本发明属生物医药科技领域，具体涉及一种外用抑菌剂，以及该外用抑菌剂的制备方法及其在制备女性阴道抗菌抑菌药物上的应用。
背景技术：
妇科病是女性常见的疾病，比如阴道炎、宫颈炎、盆腔炎附件炎等妇科临床常见病，一般由病原微生物感染所致。此类病情较长，病情反复发作，病情较顽固，严重影响妇女的身心健康以及生活和工作。女性由于各种原因，阴道会被病原菌感染或者阴道局部菌落微环境稳态被打破，导致阴道出血或者各种妇科病。从中医角度看，细菌性阴道病的病因病机多因肝、脾、肾三脏及风、冷、湿、热之邪；滴虫性阴道炎的病因病机主要是因湿热蕴结，虫蚀阴中所致；念珠菌性阴道炎病因病机多因湿浊蕴结，感染邪毒所致；老年性阴道炎的病因病机主要机制为肝肾阴虚，湿热下注，而西医中主要认为被病毒或病菌感染所致，阴道炎给妇女日常生活造成困扰，可能会导致不孕，严重的影响生命健康。
技术实现要素：
为了克服现有技术的不足，本发明的目的之一在于提供一种外用抑菌剂，通过外用该抑菌剂，以治疗女性阴道因各种细菌性、真菌性和滴虫性感染所带来的妇科疾病。
本发明的目的之二在于提供一种外用抑菌剂的制备方法，通过该制备方法以制备外用抑菌剂。
本发明的目的之三在于提供一种外用抑菌剂在制备阴道抗菌抑菌药物上的应用。
本发明的目的之一采用如下技术方案实现：
一种外用抑菌剂，按重量份计包括以下组分：
黄柏提取液2～10份、艾叶提取液0.6～2份、土荆皮提取液0.6～2.5份、苦参提取液0.2～1.5份、红花提取液0.1～1.2份、芦荟提取液5～25份、桔梗提取液1～4份、五倍子提取液1～10份、卡波姆1～5份、冰片0.05～0.4份、银离子抗菌剂2～10份、黄原胶1～5份、甘油1.5～5份、去离子水40～150份、苯氧乙醇0.1～0.8份。
进一步地，按重量份计包括以下组分：
黄柏提取液3～5份、艾叶提取液0.9～1.5份、土荆皮提取液0.8～2份、苦参提取液0.5～1.2份、红花提取液0.2～0.8份、芦荟提取液8～18份、桔梗提取液1.5～2.5份、五倍子提取液3～8份、卡波姆2～4份、冰片0.08～0.2份、银离子抗菌剂5～8份、黄原胶2～4份、甘油2.5～4份、去离子水50～100份、苯氧乙醇0.2～0.6份。
进一步地，按重量份计包括以下组分：
黄柏提取液3份、艾叶提取液1.2份、土荆皮提取液1.2份、苦参提取液0.8份、红花提取液0.4份、芦荟提取液10.1份、桔梗提取液1.8份、五倍子提取液5份、卡波姆2.4份、冰片0.1份、银离子抗菌剂7份、黄原胶3份、甘油3.6份、去离子水60份、苯氧乙醇0.4份。
进一步地，所述银离子抗菌剂为硝酸银、蛋白银、矽炭银和磺胺嘧啶银中的至少一种。
进一步地，所述黄柏提取液、艾叶提取液、土荆皮提取液、苦参提取液、红花提取液、芦荟提取液、桔梗提取液和五倍子提取液均为对应重量份的黄柏、艾叶、土荆皮、苦参、红花、芦荟、桔梗和五倍子经提取后得到的提取液。
本发明的目的之二采用如下技术方案实现：
一种外用抑菌剂的制备方法，包括以下步骤：
制备第一物料组分：将去离子水、卡波姆、黄原胶和甘油置于乳化锅中，搅拌混匀并升温至80～90℃，物料完全溶解，制得第一物料组分；
制备第二物料组分：第一物料组分降温至45～55℃，向第一物料组分中加入黄柏提取液、艾叶提取液、土荆皮提取液、苦参提取液、红花提取液、桔梗提取液和五倍子提取液，恒温搅拌混匀，制得第二物料组分；
制备外用抑菌剂：第二物料组分降温至20～40℃，向第二物料组分中加入芦荟提取液、银离子抗菌剂、冰片和苯氧乙醇，恒温搅拌均匀，制得外用抑菌剂。
进一步地，所述黄柏提取液、艾叶提取液、土荆皮提取液、桔梗提取液和五倍子提取液均通过水提法得到相应的提取液，水提法中原料与水的质量之比为1:2.5～10，水提温度为80～90℃，水提时间为2.5～4h；
所述苦参提取液、红花提取液和芦荟提取液均采用30～60％的乙醇溶液提取，原料与乙醇溶液的质量之比为1:5～12，提取温度为40～60℃，提取时间为8～16h，得到的乙醇提取液浓缩至与原料等重。
进一步地，水提法中原料与水的质量之比为1:5，水提温度为85℃，水提时间为3h，原料预先切碎；
苦参提取液、红花提取液和芦荟提取液均采用45％的乙醇溶液回流提取，原料预先切碎，原料与乙醇溶液的质量之比为1:8，提取温度为50℃，提取时间为10h。
进一步地，在制备第一物料组分步骤中，乳化锅的温度为85℃，搅拌转速为400～600r/min，搅拌15～30min。
进一步地，在制备第二物料组分步骤中，第一物料组分降温至50℃，搅拌转速为180～250r/min，搅拌时间为40～80min。
进一步地，在制备外用抑菌剂步骤中，第二物料组分降温至25℃，搅拌转速为120～150r/min，搅拌时间为60～180min。
本发明的目的之三采用如下技术方案实现：
一种外用抑菌剂在制备阴道抗菌抑菌药物上的应用。
相比现有技术，本发明的有益效果在于：
(1)本发明一种外用抑菌剂对女性阴道有抗菌抑菌作用，该外用抑菌剂具有高效、广谱的抗菌效果，是一种无毒、无味、无刺激、无污染、安全的绿色杀菌制品。该外用抑菌剂覆盖于阴道和宫颈表面形成物理和化学双重屏障，保护女性生殖器。本品ph值与阴道ph值接近，不会破坏女性阴道正常的菌群平衡和酸碱平衡，有润滑和滋养作用，可改善阴道的干涩状况，维护阴道壁的良好弹性。本发明经检测除了抗菌抑菌作用外，还具有破坏精子活性的作用从而达到良好的避孕效果。同时，本发明外用抑菌剂还具有调理阴道壁，改善阴道的干涩、出血症状，维护阴道壁的良好弹性，起到润滑和滋养阴道作用。
(2)本发明一种外用抑菌剂的制备方法，通过该制备方法制备出的外用抑菌剂具备上述抗菌抑菌、改善阴道的干涩状况、破坏精子活性等功效。
(3)本发明一种外用抑菌剂在制备阴道抗菌抑菌药物上的应用，通过制备包括该外用抑菌剂活性成分的阴道抗菌抑菌药物，最终得到一种具有良好抗菌抑菌、改善阴道的干涩状况、破坏精子活性等功效的妇科外用药物。
具体实施方式
下面，结合具体实施方式，对本发明做进一步描述，需要说明的是，在不相冲突的前提下，以下描述的各实施例之间或各技术特征之间可以任意组合形成新的实施例。
以下通过实施例1～5来说明本发明一种外用抑菌剂的具体组分。如表1所示，为实施例1～5与对比例1～5的具体组分列表，其中“\”表示不含该组分。表1中的黄柏提取液、艾叶提取液、土荆皮提取液、苦参提取液、红花提取液、芦荟提取液、桔梗提取液和五倍子提取液均为表格中对应重量的黄柏、艾叶、土荆皮、苦参、红花、芦荟、桔梗和五倍子经提取后得到的提取液。
表1实施例1～5与对比例1～5所对应的抑菌剂的具体组分
上述表1中，实施例1中所用的银离子抗菌剂为硝酸银，实施例2中所用的银离子抗菌剂为矽炭银，实施例3中所用的银离子抗菌剂为2kg硝酸银与5kg蛋白银组成的混合物，实施例4中所用的银离子抗菌剂为4kg硝酸银与4kg磺胺嘧啶银组成的混合物，实施例5中所用的银离子抗菌剂为2kg蛋白银。对比例1、对比例4和对比例5中所用的银离子抗菌剂为2kg硝酸银与5kg蛋白银组成的混合物，对比例3中所用的银离子抗菌剂为10kg硝酸银与10kg蛋白银组成的混合物。
下面通过具体的制备方法阐述本发明实施例1-5共5中外用抑菌剂的制备过程。
实施例1
制备提取液：分别取实施例1中的黄柏、艾叶、土荆皮、桔梗和五倍子，先切段成长度(或者宽度)小于1cm，再将五种组分置于五个不同的罐中，按照原料与水的质量之比为1:2.5添加纯净水，加热至80℃并维持4h，滤网过滤制得黄柏提取液、艾叶提取液、土荆皮提取液、桔梗提取液和五倍子提取液。取实施例1中的苦参、红花和芦荟，切碎至平均粒径为7mm，按照原料与乙醇溶液的质量之比为1:5添加30％的乙醇溶液进行回流提取，提取温度为40℃，提取时间为8h，得到的乙醇提取液通过旋转蒸发仪浓缩至与原料等重，制得苦参提取液、红花提取液和芦荟提取液。
制备第一物料组分：将实施例1中的去离子水、卡波姆、黄原胶和甘油置于乳化锅中，加热乳化锅升温至80℃，同时，以400r/min的转速搅拌30min，此时物料完全溶解，制得第一物料组分。
制备第二物料组分：将第一物料组分自然降温至45℃，向第一物料组分中加入制备好的黄柏提取液、艾叶提取液、土荆皮提取液、苦参提取液、红花提取液、桔梗提取液和五倍子提取液，45℃恒温条件下，180r/min搅拌80min，制得第二物料组分。
制备外用抑菌剂：待第二物料组分自然降温至20℃，向第二物料组分中加入制备好的芦荟提取液以及实施例1中的银离子抗菌剂、冰片和苯氧乙醇，20℃条件下150r/min搅拌180min，制得外用抑菌剂。
实施例2
制备提取液：分别取实施例2中的黄柏、艾叶、土荆皮、桔梗和五倍子，先切段成长度(或者宽度)小于1cm，再将五种组分置于五个不同的罐中，按照原料与水的质量之比为1:4添加纯净水，加热至90℃并维持3h，滤网过滤制得黄柏提取液、艾叶提取液、土荆皮提取液、桔梗提取液和五倍子提取液。取实施例2中的苦参、红花和芦荟，切碎至平均粒径为7mm，按照原料与乙醇溶液的质量之比为1:12添加40％的乙醇溶液进行回流提取，提取温度为40℃，提取时间为16h，得到的乙醇提取液通过旋转蒸发仪浓缩至与原料等重，制得苦参提取液、红花提取液和芦荟提取液。
制备第一物料组分：将实施例2中的去离子水、卡波姆、黄原胶和甘油置于乳化锅中，加热乳化锅升温至85℃，同时，以400r/min的转速搅拌25min，此时物料完全溶解，制得第一物料组分。
制备第二物料组分：将第一物料组分自然降温至50℃，向第一物料组分中加入制备好的黄柏提取液、艾叶提取液、土荆皮提取液、苦参提取液、红花提取液、桔梗提取液和五倍子提取液，50℃恒温条件下，200r/min搅拌60min，制得第二物料组分。
制备外用抑菌剂：待第二物料组分自然降温至25℃，向第二物料组分中加入制备好的芦荟提取液以及实施例2中的银离子抗菌剂、冰片和苯氧乙醇，25℃条件下120r/min搅拌120min，制得外用抑菌剂。
实施例3
制备提取液：分别取实施例3中的黄柏、艾叶、土荆皮、桔梗和五倍子，先切段成长度(或者宽度)小于1cm，再将五种组分置于五个不同的罐中，按照原料与水的质量之比为1:5添加纯净水，加热至85℃并维持3h，滤网过滤制得黄柏提取液、艾叶提取液、土荆皮提取液、桔梗提取液和五倍子提取液。取实施例3中的苦参、红花和芦荟，切碎至平均粒径为7mm，按照原料与乙醇溶液的质量之比为1:8添加45％的乙醇溶液进行回流提取，提取温度为50℃，提取时间为10h，得到的乙醇提取液通过旋转蒸发仪浓缩至与原料等重，制得苦参提取液、红花提取液和芦荟提取液。
制备第一物料组分：将实施例3中的去离子水、卡波姆、黄原胶和甘油置于乳化锅中，加热乳化锅升温至85℃，同时，以500r/min的转速搅拌20min，此时物料完全溶解，制得第一物料组分。
制备第二物料组分：将第一物料组分自然降温至50℃，向第一物料组分中加入制备好的黄柏提取液、艾叶提取液、土荆皮提取液、苦参提取液、红花提取液、桔梗提取液和五倍子提取液，50℃恒温条件下，200r/min搅拌60min，制得第二物料组分。
制备外用抑菌剂：待第二物料组分自然降温至25℃，向第二物料组分中加入制备好的芦荟提取液以及实施例3中的银离子抗菌剂、冰片和苯氧乙醇，25℃条件下120r/min搅拌120min，制得外用抑菌剂。
实施例4
制备提取液：分别取实施例4中的黄柏、艾叶、土荆皮、桔梗和五倍子，先切段成长度(或者宽度)小于1cm，再将五种组分置于五个不同的罐中，按照原料与水的质量之比为1:10添加纯净水，加热至850℃并维持3.5h，滤网过滤制得黄柏提取液、艾叶提取液、土荆皮提取液、桔梗提取液和五倍子提取液。取实施例4中的苦参、红花和芦荟，切碎至平均粒径为7mm，按照原料与乙醇溶液的质量之比为1:9添加60％的乙醇溶液进行回流提取，提取温度为60℃，提取时间为12h，得到的乙醇提取液通过旋转蒸发仪浓缩至与原料等重，制得苦参提取液、红花提取液和芦荟提取液。
制备第一物料组分：将实施例4中的去离子水、卡波姆、黄原胶和甘油置于乳化锅中，加热乳化锅升温至85℃，同时，以600r/min的转速搅拌20min，此时物料完全溶解，制得第一物料组分。
制备第二物料组分：将第一物料组分自然降温至50℃，向第一物料组分中加入制备好的黄柏提取液、艾叶提取液、土荆皮提取液、苦参提取液、红花提取液、桔梗提取液和五倍子提取液，50℃恒温条件下，200r/min搅拌60min，制得第二物料组分。
制备外用抑菌剂：待第二物料组分自然降温至30℃，向第二物料组分中加入制备好的芦荟提取液以及实施例4中的银离子抗菌剂、冰片和苯氧乙醇，30℃条件下120r/min搅拌120min，制得外用抑菌剂。
实施例5
制备提取液：分别取实施例5中的黄柏、艾叶、土荆皮、桔梗和五倍子，先切段成长度(或者宽度)小于1cm，再将五种组分置于五个不同的罐中，按照原料与水的质量之比为1:8添加纯净水，加热至90℃并维持2.5h，滤网过滤制得黄柏提取液、艾叶提取液、土荆皮提取液、桔梗提取液和五倍子提取液。取实施例5中的苦参、红花和芦荟，切碎至平均粒径为7mm，按照原料与乙醇溶液的质量之比为1:12添加50％的乙醇溶液进行回流提取，提取温度为60℃，提取时间为14h，得到的乙醇提取液通过旋转蒸发仪浓缩至与原料等重，制得苦参提取液、红花提取液和芦荟提取液。
制备第一物料组分：将实施例5中的去离子水、卡波姆、黄原胶和甘油置于乳化锅中，加热乳化锅升温至90℃，同时，以400r/min的转速搅拌15min，此时物料完全溶解，制得第一物料组分。
制备第二物料组分：将第一物料组分自然降温至50℃，向第一物料组分中加入制备好的黄柏提取液、艾叶提取液、土荆皮提取液、苦参提取液、红花提取液、桔梗提取液和五倍子提取液，50℃恒温条件下，200r/min搅拌60min，制得第二物料组分。
制备外用抑菌剂：待第二物料组分自然降温至40℃，向第二物料组分中加入制备好的芦荟提取液以及实施例5中的银离子抗菌剂、冰片和苯氧乙醇，40℃条件下150r/min搅拌60min，制得外用抑菌剂。
对比例1
对比例1中的外用抑菌剂的制备方法与实施例3的制备方法相同，不同点仅在于：对比例1中的外用抑菌剂不含有红花提取物。
对比例2
对比例2中的外用抑菌剂的制备方法与实施例3的制备方法相同，不同点仅在于：艾叶和土荆皮的用量上有所差异，同时对比例2中的外用抑菌剂不含有银离子抗菌剂。
对比例3
对比例3中的外用抑菌剂的制备方法与实施例3的制备方法相同，不同点仅在于：黄柏、艾叶、苦参、芦荟、桔梗根、五倍子和银离子抗菌剂的用量上有所差异，同时对比例3的外用抑菌剂中不含有苯氧乙醇。
对比例4
对比例4中的外用抑菌剂的制备方法与实施例3的制备方法的区别点在于：对比例4中的黄柏提取液、艾叶提取液、土荆皮提取液、苦参提取液、红花提取液、芦荟提取液、桔梗提取液和五倍子提取液均通过水提法制得。其中，原料与纯净水的质量之比为1:5，水提温度为85℃，水提时间为3h。
对比例5
对比例5中的外用抑菌剂的制备方法与实施例3的制备方法的区别点在于：对比例5中的黄柏提取液、艾叶提取液、土荆皮提取液、苦参提取液、红花提取液、芦荟提取液、桔梗提取液和五倍子提取液均通过45％的乙醇溶液进行回流提取。其中，原料与乙醇溶液的质量之比为1:8，回流提取温度为50℃，回流提取时间为10h。
抑菌性试验：
根据文献记载，致使阴道炎、宫颈糜烂等妇科疾病的病原菌主要有：白色念珠菌、金黄色葡萄球菌、滴虫和淋球菌，按照gb15979-2002《一次性使用卫生用品卫生标准》进行定量杀菌试验，试验结果见表2-5。
表2对白色念珠菌的杀菌效果
表3对金黄色葡萄球菌的杀菌效果
表4对滴虫的杀虫效果
表5对淋球菌的杀菌效果
由表2-5的试验结果可知，本发明实施例1-5制备的外用抑菌剂对白色念珠菌、金黄色葡萄球菌、滴虫和淋球菌具有良好的抑菌杀菌作用，特别是实施例3对应的抑菌剂，其抑菌杀局效果最佳。相比于实施例1-5，对比例1-5的抑菌杀菌效果较差，无法达到有效的抑菌杀菌。
避孕试验：
取有生育能力的雄家兔200只和雌家兔100只，按每20只雄家兔对应10雌家兔进行随机分组，并标号a组(对应实施例1)、b组(对应实施例2)、c组(对应实施例3)、d组(对应实施例4)、e组(对应实施例5)、f组(对应对比例1)、h组(对应对比例2)、g组(对应对比例3)、h组(对应对比例4)和i组(对应对比例5)。每只雌兔发情交配前24小时肌注苯甲酸雌二醇0.1mg催情，取实施例1-5及对比例1-5制备的10种外用抑菌剂进行避孕试验。试验时将外用抑菌剂通过钝头注射器推入雌兔阴道中，10min后，按1：2将雌兔与雄兔进行交配，交配30天后解剖雌兔，观察并统计死胎，结果如表6所示。
表6避孕试验结果
由表6结果可知，实施例1-5制备的外用抑菌剂应用于雌兔，交配30天后均无死胎，表明实施例1-5制备的外用抑菌剂能够有效地避免雌兔受孕，具有良好的避孕效果。相比于对比例1-5，均有部分雌兔受孕成功(即观察到死胎)，避孕效果较差。
改善阴道干涩、出血的试验：
随机收纳100例临床表现为阴道干涩、易出血的女性志愿者，给与实施例1-5及对比例1-5中的外用抑菌剂治疗。具体治疗方法如下：没人每日早晚各一次通过去针头注射器注射外用抑菌剂2ml，治疗两个疗程(一个疗程为一个月)后统计阴道干涩、出血情况。结果见表7。
表7改善阴道干涩、出血的试验结果
由表7的结果可见，本发明外用抑菌剂能够很好地改善阴道干涩、出血的症状，而对比例1-5制备的外用抑菌剂对改善阴道干涩、出血的症状的效果欠佳。
上述实施方式仅为本发明的优选实施方式，不能以此来限定本发明保护的范围，本领域的技术人员在本发明的基础上所做的任何非实质性的变化及替换均属于本发明所要求保护的范围。