本发明涉及水产养殖病害防治领域，具体涉及一种预防中华绒螯蟹“水瘪子”病中草药免疫增强剂及其制备方法和应用。
背景技术：
中华绒螯蟹(eriocheirsinensis)又称河蟹、清水蟹及大闸蟹，隶属于节肢动物门(arthropoda)甲壳纲(cmstacea)十足目(decapoda)弓蟹科(varunidae)绒螯蟹属(eriocheir)，其肉质鲜美且营养价值较高，是一种重要的水产养殖经济物种，广受消费者喜爱。
近年来，随着市场需求的不断增长，中华绒螯蟹养殖规模不断扩大，高密度养殖的同时带来了大量的病害问题，种质的退化以及养殖水质的恶化都导致了中华绒螯蟹抗病力的下降，尤其是2015年江苏省中华绒螯蟹“水瘪子”病的大爆发，造成空壳、肝胰腺变白、水化及坏死，给养殖户造成了极大的经济损失。
针对中华绒螯蟹“水瘪子”病的原因，众说纷纭，寄生虫、病毒或者细菌感染、农药及杀虫剂的使用等等，都是目前争议较多的致病原因，传统的抵御疾病的侵害，依赖于大量的抗生素和消毒剂的使用，不仅仅造成环境污染，还极有可能造成耐药性的产生，如何从源头上预防“水瘪子”病的发生，提高中华绒螯蟹自身免疫力，增强抗应激性，从而抵御“水瘪子”病的侵害，已经成为众多学者研究的方向。
甲壳类动物的免疫，依赖于机体的非特异性免疫，主要体现在抗氧化能力及抗应激反应中的各种非特异性免疫酶，目前常见的检测指标为谷丙转氨酶(alt)、溶菌酶(lzm)、超氧化物歧化酶(sod)、过氧化氢酶(cat)，过氧化酶(pod)，通过对中华绒螯蟹非特异性免疫酶的测定，研制一种中草药免疫增强剂，从而提高中华绒螯蟹机体免疫力，抵御“水瘪子”病的侵害，为完善饲料配方提供依据，最终促进中华绒螯蟹养殖业的长期稳定发展。
目前水产养殖中使用中草药作为甲壳类添加剂的报道较少，如cn103494038公开了一种克氏原螯虾抵抗白斑综合症的中草药免疫增强剂，该中草药免疫增强剂主要是提高克氏原螯虾的机体免疫力从而抵抗白斑病的发生，针对的对象为克氏原螯虾；cn102389499a公布了一种中药提取液用于防治水产养殖病毒性病害，针对的对象为对虾及鱼类，并且这两种中草药组合物明确针对病毒感染，而对中华绒螯蟹这种不明原因所致的病害问题，效果不明显,且针对的对象与中华绒螯蟹在分类学上属于不同科的生物，对同一种药物的吸收不同，药物发挥作用的靶点等也可能不同，利用cn103494038和cn102389499a公开的中草药组合物与本专利公开的免疫增强剂做对比试验，发现这两个专利公开的中药组合物对中华绒螯蟹机体免疫力提高效果不明显。在目前对大黄、黄芪、板蓝根、茵陈、甘草及槟榔的配伍使用及其对中华绒螯蟹影响还未见报道，因此，通过中华绒螯蟹非特异性免疫酶的测定以及发生“水瘪子”病死亡情况的研究，筛选出促进中华绒螯蟹非特异性免疫功能的中草药免疫增强剂，从而预防中华绒螯蟹“水瘪子”病的发生，对中华绒螯蟹养殖业的发展具有重要意义。
技术实现要素：
本发明的目的是提供了一种预防中华绒螯蟹“水瘪子”病的中草药组合物。
本发明的另一目的是提供该中草药组合物的制备方法。
本发明的又一目的是提供该组合物的应用.
本发明的技术方案如下：
一种预防中华绒螯蟹“水瘪子”病的中草药组合物，由以下组份组成：大黄25-40重量份，黄芪15-25重量份，板蓝根15-25重量份，茵陈10-20重量份，甘草10-20重量份，槟榔4-6重量份。
所述的中草药组合物优选由以下组份组成：大黄30-40重量份，黄芪15-22重量份，板蓝根15-20重量份，茵陈10-20重量份，甘草12-20重量份，槟榔4-6重量份。
本发明所述的中草药组合物在制备预防中华绒螯蟹“水瘪子”病的制剂中的应用。
本发明所述的预防中华绒螯蟹“水瘪子”病的中草药免疫增强剂的制备方法，将所述的中草药免疫增强剂各组份先粗粉碎再经超微粉碎机粉碎，过100目筛网后，在混合机内混合均匀，即制成所述的免疫增强剂。
按照上述方法制备的预防中华绒螯蟹“水瘪子”病的中草药免疫增强剂。
本发明所述的中草药组合物在制备提高中华绒螯蟹免疫力的制剂中的应用。
一种预防中华绒螯蟹“水瘪子”病的中华绒螯蟹饲料，含有本发明所述的防中华绒螯蟹“水瘪子”病的中草药免疫增强剂。
所述的中华绒螯蟹饲料优选将所述的中草药免疫增强剂按照1wt％的量添加到常规中华绒螯蟹基础饲料中所得。
有益效果：
本发明从甲壳类动物的免疫机理出发，针对中华绒螯蟹发生“水瘪子”病时出现的肝胰腺综合征，病蟹谷丙转氨酶活力极显著高于健康蟹(杨宗英；曾柳根；王玉兰；姚毅；侯玉洁；雷小青；许亮清；熊春贤；杨先乐；；中华绒螯蟹“水瘪子”病超微病理和病理生理研究[j]；浙江农业学报；2018年07期),从中草药中筛选出大黄、黄芪、板蓝根、茵陈、甘草及槟榔，并按照比例进行配比，大黄及黄芪相使，可以补中益气，提高机体免疫力，板蓝根可以清热解毒发挥抗病毒功效，茵陈清肝胆，甘草保肝护肝且解毒泻火，槟榔可驱虫消积，通过这几种中草药配比使用，可以提高中华绒螯蟹机体抗氧化及抗应激能力，显著降低谷丙转氨酶的含量，加快机体修复，保肝护肝，降低中华绒螯蟹“水瘪子”病的发生。
本发明所述中草药简单易得，成本低廉，效果稳定，且制备及使用方法简单。
具体实施方式
实施例1
取大黄重量25份，黄芪重量15份，板蓝根25重量份，茵陈12重量份，甘草15重量份，槟榔4重量份；将上述各组分先粗粉碎后经超微粉碎机粉碎，过100目筛网，然后于混合机内充分混匀，制成免疫增强剂。
实施例2
取大黄35重量份，黄芪20重量份，板蓝根20重量份，茵陈18重量份，甘草10重量份，槟榔5重量份；将上述各组分先粗粉碎后经超微粉碎机粉碎，过100目筛网，然后于混合机内充分混匀，制成免疫增强剂。
实施例3
取大黄40重量份，黄芪18重量份，板蓝根18重量份，茵陈10重量份，甘草20重量份，槟榔5重量份；将上述各组分先粗粉碎后经超微粉碎机粉碎，过100目筛网，然后于混合机内充分混匀，制成免疫增强剂。
实施例4
取大黄28重量份，黄芪22重量份，板蓝根16重量份，茵陈16重量份，甘草18重量份，槟榔4重量份；将上述各组分先粗粉碎后经超微粉碎机粉碎，过100目筛网，然后于混合机内充分混匀，制成免疫增强剂。
实施例5
取大黄30重量份，黄芪15重量份，板蓝根20重量份，茵陈20重量份，甘草12重量份，槟榔6重量份；将上述各组分先粗粉碎后经超微粉碎机粉碎，过100目筛网，然后于混合机内充分混匀，制成免疫增强剂。
实施例6
取大黄30重量份，黄芪20重量份，板蓝根20重量份，茵陈15重量份，甘草16重量份，槟榔5重量份；将上述各组分先粗粉碎后经超微粉碎机粉碎，过100目筛网，然后于混合机内充分混匀，制成免疫增强剂。
对比试验：中华绒鳌蟹由江苏省淡水水产研究所扬中基地提供。试验选择健康、规格和重量基本一致的幼蟹(平均体重：9.62±0.05g)。随机分为4组，每组设2个平行试验组，每平行组50只试验蟹。全部放于已经消毒过的水泥池进行饲养，水泥池规格为4m×4m×2m，对照组1投喂由南京帅丰饲料有限公司生产的中华绒螯蟹基础饲料(粗蛋白38％，粗脂肪5.2％，粗纤维6.9％，粗灰分17.8％，总磷1.2％，赖氨酸2.1％)，对照组2(在基础饲料中添加1.0％大黄)，对照组3(在基础饲料中添加0.5％大黄和0.5％黄芪)，对照组4添加cn103494038实施例1的中草药免疫增强剂，对照组5添加cn102389499a公开的3号中草药提取液，对照组4以及对照组5中草药制剂添加量均与其专利公开一致，试验组1-6分别投喂在基础饲料中按照1wt％添加的实施例1-6制备的中草药免疫增强剂，河蟹经7天驯养后进行投喂试验，90天后测定其免疫酶各项指标平均值。
表1
结果表明：与对照组1-5相比，试验组1-6显著提高了溶菌酶、超过氧化物岐化酶、过氧化氢酶及过氧化酶的含量，而降低了谷丙转氨酶的含量，对照组4以及对照组5对中华绒螯蟹机体免疫力提高效果不明显，因此，本发明中草药免疫增强剂能显著提高中华绒螯蟹免疫与抗氧化能力，为后续实施例7临床实践提供了理论基础。
实施例7
取大黄35重量份，黄芪20重量份，板蓝根20重量份，茵陈15重量份，甘草15重量份，槟榔5重量份，将上述各组分先粗粉碎后经超微粉碎机粉碎，过100目筛网，然后于混合机内充分混匀，制成免疫增强剂。
选择兴化市2015年中华绒螯蟹“水瘪子”病发病率较高的养殖基地3个，每个养殖基地选择2个养殖塘口，设对照组和试验组，养殖塘口2015年均发生过中华绒螯蟹“水瘪子”病且发病率达到45％-53％，中华绒鳌蟹苗种选自江苏省淡水水产研究所扬中基地，且从未发生过河蟹“水瘪子”病的繁育塘口，对照组选用由南京帅丰饲料有限公司生产的中华绒螯蟹基础饲料进行投喂，试验组选择本发明制备的中草药免疫增强剂，按照1wt％添加到基础饲料中进行投喂，试验周期为6个月，试验结束后每个养殖塘口随机挑选中华绒螯蟹100只，进行血淋巴采样，分析非特异性免疫酶平均值，并检查“水瘪子”病的发病率。
表2
结果表明：与对照组1-3相比，试验组1-3均明显的提高了溶菌酶、超过氧化物岐化酶、过氧化氢酶及过氧化酶的含量，且降低了谷丙转氨酶的含量；与对照组1相比，试验组1“水瘪子”病发病率由41％下降到14％；与对照组2相比，试验组2“水瘪子”病发病率由38％下降到11％；；与对照组3相比，试验组3“水瘪子”病发病率由29％下降到5％；通过对比试验以及塘口临床试验，得出该中草药免疫增强剂能够显著提高中华绒螯蟹抗应激及抗氧化能力，并且最终能够降低中华绒螯蟹“水瘪子”病的发病率，表明该中草药免疫增强剂能够预防中华绒螯蟹“水瘪子”病的发生。