg；对于肾上腺素来说：0.01mg/kg。在人类中，计算剂量对于美金刚胺来说：10mg至150mg；对于肾上腺素来说1mg。在某些实施方式中，所述方法包括肌肉内给药10mg至150mg美金刚胺和1mg肾上腺素。
在用于口服给药的组合物中活性成分的优选剂量范围如下：对于吗啡来说：0.1mg/kg至5mg/kg；对于苯肾上腺素来说：0.02mg/kg。在人类中，计算剂量对于吗啡来说：1mg至50mg；对于苯肾上腺素来说：0.2mg。在某些实施方式中，所述方法包括口服给药1mg至50mg吗啡和0.2mg苯肾上腺素。
在用于口服给药的组合物中活性成分的优选剂量范围如下：对于美金刚胺来说：1mg/kg至20mg/kg；对于苯肾上腺素来说0.02mg/kg。在人类中，计算剂量对于美金刚胺来说：10mg至200mg；对于苯肾上腺素来说0.2mg。在某些实施方式中，所述方法包括口服给药10mg至200mg美金刚胺和0.2mg苯肾上腺素。
在用于口服给药的组合物中活性成分的优选剂量范围如下：对于阿米替林来说：0.1mg/kg至10mg/kg；对于苯肾上腺素来说：0.02mg/kg。在人类中，计算剂量对于阿米替林来说：1mg至100mg；对于苯肾上腺素来说：0.2mg。在某些实施方式中，所述方法包括口服给药1mg至100mg阿米替林和0.2mg苯肾上腺素。
在用于口服给药的组合物中活性成分的优选剂量范围如下：对于安乃近来说：0.2mg/kg至20mg/kg；对于苯肾上腺素来说：0.02mg/kg。在人类中，计算剂量对于安乃近来说：2mg至200mg；对于苯肾上腺素来说：0.2mg。在某些实施方式中，所述方法包括口服给药2mg至200mg安乃近和0.2mg苯肾上腺素。
在用于系统性口服给药的组合物中活性成分的优选浓度范围如下：对于左旋多巴来说1.5mg/kg至20mg/kg；对于苯肾上腺素来说0.1mg/kg至0.3mg/kg。在人类中，计算剂量范围对于左旋多巴来说为15mg至200mg，对于苯肾上腺素来说为1mg至3mg。在某些实施方式中，所述方法包括口服给药15mg至200mg左旋多巴和1mg至3mg苯肾上腺素。
在用于系统性口服给药的组合物中活性成分的优选浓度范围如下：对于美金刚胺来说0.5mg/kg至10mg/kg；对于苯肾上腺素来说0.1mg/kg。在人类中，计算剂量范围对于美金刚胺来说为5mg至100mg，对于苯肾上腺素来说为1mg。在某些实施方式中，所述方法包括口服给药5mg至100mg美金刚胺和1mg苯肾上腺素。
在某些实施方式中，所述cns药物和外周肾上腺素能受体激动剂的摩尔比分别在2-1000:1的范围内。在某些实施方式中，所述cns药物和外周肾上腺素能受体激动剂的摩尔比分别在5-500:1的范围内。
在某些实施方式中，所述cns药物:外周肾上腺素能受体激动剂的摩尔比分别为1-1000:1。在某些实施方式中，所述cns药物:外周肾上腺素能受体激动剂的摩尔比分别为2.5-400:1。在某些实施方式中，所述cns药物:外周肾上腺素能受体激动剂的摩尔比分别为5-200:1。在某些实施方式中，所述cns药物是左旋多巴，并且所述外周肾上腺素能受体激动剂是苯肾上腺素。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.05-20mg苯肾上腺素。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.15-6mg苯肾上腺素。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.3-3mg苯肾上腺素。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.2-12mg苯肾上腺素。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.45-6mg苯肾上腺素。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.9-3mg苯肾上腺素。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药1或3mg苯肾上腺素。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药1-5mg苯肾上腺素。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药1-400mg左旋多巴。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药2.5-400mg左旋多巴。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药5-200mg左旋多巴。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药5-30mg左旋多巴。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药30mg左旋多巴。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药25-200mg左旋多巴。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药5-30mg左旋多巴。
在某些实施方式中，所述cns药物:外周肾上腺素能受体激动剂的摩尔比分别为1-1300:1。在某些实施方式中，所述cns药物:外周肾上腺素能受体激动剂的摩尔比分别为3-640:1。在某些实施方式中，所述cns药物:外周肾上腺素能受体激动剂的摩尔比分别为6-322:1。在某些实施方式中，所述cns药物是吗啡，并且所述外周肾上腺素能受体激动剂是肾上腺素。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.005-2mg肾上腺素。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.015-0.6mg肾上腺素。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.05-0.3mg肾上腺素。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.05mg肾上腺素。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.05,0.1或0.3mg肾上腺素。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.05或0.1mg肾上腺素。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.05-0.1mg肾上腺素。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.3mg肾上腺素。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.5-30mg吗啡。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.15-15mg吗啡。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.3-8mg吗啡。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药1-4mg吗啡。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.5-4mg吗啡。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.5-1mg吗啡。
在某些实施方式中，所述cns药物:外周肾上腺素能受体激动剂的摩尔比分别为1-350:1。在某些实施方式中，所述cns药物:外周肾上腺素能受体激动剂的摩尔比分别为2.5-180:1。在某些实施方式中，所述cns药物:外周肾上腺素能受体激动剂的摩尔比分别为5-100:1。在某些实施方式中，cns药物是吗啡，并且所述外周肾上腺素能受体激动剂是苯肾上腺素。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.15-20mg苯肾上腺素。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.2-4mg苯肾上腺素。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.2-1mg苯肾上腺素。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.2或1mg苯肾上腺素。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药1-10mg苯肾上腺素。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.05-4mg苯肾上腺素。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.5-30mg吗啡。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.15-8mg吗啡。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.3-4mg吗啡。在某些实施方式中，上述方法包括向所述对象给药0.5-2mg吗啡。
在某些实施方式中，上述药物组合物包含0.15-200mg所述cns药物和0.005-20mg所述外周肾上腺素能受体激动剂。在某些实施方式中，上述药物组合物包含0.3-100mg所述cns药物和0.015-10mg所述外周肾上腺素能受体激动剂。在某些实施方式中，上述药物组合物包含0.5-50mg所述cns药物和0.02-5mg所述外周肾上腺素能受体激动剂。在某些实施方式中，上述药物组合物包含0.6-30mg所述cns药物和0.3-5mg所述外周肾上腺素能受体激动剂。
当在本文中使用时，术语“和/或”意味着“任一或两者”。当在本文中使用时，短语“‘a’和‘b’中的至少一者”意味着具有至少一个“a”的任何组或具有至少一个“b”的任何组。
在某些实施方式中，至少一种药物以比其标准剂量低10倍至100倍的低剂量给药。在某些实施方式中，至少一种药物以比其标准剂量低2倍至5倍的标准以下剂量给药。在某些实施方式中，至少一种药物以其标准剂量给药。
尽管已参考某些实施方式对本发明进行了描述，但本领域技术人员应该理解，可以做出各种不同的改变并且可以用等同方案替换，而不背离本发明的范围。此外，可以做出许多修改以使特定情况或材料适应于本发明的教授，而不背离其范围。因此，本发明不打算限于所公开的具体实施方式，相反，本发明将包括落于权利要求书的范围之内的所有实施方式。
提出了下面的实施例以便更充分地说明本发明的某些实施方式。然而，它们绝不应该被解释为限制本发明的广阔范围。
实施例
实施例1.在氟哌啶醇强直性昏厥模型中左旋多巴的抗帕金森氏病效果的增强及其副作用的减轻(口服给药)
方法
在wista大鼠(体重160-170g)中通过以1mg/kg的剂量i.m.注射氟哌啶醇而诱导的强直性昏厥模型上，调查药物的抗帕金森氏病效果。强直性昏厥通过在氟哌啶醇给药后60分钟置于以45度角固定的大型格栅上的大鼠的不动的时间长度来评估。大鼠中的最大强直性昏厥，在它们在180秒的观察后在格栅上完全不动的情况下被记录到(campbella.等，1988,neuropharmacology,vol.27(11)，第1197-1199页；ossowskak.j.，neural.transm.park.dis.dement.sect.,1994,vol.8(1-2)，第39-71页；gmirov.e.和serdyuks.e.，bulletinofexperimentalbiologyandmedicine,2007,vol.143(5)，第554-556页)。
在氟哌啶醇给药之前45分钟，将左旋多巴、美金刚胺、苯肾上腺素以及左旋多巴与苯肾上腺素和美金刚胺的三元组合通过刚性金属探头，在1.0ml的体积中口服给药。对照动物口服接受1ml蒸馏水。
抗帕金森氏病药物的效果被估算为用测试组合物处理的动物与对照(dw)相比平均不动持续时间的减少。
旷场试验
为了评估测试药物的(运动机能亢进)副作用，使用了“旷场”(of)试验。在所述of试验中，确定大鼠的自发活动。将动物在正方形照明场(1米x1米)的中央放置3分钟，并以秒为单位记录移动时间(水平活动)。水平自发活动的登记在测试药物给药之后40分钟、氟哌啶醇给药之前5分钟进行。为了定量针对每剂测试药物的自发活动，计算平均水平活动。左旋多巴、苯肾上腺素、美金刚胺以及左旋多巴、苯肾上腺素与美金刚胺的组合的运动机能亢进效果，通过与对照组中大鼠的测量值相比在of试验中的水平活动的平均提高百分数来评估，并且也作为水平活动显著提高(与对照相比提高50％或更多)的大鼠的数目来评估。
以1mg/kg的剂量肌肉内(im)注射氟哌啶醇，在注射后60分钟在对照组中引起158.2±25秒的不动(表1)。
表1.
*n.c.–阴性对照(蒸馏水)。**人类剂量–60kg人类的绝对剂量，按照fda指南(工业指南，“在成年健康志愿者中在治疗剂的初始临床试验中估算最大安全起始剂量”，2005年7月，第7页)计算。
三联疗法
剂量为0.5mg/kg的左旋多巴与0.5mg/kg的低剂量的美金刚胺和0.03mg/kg的低剂量的苯肾上腺素的组合给药引起显著、接近最大的抗帕金森氏病效果(将在格栅上的不动持续时间减少4倍，从158减少到38秒)，与以20mg/kg的高剂量独立使用的左旋多巴和美金刚胺相当。这种组合不提高大鼠的水平活动。因此，包含0.5mg/kg的低阈值剂量的美金刚胺和0.03mg/kg的低阈值剂量的苯肾上腺素的组合物，将左旋多巴的有效剂量降低40倍(20.0mg/kg相比于0.5mg/kg)，引起最大抗帕金森氏病效果而不产生运动机能亢进副作用。
剂量为0.5mg/kg的左旋多巴与1mg/kg的阈值剂量的美金刚胺和0.1mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素的组合给药达到最大抗帕金森氏病效果(将在格栅上的不动持续时间减少5.6倍，从158减少到28秒)，这比单独的20mg/kg的高剂量的左旋多巴强1.2倍。这种组合不提高大鼠的水平活动。
剂量为1mg/kg的左旋多巴与剂量为1mg/kg的美金刚胺和0.05mg/kg的低剂量的苯肾上腺素的组合给药引起显著的抗帕金森氏病效果(将在格栅上的不动持续时间减少4.7倍，从158减少到33秒)，与20mg/kg的高剂量的单独的左旋多巴或单独的美金刚胺相当。这种组合不提高大鼠的水平活动。
3mg/kg的常规低剂量的左旋多巴与1mg/kg的阈值剂量的美金刚胺和0.1mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素的组合给药与剂量为20mg/kg的左旋多巴相比导致最大抗帕金森氏病提高2.8倍(将在格栅上的不动持续时间从35减少到12秒)，而不在大鼠中产生运动机能亢进。相比较而言，1mg/kg的阈值剂量的美金刚胺与0.1mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素的组合物仅仅引起轻度抗帕金森氏病效果，因为它将氟哌啶醇强直性昏厥的量从158减少到79秒，而在与左旋多巴的口服给药的组合中一方面放大了左旋多巴的最大抗帕金森氏病效果，另一方面将左旋多巴的有效剂量降低7倍(至3mg/kg)，导致抗帕金森氏病效果增强而不产生运动机能亢进副作用。非常令人吃惊的是，左旋多巴在与0.1mg/kg苯肾上腺素和1.0mg/kg美金刚胺的三元组合物中组合给药后的增强的协同作用，导致抗帕金森氏病作用的多倍提高和左旋多巴引起增强效果的有效剂量的7倍降低。
剂量为5mg/kg的左旋多巴与剂量为3mg/kg的美金刚胺和0.1mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素的组合给药产生最大抗帕金森氏病效果(将在格栅上的不动持续时间减少13倍，从158减少到12秒)，这比单独的20mg/kg的高剂量的左旋多巴强3倍。这种组合不提高大鼠的水平活动。
剂量为10mg/kg的左旋多巴与剂量为3mg/kg的美金刚胺和0.1mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素的组合给药产生最大抗帕金森氏病效果(将在格栅上的不动持续时间减少31倍，从158减少到5秒)，这比单独的20mg/kg的高剂量的左旋多巴强7倍。这种组合不提高大鼠的水平活动。
10mg/kg的中等治疗剂量和20mg/kg的最高剂量的左旋多巴与1mg/kg的阈值剂量的美金刚胺和0.1mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素的组合给药与单独的剂量为20mg/kg的左旋多巴相比，将最大抗帕金森氏病效果提高5-8倍(在格栅上的不动持续时间分别从35减少到6和3秒)，并且也在所有大鼠中消除运动机能亢进。
这些研究的结果表明，含有左旋多巴、苯肾上腺素和美金刚胺的三元组合物发挥出的抗帕金森氏病效果大大优于常规剂量的左旋多巴的抗帕金森氏病效果而不产生运动机能亢进副作用，并且显著降低了所述组合物中常规左旋多巴、美金刚胺和苯肾上腺素的剂量。上面提到的组合物以安全的方式引起左旋多巴的抗帕金森氏病作用的增强，因为它消除了使用所述组合物的每种组分的副作用。
实施例2.在甩尾和旷场试验中吗啡的镇痛效果的增强和副作用的减轻(肌肉内给药)
方法
甩尾试验
从雄性wista大鼠的甩尾延迟期的延长来估算药物的急性镇痛作用(woolfc.j.等，1977,eur.j.pharmacol.,vol.45(3)，第311-314页；serdyuks.e.和gmirov.e.，2007,bull.exp.biol.med.,vol.143(3)，第350-352页)。在所述甩尾试验中，通过将大鼠尾浸泡在55±0.1℃的热水中来刺激疼痛。每3分钟确定尾回撤的延迟期(摆脱疼痛刺激物的时间)。为了评估疼痛敏感性，使用在物质给药之前的最后15min内具有短的延迟期(3-5秒)的大鼠。将吗啡、美金刚胺、肾上腺素以及吗啡与肾上腺素和美金刚胺的三元组合在0.1-0.3ml的体积中以逐渐提高的剂量肌肉内(i.m.)给药，直至在疼痛敏感性的最后三次测量期间达到最大痛觉缺失(被测量为以秒为单位的尾回撤的最大延迟期)。对照动物i.m注射0.2ml蒸馏水。镇痛效果通过与对照(蒸馏水)相比尾回撤的延迟期的增加来评估。
旷场试验
为了评估测试药物的运动机能减退(镇定)或运动机能亢进作用效果，使用了“旷场”(of)试验。在所述of试验中，确定大鼠的自发活动。将动物在正方形照明场(1米x1米)的中央放置3分钟，并以秒为单位记录移动时间(水平活动)。水平自发活动的登记在测试药物给药之后40分钟进行。为了定量每剂测试药物的自发活动，计算平均水平活动。吗啡、美金刚胺、肾上腺素以及吗啡与肾上腺素和美金刚胺的三元组合的运动机能减退(镇定)或运动机能亢进作用，通过与对照组中大鼠的测量值相比在of试验中的平均水平活动的降低(运动机能减退)或提高(运动机能亢进)百分数，以及水平活动显著降低或提高(与对照相比50％或更多)的大鼠的数目来评估。
表2.
*n.c.–阴性对照(蒸馏水)。**人类剂量–60kg人类的绝对剂量，按照fda指南(工业指南，“在成年健康志愿者中在治疗剂的初始临床试验中估算最大安全起始剂量”，2005年7月，第7页)计算。***运动机能亢进。
三联疗法
0.05mg/kg的低剂量的吗啡与0.005mg/kg的最低阈值剂量的肾上腺素和0.5mg/kg的低阈值剂量的美金刚胺的组合给药与对照相比非显著性地降低了对疼痛的敏感性，因为它将甩尾的延迟期从4.5增加到6.9秒。
0.1mg/kg的较高剂量的吗啡与0.005mg/kg的最低阈值剂量的肾上腺素和0.5mg/kg的低阈值剂量的美金刚胺的组合给药引起近最大镇痛效果(与对照相比将尾回撤延迟期增加4.1倍，从4.5增加到18.5秒)，与单独的5mg/kg的高剂量的吗啡(19.8秒)几乎相同。这种组合不降低大鼠中的水平活动。因此，包含0.5mg/kg的低阈值剂量的美金刚胺和0.005mg/kg的低阈值剂量的肾上腺素的组合物将吗啡的有效剂量降低50倍(从5降低到0.1mg/kg)，引起最大镇痛效果而不产生镇定(运动机能减退)副作用。非常令人吃惊的是，通过0.1mg/kg吗啡在与0.005mg/kg肾上腺素和0.5mg/kg美金刚胺的三元组合物中的组合给药实现了协同效应，因为在所述与吗啡的三元组合物中的肾上腺素和美金刚胺的阈值剂量与在0.01mg/kg肾上腺素和1mg/kg美金刚胺的组合物中使用的引起非常低的镇痛效果(与对照相比尾回撤延迟期从4.5增加到6.5秒)的剂量相比降低2倍。
1mg/kg的低常规剂量的吗啡与0.01mg/kg的阈值剂量的肾上腺素和1.0mg/kg的阈值剂量的美金刚胺的组合给药与5mg/kg的吗啡相比将最大镇痛效果提高1.4倍(将甩尾延迟期从19.8增加到27.2秒)，而不发生运动机能减退。
2.5mg/kg的平均剂量和5mg/kg的较高剂量的吗啡与0.01mg/kg的阈值剂量的肾上腺素和1.0mg/kg的阈值剂量的美金刚胺的组合给药，与5mg/kg吗啡相比将最大镇痛效果分别提高1.7和2.0倍(将尾回撤的延迟期从19.8秒分别增加到33.2和38.9秒)，并在80-90％的大鼠中消除运动机能减退。因此，在与吗啡的组合给药中1mg/kg的阈值剂量的美金刚胺和0.01mg/kg的阈值剂量的肾上腺素的给药一方面将吗啡的最大效果提高1.4-2.0倍，另一方面将吗啡的有效剂量减少5倍(至1mg/kg)，引起镇痛效果增强而不产生运动机能减退(镇定)副作用。当在与0.01mg/kg肾上腺素和美金刚胺(1.0mg/kg)的三元组合物中组合时，吗啡的增强的协同效应是非常令人吃惊的，包括最大镇痛效果的1.4-2.0倍的提高和吗啡的引起镇痛效果增强的有效剂量的5倍的降低。在三元组合物的内含物中吗啡的镇痛效果的增强不能用0.01mg/kg肾上腺素+1mg/kg美金刚胺的组合物的额外镇痛效果来解释，因为0.01mg/kg肾上腺素+1mg/kg美金刚胺的组合物具有非常弱的镇痛效果。
这些研究的结果表明，含有吗啡、肾上腺素和美金刚胺的三元组合物引起的镇痛效果显著优于常规剂量的吗啡的镇痛效果而不产生镇定(运动机能减退)副作用，并且也显著降低作为组合物的一部分的吗啡、美金刚胺和肾上腺素的常规剂量。上面提到的组合物以安全的方式引起吗啡的镇痛效果的增强，因为它们消除了使用所述组合物的每种组分的副作用。
实施例3.在甩尾、缩爪和旷场试验中美金刚胺、吗啡、阿米替林和安乃近的镇痛和抗痛觉过敏效果的增强和副作用的减轻方法甩尾试验(急性疼痛)
从雄性wista大鼠中的甩尾延迟期的延长来估算药物的急性镇痛作用(woolfc.j.等，1977,eur.j.pharmacol.,vol.45(3)，第311-314页；serdyuks.e.和gmirov.e.，2007,bull.exp.biol.med.,vol.143(3)，第350-352页)。在所述甩尾试验中，通过将大鼠尾浸泡在55±0.1℃的热水中来刺激疼痛。每3分钟确定尾回撤的延迟期(摆脱疼痛刺激物的时间)。为了评估疼痛敏感性，使用在物质给药之前的最后15min内具有短的延迟期(3-5秒)的大鼠。将吗啡、美金刚胺、阿米替林、安乃近、苯肾上腺素、肾上腺素及其三元组合以逐渐提高的剂量肌肉内(i.m.)或口服(灌胃，i.g.)给药，直至在疼痛敏感性的最后三次测量期间达到最大痛觉缺失(被测量为以秒为单位的尾回撤的最大延迟期)。对照动物i.m.注射0.2ml或口服1.0ml蒸馏水。镇痛效果通过与对照(蒸馏水)相比尾回撤的延迟期的增加来评估。
缩爪试验(急性炎性痛觉过敏)
通过在乙醚麻醉条件下将爪置于热水(56℃)中20-25秒，引起爪的炎性痛觉过敏。痛觉过敏在所述烫伤后30min发生(在爪被放置在温度为47℃的水中后缩爪的延迟期从15-20秒减少到2-4秒)。药物的急性抗痛觉过敏作用从具有炎性痛觉过敏的雄性wista大鼠中缩爪延迟期的延长来估算(coderret.j.，melzackr.brainres.(1987)404(l-2):95-106)。
每5分钟确定缩爪的延迟期(摆脱疼痛刺激物的时间)。为了估算痛觉过敏，使用在物质给药之前的最后20min内具有短的延迟期(3-5秒)的大鼠。将吗啡、美金刚胺、阿米替林、安乃近、苯肾上腺素、肾上腺素及其三元组合以逐渐增加的剂量肌肉内(i.m.)或口服给药，直至在疼痛敏感性的最后三次测量期间达到以秒为单位的缩爪的最大延迟期。对照动物i.m.注射0.2ml或口服1.0ml蒸馏水。抗痛觉过敏效果通过与对照(蒸馏水)相比缩爪延迟期的增加来评估。
旷场试验
为了评估测试药物的运动机能减退(镇定)或运动机能亢进作用效果，使用了“旷场”(of)试验。在所述of试验中，确定大鼠的自发活动。将动物在正方形照明场(1米x1米)的中央放置3分钟，并以秒为单位记录移动时间(水平活动)。水平自发活动的登记在测试药物给药之后40分钟进行。为了定量每剂测试药物的自发活动，计算平均水平活动。吗啡、美金刚胺、肾上腺素、苯肾上腺素、阿米替林和安乃近及其三元组合的运动机能减退(镇定)或运动机能亢进作用，通过与对照组中大鼠的测量值相比在of试验中的平均水平活动的降低(运动机能减退)或提高(运动机能亢进)百分数，以及水平活动显著降低或提高(与对照相比50％或更多)的大鼠的数目来评估。
表3.
*n.c.–阴性对照(蒸馏水)。**在旷场试验中的镇静。***在旷场试验中的运动机能亢进。
三联疗法
0.01mg/kg的非常低剂量的吗啡与0.01mg/kg的阈值剂量的肾上腺素和1.0mg/kg的低剂量的美金刚胺的组合给药，在尾回撤和缩爪试验中消除了剂量为0.01mg/kg的吗啡引起的阿片类痛觉过敏，因为它将尾回撤和缩爪的延迟期从0.9和1.1秒分别增加到7.4和7.1秒。
0.02mg/kg的非常低剂量的吗啡与0.01mg/kg的阈值剂量的肾上腺素和1mg/kg的低剂量的美金刚胺的组合给药不仅消除了剂量为0.02mg/kg的吗啡引起的阿片类痛觉过敏，而且引起了最大镇痛和抗痛觉过敏效果，与对照例如单独的5mg/kg的高剂量的吗啡相比将疼痛敏感性和痛觉过敏降低4.4和4.5倍(将尾回撤和缩爪的延迟期从4.5和4.3秒分别增加到19.4和19.1秒)。重要的是指出这种组合不改变大鼠中的水平活动。因此，包含1mg/kg的低剂量的美金刚胺和0.1mg/kg的阈值剂量的肾上腺素(单独时无效)的组合物，将吗啡的有效剂量降低约250倍(从5降低到0.02mg/kg)，引起最大镇痛和抗痛觉过敏效果而不产生成瘾(阿片类痛觉过敏)和镇定副作用。
非常令人吃惊的是，通过0.02mg/kg吗啡在与0.01mg/kg肾上腺素和1mg/kg美金刚胺的三元组合物中的组合给药实现了协同效应，因为在所述与吗啡的三元组合物中的肾上腺素和美金刚胺的阈值剂量引起非常小的镇痛和抗痛觉过敏效果(与对照相比将尾回撤和缩爪延迟期从4.5和4.3秒增加到6.5和5.9秒)。
0.5mg/kg的低剂量的吗啡与0.01mg/kg的阈值剂量的肾上腺素和1.0mg/kg的阈值剂量的美金刚胺的组合给药与5mg/kg的吗啡相比将最大镇痛和抗痛觉过敏效果提高1.5倍(将尾回撤和缩爪延迟期从19.8和19.5秒分别增加到29.5和29.2秒)，而不产生运动机能减退。
5mg/kg的较高剂量的吗啡与0.01mg/kg的阈值剂量的肾上腺素和1.0mg/kg的阈值剂量的美金刚胺的组合给药，与5mg/kg的吗啡相比将最大镇痛和痛觉过敏效果分别提高2.0和1.9倍(将尾回撤和缩爪延迟期从19.8和19.5秒分别增加到38.9和37.8秒)，并且在100％的大鼠中消除运动机能减退。因此，在与吗啡的组合给药中1mg/kg的低剂量的美金刚胺和0.01mg/kg的阈值剂量的肾上腺素的给药一方面将吗啡的最大效果提高1.5-2.0倍，另一方面将吗啡的有效剂量降低10倍(至0.5mg/kg)，引起镇痛和抗痛觉过敏效果的增强而不产生镇定副作用。当在与0.01mg/kg肾上腺素和美金刚胺(1.0mg/kg)的三元组合物中组合时，吗啡的增强的协同效应是非常令人吃惊的，包括最大镇痛效果的1.4-2.0倍的提高和吗啡的引起增强的镇痛和抗痛觉过敏效果的有效剂量的10倍的降低。在所述三元组合物的内含物中吗啡的镇痛效果的增强，不能用0.01mg/kg肾上腺素+1mg/kg美金刚胺的组合物的额外的镇痛效果来解释，因为0.01mg/kg肾上腺素+1mg/kg美金刚胺的组合物具有非常弱的镇痛效果。
这些研究的结果表明，含有吗啡、肾上腺素和美金刚胺的三元组合物引起的镇痛和抗痛觉过敏效果显著优于常规剂量的吗啡的镇痛和抗痛觉过敏效果，而不产生镇定和成瘾(阿片类痛觉过敏)副作用，并且也显著降低了作为组合物的一部分的吗啡、美金刚胺和肾上腺素的常规剂量。上面提到的组合物以安全的方式引起吗啡的镇痛效果的增强，因为它们消除了使用所述组合物的每种组分的副作用。
表4.
*n.c.–阴性对照(蒸馏水)。**旷场试验中的镇静。***旷场试验中的运动机能亢进。
三联疗法
0.01mg/kg的非常低剂量的吗啡与0.02mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素和1.0mg/kg的低剂量的美金刚胺的组合给药消除了尾回撤和缩爪试验中剂量为0.01mg/kg的吗啡引起的阿片类痛觉过敏，因为它将尾回撤和缩爪的延迟期从1.3和1.2秒分别增加到5.0和5.1秒。
0.02mg/kg的非常低剂量的吗啡与0.02mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素和1mg/kg的低剂量的美金刚胺的组合给药不仅消除了剂量为0.02mg/kg的吗啡引起的阿片类痛觉过敏，而且引起最大镇痛和抗痛觉过敏效果，例如与单独的5mg/kg的高剂量的吗啡相比将疼痛敏感性和痛觉过敏降低4.1和4.3倍(将尾回撤和缩爪的延迟期从4.8和4.5秒分别增加到19.7和19.4秒)。重要的是指出这种组合不改变大鼠中的水平活动。因此，包含1mg/kg的低剂量的美金刚胺和0.2mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素(单独时无效)的组合物，将吗啡的有效剂量降低约250倍(从5降低到0.02mg/kg)，引起最大镇痛和抗痛觉过敏效果而不产生成瘾(阿片类痛觉过敏)和镇定副作用。
非常令人吃惊的是，在与0.02mg/kg苯肾上腺素和1mg/kg美金刚胺的三元组合物内，实现了吗啡(0.01-0.02mg/kg)痛觉过敏的消除。非常令人吃惊的是，通过0.02mg/kg吗啡在与0.02mg/kg苯肾上腺素和1mg/kg美金刚胺的三元组合物中的组合给药实现了协同效应，因为在所述与吗啡的三元组合物中的苯肾上腺素和美金刚胺的阈值剂量引起非常小的镇痛和抗痛觉过敏效果(与对照相比将尾回撤和缩爪延迟期从4.8和4.5秒增加到5.2和5.4秒)。
1mg/kg的低常规剂量的吗啡与0.02mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素和1.0mg/kg的低剂量的美金刚胺的组合给药，与5mg/kg的吗啡相比将最大镇痛和抗痛觉过敏效果提高1.6和1.5倍(将尾回撤和缩爪延迟期从20.5和21.3秒分别增加到32.5和31.6秒)，并且在100％的大鼠中消除镇静。
5mg/kg的较高剂量的吗啡与0.02mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素和1.0mg/kg的低剂量的美金刚胺的组合给药，与5mg/kg的吗啡相比将最大镇痛和痛觉过敏效果提高1.8和1.7倍(将尾回撤和缩爪延迟期从20.5和21.3秒分别增加到37.6和36.6秒)，并在100％的大鼠中消除运动机能减退。因此，在与吗啡的组合给药中1mg/kg的低剂量的美金刚胺和0.02mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素的给药一方面将吗啡的最大效果提高1.5-1.8倍，另一方面将吗啡的有效剂量降低5倍(至1mg/kg)，引起镇痛和抗痛觉过敏效果的增强而不产生运动机能减退(镇定)副作用。当在与0.02mg/kg苯肾上腺素和美金刚胺(1.0mg/kg)的三元组合物中组合时，吗啡的增强的协同效应是非常令人吃惊的，包括最大镇痛和抗痛觉过敏效果的1.5-1.8倍的提高和吗啡的引起增强的镇痛和抗痛觉过敏效果的有效剂量的5倍的降低。在所述三元组合物的内含物中吗啡的镇痛和抗痛觉过敏效果的增强，不能用0.02mg/kg苯肾上腺素+1mg/kg美金刚胺的组合物的额外的镇痛效果来解释，因为0.02mg/kg苯肾上腺素+1mg/kg美金刚胺的组合物具有非常弱的镇痛和抗痛觉过敏效果。
0.05mg/kg的非常低剂量的阿米替林与0.02mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素和1mg/kg的低剂量的美金刚胺的组合给药，实际上不改变对疼痛的敏感性和痛觉过敏(尾回撤和缩爪的延迟期从4.8和4.5秒分别改变到5.6和5.8秒)。
0.1mg/kg的低剂量的阿米替林与0.02mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素和1mg/kg的低剂量的美金刚胺的组合给药引起最大镇痛和抗痛觉过敏效果，例如与单独的10mg/kg的高剂量的阿米替林相比将疼痛敏感性和痛觉过敏降低4.2和4.4倍(将尾回撤和缩爪的延迟期从4.8和4.5秒分别增加到19.5和19.8秒)。重要的是指出这种组合不改变大鼠中的水平活动。因此，包含1mg/kg的低剂量的美金刚胺和0.2mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素(单独时无效)的组合物，将阿米替林的有效剂量降低约100倍(从10降低到0.1mg/kg)，引起最大镇痛和抗痛觉过敏效果而不产生镇定副作用。
2mg/kg的低常规剂量的阿米替林与0.02mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素和1.0mg/kg的低剂量的美金刚胺的组合给药与10mg/kg的阿米替林相比，将最大镇痛和抗痛觉过敏效果提高1.5和1.5倍(将尾回撤和缩爪的延迟期从20.2和19.8秒分别增加到29.8和29.3秒)，并且在100％的大鼠中消除镇静。
因此，在与阿米替林的组合给药中1mg/kg的低剂量的美金刚胺和0.02mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素的给药一方面将阿米替林的最大效果提高1.5倍，另一方面将阿米替林的有效剂量降低5倍(至2mg/kg)，引起镇痛和抗痛觉过敏效果的增强而不产生运动机能减退(镇定)副作用。当在与0.02mg/kg苯肾上腺素和美金刚胺(1.0mg/kg)的三元组合物中组合时，阿米替林的增强的协同效应是非常令人吃惊的，包括最大镇痛和抗痛觉过敏效果的1.5倍的提高和阿米替林的引起增强的镇痛和抗痛觉过敏效果的有效剂量的5倍的降低。在所述三元组合物的内含物中阿米替林的镇痛和抗痛觉过敏效果的增强，不能用0.02mg/kg苯肾上腺素+1mg/kg美金刚胺的组合物的额外的镇痛效果来解释，因为0.02mg/kg苯肾上腺素+1mg/kg美金刚胺的组合物具有非常弱的镇痛和抗痛觉过敏效果。
0.05mg/kg的非常低剂量的安乃近与0.02mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素和1mg/kg的低剂量的美金刚胺的组合给药，实际上不改变对疼痛的敏感性和痛觉过敏(尾回撤和缩爪的延迟期从4.8和4.5秒分别改变到5.8和5.5秒)。
0.1mg/kg的低剂量的安乃近与0.02mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素和1mg/kg的低剂量的美金刚胺的组合给药引起最大镇痛和抗痛觉过敏效果，例如与单独的20mg/kg的高剂量的安乃近相比将疼痛敏感性和痛觉过敏降低4.1和4.4倍(将尾回撤和缩爪的延迟期从4.8和4.5秒分别增加到19.7和19.9秒)。重要的是指出这种组合不改变大鼠中的水平活动。因此，包含1mg/kg的低剂量的美金刚胺和0.2mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素(单独时无效)的组合物，将安乃近的有效剂量降低约200倍(从20降低到0.1mg/kg)，引起最大镇痛和抗痛觉过敏效果而不产生运动副作用。
4mg/kg的低常规剂量的安乃近与0.02mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素和1.0mg/kg的低剂量的美金刚胺的组合给药与20mg/kg的安乃近相比，将最大镇痛和抗痛觉过敏效果提高1.5和1.5倍(将尾回撤和缩爪的延迟期从20.6和20.1秒分别增加到30.4和29.9秒)。
因此，在与安乃近的组合给药中1mg/kg的低剂量的美金刚胺和0.02mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素的给药一方面将安乃近的最大效果提高1.5倍，另一方面将安乃近的有效剂量降低5倍(至4mg/kg)，引起镇痛和抗痛觉过敏效果的增强而不产生运动副作用。当在与0.02mg/kg苯肾上腺素和美金刚胺(1.0mg/kg)的三元组合物中组合时，安乃近的增强的协同效应是非常令人吃惊的，包括最大镇痛和抗痛觉过敏效果的1.5倍的提高和安乃近的引起增强的镇痛和抗痛觉过敏效果的有效剂量的5倍的降低。在所述三元组合物的内含物中安乃近的镇痛和抗痛觉过敏效果的增强，不能用0.02mg/kg苯肾上腺素+1mg/kg美金刚胺的组合物的额外的镇痛效果来解释，因为0.02mg/kg苯肾上腺素+1mg/kg美金刚胺的组合物具有非常弱的镇痛和抗痛觉过敏效果。
这些研究的结果表明，含有吗啡、苯肾上腺素和美金刚胺、阿米替林、苯肾上腺素和美金刚胺以及安乃近、苯肾上腺素和美金刚胺的三元组合物引起的镇痛和抗痛觉过敏效果显著优于常规剂量的单独的吗啡、阿米替林和安乃近的镇痛和抗痛觉过敏效果而不产生镇定副作用，并且也显著降低了作为组合物的一部分的吗啡、阿米替林、安乃近、美金刚胺和苯肾上腺素的常规剂量。上面提到的组合物以安全的方式引起吗啡的镇痛和抗痛觉过敏效果的增强，而不产生阿片类痛觉过敏和镇定副作用。
实施例4.在氟哌啶醇强直性昏厥模型中左旋多巴的抗帕金森氏病效果的增强及其副作用的减轻(口服给药)
方法
在wista大鼠(体重160-170g)中通过以1mg/kg的剂量i.m.注射氟哌啶醇而诱导的强直性昏厥模型上，调查药物的抗帕金森氏病效果。强直性昏厥通过在氟哌啶醇给药后60分钟置于以45度角固定的大型格栅上的大鼠的不动的时间长度来评估。大鼠中的最大强直性昏厥，在它们在180秒的观察后在格栅上完全不动的情况下被记录到(campbella.等，1988,neuropharmacology,vol.27(11)，第1197-1199页；ossowskak.j.，neural.transm.park.dis.dement.sect.,1994,vol.8(1-2)，第39-71页；gmirov.e.和serdyuks.e.，bulletinofexperimentalbiologyandmedicine,2007,vol.143(5)，第554-556页)。
在氟哌啶醇给药之前45分钟，将左旋多巴、美金刚胺、苯肾上腺素及其组合通过刚性金属探头，在1.0ml的体积中口服给药。对照动物口服接受1ml蒸馏水。
抗帕金森氏病药物的效果被估算为用测试组合物处理的动物与对照(dw)相比平均不动持续时间的减少。
旷场试验
为了评估测试药物的(运动机能亢进)副作用，使用了“旷场”(of)试验。在所述of试验中，确定大鼠的自发活动。将动物在正方形照明场(1米x1米)的中央放置3分钟，并以秒为单位记录移动时间(水平活动)。水平自发活动的登记在测试药物给药之后40分钟、氟哌啶醇给药之前5分钟进行。为了定量每剂测试药物的自发活动，计算平均水平活动。左旋多巴、苯肾上腺素、美金刚胺以及苯肾上腺素与美金刚胺和左旋多巴的组合的运动机能亢进效果，通过与对照组中大鼠的测量值相比在of试验中的水平活动的平均提高百分数来评估，并且也作为水平活动显著提高(与对照相比提高50％或更多)的大鼠的数目来评估。
以1mg/kg的剂量肌肉内(im)注射氟哌啶醇，在注射后60分钟在对照组中引起158.2±25秒的不动(表5)。
表5.
*n.c.–阴性对照(蒸馏水)。**人类剂量–60kg人类的绝对剂量，按照fda指南(工业指南，“在成年健康志愿者中在治疗剂的初始临床试验中估算最大安全起始剂量”，2005年7月，第7页)计算。
三联疗法
0.25mg/kg左旋多巴与1mg/kg的低剂量的美金刚胺和0.1mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素的组合给药引起轻度但显著的抗帕金森氏病效果，因为它将氟哌啶醇强直性昏厥降低2.0倍(将在格栅上的不动持续时间从158减少到81秒)。
剂量为1.0mg/kg的左旋多巴与1mg/kg的低剂量的美金刚胺和0.1mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素的组合给药引起显著、接近最大的抗帕金森氏病效果(将在格栅上的不动持续时间减少4倍，从158减少到28秒)，与以20mg/kg的高剂量独立使用的左旋多巴和美金刚胺相当。这种组合不提高大鼠的水平活动。因此，包含0.1mg/kg的低剂量的美金刚胺和0.1mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素的组合物，将左旋多巴的有效剂量降低40倍(20.0mg/kg相比于0.5mg/kg)，引起最大抗帕金森氏病效果而不产生运动机能亢进副作用。
3mg/kg的常规低剂量的左旋多巴与1mg/kg的阈值剂量的美金刚胺和0.1mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素的组合给药与剂量为20mg/kg的左旋多巴相比导致最大抗帕金森氏病提高2.8倍(将在格栅上的不动持续时间从35减少到12秒)，而不在大鼠中产生运动机能亢进。相比较而言，1mg/kg的阈值剂量的美金刚胺与0.1mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素的组合物仅仅引起轻度抗帕金森氏病效果，因为它将氟哌啶醇强直性昏厥的量从158减少到79秒，而在与左旋多巴的口服给药的组合中一方面放大了左旋多巴的最大抗帕金森氏病效果，另一方面将左旋多巴的有效剂量降低7倍(至3mg/kg)，引起抗帕金森氏病效果增强而不产生运动机能亢进副作用。非常令人吃惊的是，左旋多巴在与0.1mg/kg苯肾上腺素和1.0mg/kg美金刚胺的三元组合物中组合给药后的增强的协同作用，导致抗帕金森氏病作用的多倍提高和左旋多巴引起增强效果的有效剂量的7倍的降低。
10mg/kg的中等治疗剂量和20mg/kg的最高剂量的左旋多巴与1mg/kg的阈值剂量的美金刚胺和0.1mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素的组合给药与单独的剂量为20mg/kg的左旋多巴相比，将最大抗帕金森氏病效果提高5-8倍(在格栅上的不动持续时间分别从35减少到6和3秒)，并且也在所有大鼠中消除运动机能亢进。
这些研究的结果表明，含有左旋多巴、苯肾上腺素和美金刚胺的三元组合物发挥出的抗帕金森氏病效果大大优于常规剂量的左旋多巴的抗帕金森氏病效果而不产生运动机能亢进副作用，并且显著降低了所述组合物中常规左旋多巴、美金刚胺和苯肾上腺素的剂量。上面提到的组合物以安全的方式引起左旋多巴的抗帕金森氏病作用的增强，因为它消除了使用所述组合物的每种组分的副作用。
实施例5.在大鼠中在鱼藤酮诱导的帕金森氏病(pd)和进行性核上性麻痹(psp)中左旋多巴和美金刚胺的抗帕金森氏病和神经保护效果的增强及其副作用的消除(口服给药)
鱼藤酮是线粒体复合物1的特异性抑制剂，引起纹状体、黑质和小脑中多巴胺能和胆碱能神经元的氧化胁迫和凋亡性死亡。这些神经元的损伤导致pd常见的纹状体中多巴胺和乙酰胆碱水平降低、锥体束外障碍(强直性昏厥、运动协调受损)和寡动症(oligokinesia)，以及psp特征性的共济失调、四肢肌张力不足和死亡。通过腹膜内导入2.3mg/kg的有毒剂量的鱼藤酮，鱼藤酮被用于在wista大鼠中产生pd和psp模型(jasonr.cannon等，neurobiologyofdisease,2009,vol.34，第279–290页)。这种模型用于在左旋多巴和苯肾上腺素与美金刚胺和左旋多巴的组合物按照预防性计划长期口服给药后进行它们的抗帕金森氏病和神经保护活性的试验和比较(yangy.等，j.neurosci.res.,2005,vol.80(3)，第442-449页；cannonj.r.等，neurobiol.dis.,2009,vol.34(2)，第279-290页)。
鱼藤酮的给药
鱼藤酮以2.3mg/ml的浓度溶解在比例为2:98的dmso和miglyol812n的混合物中。制备：将小瓶中的230mg鱼藤酮样品溶解在2mldmso中。将所述溶液倾倒在100ml广口瓶中。将小瓶用5mlmiglyol冲洗两次，将清洗液合并到主溶液并搅拌。向该溶液添加88mlmiglyol并再次混合。将得到的溶液分成三剂。将所述溶液储存在-10℃。每只动物给药0.2ml鱼藤酮溶液：每只体重为200±20g的动物0.46mg的剂量，即2.3mg/kg。将所述鱼藤酮溶液每天一次ip注射共19天。
在具有鱼藤酮诱导的pd的大鼠中疗法的抗帕金森氏病效果，根据“旷场”试验中锥体束外障碍(强直性昏厥)和寡动症(重复性运动的幅度和速度的快速下降)的消除来估算。疗法的神经保护效果通过在具有鱼藤酮诱导的psp的大鼠中共济失调、四肢肌张力不足和死亡的消除来评估。运动机能亢进副作用(兴奋性运动)通过与实验的第一天相比，在实验的第10和第18天在旷场中的水平和垂直活动以％计的提高来评估。
将0.3mg/kg苯肾上腺素、左旋多巴(10和20mg/kg)、2.5和5mg/kg美金刚胺、1mg/kg美金刚胺+0.3mg/kg苯肾上腺素+5mg/kg左旋多巴的组合、1mg/kg美金刚胺+0.3mg/kg苯肾上腺素+10mg/kg左旋多巴的组合和dw(1.0ml，对照)每天在1ml体积中，在鱼藤酮给药之前45分钟，使用刚性金属探头口服给药，共19天。对照和实验组中的动物数目在6至8的范围内。
将左旋多巴与苄丝肼(外周多巴脱羧酶抑制剂)以4:1的比例组合给药，以降低左旋多巴的与外周多巴胺受体的刺激相关的副作用(alamm.等，behav.brainres.,2004,vol.153(2)，第439-446页)。将左旋多巴和苄丝肼溶解在1mldw中并在1ml体积中口服给药。左旋多巴与苯肾上腺素的组合：将左旋多巴和苄丝肼溶液(0.5ml)与0.5ml苯肾上腺素溶液混合。左旋多巴与美金刚胺和苯肾上腺素的组合：将左旋多巴和苄丝肼溶液(0.5ml)与0.5ml的苯肾上腺素+美金刚胺溶液混合。所述混合物以1ml的体积口服给药。使用鱼藤酮的大鼠的实验组中的抗帕金森氏病效果，通过消除强直性昏厥和寡动症来评估。
大鼠中的强直性昏厥通过置于以45°角倾斜的大型格栅上的动物的不动时间来确定。大鼠中的最大强直性昏厥在观察120秒时它们在格栅上完全不动的情况下被记录。强直性昏厥的值以点数为单位评估：3点-不动持续时间为80秒至120秒，2点-不动持续时间为40至70秒，1点-不动持续时间为20至35秒，0点-不动少于20秒。每天在鱼藤酮给药之前30分钟和鱼藤酮给药之后180分钟在大鼠中追踪强直性昏厥。对于每个实验组来说，在整个观察期间，在每日的基础上确定具有严重强直性昏厥(2-3点)的大鼠数目占组中大鼠总数的％。为了评估疗法的抗全身僵硬效果，在实验的第12和第19天，与使用蒸馏水处理的对照相比确定具有严重强直性昏厥(2-3点)的大鼠数目减少的％。
大鼠的自发活动在“旷场”试验中测试。将动物置于正方形照明场(1米x1米)的中央，并在3分钟内记录移动的距离(水平活动)和用后腿直立次数(垂直活性)。水平和垂直自发活动的登记在第一天，在鱼藤酮的第一次给药之前60分钟，对具有高度选择的自发活动(总行走时间不少于12秒并且直立次数至少为4)的大鼠进行。为了鉴定每个实验组中鱼藤酮诱导的寡动症，在实验的第12和第19天，在鱼藤酮给药后2小时再次在旷场试验中检查自发活动。
寡动症以点数为单位定量：0点-最高水平活动(总行走时间超过12秒)和高垂直活性(立桩次数超过3)；1点-水平活动降低(总行走时间7-11秒)并且垂直活性降低(立桩次数1-3)；2点-水平活动显著降低(总行走时间2-6秒)并且不存在垂直活性(立桩次数0-1)；3点-不存在水平活动(总行走时间0-1秒)并且不存在垂直活性(立桩次数0)。在每个实验组中，在实验的第12和19天在鱼藤酮给药后120分钟，确定具有严重寡动症(2-3点)的大鼠数目占组中大鼠总数的％。
具有鱼藤酮诱导的psp的大鼠的实验组中的神经保护效果，根据由鱼藤酮的小脑神经毒性作用引起的共济失调、四肢肌张力不足和死亡的消除来评估(j.neurochem.,2005,vol.95(4):930-9)。
共济失调和四肢肌张力不足是鱼藤酮的典型的不协调神经毒性效应，表现为不协调的运动和兴奋性运动被运动机能减退和刻板代替，并且在严重情况下表现为抗重力肌反射的完全违背、以单侧肌张力不全姿势跌倒和运动不能。共济失调和四肢肌张力不足的严重性的以分值为单位的评估使用下述量表进行：(+)不协调的运动，运动机能亢进；(++)显著的不协调，运动机能减退，刻板，侧向跌倒，频繁的自发性肌张力不全姿势；(+++)抗重力肌反射的完全违背，运动不能，持续肌张力不全姿势(j.neurosci.,2014,27；34(35):11723-32)。
共济失调和四肢肌张力不足的登记每日进行两次，在鱼藤酮给药之前30分钟和鱼藤酮给药之后180分钟。对于每个实验组来说，在整个观察期内，在每日的基础上确定具有严重共济失调和四肢肌张力不足(++-+++)和死亡的大鼠数目占组中大鼠总数的％。在具有psp的大鼠中疗法的神经保护效果(对共济失调、四肢肌张力不足和致死率的影响)，在实验的第12和19天被确定为与对照相比，具有严重共济失调、四肢肌张力不足和死亡的大鼠数目减少的％。运动机能亢进副作用在“旷场”试验中评估。在该试验中确定大鼠中的自发活动。将动物在正方形照明场(1米x1米)的中心放置3min的总时间，记录距离(水平活动)和后腿直立的次数(垂直活性)。在of测定法中水平和垂直自发活动的登记在实验的第10和18天，在物质给药之后40分钟内和鱼藤酮给药之前5分钟进行。运动机能亢进副作用通过水平和垂直活动显著(与实验的第一天相比至少50％)提高(运动机能亢进)的大鼠的数目占组中大鼠总数的％来评估。
表6.在大鼠中，在鱼藤酮诱导的pd和psp中左旋多巴1和美金刚胺的抗帕金森氏病和神经保护效果的增强及其副作用的消除
1在19天的持续时间内在2.3mg/kg鱼藤酮给药之前45分钟口服给药。
2人类剂量–60kg人类的绝对剂量，按照fda指南(工业指南，“在成年健康志愿者中在治疗剂的初始临床试验中估算最大安全起始剂量”，2005年7月，第7页)计算。3n.c.–阴性对照(蒸馏水)。*在倾斜格栅上大鼠的不动时间超过40秒。**在of试验中寡动症++-+++。***共济失调和四肢肌张力不足++-+++。****与实验的第一天相比在of试验中自发活动提高超过50％。
三联疗法
在实验的第12和19天，5mg/kg的低常规剂量的左旋多巴与1mg/kg的低剂量的美金刚胺和0.3mg/kg的低剂量的苯肾上腺素的组合口服给药，与对照相比将具有严重寡动症的大鼠数目减少88％和76％(从100％减少到12％和24％)，表明在具有鱼藤酮诱导的pd的大鼠中寡动症的非常显著的减少。在实验的第12和19天，这种组合与对照相比减少具有严重强直性昏厥的大鼠数目，最高效率分别为减少30％和46％(从42％减少到12％和从58％减少到12％)。5mg/kg左旋多巴与1mg/kg美金刚胺和0.3mg/kg苯肾上腺素的组合在实验的第12和19天完全消除共济失调、四肢肌张力不足和死亡。在实验的第10和18天，在of试验中，上面提到的组合在大鼠中不引起运动机能亢进。因此，所述5mg/kg的低剂量的左旋多巴与1mg/kg的低剂量的美金刚胺和0.3mg/kg的低剂量的苯肾上腺素的组合引起最大的抗帕金森氏病和神经保护效果，其大大优于单独的20mg/kg的最大剂量的左旋多巴的效能。上述组合的优点是在大鼠中完全不存在运动机能亢进副作用。
在实验的第12和19天，10mg/kg的中等常规剂量的左旋多巴与1mg/kg的低剂量的美金刚胺和0.3mg/kg的低剂量的苯肾上腺素的组合口服给药与对照相比，将具有严重寡动症的大鼠数目减少100％和88％(从100％减少到0％和12％)，指示了在具有鱼藤酮诱导的pd的大鼠中寡动症的完全消除。在实验的第12和19天，这种组合完全消除了严重强直性昏厥、共济失调、四肢肌张力不足和死亡。在实验的第10和18天，在of试验中，上面提到的组合在大鼠中不引起运动机能亢进。因此，所述10mg/kg的中等常规剂量的左旋多巴与1mg/kg的低剂量的美金刚胺和0.3mg/kg的低剂量的苯肾上腺素的组合引起最大可能的抗帕金森氏病和神经保护效果，其优于单独的20mg/kg的最大剂量的左旋多巴的效能50-100％。上述组合的优点是在大鼠中完全不存在运动机能亢进副作用。
非常令人吃惊的是，左旋多巴在与0.3mg/kg苯肾上腺素和1.0mg/kg美金刚胺的三元组合物中组合给药后的增强的协同效应，导致左旋多巴(20mg/kg)的抗帕金森氏病和神经保护作用的多倍提高及其有效剂量的2-4倍的降低。
因此，单独时无效的剂量为0.3mg/kg的苯肾上腺素和单独时无效的剂量为1mg/kg的美金刚胺，将在单独使用时具有低效能的5-10mg/kg的低剂量的左旋多巴的抗帕金森氏病和神经保护效果，协同增强到不能根据单独的20mg/kg的高剂量的左旋多巴的独立使用来解释的最高水平。然而，苯肾上腺素和美金刚胺不提高剂量为5-10mg/kg的左旋多巴的运动机能亢进副作用。
这些研究的结果表明，含有左旋多巴、苯肾上腺素和美金刚胺的三元组合物发挥的抗帕金森氏病和神经保护效果大大优于常规剂量的左旋多巴的抗帕金森氏病和神经保护效果而不产生运动机能亢进副作用，并且显著降低了组合物中常规左旋多巴、美金刚胺和苯肾上腺素的剂量。上面提到的组合物以安全的方式导致左旋多巴的抗帕金森氏病和神经保护作用的增强，因为它消除了使用所述组合物的每种组分的副作用。
根据所述实验的结果，可以提供常规低剂量的左旋多巴与苯肾上腺素和美金刚胺的组合，用于安全地治疗对左旋多巴的作用具有抗药性的严重的帕金森氏病和进行性核上性麻痹，以及用于在不能耐受左旋多巴的患者中治疗帕金森氏病和psp。
实施例6.在氟哌啶醇强直性昏厥模型中通过苯肾上腺素增强左旋多巴的抗帕金森氏病效果并减轻其副作用(口服给药)
方法
在wista大鼠(体重160-170g)中通过以1mg/kg的剂量i.m.注射氟哌啶醇而诱导的强直性昏厥模型上，调查药物的抗帕金森氏病效果。强直性昏厥通过在氟哌啶醇给药后60分钟置于以45度角固定的大型格栅上的大鼠的不动的时间长度来评估。大鼠中的最大强直性昏厥，在它们在180秒的观察后在格栅上完全不动的情况下被记录到(campbella.等，1988,neuropharmacology,vol.27(11)，第1197-1199页；ossowskak.j.，neural.transm.park.dis.dement.sect.,1994,vol.8(1-2)，第39-71页；gmirov.e.和serdyuks.e.，bulletinofexperimentalbiologyandmedicine,2007,vol.143(5)，第554-556页)。
在氟哌啶醇给药之前45分钟，将左旋多巴和苯肾上腺素通过刚性金属探头，在1.0ml的体积中口服给药。对照动物口服接受1ml蒸馏水。
抗帕金森氏病药物的效果被估算为用测试组合物处理的动物与对照(dw)相比平均不动持续时间的减少。
旷场试验
为了评估药物的运动机能亢进副作用，使用了“旷场”(of)试验。在所述of试验中，确定大鼠的自发活动。将动物在正方形照明场(1米x1米)的中央放置3分钟，并以秒为单位记录移动时间(水平活动)。水平自发活动的登记在测试药物给药之后40分钟、氟哌啶醇给药之前5分钟进行。为了定量每剂测试药物的自发活动，计算平均水平活动。左旋多巴、苯肾上腺素以及左旋多巴与苯肾上腺素的组合的运动机能亢进效果，通过与对照组中大鼠的测量值相比在of试验中的水平活动的平均提高百分数来评估，并且也作为水平活动显著提高(与对照相比提高50％或更多)的大鼠的数目来评估。
以1mg/kg的剂量肌肉内(im)注射氟哌啶醇，在注射后60分钟在对照组中引起158.2±25秒的不动(表7)。
表7.
*n.c.–阴性对照(蒸馏水)。**人类剂量–60kg人类的绝对剂量，按照fda指南(工业指南，“在成年健康志愿者中在治疗剂的初始临床试验中估算最大安全起始剂量”，2005年7月，第7页)计算。
二联疗法
1.5mg/kg的低剂量的左旋多巴与阈值剂量(0.1mg/kg，其单独时无效)的苯肾上腺素的组合给药引起轻度但显著的抗帕金森氏病效果，因为它将氟哌啶醇强直性昏厥减少2.1倍(将在格栅上的不动持续时间从158减少到75秒)。3mg/kg的低剂量的左旋多巴与0.1mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素的组合给药引起显著的抗帕金森氏病效果(将在格栅上的不动持续时间减少4.3倍，从158减少到37秒)，与单独的20mg/kg的高剂量的左旋多巴相近。重要的是指出，这种组合在大鼠中不提高水平活动。因此，阈值剂量的苯肾上腺素(0.1mg/kg)将左旋多巴的有效剂量降低约7倍，实现最大效果而不产生副作用。
剂量为3、10和20mg/kg的左旋多巴与剂量为0.3mg/kg的苯肾上腺素的组合给药具有最大抗帕金森氏病效果(将在格栅上的不动持续时间从158分别减少到33、17和10秒)，比单独的20mg/kg的高剂量的左旋多巴好1.2、2和3.5倍。重要的是指出，这种组合在大鼠中也不提高水平活动。因此，剂量为0.3mg/kg的苯肾上腺素将左旋多巴的有效剂量降低2至7倍，实现最大效果而不产生副作用。
低剂量(3mg/kg)的左旋多巴与0.3mg/kg的常规剂量的苯肾上腺素的组合给药与剂量为3mg/kg的左旋多巴与0.1mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素的组合相比不显著提高抗帕金森氏病效果(在格栅上的不动时间分别为33和37秒)。因此，为了降低左旋多巴的有效剂量，使用阈值剂量的苯肾上腺素(0.1mg/kg)就已足够，但是为了达到左旋多巴的最大抗帕金森氏病作用，应该使用更高的常规剂量的苯肾上腺素(0.3mgkg)。
高剂量(20mg/kg)的左旋多巴与阈值剂量(0.1mg/kg)的苯肾上腺素的组合给药不显著(1.2倍)提高单独的左旋多巴的最大抗帕金森氏病效果(将在格栅上的不动持续时间从35减少到29秒)，但在60％的大鼠中消除运动机能亢进。中等治疗剂量(10mg/kg)和高治疗剂量(20mg/kg)的左旋多巴与常规中等剂量(0.3mg/kg，单独地具有低的抗帕金森氏病效果)的苯肾上腺素的组合给药将剂量为20mg/kg的左旋多巴的最大抗帕金森氏病效果分别提高2.0和3.5倍(不动持续时间从35分别减少到17和10秒)，并且也在100％的大鼠中消除运动机能亢进。因此，0.3mg/kg的常规平均剂量的苯肾上腺素显著提高常规剂量的左旋多巴的最大抗帕金森氏病效果而不产生运动机能亢进副作用。
左旋多巴与常规剂量的苯肾上腺素(0.3mg/kg)的口服给药组合的增强的协同效应是非常令人吃惊的，包括最大抗帕金森氏病效果的2.0-3.5倍的提高和左旋多巴的常规剂量的2倍的降低(从20mg/kg降低到10mg/kg)。在这个组合中左旋多巴的抗帕金森氏病效果的增强不能用苯肾上腺素的额外的抗帕金森氏病效果来解释，因为剂量为0.3mg/kg的苯肾上腺素具有非常弱的抗帕金森氏病效果。
这些研究的结果表明，含有左旋多巴和苯肾上腺素的“双重”组合物发挥出的抗帕金森氏病效果大大优于单独的常规剂量的左旋多巴的抗帕金森氏病效果，而不产生运动机能亢进副作用，并且显著降低了所述组合物中常规左旋多巴和苯肾上腺素的剂量。上面提到的组合物以安全的方式引起左旋多巴的抗帕金森氏病作用的增强，因为它们消除了使用所述组合物的每种组分的副作用。
实施例7.在甩尾和旷场试验中吗啡的镇痛效果的增强及其副作用的减轻(肌肉内给药)
方法
甩尾试验
从雄性wista大鼠中甩尾延迟期的延长来估算药物的镇痛效果(woolfc.j.等，1977,eur.j.pharmacol.,vol.45(3)，第311-314页；serdyuks.e.和gmirov.e.，2007,bull.exp.biol.med.,vol.143(3)，第350-352页)。在所述甩尾试验中，通过将大鼠尾浸泡在55±0.1℃的热水中来刺激疼痛。每3分钟确定尾回撤的延迟期(摆脱疼痛刺激物的时间)。为了评估疼痛敏感性，使用在物质给药之前的最后15min内具有短的延迟期(3-5秒)的大鼠。将吗啡、肾上腺素以及吗啡与肾上腺素的组合在0.1-0.3ml的体积中以逐渐提高的剂量肌肉内(i.m.)给药，直至在疼痛敏感性的最后三次测量期间达到最大痛觉缺失(被测量为以秒为单位的尾回撤的最大延迟期)。对照动物i.m注射0.2ml蒸馏水。镇痛效果通过与对照相比尾回撤的延迟期的增加来评估。
旷场试验
为了评估药物的运动机能减退(镇定)效果，使用了“旷场”(of)试验。在所述of试验中，确定大鼠的自发活动。将动物在正方形照明场(1米x1米)的中央放置3分钟，并以秒为单位记录移动时间(水平活动)。水平自发活动的登记在测试药物给药之后40分钟进行。为了定量每剂测试药物的自发活动，计算平均水平活动。吗啡、肾上腺素以及吗啡与肾上腺素的组合的运动机能减退(镇定)作用，通过与对照组中大鼠的测量值相比在of试验中的平均水平活动的降低(运动机能减退)百分数，以及水平活动显著降低(与对照相比50％或更多)的大鼠的数目来评估。
表8.
*n.c.–阴性对照(蒸馏水)。**人类剂量–60kg人类的绝对剂量，按照fda指南(工业指南，“在成年健康志愿者中在治疗剂的初始临床试验中估算最大安全起始剂量”，2005年7月，第7页)计算。
二联疗法
0.2mg/kg的非常低剂量的吗啡和0.01mg/kg的阈值剂量的肾上腺素(各自在单独时无效)的组合给药非显著性地降低了疼痛敏感性(与对照相比1.9倍)，因为它将甩尾延迟期从4.5增加到8.7秒。0.4mg/kg的较高剂量的吗啡与0.01mg/kg的阈值剂量的肾上腺素的组合给药引起最高镇痛效果(4.2倍，将甩尾延迟期从4.5增加到18.9秒)，如同单独的5mg/kg的高剂量的吗啡。这种组合不降低大鼠中的水平活动。因此，这种组合将吗啡的有效剂量降低12.5倍，引起最大镇痛效果而不产生运动机能减退(镇定)副作用。
5mg/kg的高剂量的吗啡与0.01mg/kg的阈值剂量的肾上腺素的组合给药不显著提高单独的吗啡的最大镇痛效果(将甩尾延迟期从19.8增加到21.5秒)，但是在40％的大鼠中消除运动机能减退。因此，0.01mg/kg的阈值剂量的肾上腺素不提高高剂量的吗啡的镇痛效果，但是部分消除吗啡的运动机能减退副作用。
2.5mg/kg的中等剂量和5mg/kg的较高剂量的吗啡两者与0.03mg/kg的常规低剂量(单独时具有轻微镇痛效果)的肾上腺素的组合给药，将吗啡的最大镇痛效果分别提高1.4和1.7倍(将尾回撤的延迟期从19.8秒分别增加到26.7和32.7秒)，并且在100％的大鼠中消除运动机能减退。因此，0.03mg/kg的常规低剂量的肾上腺素显著提高2.5和5mg/kg的常规剂量的吗啡的最大镇痛效果，而不产生运动机能减退(镇定)副作用。
吗啡与低常规剂量(0.03mg/kg)的肾上腺素的肌肉内给药组合的增强的协同效应是非常令人吃惊的，包括最大镇痛效果的1.4-1.7倍的提高和吗啡的实现增强镇痛效果的常规剂量的2倍的降低(从5mg/kg降低到2.5mg/kg)。在这种组合中吗啡的镇痛效果的增强不能通过肾上腺素的额外的镇痛效果来解释，因为剂量为0.03mg/kg的肾上腺素具有非常弱的镇痛效果。
实施例8.在甩尾和旷场试验中吗啡的镇痛效果的增强及其副作用的减轻(口服给药)
方法
甩尾和旷场试验如上所详述的来进行。
将吗啡、苯肾上腺素和吗啡与肾上腺素的组合通过刚性金属探头，在1.0ml的体积中以逐渐提高的剂量口服给药，直至在氟哌啶醇给药之前45分钟在疼痛敏感性的最后三次测量期间获得最大痛觉缺失(被测量为以秒为单位的尾回撤的最大延迟期)。对照动物口服接受1ml蒸馏水。
表9.
*n.c.–阴性对照(蒸馏水)。**人类剂量–60kg人类的绝对剂量，按照fda指南(工业指南，“在成年健康志愿者中在治疗剂的初始临床试验中估算最大安全起始剂量”，2005年7月，第7页)计算。
二联疗法
与0.02mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素相组合的0.1mg/kg的非常低剂量的吗啡(各自单独时无效)与对照相比非显著性地将疼痛敏感性降低了仅仅1.8倍，因为它将甩尾延迟期从4.6增加到8.5秒。与0.02mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素相组合的0.2mg/kg的较高剂量的吗啡达到最大镇痛效果(与对照相比提高4.2倍，将甩尾延迟期从4.6增加到19.4秒)，与单独的3mg/kg的高剂量的吗啡相同。如表3中所呈现的，这种组合不降低大鼠中的水平活动。因此，0.02mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素将吗啡的有效剂量降低15倍，引起最大镇痛效果而不产生运动机能减退(镇定)副作用。
与0.02mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素相组合的3mg/kg的高剂量的吗啡也非显著性地将吗啡的最大镇痛效果提高了仅仅1.2倍(将甩尾延迟期从19增加到22秒)，但在20％的大鼠中消除运动机能减退(从70％减少到50％)。因此，0.02mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素不提高高剂量吗啡的镇痛效果，但是部分消除吗啡的镇定副作用。与0.1mg/kg的常规低剂量的苯肾上腺素(单独时具有轻微镇痛效果)相组合的1mg/kg的常规低剂量以及3mg/kg的高常规剂量的吗啡，将吗啡的最大镇痛效果分别提高1.6和1.9倍(将尾回撤的延迟期从19秒分别增加到29.4和35.5秒)，并且还在所有大鼠中消除运动机能减退。因此，1mg/kg的常规最低剂量和3mg/kg的高常规剂量的吗啡与0.1mg/kg的低常规剂量的苯肾上腺素的组合口服给药，将通常在给药3mg/kg吗啡后获得的最大镇痛效果提高60-90％，而不产生副作用(镇静)。
吗啡与低常规剂量的苯肾上腺素(0.1mg/kg)的口服给药组合的增强的协同效应是非常令人吃惊的，包括吗啡的最大镇痛效果的1.5-2倍的提高及其常规剂量的3倍的降低(从3mg/kg降低至1mg/kg)。在这个组合中吗啡的镇痛效果的增强不能通过苯肾上腺素的额外的镇痛效果来解释，因为剂量为0.1mg/kg的苯肾上腺素具有非常弱的镇痛效果。
实施例9.在大鼠中，在鱼藤酮诱导的帕金森氏病(pd)和进行性核上性麻痹(psp)中左旋多巴的抗帕金森氏病和神经保护效果的增强及其副作用的消除(口服给药)
鱼藤酮的给药
鱼藤酮以2.3mg/ml的浓度溶解在比例为2:98的dmso和miglyol812n的混合物中。制备：将小瓶中的230mg鱼藤酮样品溶解在2mldmso中。将所述溶液倾倒在100ml广口瓶中。将小瓶用5mlmiglyol冲洗两次，将清洗液合并到主溶液并搅拌。向该溶液添加88mlmiglyol并再次混合。将得到的溶液分成三剂。将所述溶液储存在-10℃。每只动物给药0.2ml鱼藤酮溶液：每只体重为200±20g的动物0.46mg的剂量，即2.3mg/kg。将所述鱼藤酮溶液每天一次ip注射共19天。
在具有鱼藤酮诱导的帕金森氏病的大鼠中疗法的抗帕金森氏病效果，根据“旷场”试验中锥体束外障碍(强直性昏厥)和寡动症的消除来估算。疗法的神经保护效果通过在具有鱼藤酮诱导的psp的大鼠中共济失调和死亡的消除来评估。运动机能亢进副作用(兴奋性运动)通过与实验的第一天相比，在实验的第10和第18天在旷场中的水平和垂直活动以％计的提高来评估。
将0.3mg/kg苯肾上腺素、左旋多巴(10和20mg/kg)、左旋多巴(10mg/kg)+苯肾上腺素(0.3mg/kg)的组合、左旋多巴(20mg/kg)+苯肾上腺素(0.3mg/kg)的组合和dw(1.0ml，对照)每天在1ml体积中，在鱼藤酮给药之前45分钟，使用刚性金属探头口服给药，共19天。对照和实验组中的动物数目在7至8的范围内。
将左旋多巴与苄丝肼(外周多巴脱羧酶抑制剂)以4:1的比例组合给药，以降低左旋多巴的与外周多巴胺受体的刺激相关的副作用(alamm.等，behav.brainres.,2004,vol.153(2)，第439-446页)。将左旋多巴和苄丝肼溶解在1mldw中并在1ml体积中口服给药。左旋多巴与苯肾上腺素的组合：将左旋多巴和苄丝肼溶液(0.5ml)与0.5ml苯肾上腺素溶液混合。所述混合物以1ml的体积口服给药。使用鱼藤酮的大鼠的实验组中的抗帕金森氏病效果，通过消除强直性昏厥和寡动症来评估。
大鼠中的强直性昏厥通过置于以45°角倾斜的大型格栅上的动物的不动时间来确定。大鼠中的最大强直性昏厥在观察120秒时它们在格栅上完全不动的情况下被记录。强直性昏厥的值以点数为单位评估：3点-不动持续时间为80秒至120秒，2点-不动持续时间为40至70秒，1点-不动持续时间为20至35秒，0点-不动少于20秒。每天在鱼藤酮给药之前30分钟和鱼藤酮给药之后180分钟在大鼠中追踪强直性昏厥。对于每个实验组来说，在整个观察期间，在每日的基础上确定具有严重强直性昏厥(2-3点)的大鼠数目占组中大鼠总数的％。为了评估疗法的抗全身僵硬效果，在实验的第12和第19天，与使用蒸馏水处理的对照相比确定具有严重强直性昏厥(2-3点)的大鼠数目减少的％。
大鼠的自发活动在“旷场”试验中测试。将动物置于正方形照明场(1米x1米)的中央，并在3分钟内记录移动的距离(水平活动)和用后腿直立次数(垂直活性)。水平和垂直自发活动的登记在第一天，在鱼藤酮的第一次给药之前60分钟，对具有高度选择的自发活动(总行走时间不少于12秒并且直立次数至少为4)的大鼠进行。为了鉴定每个实验组中鱼藤酮诱导的寡动症，在实验的第12和第19天，在鱼藤酮给药后2小时再次在旷场试验中检查自发活动。
寡动症以点数为单位定量：0点-最高水平活动(总行走时间超过12秒)和高垂直活性(立桩次数超过3)；1点-水平活动降低(总行走时间7-11秒)并且垂直活性降低(立桩次数1-3)；2点-水平活动显著降低(总行走时间2-6秒)并且不存在垂直活性(立桩次数0-1)；3点-不存在水平活动(总行走时间0-1秒)并且不存在垂直活性(立桩次数0)。在每个实验组中，在实验的第12和19天在鱼藤酮给药后120分钟，确定具有严重寡动症(2-3点)的大鼠数目占组中大鼠总数的％。
具有鱼藤酮诱导的psp的大鼠的实验组中的神经保护效果，根据由鱼藤酮的神经毒性作用引起的共济失调和死亡的消除来评估。共济失调是鱼藤酮的典型的不协调神经毒性效应，表现为不协调的运动和兴奋性运动被运动机能减退和刻板代替，并且在严重情况下表现为抗重力肌反射的完全违背、单侧跌倒和运动不能。共济失调的严重性的以分值为单位的评估使用下述量表进行：(+)不协调的运动，运动机能亢进；(++)显著的不协调，运动机能减退，刻板，侧向跌倒；(+++)抗重力肌反射的完全违背，运动不能。共济失调的登记每日进行两次，在鱼藤酮给药之前30分钟和鱼藤酮给药之后180分钟。对于每个实验组来说，在整个观察期内，在每日的基础上确定具有严重共济失调(++-+++)和死亡的大鼠数目占组中大鼠总数的％。在具有psp的大鼠中疗法的神经保护效果(对共济失调和致死率的影响)，在实验的第12和19天被确定为与对照相比，具有严重共济失调和死亡的大鼠数目减少的％。运动机能亢进副作用在“旷场”试验中评估。在该试验中确定大鼠中的自发活动。将动物在正方形照明场(1米x1米)的中心放置3min的总时间，记录距离(水平活动)和后腿直立的次数(垂直活性)。在of测定法中水平和垂直自发活动的登记在实验的第10和18天，在物质给药之后40分钟内和鱼藤酮给药之前5分钟进行。运动机能亢进副作用通过水平和垂直活动显著(与实验的第一天相比至少50％)提高(运动机能亢进)的大鼠的数目占组中大鼠总数的％来评估。
表10.在大鼠中，在鱼藤酮诱导的pd和psp中左旋多巴1的抗帕金森氏病和神经保护效果的增强及其副作用的消除
1在19天的持续时间内在2.3mg/kg鱼藤酮给药之前45分钟口服给药。2人类剂量–60kg人类的绝对剂量，按照fda指南(工业指南，“在成年健康志愿者中在治疗剂的初始临床试验中估算最大安全起始剂量”，2005年7月，第7页)计算。3n.c.–阴性对照(蒸馏水)。*在倾斜格栅上大鼠的不动时间超过40秒。**在of试验中寡动症++-+++。***共济失调++-+++。****与实验的第一天相比在of试验中自发活动提高超过50％。
二联疗法
在实验的第12和19天，左旋多巴(10mg/kg)与苯肾上腺素(0.3mg/kg)的组合在长期口服给药后，与对照相比将具有严重寡动症的大鼠数目减少75％(从100％减少到25％)，表明在具有鱼藤酮诱导的pd的大鼠中寡动症的非常显著的减少。在实验的第12和19天，这种组合与对照相比减少具有严重强直性昏厥的大鼠数目，最高效率分别为减少48％和46％(从48％减少到0％和从58％减少到12％)。10mg/kg左旋多巴与0.3mg/kg苯肾上腺素的组合在实验的第12和19天完全消除共济失调和死亡。在实验的第10和18天，在of试验中，剂量为10mg/kg的左旋多巴与剂量为0.3mg/kg的苯肾上腺素的组合在大鼠中不引起运动机能亢进。因此，所述常规低剂量(10mg/kg)的左旋多巴与0.3mg/kg的低常规剂量的苯肾上腺素的组合在具有鱼藤酮诱导的pd的大鼠中消除强直性昏厥和寡动症，并在具有鱼藤酮诱导的psp的大鼠中完全消除共济失调和麻痹。上述组合的优点是在大鼠中完全不存在运动机能亢进副作用。
剂量为20mg/kg的左旋多巴与剂量为0.3mg/kg的苯肾上腺素的组合的长期口服给药，与对照相比将具有严重寡动症的大鼠数目减少86％(从100％减少到14％)。这表明这种组合在具有鱼藤酮诱导的pd的大鼠中消除寡动症。这种组合在具有鱼藤酮诱导的pd的大鼠中完全消除严重的强直性昏厥(从48％减少到0％和从58％减少到0％)。剂量为20mg/kg的左旋多巴与剂量为0.3mg/kg的苯肾上腺素的组合在实验的第12和19天完全消除共济失调和死亡。剂量为20mg/kg的左旋多巴与剂量为0.3mg/kg的苯肾上腺素的组合在实验的第10和18天仅在14％和0％的大鼠中引起非显著性的自发活动提高，这与单独使用20mg/kg左旋多巴相比减少76％。因此，20mg/kg的高常规剂量的左旋多巴与0.3mg/kg的常规低剂量的苯肾上腺素向大鼠的长期口服给药组合，在具有鱼藤酮诱导的pd的大鼠中高效消除锥体束外和运动障碍并在具有鱼藤酮诱导的psp的大鼠中完全消除共济失调和麻痹，并且实际上消除了由高剂量的左旋多巴引起的运动机能亢进。因此，10mg/kg的低常规剂量和20mg/kg的高常规剂量的左旋多巴与0.3mg/kg的低剂量的苯肾上腺素向大鼠的口服给药，将剂量为20mg/kg的左旋多巴所实现的抗帕金森氏病和神经保护效果提高50-100％，而不产生运动机能亢进副作用。10mg/kg的常规最低剂量的左旋多巴与0.3mg/kg的常规最低剂量的苯肾上腺素的组合的抗帕金森氏病和神经保护活性是非常令人吃惊的，因为它远远超过所述组合的每一种组分单独的抗帕金森氏病和神经保护活性，并且它超过20mg/kg的双倍剂量的左旋多巴的抗帕金森氏病和神经保护活性(超过1.5-2倍)。因此，剂量为0.3mg/kg的单独时无效的苯肾上腺素，将单独使用时具有低效能的10mg/kg的低剂量的左旋多巴的抗帕金森氏病和神经保护效果，协同增强至不能根据单独的20mg/kg的高剂量的左旋多巴的独立使用来解释的最大水平。然而，苯肾上腺素不增强剂量为10mg/kg的左旋多巴的运动机能亢进副作用。
重要的是应该注意到苯肾上腺素与剂量为20mg/kg和10mg/kg的左旋多巴的组合的神经保护和抗帕金森氏病活性的差异相对小。这暗示低得多的苯肾上腺素增强20mg/kg的高剂量的左旋多巴的治疗效果，但有效地消除20mg/kg的高剂量的左旋多巴的运动机能亢进副作用。根据所述实验的结果，可以提供常规低剂量的左旋多巴与苯肾上腺素的组合，用于安全地治疗对左旋多巴的作用具有抗药性的严重的帕金森氏病和进行性核上性麻痹，以及用于在不能耐受左旋多巴的患者中治疗帕金森氏病和psp。
实施例10.在甩尾、缩爪和旷场试验中美金刚胺、吗啡、阿米替林和安乃近的镇痛和抗痛觉过敏效果的增强及其副作用的减轻方法甩尾试验(急性疼痛).
从雄性wista大鼠中的甩尾延迟期的延长来估算药物的急性镇痛作用(woolfc.j.等，1977,eur.j.pharmacol.,vol.45(3)，第311-314页；serdyuks.e.和gmirov.e.，2007,bull.exp.biol.med.,vol.143(3)，第350-352页)。在所述甩尾试验中，通过将大鼠尾浸泡在55±0.1℃的热水中来刺激疼痛。每3分钟确定尾回撤的延迟期(摆脱疼痛刺激物的时间)。为了评估疼痛敏感性，使用在物质给药之前的最后15min内具有短的延迟期(3-5秒)的大鼠。将吗啡、美金刚胺、阿米替林、安乃近、苯肾上腺素、肾上腺素及其双重组合以逐渐提高的剂量肌肉内(i.m.)或口服给药，直至在疼痛敏感性的最后三次测量期间达到最大痛觉缺失(被测量为以秒为单位的尾回撤的最大延迟期)。对照动物i.m.注射0.2ml或口服1.0ml蒸馏水。镇痛效果通过与对照(蒸馏水)相比尾回撤的延迟期的增加来评估。
缩爪试验(急性炎性痛觉过敏)
通过在乙醚麻醉条件下将爪置于热水(56℃)中20-25秒，引起爪的炎性痛觉过敏。痛觉过敏在所述烫伤后30min发生(在爪被放置在温度为47℃的水中后缩爪的延迟期从15-20秒减少到2-4秒)。药物的急性抗痛觉过敏作用从具有炎性痛觉过敏的雄性wista大鼠中缩爪延迟期的延长来估算(coderret.j.，melzackr.brainres.(1987)404(l-2):95-106)。
每5分钟确定缩爪的延迟期(摆脱疼痛刺激物的时间)。为了估算痛觉过敏，使用在物质给药之前的最后20min内具有短的延迟期(3-5秒)的大鼠。将吗啡、美金刚胺、阿米替林、安乃近、苯肾上腺素、肾上腺素及其双重组合以逐渐增加的剂量肌肉内(i.m.)或口服给药，直至在疼痛敏感性的最后三次测量期间达到以秒为单位的缩爪的最大延迟期。对照动物i.m.注射0.2ml或口服1.0ml蒸馏水。抗痛觉过敏效果通过与对照(蒸馏水)相比缩爪延迟期的增加来评估。
旷场试验
为了评估测试药物的运动机能减退(镇定)或运动机能亢进作用效果，使用了“旷场”(of)试验。在所述of试验中，确定大鼠的自发活动。将动物在正方形照明场(1米x1米)的中央放置3分钟，并以秒为单位记录移动时间(水平活动)。水平自发活动的登记在测试药物给药之后40分钟进行。为了定量每剂测试药物的自发活动，计算平均水平活动。吗啡、美金刚胺、肾上腺素、苯肾上腺素、阿米替林和安乃近及其双重组合的运动机能减退(镇定)或运动机能亢进作用，通过与对照组中大鼠的测量值相比在of试验中的平均水平活动的降低(运动机能减退)或提高(运动机能亢进)百分数，以及水平活动显著降低或提高(与对照相比50％或更多)的大鼠的数目来评估。
表11.
*n.c.–阴性对照(蒸馏水)。**在旷场试验中的镇静。***在旷场试验中的运动机能亢进。
二联疗法
0.02mg/kg的非常低剂量的吗啡与0.01mg/kg的阈值剂量的肾上腺素的组合给药，在尾回撤和缩爪试验中不消除剂量为0.02mg/kg的吗啡引起的阿片类痛觉过敏。0.02mg/kg的非常低剂量的吗啡与0.02mg/kg的较高阈值剂量的肾上腺素的组合给药消除了剂量为0.02mg/kg的吗啡引起的阿片类痛觉过敏，因为它将尾回撤和缩爪的延迟期从0.9和1.1s增加到6.5和6.2秒。
0.2mg/kg的低剂量的吗啡与0.01mg/kg的阈值剂量的肾上腺素(各自在单独时无效)的组合给药非显著性地降低了疼痛敏感性和痛觉过敏(与对照相比1.9和1.8倍)，因为它将尾回撤和缩爪的延迟期从4.5和4.3秒增加到8.7和8.2秒。0.4mg/kg的较高剂量的吗啡与0.01mg/kg的阈值剂量的肾上腺素的组合给药引起最大镇痛和抗痛觉过敏效果，将疼痛敏感性和痛觉过敏降低4.2和4.3倍(将尾回撤和缩爪的延迟期从4.5和4.3秒分别增加到18.9和18.4秒)，如同单独的5mg/kg的高剂量的吗啡。这种组合不降低大鼠中的水平活动。因此，这种组合将吗啡的有效剂量降低12.5倍，引起最大镇痛效果而不产生运动机能减退(镇定)副作用。
5mg/kg的高剂量的吗啡与0.01mg/kg的阈值剂量的肾上腺素的组合给药将吗啡的最大镇痛和抗痛觉过敏效果提高1.4和1.5倍(将尾回撤和缩爪的延迟期从19.8和19.5秒分别增加到28.5和28.2秒)，并且在100％的大鼠中消除运动机能减退。
因此，0.01mg/kg的阈值剂量的肾上腺素显著提高5mg/kg的高剂量的吗啡的最大镇痛效果，而不产生运动机能减退(镇定)副作用。
吗啡与阈值剂量的肾上腺素(0.01mg/kg)的肌肉内给药组合的增强得协同效应是非常令人吃惊的，因为将吗啡的有效剂量降低12.5倍(从5mg/kg降低至0.4mg/kg)并将高剂量吗啡的最大镇痛和抗痛觉过敏效果提高1.4-1.5倍。所述增强不能通过肾上腺素的额外的镇痛效果来解释，因为剂量为0.01mg/kg的肾上腺素没有镇痛和抗痛觉过敏效果。
1mg/kg的低剂量的美金刚胺与0.01mg/kg的阈值剂量的肾上腺素(各自在单独时无效)的组合给药，实际上与对照相比不降低疼痛敏感性和痛觉过敏(尾回撤和缩爪的延迟期从4.5和4.3秒改变到6.5和5.9秒)。2.5mg/kg的较高剂量的美金刚胺与0.01mg/kg的阈值剂量的肾上腺素的组合给药引起最大镇痛和抗痛觉过敏效果(4.4和4.5倍)，将尾回撤和缩爪的延迟期从4.5和4.3秒分别增加到19.7和19.3秒，如同单独的15mg/kg的高剂量的美金刚胺。这种组合不提高大鼠中的水平活动。因此，这种组合将美金刚胺的有效剂量降低6倍，引起最大镇痛效果而不产生运动机能亢进副作用。
5mg/kg的中等剂量的美金刚胺与0.01mg/kg的阈值剂量的肾上腺素的组合给药将15mg/kg的最大剂量的美金刚胺的最大镇痛和抗痛觉过敏效果提高1.4和1.4倍(将尾回撤和缩爪的延迟期从19.1和18.8秒分别增加到27.5和27.2s)，并在100％的小鼠中消除运动机能亢进。
因此，0.01mg/kg的阈值剂量的肾上腺素显著提高美金刚胺的最大镇痛效果并降低其有效剂量而不产生运动机能亢进副作用。
美金刚胺与0.1mg/kg的阈值剂量的肾上腺素的肌肉内给药组合的增强的协同效应是非常令人吃惊的，包括最大镇痛和抗痛觉过敏效果的1.4倍的提高和美金刚胺的常规剂量的3倍的降低(从15mg/kg降低至5mg/kg)。这种组合中美金刚胺的镇痛和抗痛觉过敏效果的增强不能通过肾上腺素的额外的镇痛效果来解释，因为剂量为0.1mg/kg的肾上腺素没有镇痛和抗痛觉过敏效果。
这些研究的结果表明，含有肾上腺素与吗啡和美金刚胺的“双重”组合物发挥的镇痛和抗痛觉过敏效果大大优于常规剂量的单独的吗啡和美金刚胺的镇痛和抗痛觉过敏效果而不产生镇定和运动机能亢进副作用，并且显著降低了所述组合物中吗啡、美金刚胺和肾上腺素的常规剂量。上面提到的组合物以安全的方式引起吗啡和美金刚胺的镇痛和抗痛觉过敏作用的增强，因为它们消除了使用所述组合物的每种组分的副作用。
表12.
*n.c.–阴性对照(蒸馏水)。**旷场试验中的镇静。***旷场试验中的运动机能亢进。
二联疗法
0.02mg/kg的非常低剂量的吗啡与0.02mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素的组合给药不消除在尾回撤和缩爪试验中剂量为0.02mg/kg的吗啡引起的阿片类痛觉过敏。0.02mg/kg的非常低剂量的吗啡与0.04mg/kg的较高阈值剂量的苯肾上腺素的组合给药消除了剂量为0.02mg/kg的吗啡引起的阿片类痛觉过敏，因为它将尾回撤和缩爪的延迟期从1.1和1.0秒分别增加到7.5和7.2秒。
0.1mg/kg的低剂量的吗啡与0.02mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素(各自单独时无效)的组合给药非显著性地降低了疼痛敏感性和痛觉过敏(与对照相比降低1.8和1.8倍)，因为它将尾回撤和缩爪的延迟期从4.8和4.5秒增加到8.5和7.9秒。0.2mg/kg的较高剂量的吗啡与0.02mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素的组合给药引起最大镇痛和抗痛觉过敏效果，将疼痛敏感性和痛觉过敏降低4.0和4.2倍(将尾回撤和缩爪的延迟期从4.8和4.5秒分别增加到19.4和19.1秒)，正如5mg/kg的单独的高剂量的吗啡。这种组合不降低大鼠中的水平活动。因此，这种组合将吗啡的有效剂量降低25倍，引起最大镇痛效果而不产生运动机能减退(镇定)副作用。
5mg/kg的高剂量的吗啡与0.02mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素的组合给药将吗啡的最大镇痛和抗痛觉过敏效果提高1.5和1.4倍，因为它将尾回撤和缩爪的延迟期从20.5和21.3秒分别增加到30.5和29.8秒，并且在100％的大鼠中消除运动机能减退。
因此，0.02mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素显著提高5mg/kg的高剂量的吗啡的最大镇痛效果，而不产生运动机能减退(镇定)副作用。
吗啡与阈值剂量的苯肾上腺素(0.02mg/kg)的口服给药组合的增强的协同效应是非常令人吃惊的，因为吗啡的有效剂量降低25倍(从5mg/kg降低至0.4mg/kg)并且高剂量的吗啡(5mg/kg)的最大镇痛和抗痛觉过敏效果提高1.5-1.4倍。所述增强不能通过苯肾上腺素的额外的镇痛效果来解释，因为剂量为0.02mg/kg的苯肾上腺素没有镇痛和抗痛觉过敏效果。
1mg/kg的低剂量的美金刚胺与0.02mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素的组合给药实际上不改变对疼痛的敏感性和痛觉过敏(将尾回撤和缩爪的延迟期从4.8和4.5秒改变到5.2和5.4秒)。2mg/kg的较高剂量的美金刚胺与0.02mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素的组合给药引起最大镇痛和抗痛觉过敏效果，将疼痛敏感性和痛觉过敏降低4.2和4.3倍(将尾回撤和缩爪的延迟期从4.8和4.5秒分别增加到20.2和19.4秒)，正如20mg/kg的单独的高剂量的美金刚胺。这种组合不提高大鼠中的水平活动。因此，这种组合将美金刚胺的有效剂量降低10倍，引起最大镇痛效果而不产生运动机能亢进副作用。
5mg/kg的中等剂量的美金刚胺与0.02mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素的组合给药将20mg/kg的高剂量的美金刚胺的最大镇痛和抗痛觉过敏效果提高1.4和1.4倍，因为它将尾回撤和缩爪的延迟期从20.3和21.0秒分别增加到28.9和28.4秒，并且在100％的大鼠中消除运动机能亢进。
因此，0.02mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素显著提高美金刚胺的最大镇痛效果并降低其有效剂量而不产生运动机能亢进副作用。
美金刚胺与0.02mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素的口服给药组合的增强的协同效应是非常令人吃惊的，包括最大镇痛和抗痛觉过敏效果的1.4倍的提高和美金刚胺的常规剂量的4倍的降低(从20mg/kg降低至5mg/kg)。这种组合中美金刚胺的镇痛和抗痛觉过敏效果的增强不能通过苯肾上腺素的额外的镇痛效果来解释，因为剂量为0.02mg/kg的苯肾上腺素没有镇痛和抗痛觉过敏效果。
0.1mg/kg的低剂量的阿米替林与0.02mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素的组合给药实际上不改变对疼痛的敏感性和痛觉过敏(将尾回撤和缩爪的延迟期从4.8和4.5秒改变到6.5和6.7秒)。0.5mg/kg的较高剂量的阿米替林与0.02mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素的组合给药引起最大镇痛和抗痛觉过敏效果，将疼痛敏感性和痛觉过敏降低4.0和4.2倍(将尾回撤和缩爪的延迟期从4.8和4.5秒分别增加到19.3和18.9秒)，正如10mg/kg的单独的高剂量的阿米替林。这种组合不降低大鼠中的水平活动。因此，这种组合将阿米替林的有效剂量降低20倍，引起最大镇痛效果而不产生镇定副作用。
10mg/kg的高剂量的阿米替林与0.02mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素的组合给药将阿米替林的最大镇痛和抗痛觉过敏效果提高1.4和1.5倍(将尾回撤和缩爪的延迟期从20.2和19.8秒分别增加到29.0和28.8秒)，并且在100％的大鼠中消除镇静。
因此，0.02mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素显著提高10mg/kg的高剂量的阿米替林的最大镇痛效果，而不产生运动机能减退(镇定)副作用。
阿米替林与阈值剂量的苯肾上腺素(0.02mg/kg)的口服给药组合的增强的协同效应是非常令人吃惊的，因为阿米替林的有效剂量降低20倍(从10mg/kg降低至0.5mg/kg)并且高剂量的阿米替林(10mg/kg)的最大镇痛和抗痛觉过敏效果提高1.4-1.5倍。所述增强不能通过苯肾上腺素的额外的镇痛效果来解释，因为剂量为0.02mg/kg的苯肾上腺素没有镇痛和抗痛觉过敏效果。
0.2mg/kg的低剂量的安乃近与0.02mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素的组合给药实际上不改变对疼痛的敏感性和痛觉过敏(将尾回撤和缩爪的延迟期从4.8和4.5秒改变到6.9和6.6秒)。1mg/kg的较高剂量的安乃近与0.02mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素的组合给药引起最大镇痛和抗痛觉过敏效果，将疼痛敏感性和痛觉过敏降低4.0和4.2倍(将尾回撤和缩爪的延迟期从4.8和4.5秒分别增加到19.3和19.0秒)，正如20mg/kg的单独的高剂量的安乃近。这种组合不改变大鼠中的水平活动。因此，这种组合将安乃近的有效剂量降低20倍，引起最大镇痛效果而不产生运动副作用。
20mg/kg的高剂量的安乃近与0.02mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素的组合给药将安乃近的最大镇痛和抗痛觉过敏效果提高1.4和1.5倍(将尾回撤和缩爪的延迟期从20.6和20.1秒分别增加到29.4和29.2秒)，并且在旷场试验中不改变水平活动。
因此，0.02mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素显著提高20mg/kg的高剂量的安乃近的最大镇痛效果，而不产生运动副作用。
安乃近与阈值剂量的苯肾上腺素(0.02mg/kg)的口服给药组合的增强的协同效应是非常令人吃惊的，因为安乃近的有效剂量降低20倍(从20mg/kg降低至1mg/kg)并且高剂量的安乃近(20mg/kg)的最大镇痛和抗痛觉过敏效果提高1.4-1.5倍。所述增强不能通过苯肾上腺素的额外的镇痛效果来解释，因为剂量为0.02mg/kg的苯肾上腺素没有镇痛和抗痛觉过敏效果。
这些研究的结果表明，含有苯肾上腺素与吗啡、美金刚胺、阿米替林和安乃近的“双重”组合物发挥的镇痛和抗痛觉过敏效果大大优于常规剂量的单独的吗啡、美金刚胺、阿米替林和安乃近的镇痛和抗痛觉过敏效果而不产生镇定和运动机能亢进副作用，并且显著降低了所述组合物中吗啡、美金刚胺、阿米替林、安乃近和苯肾上腺素的常规剂量。上面提到的组合物以安全的方式引起吗啡、阿米替林、安乃近和美金刚胺的镇痛和抗痛觉过敏作用的增强，因为它们消除了使用所述组合物的每种组分的副作用。
实施例11.在氟哌啶醇强直性昏厥模型中左旋多巴和美金刚胺的抗帕金森氏病效果的增强及其副作用的减轻(口服给药)
方法
在wista大鼠(体重160-170g)中通过以1mg/kg的剂量i.m.注射氟哌啶醇而诱导的强直性昏厥模型上，调查药物的抗帕金森氏病效果。强直性昏厥通过在氟哌啶醇给药后60分钟置于以45度角固定的大型格栅上的大鼠的不动的时间长度来评估。大鼠中的最大强直性昏厥，在它们在180秒的观察后在格栅上完全不动的情况下被记录到(campbella.等，1988,neuropharmacology,vol.27(11)，第1197-1199页；ossowskak.j.，neural.transm.park.dis.dement.sect.,1994,vol.8(1-2)，第39-71页；gmirov.e.和serdyuks.e.，bulletinofexperimentalbiologyandmedicine,2007,vol.143(5)，第554-556页)。
在氟哌啶醇给药之前45分钟，将左旋多巴、美金刚胺、苯肾上腺素以及苯肾上腺素与美金刚胺或左旋多巴的双重组合通过刚性金属探头，在1.0ml的体积中口服给药。对照动物口服接受1ml蒸馏水。
抗帕金森氏病药物的效果被估算为用测试组合物处理的动物与对照(dw)相比平均不动持续时间的减少。
旷场试验
为了评估测试药物的(运动机能亢进)副作用，使用了“旷场”(of)试验。在所述of试验中，确定大鼠的自发活动。将动物在正方形照明场(1米x1米)的中央放置3分钟，并以秒为单位记录移动时间(水平活动)。水平自发活动的登记在测试药物给药之后40分钟、氟哌啶醇给药之前5分钟进行。为了定量每剂测试药物的自发活动，计算平均水平活动。左旋多巴、苯肾上腺素、美金刚胺以及苯肾上腺素与美金刚胺和左旋多巴的组合的运动机能亢进效果，通过与对照组中大鼠的测量值相比在of试验中的水平活动的平均提高百分数来评估，并且也作为水平活动显著提高(与对照相比提高50％或更多)的大鼠的数目来评估。
以1mg/kg的剂量肌肉内(im)注射氟哌啶醇，在注射后60分钟在对照组中引起158.2±25秒的不动(表13)。
表13.
*n.c.–阴性对照(蒸馏水)。**人类剂量–60kg人类的绝对剂量，按照fda指南(工业指南，“在成年健康志愿者中在治疗剂的初始临床试验中估算最大安全起始剂量”，2005年7月，第7页)计算。
二联疗法
1.5mg/kg的低剂量的左旋多巴与阈值剂量(0.1mg/kg，其单独时无效)的苯肾上腺素的组合给药引起轻度但显著的抗帕金森氏病效果，因为它将氟哌啶醇强直性昏厥减少2.1倍(将在格栅上的不动持续时间从158减少到75秒)。3mg/kg的低剂量的左旋多巴与0.1mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素的组合给药引起显著的抗帕金森氏病效果(将在格栅上的不动持续时间减少4.3倍，从158减少到37秒)，与以20mg/kg的高剂量单独使用的左旋多巴相近。重要的是指出这种组合不提高大鼠中的水平活动。因此，阈值剂量的苯肾上腺素(0.1mg/kg)将左旋多巴的有效剂量降低约7倍，实现最大效果而不产生副作用。
剂量为10mg/kg的左旋多巴与0.1mg/kg的阈值剂量和0.3mg/kg的低常规剂量的苯肾上腺素的组合给药具有最大抗帕金森氏病效果(将在格栅上的不动持续时间从158分别减少到21和12秒)，这比单独的20mg/kg的高剂量的左旋多巴好1.8和3.0倍。重要的是指出这些组合也不提高大鼠中的水平活动。因此，剂量为0.1-0.3mg/kg的苯肾上腺素将左旋多巴的有效剂量降低2倍，并且提高左旋多巴的最大效果而不产生副作用。
左旋多巴与0.1mg/kg的阈值剂量和0.3mg/kg的低常规剂量的苯肾上腺素的口服给药组合的增强的协同效应是高度令人吃惊的，其包括最大抗帕金森氏病效果的1.8-3.0倍的提高和左旋多巴的常规剂量的2倍的降低(从20mg/kg降低至10mg/kg)。在这种组合物中左旋多巴的抗帕金森氏病效果的增强不能通过苯肾上腺素的额外的抗帕金森氏病效果来解释，因为剂量为0.1-0.3mg/kg的苯肾上腺素具有非常弱的抗帕金森氏病效果。
这些研究的结果表明，含有左旋多巴和苯肾上腺素的“双重”组合物发挥出的抗帕金森氏病效果大大优于单独的常规剂量的左旋多巴的抗帕金森氏病效果而不产生运动机能亢进副作用，并且显著降低了所述组合物中常规左旋多巴和苯肾上腺素的剂量。上面提到的组合物以安全的方式引起左旋多巴的抗帕金森氏病作用的增强，因为它们消除了使用所述组合物的每种组分的副作用。
0.5mg/kg的低剂量的美金刚胺与阈值剂量(0.1mg/kg，其单独时无效)的苯肾上腺素的组合给药引起不显著的抗帕金森氏病效果，因为它将氟哌啶醇强直性昏厥减少1.2倍(将在格栅上的不动持续时间从158减少到133秒)。
1.0mg/kg的低剂量的美金刚胺与阈值剂量(0.1mg/kg)的苯肾上腺素的组合给药引起轻度但显著的抗帕金森氏病效果，因为它将氟哌啶醇强直性昏厥减少2.0倍(将在格栅上的不动持续时间从158减少到79秒)。3mg/kg的低剂量的美金刚胺与0.1mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素的组合给药引起显著的抗帕金森氏病效果(将在格栅上的不动持续时间减少4.5倍，从158减少到35秒)，与单独的20mg/kg的高剂量的美金刚胺相近。重要的是指出这种组合不提高大鼠中的水平活动。因此，阈值剂量的苯肾上腺素(0.1mg/kg)将美金刚胺的有效剂量降低约7倍，实现最大效果而不产生副作用。
剂量为10mg/kg的美金刚胺与0.1mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素的组合给药具有最大抗帕金森氏病效果(将在格栅上的不动持续时间从158减少到12秒)，这比单独的20mg/kg的高剂量的美金刚胺好2.9倍。重要的是指出这些组合也不提高大鼠中的水平活动。因此，剂量为0.1mg/kg的苯肾上腺素将美金刚胺的有效剂量降低2倍，并且提高美金刚胺的最大效果而不产生副作用。
美金刚胺与0.1mg/kg的阈值剂量的苯肾上腺素的口服给药组合的增强的协同效应是高度令人吃惊的，其包括最大抗帕金森氏病效果的2.8倍的提高和美金刚胺的常规剂量的2倍的降低(从20mg/kg降低至10mg/kg)。在这种组合中美金刚胺的抗帕金森氏病效果的增强不能通过苯肾上腺素的额外的抗帕金森氏病效果来解释，因为剂量为0.1mg/kg的苯肾上腺素具有非常弱的抗帕金森氏病效果。
这些研究的结果表明，含有苯肾上腺素与左旋多巴和美金刚胺的“双重”组合物发挥出的抗帕金森氏病效果大大优于单独的常规剂量的左旋多巴和美金刚胺的抗帕金森氏病效果而不产生运动机能亢进副作用，并且显著降低了所述组合物中常规左旋多巴、美金刚胺和苯肾上腺素的剂量。上面提到的组合物以安全的方式引起左旋多巴和美金刚胺的抗帕金森氏病作用的增强，因为它们消除了使用所述组合物的每种组分的副作用。
实施例12.在大鼠中，在鱼藤酮诱导的帕金森氏病(pd)和进行性核上性麻痹(psp)中左旋多巴和美金刚胺的抗帕金森氏病和神经保护效果的增强及其副作用的消除鱼藤酮的给药
鱼藤酮以2.3mg/ml的浓度溶解在比例为2:98的dmso和miglyol812n的混合物中。制备：将小瓶中的230mg鱼藤酮样品溶解在2mldmso中。将所述溶液倾倒在100ml广口瓶中。将小瓶用5mlmiglyol冲洗两次，将清洗液合并到主溶液并搅拌。向该溶液添加88mlmiglyol并再次混合。将得到的溶液分成三剂。将所述溶液储存在-10℃。每只动物给药0.2ml鱼藤酮溶液：每只体重为200±20g的动物0.46mg的剂量，即2.3mg/kg。将所述鱼藤酮溶液每天一次ip注射共19天。
在具有鱼藤酮诱导的pd的大鼠中疗法的抗帕金森氏病效果，根据“旷场”试验中锥体束外障碍(强直性昏厥)和寡动症的消除来估算。疗法的神经保护效果通过在具有鱼藤酮诱导的psp的大鼠中共济失调、四肢肌张力不足和死亡的消除来评估。运动机能亢进副作用(兴奋性运动)通过与实验的第一天相比，在实验的第10和第18天在旷场中的水平和垂直活性以％计的提高来评估。
将0.3mg/kg苯肾上腺素、左旋多巴(10和20mg/kg)、2.5和5mg/kg美金刚胺、10mg/kg左旋多巴+0.3mg/kg苯肾上腺素的组合、20mg/kg左旋多巴+0.3mg/kg苯肾上腺素的组合、1mg/kg美金刚胺+0.3mg/kg苯肾上腺素的组合、2.5mg/kg美金刚胺+0.3mg/kg苯肾上腺素的组合、5mg/kg美金刚胺+0.3mg/kg苯肾上腺素的组合和dw(1.0ml，对照)每天在1ml体积中，在鱼藤酮给药之前45分钟，使用刚性金属探头口服给药，共19天。对照和实验组中的动物数目在6至8的范围内。
将左旋多巴与苄丝肼(外周多巴脱羧酶抑制剂)以4:1的比例组合给药，以降低左旋多巴的与外周多巴胺受体的刺激相关的副作用(alamm.等，behav.brainres.,2004,vol.153(2)，第439-446页)。将左旋多巴和苄丝肼溶解在1mldw中并在1ml体积中口服给药。左旋多巴与苯肾上腺素的组合：将左旋多巴和苄丝肼溶液(0.5ml)与0.5ml苯肾上腺素溶液混合。左旋多巴与美金刚胺和苯肾上腺素的组合：将左旋多巴和苄丝肼溶液(0.5ml)与0.5ml的苯肾上腺素+美金刚胺溶液混合。所述混合物以1ml的体积口服给药。使用鱼藤酮的大鼠的实验组中的抗帕金森氏病效果，通过消除强直性昏厥和寡动症来评估。
大鼠中的强直性昏厥通过置于以45°角倾斜的大型格栅上的动物的不动时间来确定。大鼠中的最大强直性昏厥在观察120秒时它们在格栅上完全不动的情况下被记录。强直性昏厥的值以点数为单位评估：3点-不动持续时间为80秒至120秒，2点-不动持续时间为40至70秒，1点-不动持续时间为20至35秒，0点-不动少于20秒。每天在鱼藤酮给药之前30分钟和鱼藤酮给药之后180分钟在大鼠中追踪强直性昏厥。对于每个实验组来说，在整个观察期间，在每日的基础上确定具有严重强直性昏厥(2-3点)的大鼠数目占组中大鼠总数的％。为了评估疗法的抗全身僵硬效果，在实验的第12和第19天，与使用蒸馏水处理的对照相比确定具有严重强直性昏厥(2-3点)的大鼠数目减少的％。
大鼠的自发活动在“旷场”试验中测试。将动物置于正方形照明场(1米x1米)的中央，并在3分钟内记录移动的距离(水平活动)和用后腿直立次数(垂直活性)。水平和垂直自发活动的登记在第一天，在鱼藤酮的第一次给药之前60分钟，对具有高选择性自发活动(总行走时间不少于12秒并且直立次数至少为4)的大鼠进行。为了鉴定每个实验组中鱼藤酮诱导的寡动症，在实验的第12和第19天，在鱼藤酮给药后2小时再次在旷场试验中检查自发活动。
寡动症以点数为单位定量：0点-最高水平活动(总行走时间超过12秒)和高垂直活性(立桩次数超过3)；1点-水平活动降低(总行走时间7-11秒)并且垂直活性降低(立桩次数1-3)；2点-水平活动显著降低(总行走时间2-6秒)并且不存在垂直活性(立桩次数0-1)；3点-不存在水平活动(总行走时间0-1秒)并且不存在垂直活性(立桩次数0)。在每个实验组中，在实验的第12和19天在鱼藤酮给药后120分钟，确定具有严重寡动症(2-3点)的大鼠数目占组中大鼠总数的％。
具有鱼藤酮诱导的psp的大鼠的实验组中的神经保护效果，根据由鱼藤酮的小脑神经毒性作用引起的共济失调、四肢肌张力不足和死亡的消除来评估(j.neurochem.,2005,vol.95(4):930-9)。
共济失调和四肢肌张力不足是鱼藤酮的典型的不协调神经毒性效应，表现为不协调的运动和兴奋性运动被运动机能减退和刻板代替，并且在严重情况下表现为抗重力肌反射的完全违背、以单侧肌张力不全姿势跌倒和运动不能。共济失调和四肢肌张力不足的严重性的以分值为单位的评估使用下述量表进行：(+)不协调的运动，运动机能亢进；(++)显著的不协调，运动机能减退，刻板，侧向跌倒，频繁的自发性肌张力不全姿势；(+++)抗重力肌反射的完全违背，运动不能，持续肌张力不全姿势(j.neurosci.,2014,27；34(35):11723-32)。
共济失调和四肢肌张力不足的登记每日进行两次，在鱼藤酮给药之前30分钟和鱼藤酮给药之后180分钟。对于每个实验组来说，在整个观察期内，在每日的基础上确定具有严重共济失调和四肢肌张力不足(++-+++)和死亡的大鼠数目占组中大鼠总数的％。在具有psp的大鼠中疗法的神经保护效果(对共济失调、四肢肌张力不足和致死率的影响)，在实验的第12和19天被确定为与对照相比，具有严重共济失调、四肢肌张力不足和死亡的大鼠数目减少的％。运动机能亢进副作用在“旷场”试验中评估。在该试验中确定大鼠中的自发活动。将动物在正方形照明场(1米x1米)的中心放置3min的总时间，记录距离(水平活动)和后腿直立的次数(垂直活性)。在of测定法中水平和垂直自发活动的登记在实验的第10和18天，在物质给药之后40分钟内和鱼藤酮给药之前5分钟进行。运动机能亢进副作用通过水平和垂直活性显著(与实验的第一天相比至少50％)提高(运动机能亢进)的大鼠的数目占组中大鼠总数的％来评估。
表14.在大鼠中，在鱼藤酮诱导的pd和psp中左旋多巴1和美金刚胺的抗帕金森氏病和神经保护效果的增强及其副作用的消除
1在19天的持续时间内在2.3mg/kg鱼藤酮给药之前45分钟口服给药。
2人类剂量–60kg人类的绝对剂量，按照fda指南(工业指南，“在成年健康志愿者中在治疗剂的初始临床试验中估算最大安全起始剂量”，2005年7月，第7页)计算。3n.c.–阴性对照(蒸馏水)。*在倾斜格栅上大鼠的不动时间超过40秒。**在of试验中寡动症++-+++。***共济失调和四肢肌张力不足++-+++。****与实验的第一天相比在of试验中自发活动提高超过50％。
二联疗法
在实验的第12和19天，左旋多巴(10mg/kg)与苯肾上腺素(0.3mg/kg)的组合在长期给药后，与对照相比将具有严重寡动症的大鼠数目减少76％(从100％减少到24％)，表明在具有鱼藤酮诱导的pd的大鼠中寡动症的非常显著的减少。在实验的第12和19天，这种组合与对照相比减少具有严重强直性昏厥的大鼠数目，最高效率分别为减少42％和46％(从42％减少到0％和从58％减少到12％)。10mg/kg左旋多巴与0.3mg/kg苯肾上腺素的组合在实验的第19天显著(30％)减少共济失调、四肢肌张力不足和死亡，从42％减少到12％。在实验的第10和18天，在of试验中，剂量为10mg/kg的左旋多巴与剂量为0.3mg/kg的苯肾上腺素的组合不引起大鼠中的运动机能亢进。因此，所述常规低剂量(10mg/kg)的左旋多巴与0.3mg/kg的低常规剂量的苯肾上腺素的组合在具有鱼藤酮诱导的pd的大鼠中消除强直性昏厥并显著减少寡动症，并且在具有鱼藤酮诱导的psp的大鼠中非常显著地减少共济失调、四肢肌张力不足和死亡。上述组合的优点是在大鼠中完全不存在运动机能亢进副作用。
剂量为20mg/kg的左旋多巴与剂量为0.3mg/kg的苯肾上腺素的组合的长期口服给药，与对照相比将具有严重寡动症的大鼠数目减少88％(从100％减少到12％)。这表明这种组合在具有鱼藤酮诱导的pd的大鼠中消除寡动症。这种组合在具有鱼藤酮诱导的pd的大鼠中完全消除严重的强直性昏厥(从42％减少到0％和从58％减少到0％)。在实验的第12和19天，剂量为20mg/kg的左旋多巴与剂量为0.3mg/kg的苯肾上腺素的组合完全消除了共济失调、四肢肌张力不足和死亡。在实验的第18天，剂量为20mg/kg的左旋多巴与剂量为0.3mg/kg的苯肾上腺素的组合不提高大鼠中的自发活动。因此，20mg/kg的高常规剂量的左旋多巴与0.3mg/kg的常规低剂量的苯肾上腺素的组合向大鼠的长期口服给药，在具有的鱼藤酮诱导的pd的大鼠中高效消除锥体束外和运动障碍，并在具有鱼藤酮诱导的psp的大鼠中完全消除共济失调、四肢肌张力不足和死亡，并且事实上消除由高剂量的左旋多巴引起的运动机能亢进。因此，10mg/kg的低常规剂量和20mg/kg的高常规剂量的左旋多巴与0.3mg/kg的低剂量的苯肾上腺素向大鼠的口服给药，将由剂量为20mg/kg的左旋多巴所实现的抗帕金森氏病和神经保护效果提高50-100％，而不产生运动机能亢进副作用。10mg/kg的常规最低剂量的左旋多巴与0.3mg/kg的常规最低剂量的苯肾上腺素的组合的抗帕金森氏病和神经保护活性是非常令人吃惊的，因为它远远超过所述组合的每一种组分单独的抗帕金森氏病和神经保护活性，并且它超过20mg/kg的双倍剂量的左旋多巴的抗帕金森氏病和神经保护活性(超过1.5-2倍)。因此，剂量为0.3mg/kg的单独时无效的苯肾上腺素，将单独使用时具有低效能的10mg/kg的低剂量的左旋多巴的抗帕金森氏病和神经保护效果，协同增强至不能根据单独的20mg/kg的高剂量的左旋多巴的独立使用来解释的最大水平。然而，苯肾上腺素不增强剂量为10mg/kg的左旋多巴的运动机能亢进副作用。
重要的是应该注意到苯肾上腺素与剂量为20mg/kg和10mg/kg的左旋多巴的组合的神经保护和抗帕金森氏病活性的差异相对小。这暗示低得多的苯肾上腺素增强20mg/kg的高剂量的左旋多巴的治疗效果，但有效地消除20mg/kg的高剂量的左旋多巴的运动机能亢进副作用。根据所述实验的结果，可以提供常规低剂量的左旋多巴与苯肾上腺素的组合，用于安全地治疗对左旋多巴的作用具有抗药性的严重的帕金森氏病和进行性核上性麻痹，以及用于在不能耐受左旋多巴的患者中治疗帕金森氏病和psp。
1mg/kg的低剂量的美金刚胺与剂量为0.3mg/kg的苯肾上腺素的组合的长期口服给药，在具有鱼藤酮帕金森氏病和pst的大鼠中引起不显著的抗帕金森氏病和神经保护效果。2.5mg/kg的低剂量的美金刚胺与0.3mg/kg苯肾上腺素的组合在长期给药后在实验的第12和19天，与对照相比将具有严重寡动症的大鼠数目减少67％和50％(从100％减少到33％和50％)，表明在具有鱼藤酮诱导的pd的大鼠中寡动症的非常显著的减少。在实验的第12和19天，这种组合与对照相比减少具有严重强直性昏厥的大鼠数目，最高效率分别为减少29％和41％(从42％减少到17％和从58％减少到17％)。2.5mg/kg美金刚胺与0.3mg/kg苯肾上腺素的组合在实验的第19天显著引起共济失调、四肢肌张力不足和死亡的25％的减少，从42％减少到17％。在实验的第10和18天，在of试验中，剂量为2.5mg/kg的美金刚胺与剂量为0.3mg/kg的苯肾上腺素的组合不引起大鼠中的运动机能亢进。因此，所述常规低剂量(2.5mg/kg)的美金刚胺与0.3mg/kg的低常规剂量的苯肾上腺素的组合引起亚最大抗帕金森氏病和神经保护效果，与单独的剂量为5mg/kg的美金刚胺的效能可比。上述组合的优点是在大鼠中完全不存在运动机能亢进副作用。
在实验的第12和19天，5mg/kg的常规剂量的美金刚胺与0.3mg/kg的低剂量的苯肾上腺素的组合的长期口服给药，与对照相比将具有严重寡动症的大鼠数目减少83％和66％(从100％减少到17和34％)。这表明这种组合具有在鱼藤酮诱导的pd的大鼠中非常显著地减少寡动症。在具有鱼藤酮诱导的pd的大鼠中，这种组合完全消除严重的强直性昏厥(从42％减少到0％和从58％减少到0％)。在实验的第12和19天，剂量为5mg/kg的美金刚胺与剂量为0.3mg/kg的苯肾上腺素的组合完全消除了共济失调、四肢肌张力不足和死亡。在实验的第18天，剂量为5mg/kg的美金刚胺与剂量为0.3mg/kg的苯肾上腺素的组合不提高大鼠的自发活动。因此，5mg/kg的常规剂量的美金刚胺与0.3mg/kg的常规低剂量的苯肾上腺素的组合向大鼠的长期口服给药，在具有的鱼藤酮诱导的pd的大鼠中高效消除锥体束外和运动障碍，并在具有鱼藤酮诱导的psp的大鼠中完全消除共济失调、四肢肌张力不足和死亡，并且事实上消除由常规剂量的美金刚胺引起的运动机能亢进。因此，5mg/kg的常规剂量的美金刚胺与0.3mg/kg的低剂量的苯肾上腺素向大鼠的口服给药，将由剂量为5mg/kg的美金刚胺所实现的抗帕金森氏病和神经保护效果提高50-70％，而不产生运动机能亢进副作用。2.5mg/kg的低剂量和5mg/kg的常规剂量的美金刚胺与0.3mg/kg的常规最低剂量的苯肾上腺素的组合的抗帕金森氏病和神经保护活性是非常令人吃惊的，因为它远远超过所述组合的每一种组分单独的抗帕金森氏病和神经保护活性。因此，剂量为0.3mg/kg的单独时无效的苯肾上腺素，将2.5mg/kg的低剂量和5mg/kg的常规剂量的美金刚胺的抗帕金森氏病和神经保护效果，协同增强至不能根据单独的这种剂量的美金刚胺的独立使用来解释的最大水平。然而，苯肾上腺素不增强2.5mg/kg的低剂量的美金刚胺的运动机能亢进副作用，但是有效地消除5mg/kg的较高剂量的美金刚胺的运动机能亢进副作用。
根据所述实验的结果，可以提供常规低剂量的美金刚胺与苯肾上腺素的组合，用于安全地治疗对左旋多巴的作用具有抗药性的严重的帕金森氏病和进行性核上性麻痹，以及用于在不能耐受左旋多巴的患者中治疗帕金森氏病和psp。
重要的是应该指出，本发明的范围不被解释为受到本文阐述的说明性实施方式限制。在权利要求书中所定义的本发明的范围之内，其他变化形式是可能的。通过本权利要求书的修改或在这个和相关申请中提呈新的权利要求项，可以对特征、功能、要素和/或性质的其他组合和子组合提出权利要求。这些修改的或新的权利要求项，不论它们是针对不同组合还是针对相同组合，不论与原始权利要求项相比在范围上不同、更宽、更窄还是相等，也被视为包括在本描述的主题内容之内。