本发明属于医药技术领域，涉及一种可用于在散瞳、调节睫状肌麻痹和延缓青少年近视的治疗或辅助治疗的药物，特别是涉及一种以格隆溴铵为活性成份制成的药物组合物例如滴眼液。本发明还涉及该药物组合物的制备方法。
背景技术
通常认为近视的发生发展的一个重要机制是睫状肌的持续收缩，引起紧张或痉挛，并使脉络膜延长，血容量减少，继发营养不良和萎缩，进一步导致巩膜变形，眼球后极延长。因此通过药物缓解或者麻痹睫状肌成为控制近视进展的一个重要课题。
目前，我国近视的发生率已由世界第三位上升到仅次于日本的第二位，全国近视眼人数约有4亿多，近视人口发生率为30％～35％，约是世界平均水平的1.6倍。近年来，中国近视眼率有急剧增加的趋势，而且发病年龄小，发病率高，学生是近视主要的发病群体，我国青少年患者近视数量呈几何级增长，其中青少年近视有2亿多人，中国青少年近视发病率高达60％～70％，每年新增近视眼约为6％。中国学生的近视率排到了世界第二，仅次于新加坡，其中小学生的发病率是30％～40％，初中生的发病率为50％～60％，高中生为70％～80％，大学生则高达90％以上，给他们的生活，学习带来了很多不便。目前市场上的滴眼液大多都是缓解眼部疲劳，但不能对近视眼进行治疗，临床急需疗效确切的近视药品。
临床上最有效和常用的药物是阿托品，它麻痹睫状肌作用强，持续时间久，而且有研究认为阿托品可以抑制促使巩膜生长的因子，抑制巩膜成纤维细胞的生长。临床上还有其他常用的类似药物有环戊通、后马托品和托吡卡胺等，但共同的缺点是瞳孔散大畏光、近视力下降，而且研究显示环戊通抑制近视进展的作用弱于阿托品。kennedy在1995年通过病例对照研究发现局部滴用阿托品可以有统计学意义地减缓近视的发展。近期一个双盲临床随机对照试验发现，配合多焦眼镜，阿托品可以明显抑制近视进展，眼轴变长明显减慢。因为在同一研究中单独多焦眼镜不能阻止近视进展，因此认为是阿托品抑制了近视进展，这与其他学者近期的研究结果类似。
阿托品，是从茄科植物颠茄、曼陀罗或莨菪等提取的消旋莨菪碱，抗胆碱药，为m-受体阻断剂，可与乙酰胆碱竞争副交感神经节后纤维突触后膜的乙酰胆碱m-受体，从而拮抗过量乙酰胆碱对突触后膜刺激所引起的毒蕈碱样症状和中枢神经症状。临床上常用于抑制腺体分泌、扩大瞳孔、调节睫状肌痉孪、解除肠胃和支气管等平滑肌痉挛。它可以有效地控制有机磷农药中毒时出现的毒蕈碱样症状和中枢神经症状。临床上阿托品滴眼液可能是未来最有希望应用于临床近视控制的药物了，不过它也有一系列副作用，比如过敏、畏光、面红、发热等，长期使用，具有极大的副作用和耐受性，因此还不能做为常规的控制近视进展的药物。
我们进一步认识到，由于阿托品的眼睛副作用，包括由于瞳孔扩大引起的眩目和由于调节损失引起的视力模糊，使阿托品作为治疗的临床应用受到限制。
格隆溴铵（glycopyrrolate），化学名为溴化3-羟基-1,1-二甲基吡咯烷-α-环戊基扁桃酸酯。它为合成的季铵类抗毒蕈碱（m胆碱）药，其适应症与传统的抗胆碱药阿托品类似。最初由美国百特医疗用品公司研发，于1975年2月6日经fda批准上市，现已在英国、美国、德国、澳大利亚等多个国家上市，临床使用广泛，使用时间长达35年。目前已上市的剂型包括口服制剂、吸入剂型和注射剂。fda公布的格隆溴铵注射液的一般药理学研究表明，格隆溴铵对抗m胆碱作用比阿托品更有效。
目前，尚未有采用以格隆溴铵为原料直接制备的格隆溴铵滴眼液的相关报道，也没有溴铵类滴眼剂申报临床研究及上市使用。滴眼液属外用制剂，与口服用的片剂、鼻腔给药的吸入剂及注射给药的注射剂给药途径、作用部位都不同，应用方法也不同，在黏度、促进吸收、抑菌剂等方面材料应用及要求有明显不同。
技术实现要素：
本发明人已经成功开发了仿制药格隆溴铵注射液及格隆溴铵片剂，基于对格隆溴铵临床作用的深刻理解，虽不结合任何理论，但本发明人推断，格隆溴铵在眼科方面的运用，可以预防、治疗和延缓青少年近视。通过本发明，有望开发出能常规控制近视进展的药物。
本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种格隆溴铵眼用药物组合物并在眼科中的医药用途。
本发明的再一目的是，提供一种格隆溴铵滴眼液或凝胶剂。
本发明的另一目的是，提供一种格隆溴铵眼用即用凝胶。
本发明的又一目的是，提供一种格隆溴铵眼用药物组合物在散瞳、调节睫状肌麻痹和延缓青少年近视的治疗或辅助治疗药物中的运用。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：一种格隆溴铵眼用药物组合物，其每1ml中包含：
格隆溴铵，0.001%～1.0%（w/v）；
ph调节剂：其量以ph调节至4.5～6.0范围内
渗透压调节剂，其量以260mosmol/kg～320mosmol/kg范围内；
媒介物；
防腐剂，0.0%～0.05%（w/v）；
水。
其中，本发明中所述的格隆溴铵眼用药物组合物中，格隆溴铵原料药符合现行版的美国药典、欧洲药典标准，附加剂中辅料符合中国药典及美国非活性成分关于辅料标准中眼用制剂和滴眼剂要求。
为实现第二个目的，本发明采用的技术方案是：一种格隆溴铵滴眼液或凝胶剂，其中媒介物选自羟丙基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙甲基纤维素、羧甲基纤维素、聚乙烯醇、聚乙二醇、糊精、泊洛沙姆、聚乙烯吡咯烷酮、壳聚糖、明胶、透明质酸钠中的一种或其组合。
为实现第三个目的，本发明采用的技术方案是：一种格隆溴铵眼用即用凝胶，其中媒介物选自温度敏感型、ph敏感型或离子敏感型高分子材料中的一种或多种。
关于温度敏感型高分子材料，包括泊洛沙姆407、泊洛沙姆188,n-异丙基丙烯酰胺共聚物和/或聚乙二酸-plga嵌段共聚物。
关于ph敏感型高分子材料，包括醋酸纤维素酞酸酯，丙烯酸树脂卡波姆或聚乙烯缩醛二乙胺醋酸；
关于离子敏感型高分子材料，包括去结冷胶、去乙酰结冷胶、海藻酸钠、黄原酸、卡拉胶/文莱胶；
关于ph调节剂：选自乙酸盐缓冲液、柠檬酸盐缓冲液、磷酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液、盐酸、氢氧化钠中的一种或多种；
关于渗透压调节剂：选自氯化钠、硝酸钠、硫酸钠、硫酸氢钠、氯化钾、氯化钙、氯化镁、氯化锌、乙酸钾、乙酸钠、碳酸氢钠、碳酸钠、硫代硫酸钠、硫酸镁、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸二氢钾、右旋糖、甘露醇、山梨醇、右旋糖、蔗糖、尿素、丙二醇、甘油或其组合；
关于防腐剂：选自苯扎氯胺、聚季铵盐-1、氯丁醇、硫柳汞、聚六亚甲基双胍或其组合。
制备格隆溴铵眼用组合物，必须综合考虑各种因素，结合具体实验效果来决定方案。格隆溴铵的理化性质，格隆溴铵为白色结晶性固体粉末，水中属易溶，在酸性环境下稳定性下降。格隆溴铵对高温、高湿有一定稳定性，具备可以配制每毫升含格隆溴铵0.1mg～0.5mg的制剂基本条件，但要综合设计处方、工艺，靠具体实验效果来决定方案。
滴眼液的ph值直接影响对眼部的刺激和药物的疗效。正常眼睛耐受的ph值为5.0～9.0，ph6.0～8.0时眼睛无不适感，而人体泪液的ph值为7.4，小于5.0和大于11.4有明显刺激性。ph值的选择应兼顾药物溶解性、稳定性、及对眼部的刺激性等多种因素。格隆溴铵在ph5.5时，最稳定，故我们优选ph5.5。
此外，本发明人发现，在较低浓度（例如0.001%～0.05%）)下配制的格隆溴铵液体组合物表现出比在较高浓度（例如0.1%～1%）下配制时更小的稳定性挑战。
关于本发明包装，本文所述的组合物储存在塑料容器中。选自塑料容器的材料包括高密度聚乙烯(hdpe)、低密度聚乙烯(ldpe)、聚对苯二甲酸乙二醇酯(pet),聚氯乙烯(pvc)、聚丙烯(pp)、聚苯乙烯(ps)、氟处理的hdpe、消费后再生树脂((pcr)、k-树脂(sbc)或生物塑料。
近视，即眼睛的轴向伸长，影响了一大部分人群。近视通常在小学期间发作，并且进展到眼睛生长完成为止。本发明认识到用于预防或阻止近视发展的组合物和治疗，尤其是允许方便施用、减少潜在的副作用、具有适当的稳定性并且/或者提供相对一致的治疗效果的组合物和治疗的重要性。
本发明的有益技术效果在于：
1）成功开发了新的格隆溴铵滴眼液、格隆溴铵眼用即用凝胶、格隆溴铵眼膏，方便眼科疾病患者使用；
2）本发明以格隆溴铵为原料直接制备，生产工艺方便简单、周期短，质量稳定，满足规模化生产需要；
3）本发明的格隆溴铵眼用药物组合物，散瞳与调节睫状肌麻痹较弱，治疗近视有显著效果，有望成为常规的控制近视进展的理想药物。
具体实施方式
现将参照下述实施例来说明本发明。提供这些实施例仅仅为了例证的目的，本发明决不应该解释为限于这些实施例，而应解释为涵盖根据本文提供的教导而显而易见的任意及所有变体。
实施例1格隆溴铵滴眼液的制备
处方：
制备方法：将苯扎氯胺加入适量的去离子水，加热溶解，备用。将羟丙甲基纤维素加入适量的去离子水中，搅拌润湿，静置过夜，搅拌下，依次加入硼酸、格隆溴铵及苯扎氯胺的溶液，加水至全量，用0.1n氢氧化钠溶液调节ph至5.5，充分搅拌均匀，用适宜的滤器过滤至澄明，盛装于容器中，密封封口，以流通蒸汽灭菌30min，在避菌环境下，分装於洗净的5ml无菌高密度聚乙烯瓶中，每支灌封5ml，用聚丙烯塑料盖严封即得。
实施例2格隆溴铵滴眼液的制备
处方：
制备方法：将聚季铵盐-1加入适量的去离子水水，加热溶解，然后依次加入甘露醇、聚乙烯醇与格隆溴铵，搅拌均匀，加水至全量，用柠檬酸缓冲液溶液适量调节ph至5.5，充分搅拌均匀，用适宜的滤器过滤至澄明，盛装于容器中，密封封口，以流通蒸汽灭菌30min，在避菌环境下，分装于洗净的5ml无菌低密度聚乙烯瓶中，每支灌封5ml，用聚丙烯塑料盖严封即得。
实施例3格隆溴铵滴眼液的制备
处方：
制备方法：将聚季铵盐-1加入适量的去离子水水，加热溶解，然后依次加入甘油、透明质酸钠与格隆溴铵，搅拌均匀，加水至全量，用硼酸盐缓冲液溶液适量调节ph至5.5，充分搅拌均匀，用适宜的滤器过滤至澄明，盛装于容器中，密封封口，以流通蒸汽灭菌30min，在避菌环境下，分装於洗净的5ml无菌高密度聚乙烯瓶中，每支灌封5ml，用聚丙烯塑料盖严封即得。
实施例4格隆溴铵眼用即用凝胶的制备
处方：
制备方法：将羟丙甲纤维素、海藻酸钠加入适量的去离子水水，常温搅拌润湿，后於4℃下静置过夜至溶胀完全溶解，在搅拌下，依次加入甘露醇、苯扎氯胺及格隆溴铵，搅拌均匀，加水至全量，用硼酸盐缓冲液溶液适量调节ph至5.2，充分搅拌均匀，用适宜的滤器过滤至澄明，盛装于容器中，密封封口，以流通蒸汽灭菌30min，在避菌环境下，分装於洗净的5ml无菌高密度聚乙烯瓶中，每支灌封5ml，用聚丙烯塑料盖严封即得。
实施例5格隆溴铵眼用即用凝胶的制备
处方：
制备方法：将卡波姆971、泊洛沙姆470加入适量的去离子水水，常温搅拌润湿，后於4℃下静置过夜至溶胀完全溶解，在搅拌下，依次加入甘露醇、尼泊金甲酯、尼泊金乙酯及格隆溴铵，搅拌均匀，加水至全量，用硼酸适量调节ph至5.5，充分搅拌均匀，用适宜的滤器过滤至澄明，盛装于容器中，密封封口，以流通蒸汽灭菌30min，在避菌环境下，分装於洗净的5ml无菌高密度聚乙烯瓶中，每支灌封5ml，用聚丙烯塑料盖严封即得。
实施例6格隆溴铵眼用即用凝胶的制备
处方：
制备方法：将壳聚糖、2-丙烯酰胺基-2-甲基丙磺酸加入适量的去离子水水，常温搅拌润湿，后於4℃下静置过夜至溶胀完全溶解，在搅拌下，依次加入甘露醇、聚季铵盐-1及格隆溴铵，搅拌均匀，加水至全量，用0.1nhcl适量调节ph至5.0，充分搅拌均匀，用适宜的滤器过滤至澄明，再用0.22μm微孔滤膜无菌过滤，在避菌环境下，分装于洗净的5ml无菌高密度聚乙烯瓶中，每支灌封5ml，用聚丙烯塑料盖严封即得。
实施例7格隆溴铵软膏的制备
处方：
制备方法：将液体石蜡150℃干热灭菌1.5h备用；无水羊毛脂和白凡士林加热融化后趁热无菌纱布过滤，150℃干热灭菌1.5h备用；无菌条件下，将格隆溴铵置已经干热灭菌的乳体中，研细，缓缓加入液体石蜡，研磨成乳状后分次递加入；无水羊毛脂和白凡士林混合物研均分装即得。
实施例8格隆溴铵眼用凝胶的制备
处方：
制备方法：将卡波姆940nf加入到甘油中，研磨，充分润湿后加去离子水，浸泡过夜；将格隆溴铵、氯化钠及尼泊金乙酯加水溶解，搅拌下加入到上述的凝胶基质中，搅拌下用0.1n氢氧化钠适量调节ph至5.5，使成凝胶状，加去离子水至全量，搅拌均匀即得。
实施例9格隆溴铵眼用凝胶的制备
处方：
制备方法：将卡波姆940nf加入到甘油中，研磨，充分润湿后加去离子水，浸泡过夜；将格隆溴铵、氯化钠及尼泊金乙酯加水溶解，搅拌下加入到上述的凝胶基质中，搅拌下用0.1n氢氧化钠适量调节ph至5.0，使成凝胶状，加去离子水至全量，搅拌均匀即得。
实施例10格隆溴铵滴眼液的制备
处方：
制备方法：将20%去离子水预溶解玻璃酸钠2h以上，取50%去离子水溶解氯化钠、泊洛沙姆407、edta-2na，然后加入格隆溴铵，搅拌下，加入已溶解好的玻璃酸钠溶液，加入苯扎氯胺，混合均匀，加上至全量，用0.1n氢氧化钠调节ph至5.5，分别用0.45μm和0.22μm微孔滤膜无菌过滤除菌，检验合格后，无菌分装于洗净的5ml无菌高密度聚乙烯瓶中，每支灌封5ml，用聚丙烯塑料盖严封即得。
实施例11格隆溴铵滴眼液的制备
处方：
制备方法：同实施例1。
实施例12眼刺激性试验
参照《化学药物刺激性、过敏性和溶血性研究技术指导原则》中的有关规定,本实验采用一次给药法及多次给药法进行兔眼刺激性试验。
一次给药法
取健康、双眼正常成年家兔，每实施例组合物3只，向3只家兔的每一只右眼单独给予组合物，并向左眼给予同样体积的安慰剂，在4h、24h、48h及72h对兔进行检验，观察角膜、结膜、虹膜及分泌物情况，结果未见兔眼充血、流泪、畏光、水肿、分泌物增加等刺激反应。采用手持裂隙灯检查角膜、虹膜变化，未见异常。
多次给药法
取健康、双眼正常成年家兔，每实施例组合物3只，向3只家兔的每一只右眼单独给予组合物0.1ml，右眼滴生理盐水作对照，qid，连续滴14天，每天给药前以及最后一次给药后1h、24h、48h和72h对眼部进行检查，记录每天的局部反应情况，结果实施例组左右眼均未见异常。
结果表明本发明的组合物对兔眼无特殊刺激反应。
实施例13对小鸡形觉剥夺近视模型的作用
试验动物为新出生的健康雏鸡44只，雌雄各半，体重35～40g。试验药品为：1）0.5%噻吗洛尔滴眼液；2）实施例1组合物滴眼液；3）1%阿托品滴眼液。
实验方法：动物于出生后当天随机分为4组(a、b、c、d组)，每组11只，其中a为模型组，b为0.5%噻吗洛尔滴眼液组，c为实施例1组合物滴眼液组，d为1%阿托品滴眼液组，一眼处理，另眼对照。造模次日，b、c、d组分别给与0.5%噻吗洛尔滴眼液、实施例1组合物滴眼液及1%阿托品眼水点右眼，1次2～3滴，1日2次，连续一月，一月后剪开融合的眼睑，由固定的验光师以带状检影镜验光，测双眼眼轴长度，确定近视形成后，测双眼眼压。之后摘出眼球，每组取2只鸡眼球(包括正常对照组)固定，备于电镜检查，其余鸡眼球作光镜检查。采用spss统计学软件进行统计数据处理。实验结果如下：
各组平均屈光度的比较（x±s）
统计结果表明：形觉剥夺眼与正常对照眼比较有极显著性差异(p<0.01)；各用药组与模型组相比有极显著性差异(p<0.01)；噻吗洛尔组与阿托品组比较有显著性差异(p<0.05)；实施例1组与阿托品组比较无明显差异(p>0.05)。
临床应用证明本品具有起效快、副作用小、耐受性好等特点，短期、长期应用无明显的局部或全身不良反应，小剂量散瞳作用轻微，用后不影响看书。
本品经临床验证，疗效确切，其全部用量及时通过眼部，鼻粘膜完全吸收，进入血液循环，也不会产生全身的药理作用，故安全性很好。
本品的使用人群为青少年近视患者，故没考察老年用药。
本文描述了本发明的某些实施方案，包括发明人已知的、用于执行本发明的最佳模式。当然，在阅读了前述说明之后，这些描述的实施方案的变化对于本领域的普通技术人员来说是显而易见的。发明人希望本领域的技术人员适当使用这些变化，并且发明人希望本发明以并非本文具体描述的方式实施。因此，本发明包括本发明所附的被适用法律允许的权利要求书中引用的主题的所有修改和等同变化。另外，除非另有说明或者与上下文明显冲突，否则本发明将包含上述元件的任何组合的所有可能变化。最后，应该理解的是本文所公开的本发明的实施方案是对本发明的原理的示例性说明。可以使用的其他修改在本发明的范围内。因此，通过实例，但是为非限制性的，可以根据本文的教导利用本发明的可选配置。因此，本发明并不局限于明确示出和描述的内容。