水产病原菌糖酵解途径中持家酶的广谱组合型疫苗及其应用的制作方法

文档序号:21538199发布日期:2020-07-17 17:36阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种水产病原菌糖酵解途径中的持家酶的广谱组合型疫苗,其特征在于,其是以至少两种糖酵解途径来源的持家酶的关键表位相连接而形成的重组蛋白作为抗原成分。

2.如权利要求1所述的水产病原菌糖酵解途径中的持家酶的广谱组合型疫苗,其特征在于,糖酵解途径来源的持家酶为pgm、pgk、eno、hk,所述pgm、pgk、eno、hk的关键表位分别为pgm1、pgk2与pgk3、eno1以及hk3,所述pgm1是具有蛋白pgm相对应的第1-54位氨基酸的多肽片段,所述pgk2是具有蛋白pgk相对应的第98-194位氨基酸的多肽片段,所述pgk3是具有蛋白pgk相对应的第195-291位氨基酸的多肽片段,所述eno1是具有蛋白eno相对应的第1-108位氨基酸的多肽片段,所述hk3是具有蛋白hk相对应的第161-240位氨基酸的多肽片段,所述蛋白pgk、pgm、eno、hk的氨基酸序列分别如seqidno:1、seqidno:2、seqidno:3、seqidno:4所示。

3.如权利要求1所述的水产病原菌糖酵解途径中的持家酶的广谱组合型疫苗,其特征在于,其是以糖酵解途径来源的持家酶pgm和pgk的关键表位相连接而成的重组蛋白作为抗原成分;

所述pgm、pgk关键表位分别为pgm1、pgk2与pgk3,所述pgm1是具有蛋白pgm相对应的第1-54位氨基酸的多肽片段,所述pgk2是具有蛋白pgk相对应的第98-194位氨基酸的多肽片段,所述pgk3是具有蛋白pgk相对应的第195-291位氨基酸的多肽片段,所述蛋白pgk、pgm的氨基酸序列分别如seqidno:1、seqidno:2所示,所对应的编码基因序列分别具有如seqidno:5、seqidno:6所示的核苷酸序列。

4.如权利要求1-3任一项所述的水产病原菌糖酵解途径中的持家酶的广谱组合型疫苗,其特征在于,所述的水产病原菌包括鳗弧菌、哈维氏弧菌、溶藻弧菌、嗜水气单胞菌、假单胞菌、爱德华氏菌、杀鲑气单胞菌、美人鱼发光杆菌、鲁氏耶尔森菌。

5.一种如权利要求1-3任一项所述的水产病原菌糖酵解途径中的持家酶的广谱组合型疫苗在防治水产养殖中的细菌性病害中的应用。

6.一种重组蛋白,其特征在于,其是通过将至少两种糖酵解途径来源的持家酶的关键表位相连接而成,所述糖酵解途径来源的持家酶为pgm、pgk、eno、hk,所述pgm、pgk、eno、hk的关键表位分别为pgm1、pgk2与pgk3、eno1以及hk3,所述pgm1是具有蛋白pgm相对应的第1-54位氨基酸的多肽片段,所述pgk2是具有蛋白pgk相对应的第98-194位氨基酸的多肽片段,所述pgk3是具有蛋白pgk相对应的第195-291位氨基酸的多肽片段,所述eno1是具有蛋白eno相对应的第1-108位氨基酸的多肽片段,所述hk3是具有蛋白hk相对应的第161-240位氨基酸的多肽片段,所述蛋白pgk、pgm、eno、hk的氨基酸序列分别如seqidno:1、seqidno:2、seqidno:3、seqidno:4所示。

7.一种重组载体,其特征在于,含有编码权利要求5所述的重组蛋白的核苷酸序列的表达载体。

8.一种宿主细胞,其特征在于,包括权利要求7所述的重组载体的宿主细胞。

9.一种抑菌组合物,其特征在于,包括由至少两种糖酵解途径来源的持家酶的关键表位相连接而成的重组蛋白,含有所述重组蛋白的表达载体,以及含有所述重组蛋白的宿主细胞中的至少一种;其中,

糖酵解途径来源的持家酶为pgm、pgk、eno、hk,所述pgm、pgk、eno、hk的关键表位分别为pgm1、pgk2与pgk3、eno1以及hk3,所述pgm1是具有蛋白pgm相对应的第1-54位氨基酸的多肽片段,所述pgk2是具有蛋白pgk相对应的第98-194位氨基酸的多肽片段,所述pgk3是具有蛋白pgk相对应的第195-291位氨基酸的多肽片段,所述eno1是具有蛋白eno相对应的第1-108位氨基酸的多肽片段,所述hk3是具有蛋白hk相对应的第161-240位氨基酸的多肽片段,所述蛋白pgk、pgm、eno、hk的氨基酸序列分别如seqidno:1、seqidno:2、seqidno:3、seqidno:4所示。

10.一种抑菌剂,其特征在于,其主要活性成分为由至少两种糖酵解途径来源的持家酶的关键表位相连接而成的重组蛋白,含有所述重组蛋白的表达载体,以及含有所述重组蛋白的宿主细胞中的至少一种;其中,

糖酵解途径来源的持家酶为pgm、pgk、eno、hk,所述pgm、pgk、eno、hk的关键表位分别为pgm1、pgk2与pgk3、eno1以及hk3,所述pgm1是具有蛋白pgm相对应的第1-54位氨基酸的多肽片段,所述pgk2是具有蛋白pgk相对应的第98-194位氨基酸的多肽片段,所述pgk3是具有蛋白pgk相对应的第195-291位氨基酸的多肽片段,所述eno1是具有蛋白eno相对应的第1-108位氨基酸的多肽片段,所述hk3是具有蛋白hk相对应的第161-240位氨基酸的多肽片段,所述蛋白pgk、pgm、eno、hk的氨基酸序列分别如seqidno:1、seqidno:2、seqidno:3、seqidno:4所示。

11.如权利要求10所述的抑菌剂,其特征在于,所述抑菌剂的抑菌谱为:鳗弧菌、哈维氏弧菌、溶藻弧菌、嗜水气单胞菌、假单胞菌、爱德华氏菌。

12.一种如权利要求1-3任一项所述的水产病原菌糖酵解途径中的持家酶的广谱组合型疫苗在制备饲料添加剂、饲料或饵料中的应用。


技术总结
本发明公开了一种水产病原菌糖酵解途径中的持家酶的广谱组合型疫苗,其是以至少两种糖酵解途径来源的持家酶的关键表位相连接而形成的重组蛋白作为抗原成分。本发明还公开了所述水产病原菌糖酵解途径中的持家酶的广谱组合型疫苗在防治水产病原菌对鱼类的感染中的应用。本发明的广谱组合型疫苗,其是将具有免疫活性的多肽片段PGK2、PGK3和PGM1组合免疫、将PGK2、PGK3和ENO1组合免疫、将PGM1与HK3组合免疫、以及将PGM1与ENO1组合免疫,均具有良好的免疫作用,可以用于研制使用方便、高效、易商品化大规模生产、切实有效的亚单位疫苗,用于水产养殖多病原共感染的免疫防治,具有良好的应用前景。

技术研发人员:吴海珍;范建华;包秋文;马可
受保护的技术使用者:华东理工大学
技术研发日:2020.03.09
技术公布日:2020.07.17
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