一种黄芪桂枝五物汤及其提取工艺

1.本发明属于中药提取技术领域，具体涉及一种黄芪桂枝五物汤及其提取工 艺。


背景技术：

2.糖尿病周围神经病变(diabetic peripheral neuropathy，dpn)是糖尿病的常 见并发症，具有高致残率和致死率。dpn的症状表现和病机同中医的“血痹
”ꢀ
范畴吻合，临床研究表明，黄芪桂枝五物汤(huangqi guizhi wuwu decoction， hgwd)对dpn有较好的治疗作用。该方始由黄芪、桂枝、芍药、生姜和大枣 五味药配伍而成，具补益气血、温通卫阳、散寒除痹之功。
3.现有的黄芪桂枝五物汤的提取方法有多种，主要采用乙醇提取法、水煎煮 法、超声波提取法和微波提取法，但上述方法各有优缺点，如乙醇提取法中乙 醇的成本高，具有危险性(高浓度酒精易燃)；超声波以及微波提取所需的设备复 杂，成本较高；水煎煮法中煎煮时间长，有效成分难以分离，有效成分的提取 率和纯度较低。


技术实现要素：

4.针对上述现有技术，本发明提供一种黄芪桂枝五物汤及其提取工艺，以提 高有效成分的提取率。
5.为了达到上述目的，本发明所采用的技术方案是：提供一种黄芪桂枝五物 汤，包括以下质量份原料：黄芪13.8份、桂枝13.8份、白芍13.8份、生姜13.8 份和大枣20～40份。
6.本发明还提供上述黄芪桂枝五物汤的提取工艺，包括以下步骤：
7.(1)称取药材按料液比1:3加入水，于室温下浸泡60～90min，再煎煮2h 后过滤；
8.(2)取步骤(1)过滤后的药材，按料液比1:3～5加入水，于室温下浸泡 60～90min，再煎煮1h后过滤；
9.(3)取步骤(2)过滤后的药材，按料液比1:3～5加入水，于室温下浸泡 60～90min，再煎煮1h后过滤；
10.(4)将步骤(1)～(3)所得滤液合并后，再减压浓缩，即得。
11.进一步，步骤(1)～(3)中过滤为经150～250目滤布滤过。
12.本发明的有益效果是：通过调整浸泡时间、提取次数、提取时间、溶剂倍 量来提高总多糖、黄芪甲苷、芍药苷的提取量和干膏得率，分别可达0.88mg
·
g
‑1、 22.55mg
·
g
‑1、15.83mg
·
g
‑1、23.02％。
具体实施方式
13.下面结合实施例对本发明的具体实施方式做详细的说明。
14.实施例1
15.一种黄芪桂枝五物汤，包括以下质量份原料：黄芪13.8份、桂枝13.8份、 白芍13.8份、生姜13.8份和大枣20份。
16.上述黄芪桂枝五物汤的提取工艺，包括以下步骤：(1)称取药材按料液比 1:3加入水，于室温下浸泡60min，再煎煮2h后经200目滤布过滤；
17.(2)取步骤(1)过滤后的药材，按料液比1:4加入水，于室温下浸泡60min， 再煎煮1h后经200目滤布过滤；
18.(3)取步骤(2)过滤后的药材，按料液比1:4加入水，于室温下浸泡60min， 再煎煮1h后经200目滤布过滤；
19.(4)将步骤(1)～(3)所得滤液合并后，再减压浓缩，即得。
20.实施例2
21.一种黄芪桂枝五物汤，包括以下质量份原料：黄芪13.8份、桂枝13.8份、 白芍13.8份、生姜13.8份和大枣30份。
22.上述黄芪桂枝五物汤的提取工艺，包括以下步骤：(1)称取药材按料液比 1:3加入水，于室温下浸泡75min，再煎煮2h后经150目滤布过滤；
23.(2)取步骤(1)过滤后的药材，按料液比1:5加入水，于室温下浸泡75min， 再煎煮1h后经150目滤布过滤；
24.(3)取步骤(2)过滤后的药材，按料液比1:5加入水，于室温下浸泡75min， 再煎煮1h后经150目滤布过滤；
25.(4)将步骤(1)～(3)所得滤液合并后，再减压浓缩，即得。
26.实施例3
27.一种黄芪桂枝五物汤，包括以下质量份原料：黄芪13.8份、桂枝13.8份、 白芍13.8份、生姜13.8份和大枣40份。
28.上述黄芪桂枝五物汤的提取工艺，包括以下步骤：(1)称取药材按料液比 1:3加入水，于室温下浸泡90min，再煎煮2h后经250目滤布过滤；
29.(2)取步骤(1)过滤后的药材，按料液比1:3加入水，于室温下浸泡90min， 再煎煮1h后经250目滤布过滤；
30.(3)取步骤(2)过滤后的药材，按料液比1:3加入水，于室温下浸泡90min， 再煎煮1h后经250目滤布过滤；
31.(4)将步骤(1)～(3)所得滤液合并后，再减压浓缩，即得。
32.对比例1
33.一种黄芪桂枝五物汤，包括以下质量份原料：黄芪13.8份、桂枝13.8份、 白芍13.8份、生姜13.8份和大枣40份。
34.上述黄芪桂枝五物汤的提取工艺，包括以下步骤：(1)称取药材按料液比1:3加入水，于室温下浸泡30min，再煎煮2h后经250目滤布过滤；
35.(2)取步骤(1)过滤后的药材，按料液比1:3加入水，于室温下浸泡30min， 再煎煮1h后经250目滤布过滤；
36.(3)取步骤(2)过滤后的药材，按料液比1:3加入水，于室温下浸泡30min， 再煎煮1h后经250目滤布过滤；
37.(5)将步骤(1)～(3)所得滤液合并后，再减压浓缩，即得。
38.对比例2
39.一种黄芪桂枝五物汤，包括以下质量份原料：黄芪13.8份、桂枝13.8份、 白芍13.8
份、生姜13.8份和大枣20份。
40.上述黄芪桂枝五物汤的提取工艺，包括以下步骤：(1)称取药材按料液比 1:3加入水，于室温下浸泡60min，再煎煮2h后经200目滤布过滤；
41.(2)取步骤(1)过滤后的药材，按料液比1:2入水，于室温下浸泡60min， 再煎煮1h后经200目滤布过滤；
42.(3)取步骤(2)过滤后的药材，按料液比1:2入水，于室温下浸泡60min， 再煎煮1h后经200目滤布过滤；
43.(4)将步骤(1)～(3)所得滤液合并后，再减压浓缩，即得。
44.对比例3
45.实施例1
46.一种黄芪桂枝五物汤，包括以下质量份原料：黄芪13.8份、桂枝13.8份、 白芍13.8份、生姜13.8份和大枣20份。
47.上述黄芪桂枝五物汤的提取工艺，包括以下步骤：称取药材按料液比1:3加 入水，于室温下浸泡60min，再煎煮2h后经200目滤布过滤，再减压浓缩，即 得。
48.下面对实施例和对比例所得黄芪桂枝五物汤的总多糖、黄芪甲苷、芍药苷 的提取量和干膏得率进行测量。
49.1.黄芪甲苷含量测定：
50.测试溶液制备：量取实施例1所得黄芪桂枝五物汤的提取液25ml，加入 40ml水饱和的正丁醇萃取4次，合并正丁醇溶液，用氨试液充分洗涤2次，每 次50ml，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣用甲醇溶解并转移至5ml容量瓶中， 即得。
51.色谱条件：色谱柱为zorbax sb
‑
c18(250mm
×
4.6mm，5μm)；流动相 乙腈
‑
水(33:67)；流速：1.0ml
·
min
‑
1；柱温：30℃；进样量：20μl；检测器：蒸 发光散色检测器；漂移管温度：45℃；氮气流速：1.0ml
·
min
‑1；理论塔板数以 黄芪甲苷计不低于5000，分离度>1.5。
52.2.芍药苷含量测定
53.测试溶液制备：量取实施例1所得黄芪桂枝五物汤的提取液1ml于25ml 容量瓶中，加入50％甲醇20ml，超声10min，放冷，加入50％甲醇定容，摇匀， 即得。
54.色谱条件：色谱柱为zorbax sb
‑
c18(250mm
×
4.6mm，5μm)；流动相 乙腈
‑
0.1％甲酸水(12:88)；流速1ml
·
min
‑
1；柱温30℃；检测器：dad检测器； 检测波长：230nm；进样量：10μl；理论塔板数以芍药苷计不低于5000，分离 度>1.5，且阴性对照无干扰。
55.3.总多糖含量测定
56.测试溶液制备：量取实施例1所得黄芪桂枝五物汤的提取液5ml，加水定 容至10ml，摇匀，加入sevag试剂2ml，振摇后离心收集上清液，重复操作至 无沉淀。取上清液2ml，加入5倍量乙醇，冰箱静置过夜后离心(4000r，10min)， 沉淀用水溶解并转移至50ml容量瓶中，摇匀，精密量取5ml于50ml容量瓶 中，加水至刻度，摇匀即得。
57.4.干膏得率的测定：
58.测试溶液制备：量取实施例1所得黄芪桂枝五物汤的提取液10ml，置于已 经干燥至恒重的蒸发皿，水浴蒸干，于105℃干燥至恒重，精密称定，计算干膏 率。
59.5.综合评分＝[(总多糖提取量/总多糖最大提取量)
×
0.4724+(黄芪甲苷提取量 /黄芪甲苷最大提取量)
×
0.2854+(芍药苷提取量/芍药苷最大提取量)
×ꢀ
0.1697+(干膏
率/干膏率最大值)
×
0.0725]
×
100。
[0060]
表1为实施例和对比例所得黄芪桂枝五物汤中总多糖、黄芪甲苷、芍药苷 的提取量和干膏得率的测量结果。
[0061]
表1总多糖、黄芪甲苷、芍药苷的提取量和干膏得率
[0062][0063][0064]
虽然结合实施例对本发明的具体实施方式进行了详细地描述，但不应理解 为对本专利的保护范围的限定。在权利要求书所描述的范围内，本领域技术人 员不经创造性劳动即可作出的各种修改和变形仍属本专利的保护范围。