去甲基异波尔定在制备预防和/或治疗膀胱平滑肌功能障碍的药物中的应用的制作方法

本发明属于膀胱平滑肌功能障碍治疗技术领域，尤其涉及去甲基异波尔定在制备预防和/或治疗膀胱平滑肌功能障碍的药物中的应用。

背景技术：

膀胱具有贮尿和排尿功能，这两个功能是在神经和受体的调节下平滑肌的舒张和收缩实现的。逼尿肌保持正常的舒张和收缩对维持正常的贮尿和排尿尤为重要，而膀胱功能的改变是引起尿频、尿急、尿失禁等下尿路疾病症状的重要因素之一。平滑肌功能的改变既是膀胱过度活跃或者逼尿肌过度活动的重要发病机制，也是产生不随意逼尿肌收缩的必要条件，膀胱的自主性，任何能够引起逼尿肌模块间联系增强的因素均易导致膀胱逼尿肌过度活动。

膀胱过度活动症(overactivebladder,oab)是一种常见的膀胱功能障碍，虽无生命危害，但严重影响患者的生活质量。据北美流行病学研究报道，女性中有16.9％受到oab相关症状的困扰，而随着年龄的增长，65岁以上oab的发病率达到30.9％(dudleyrobinson,iliasgiarenis,lindacardozo.nnovationinmidlifehealthandbeyondnewdevelopmentsinthemedicalmanagementofoveractivebladder[j].maturitas,2013,76(3):225-229)。40岁以上欧洲人口中，亦有16.6％的发病率，其发病率甚至超过阿尔茨海默病和骨质疏松症(gunthorpemj,szallasia.peripheraltrpv1receptorsastaegetsfordrugdevelopment:newmoleculesandmechanisms[j].currpharmdes,2008,14(1):32-41.。日本一项近期的流行病学调查显示，在40岁及以上的成人中发现有oab存在的患者数量达到了810万人(osamuy,osamun,masayukit,etal.clinicalguidelinesforoveractivebladder[j].internationaljournalofurology,2009,16,126-142.)。北京大学泌尿外科研究所在北京地区的调查显示，50岁以上男性急迫性尿失禁的发生率为16.4％(颜明根,马小兵,等.膀胱过度活动症诊疗的研究进展[j].海军医学杂志,2011,32(4):65-69.)。虽然不同地区有着不同的发病率，显然，这一类型泌尿道系统障碍成为了全世界的负担。

而且，当前的人口老龄化趋势对国际社会的经济发展、医疗保健等方面都带来了深远的影响，随着社会老龄化的发展，各种下尿路疾病如膀胱炎、尿道炎、尿失禁等的发病率不断上升，在老年人群中的发生率高达91％，且症状的严重程度与年龄的增长呈正相关。

目前，膀胱过度活动症治疗方式主要包括行为治疗、药物治疗、神经调节治疗等，严重者可采取逼尿肌横断术或膀胱扩大术等，但疗效均不尽人意，而抗胆碱药的副作用在一定程度上也限制了它的临床应用。

技术实现要素：

有鉴于此，本发明的目的在于提供去甲基异波尔定在制备预防和/或治疗膀胱平滑肌功能障碍的药物中的应用。在本发明中，所述去甲基异波尔定对膀胱平滑肌功能有很好的调节作用，可以减少逼尿肌的收缩能力，显著降低逼尿肌对α,β-methyleneatp，cch和kcl引起的收缩反应(p<0.01或p<0.05)，还能够显著减少efs(电场刺激)引起的收缩，对膀胱平滑肌功能有明显的调节作用，可以用于oab的治疗，也可以用于尿失禁、多尿等多种疾病的治疗。

为了实现上述发明目的，本发明提供了以下技术方案：

本发明提供了去甲基异波尔定在制备预防和/或治疗膀胱平滑肌功能障碍的药物中的应用。

优选的，所述药物以去甲基异波尔定为有效成分。

优选的，所述药物还包括去甲基异波尔定药学上可接受的辅料。

优选的，所述药物中去甲基异波尔定的质量百分含量为0.1％～50％。

优选的，所述药物中去甲基异波尔定的浓度为1～200μmol/l。

优选的，所述药物中去甲基异波尔定的浓度为10～150μmol/l。

本发明还提供了去甲基异波尔定在制备调节逼尿肌的收缩反应的药物中的应用。

优选的，所述逼尿肌的收缩反应包括α,β-亚甲基三磷酸腺苷，卡巴胆碱，电场刺激，氯化钾引起的收缩反应。

本发明的有益效果：本发明提供了去甲基异波尔定在制备预防和/或治疗膀胱平滑肌功能障碍的药物中的应用；所述去甲基异波尔定对膀胱平滑肌功能有很好的调节作用，可以减少逼尿肌的收缩能力，显著降低逼尿肌对α,β-methyleneatp，cch和kcl引起的收缩反应(p<0.01或p<0.05)，还能够显著减少efs(电场刺激)引起的收缩，对膀胱平滑肌功能有明显的调节作用，可以用于oab的治疗，也可以用于尿失禁、多尿等多种疾病的治疗。

根据实施例的记载，用不同浓度的去甲基异波尔定作用于小鼠逼尿肌，小鼠逼尿肌对efs(32hz)的刺激显著地受到抑制(p<0.01或p<0.05)；小鼠的膀胱平滑肌在atp、efs、kcl和cch的刺激下收缩能力显著升高(p<0.01)，在去甲基异波尔定(60μmol/l)作用下小鼠膀胱平滑肌对atp、efs、kcl和cch作用后收缩力显著降低(p<0.01或p<0.05)。

附图说明

图1为去甲基异波尔定(1、2、4、8、16、32、64、128μmol/l)对小鼠dsm在efs(32hz)刺激下引起收缩反应的作用；实验组和对照组对比结果，**p<0.01or*p<0.05；

图2为去甲基异波尔定(60μmol/l)对小鼠dsm在α,β-methyleneatp(100μmol/l)刺激下收缩能力变化；

图3为去甲基异波尔定对小鼠dsm在α,β-methyleneatp(100μmol/l)刺激下收缩能力的作用；

图4为去甲基异波尔定(60μmol/l)对小鼠dsm在kcl(120mm)刺激下收缩能力变化；

图5为去甲基异波尔定(60μmol/l)对小鼠dsm在kcl(120mm)刺激下收缩能力的作用；模型组和对照组对比，**p<0.01or*p<0.05；

图6为去甲基异波尔定(60μmol/l)对小鼠dsm在cch(10^-8～10^-5m)刺激下收缩能力变化；

图7为去甲基异波尔定(60μmol/l)对小鼠dsm在cch(10^-8～10^-5m)刺激下收缩能力的作用，**p<0.01or*p<0.05；

图8为去甲基异波尔定(60μmol/l)对小鼠dsm在efs(1～64hz)刺激下收缩能力变化；

图9为去甲基异波尔定(60μmol/l)对小鼠dsm在efs(1～64hz)刺激下收缩能力的作用，**p<0.01or*p<0.05。

具体实施方式

本发明提供了去甲基异波尔定在制备预防和/或治疗膀胱平滑肌功能障碍的药物中的应用。

在本发明中，所述药物优选的以去甲基异波尔定为有效成分，更优选的以甲基异波尔定为唯一有效成分。在本发明中，所述药物优选的还包括去甲基异波尔定药学上可接受的辅料，本发明对所述辅料的种类和用量没有特殊限定，采用本领域常规的辅料即可。本发明对所述药物的剂型没有特殊限定，任何以去甲基异波尔定为活性成分能够制备获得的剂型均可。在本发明中，所述药物中去甲基异波尔定的质量百分含量优选为0.1％～50％。在本发明中，所述药物中去甲基异波尔定的浓度优选为1～200μmol/l，更优选为10～150μmol/l。在本发明中，所述药物的每日施用剂量优选为1mg～3000mg，更优选为10～3000mg。

本发明还提供了去甲基异波尔定在制备调节逼尿肌的收缩反应的药物中的应用。在本发明中，所述药物优选的以去甲基异波尔定为有效成分，更优选的以甲基异波尔定为唯一有效成分。在本发明中，所述药物优选的还包括去甲基异波尔定药学上可接受的辅料，本发明对所述辅料的种类和用量没有特殊限定，采用本领域常规的辅料即可。本发明对所述药物的剂型没有特殊限定，任何以去甲基异波尔定为活性成分能够制备的剂型均可。在本发明中，所述药物中去甲基异波尔定的质量百分含量优选为0.1％～50％。在本发明中，所述药物中去甲基异波尔定的浓度优选为10～200μmol/l，更优选为30～150μmol/l。

在本发明中，所述逼尿肌的收缩反应包括α,β-亚甲基三磷酸腺苷，卡巴胆碱，电场刺激，氯化钾引起的收缩反应。在本发明中，所述α,β-亚甲基三磷酸腺苷的作用浓度优选为80～120μmol/l，更优选为100μmol/l；所述卡巴胆碱cch的作用浓度优选为10^-8～10^-5mol/l；所述电场刺激的作用频率优选为1～64hz；所述氯化钾的作用浓度优选为100～150mmol/l，更优选为120mmol/l。

下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。

实施例1

去甲基异波尔定对逼尿肌收缩能力的作用

取小鼠膀胱，用手术刀将膀胱纵切成4份(每份大小5～10mm×1～5mm)，并在每份的两端用6号手术线打结成圈，一端附着在固定的钩子上，而另一端则连接到张力传感器上测量张力(harvardapparatus，美国)，组织浸入到一个含有kreb’s的溶液的器官浴槽，溶液维持在37℃，并持续通氧，通入的气体组成如下：950ml/lo2+50ml/lco2。在一种无张力的状态下适应0.5h后，将膀胱组织拉伸到0.5g的张力并平衡1h。在生理记录仪(harvardapparatus,美国&labchart,新西兰)上显示张力变化，数据被软件(labchartsoftware)记录下来。

在平衡之后，以efs(40v，2～30hz，0.5ms的脉冲持续时间，10s)引起神经介导的膀胱组织的收缩。efs是通过与刺激器相连的铂电极来实现的(harvardapparatus，美国)。加入去甲基异波尔定至终浓度为2μmol/l的孵育15min。再次给与efs(32hz)刺激，观察dsm收缩能力的变化。用同样的方法观察去甲基异波尔定(4、8、16、32、64、128μmol/l)对dsm对efs(32hz)的影响。对照组的膀胱组织在平衡后，不添加去甲基异波尔定。在做完试验后，取出dsm肌条并用万分之一的电子天平称量重量，用刻度尺量取长度。结果如图1所示，与对照组相比，实验组小鼠在nor(16、32、64、128μmol/l)影响下dsm对efs(32hz)的刺激均显著地受到抑制(p<0.01或p<0.05)。

实施例2

去甲基异波尔定对小鼠膀胱平滑肌(dsm)收缩能力的作用

1)取小鼠膀胱，用手术刀将膀胱纵切成4份(每份大小5～10mm×1～5mm)，并在每份的两端用6号手术线打结成圈，一端附着在固定的钩子上，而另一端则连接到张力传感器上测量张力(harvardapparatus，美国)，组织浸入到一个含有kreb’s的溶液的器官浴槽，溶液维持在37℃，并持续通氧，通入的气体组成如下：950ml/lo2+50ml/lco2。在一种无张力的状态下适应0.5h后，将膀胱组织拉伸到0.5g的张力并平衡1h。在图形记录仪(harvardapparatus,美国&labchart,新西兰)上显示张力变化，数据被软件(labchartsoftware)记录下来。张力平衡后，先观察小鼠dsm对α,β-methyleneatp(100μmol/l)刺激的收缩能力。清洗浴槽平衡后，加入60μmol/l的去甲基异波尔定入浴槽孵育15min，再次给与α,β-methyleneatp(100μmol/l)刺激，观察dsm收缩能力的变化；

2)用同样的方法观察去甲基波尔定(60μmol/l)对dsm在cch(10^-8～10^-5mol/l)和kcl(120mmol/l)刺激下收缩能力的变化；

3)再观察小鼠膀胱平滑肌对efs(1、2、4、8、16、32和64hz)收缩能力的变化。在efs结束后清洗并调整张力，平衡30min后，用去甲基异波尔定(60μmol/l)孵育15min。再一次用efs刺激膀胱平滑肌，具体操作方法参见实施例1。

结果如图2～9及表1，2，3所示，实验组小鼠在去甲基异波尔定(16、32、64、128μmol/l)影响下dsm对efs(32hz)的刺激均显著地受到抑制(p<0.01或p<0.05)；在去甲基异波尔定(60μmol/l)作用下小鼠膀胱平滑肌对atp、efs、kcl和cch作用后收缩力显著降低(p<0.01或p<0.05)。

表1去甲基异波尔定(60μm)对小鼠dsm功能的作用

*示与对照组相比，p<0.05，**示与对照组相比，p<0.01，下同表2去甲基异波尔定(60μm)对小鼠dsm在cch(10^-8～10^-5m)刺激下收缩能力的作用

表3去甲基异波尔定(60μm)对小鼠dsm在efs(1-64hz))刺激下收缩能力的作用

由上述实施例可知，去甲基异波尔定能够显著降低逼尿肌对α,β-methyleneatp，cch和kcl引起的收缩反应(p<0.01或p<0.05)，能够显著减少efs(电场刺激)引起的收缩，对膀胱平滑肌功能有明显的调节作用，能够用于oab的治疗，也可以用于尿失禁、多尿等多种疾病的治疗。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。