一种治疗骨关节炎的药物及其制备方法

一种治疗骨关节炎的药物及其制备方法
发明领域：
1.本发明涉及一种治疗骨关节炎的药物(又名：鸡胚地龙膏)及其制备方法，属于药品技术的领域。
技术背景：
2.骨关节炎一种退行性病变，系由于增龄、肥胖、劳损、创伤、关节先天性异常、关节畸形等诸多因素引起的关节软骨退化损伤、关节边缘和软骨下骨反应性增生。本病多见于中老年人群，好发于负重关节及活动量较多的关节(如，颈椎、腰椎、膝关节、髋关节等)。过度负重或使用这些关节，均可促进退行性变化的发生。临床表现为缓慢发展的关节疼痛、压痛、僵硬、关节肿胀、活动受限和关节畸形等。目前的治疗方法有以下方面：首先、消炎镇痛药物可减轻或控制症状，但应在评估患者风险因素后慎重使用且不宜长期服用。其次、使用软骨保护剂如硫酸氨基葡萄糖具有缓解症状和改善功能的作用，同时长期服用可以延迟疾病的结构性进展。最后、对晚期病例，在全身情况能耐受手术的条件下，行人工关节置换术，但手术有一定风险，而且费用较高。
3.本方为水族验方，水族人民长期居住在高温、潮湿、多雨、瘴疠流行严重的地区，在这种交通不便，经济落后的地理环境中，水族人民在长期生产、生活实践中，积累了丰富的医疗经验，逐步形成了适应自身特点的，具有民族特色的水族医药。中药膏药是直接敷贴于体表，通过辛香走窜极强的引经药物，渗透入皮肤，内传经络、脏腑，起到行气活血、通络伸筋、消肿止痛的功效，在受伤的骨头、关节、软组织上外包膏药，适用于关节疼痛、局部淤肿、关节屈伸不利的骨关节炎人群，制成的药物疗效显著，具有安全、无毒副作用、作用方便、药性稳定、止痛效果肯定的优点。
4.本专利申请得到了2019科技部国家重点研发计划中医药现代化研究《十五个少数民族医防治常见病特色诊疗技术、方法、方药整理与示范研究》(项目编号：2019yfc1712500，课题编号：2019yfc1712504)项目支持。


技术实现要素：

5.本发明所要解决的技术问题在于提供一种治疗骨关节炎的药物(又名：鸡胚地龙膏)及其制备方法。所述药物具有行气活血、通络伸筋、消肿止痛的功效，适用于关节疼痛、局部淤肿、关节屈伸不利的骨关节炎人群，。
6.为解决以上技术问题，本发明采用以下技术方案实现：
7.一种治疗骨关节炎的药物，按照重量组份计算，由鸡胚500-1500份、地龙100-900份、补骨脂100-900份、烫骨碎补100-900份、冰片10-190份、栀子200-1000份、泽兰50-800份、白芷20-500份、马钱子10-190份、秦艽100-900份、伸筋草100-900份、豨莶草100-900份、土茯苓100-900份、白屈菜80-650份及辅料制备而成。
8.具体地说，所述治疗骨关节炎的药物，按照重量组份计算，由鸡胚900-1100份、地龙400-600份、补骨脂400-600份、烫骨碎补400-600份、冰片50-150份、栀子500-700份、泽兰
300-500份、白芷100-300份、马钱子50-150份、秦艽400-600份、伸筋草400-600份、豨莶草400-600份、土茯苓400-600份、白屈菜200-400份及辅料制备而成。
9.更具体地说，所述所述治疗骨关节炎的药物，按照重量组份计算，由鸡胚1000份、地龙500份、补骨脂500份、烫骨碎补500份、冰片100份、栀子600份、泽兰400份、白芷200份、马钱子100份、秦艽500份、伸筋草500份、豨莶草500份、土茯苓500份、白屈菜300份及辅料制备而成。
10.前述治疗骨关节炎药物的制备方法为：按照比例称取方中所有药材，按照常规的制备方法进行加工，与药物中可以接受的药用辅料和基质进行组合，并制成相应的药物制剂。
11.具体地说，前述治疗骨关节炎药物的制备方法为：按照组方比例称取各药材，除冰片外其余药材粉碎成粗粉，按照常规的制备方法进行加工，炼制成膏，再加入冰片细粉，搅拌均匀涂布在基质上，制成相应的药物制剂。
12.所述药物制剂为硬膏剂、橡胶膏剂、凝胶膏剂。
13.所述硬膏剂这样制备：按照处方比例称取各药材(除冰片)，粉碎成粗粉；另取2倍量的麻油微热后，加入药材粗粉(除冰片)，加热并不断搅拌，直至药料炸至表面深褐色内部焦黄为度；温度达220度，炸好后捞去药渣，去渣后的油为药油；取上药油继续熬炼，待油温度上升到320度，改用中火熬炼，直到取少许药油滴于水中，不散开成珠状即可；药油炼成后，离火下制成量50％的红丹，边加边搅动，搅成粘稠的膏体，膏药不粘手，拉丝不断即得膏药；膏药制成后放入冷水中浸泡去火毒，每一日换一次水，连续七日；膏药团置于容器中，在文火上熔化，加入按照处方比例制成细粉的冰片，均匀涂布在膏药布上，即得。
14.所述橡胶膏剂这样制备：按照处方比例称取各药材(除冰片)，用6倍量50％乙醇浸泡0.5h，于80℃回流提取2次，每次2小时，两次提取液液合并，混匀，浓缩成原药液的80％时，趁热过滤，滤液浓缩至80℃时相对密度为1.20-1.30的浸膏；另取10倍量的生橡胶，在50℃干燥后，切成条块，在炼胶机中塑炼成网状薄片，摊开放冷，消除静电后，浸于适量汽油中浸泡20小时，待完全溶胀成凝胶状后移人打膏机中，搅拌3小时后，分次加人制成量2％凡士林、5％羊毛脂、10％氧化锌和1％松香制成塞质，再加人浸膏和按照处方比例制成细粉的冰片，搅拌均匀，涂膏，快速干燥后加衬、切割及包装，即得。
15.所述凝胶膏剂这样制备：按照处方比例称取各药材(除冰片)，用8倍量50％乙醇浸泡0.5h，于80℃回流提取3次，每次1小时，三次提取液液合并，混匀，浓缩成原药液的80％时，趁热过滤，滤液浓缩至80℃时相对密度为1.20-1.30的浸膏，该浸膏加入制成量50％的水，备用；另取聚丙烯酸钠20g、明胶10g和微粉硅胶2g混合均匀后加入甘油30g，混合物倒入浸膏中，加入按照处方比例制成细粉的冰片，均匀涂于无纺布上，厚度约1.5mm左右，烘干0.5h，室温固化48h，盖上背衬层，密封包装，即得。
16.发明所述药物组合物在制成药剂时，单位剂量的药剂可含有本发明的药物活性物质0.1-1000mg，其余为药学上可接受的辅料。药学上可接受的辅料以重量计可以是制剂总重量的0.1-99.9％。
17.本发明所述药物由鸡胚、地龙、补骨脂、烫骨碎补、冰片、栀子、泽兰、白芷、马钱子、秦艽、伸筋草、豨莶草、土茯苓、白屈菜及辅料制备而成。各成分性质及功效如下：鸡胚为鸡的胚胎(英文名：chick embryo or embryonated egg)，是经过孵化，但又未能孵出小鸡的
鸡蛋，鸡蛋内的胚胎已经发育，剥开蛋壳，能看到小鸡的雏形，细软的绒毛，甚至还可以看到鸡骨头；要选用自然孵化的活鸡仔胎，死胎的千万不可食用；具有补气、养颜美容、保健补血之功效，在《本草纲目》中记载：“鸡胚蛋有治骨关节炎、偏骨关节炎、头疯病及四肢疯瘴之功能；”鸡仔胎的营养价值不错，里面含有的矿物质、维生素丰富，比普通鸡蛋营养价值高，可以改善缺硒的情况，还有抗衰老作用。地龙品为钜蚓科动物参环毛蚓pheretima aspergillum(e.perrier)、通俗环毛蚓pheretima vulgaris chen、威廉环毛蚓pheretima guillelmi(michaelsen)或栉盲环毛蚓pheretima pectinifera michaelsen的干燥；前一种习称“广地龙”后三种习称“沪地龙”；广地龙春季至秋季捕捉，沪地龙夏季捕捉，及时剖开腹部，除去内脏和泥沙，洗净，晒干或低温干燥；味咸，性寒；归肝、脾、膀胱经；具有清热定惊、通络、平喘、利尿的功效；用于高热神昏、惊痫抽搐、关节麻痹、肢体麻木、半身不遂、肺热喘咳、水肿尿少。补骨脂品为豆科植物补骨脂psoralea corylifolia l.的干燥成熟果实，秋季果实成熟时采收果序，晒干，搓出果实，除去杂质；味辛、苦，性温；归肾、脾经；具有温肾助阳、纳气平喘、温脾止泻的功效；外用具有消风祛斑的功效；用于肾阳不足、阳痿遗精、遗尿尿频、腰滕冷痛、肾虚作喘、五更泄泻；外用治白癜风、斑秃。烫骨碎补为骨碎补科davallia mariesii moore ex bak.的干燥根状茎的炮制品，制备方法为取沙子置锅内，用武火炉热后，加入净骨碎补或片，不断翻动，烫至鼓起时，取出，筛去沙子，撞去毛，放凉即得；味苦，性温；归肾、肝经；具有补肾强骨，续伤止痛、散瘀止痛、接骨续筋、治牙疼、腰疼、久泻等功效；用于肾虚腰痛，耳鸣耳聋，牙齿松动，跌扑闪挫，筋骨折伤；外治斑秃，白癜风。冰片为樟科植物棒cinnamomum camphora(l.)presl的新鲜枝、叶经提取加工制成；味辛、苦，性凉；归心、脾、肺经具有开窍醒神，淸热止痛；用于热病神昏、惊厥，中风痰厥，气郁暴厥，中恶昏迷，胸痹心痛，目赤，口疮，咽喉肿痛，耳道流脓。栀子为茜草科植物扼子gardenia jasminoides ellis的干燥成熟果实；9～11月果实成熟呈红黄色时采收，除去果梗和杂质，蒸至上气或置沸水中略烫，取出，干燥；味苦，性寒。归心、肺、三焦经；具有泻火除烦，清热利湿，凉血解毒；外用消肿止痛的功效；用于热病心烦，湿热黄疸，淋证涩痛，血热吐衄，目赤肿痛，火毒疮疡；外治扭挫伤痛。泽兰为唇形科植物毛叶地瓜儿苗lycopus lucidus turcz.var.hirtus regel的干燥地上部分；夏、秋二季莲叶茂盛时采割，晒干；味苦、辛，性微温；归肝、脾经；具有活血调经，祛瘀消痈，利水消肿的功效；用于月经不调，经闭，痛经，产后瘀血腹痛，疮痈肿毒，水肿腹水。白芷为伞形科植物白芷angelica dahurica(fisch.ex hoffm.)benth.et hook.f.或杭白芷angelica dahurica(fisch.ex hoffm.)benth.et hook.f.var.formosana(boiss.)shan et yuan的干燥根；夏、秋间叶黄时采，除去须根和泥沙，晒干或低温干燥；味辛，性温；归胃、大肠、肺经；具有解表散寒，祛风止痛，宜通鼻窍，燥湿止带，消肿排脓的功效；用于感冒骨关节炎，眉梭骨痛，鼻塞流涕，鼻鼽，鼻渊，牙痛，带下，疮疡肿毒。马钱子为马钱科植物马钱strychnos nux vomical.的干燥成熟种子；冬季采收成熟果实，取出种子，晒干；味苦，性温、有大毒；归肝、脾经；具有通络止痛，散结消肿的功效；用于跌打损伤，骨折肿痛，风湿顽痹，麻木瘫痪，痈疽疮毒，咽喉肿痛。秦艽为龙胆科植物秦艽gentiana macrophylla pall.、麻花秦艽gentiana straminea maxim.、粗莲秦艽gentiana crassicaulis duthie ex burk.或小秦艽gentiana dahurica fisch.的干燥根；前三种按性状不同分别习称“秦艽”和“麻花艽”，后一种习称“小秦艽”；春、秋二季采挖，除去泥沙；秦艽和麻花艽晒软，堆置“发汗”至表面呈红黄色或灰黄色时，摊开晒干，或不经“发汗”直接晒干；小秦艽趁鲜时搓去黑皮，晒干；味辛、苦，性平；归胃、肝、胆经；具有怯风湿，清湿热，止痹痛，退虚热的功效；用于风湿痹痛，中风半身不遂，筋脉拘挛，骨节酸痛，湿热黄疸，骨蒸潮热，小儿疳积发热。伸筋草为石松科植物石松lycopodium japonicum thunb.的干燥全草；夏、秋二季茎叶茂盛时采收，除去杂质，晒干；味微苦、辛，性温；归肝、脾、肾经；具有祛风除湿，舒筋活络的功效；用于关节酸痛，屈伸不利。豨莶草为菊科植物稀莶siegesbeckia orientalisl.、腺梗稀莶siegesbeckia pubescens makino或毛梗稀莶siegesbeckia glabrescens makino的干燥地上部分；夏、秋二季花开前和花期均可采割，除去杂质，晒干；味辛、苦，性寒；归肝、肾经；具有祛风湿，利关节，解毒的活血；用于风湿痹痛，筋骨无力，腰膝酸软，四肢麻痹，半身不遂，风疹湿疮。土茯苓为百合科植物光叶菝葜smilax glabra roxb.的干燥根茎；夏、秋二季采挖，除去须根，洗净，干燥；或趁鲜切成薄片，干燥；味甘、淡，性平；归肝、胃经；具有解毒，除湿，通利关节的功效；用于梅毒及汞中毒所致的肢体拘挛，筋骨疼痛；湿热淋浊，带下，痈肿，瘰疬，疥癣。白屈菜为罂粟科植物白屈菜chelidonium majus l.的干燥全草；夏、秋二季采，除去泥沙，阴干或晒干；味苦，性凉；有毒；归脾、肺经；具有解痉止痛，止咳平喘的功效；用于胃脘挛痛，咳嗽气喘，百日咳。
18.方解：《理瀹骈文》曰:外治之理,即内治之理,外治之药,亦即内治之药；所异者,法耳。外治之法,药物可直达病所。用膏贴之,闭塞其气,使药性从毛孔而入腠理,通经贯络,或提而出之,攻而激之,较之服药尤有利,此至妙之法也。现代药理学的研究表明，活血化瘀生肌长肉类外用中药含有大量免疫激活物,在细胞之间、细胞与体液之间起调节作用,加快出血水肿吸收,使组织缺氧,乳酸堆积,ph下降,从而加强有氧代谢,促进肌肉纤维损伤后再生,是促进损伤组织愈合的基础。
19.鸡胚地龙膏主要由鸡胚、地龙、补骨脂、烫骨碎补、冰、豨莶草、土茯苓、白屈菜等14味中药组成。该方以活血化瘀，祛风除湿，消肿止痛为治则,用烫骨碎补为温药,味辛,活络,补肾,补骨脂温暖水土，消化饮食，升达脾胃，收敛滑泄，补脾，二者脾肾双补，合用为君药。辅以栀子、泽兰、白芷、马钱子、秦艽、伸筋草消肿散结，破血消徵，祛风除湿，舒筋活络，散瘀止痛。豨莶草治四肢麻痹，筋骨疼痛，腰膝无力，疟疾，疔疮肿毒，外伤出血。以上诸药共为臣用,助君药一臂之力。佐以土茯苓强筋骨，去风湿，利关节；白屈菜镇痛，利尿解毒；冰片通诸窍，散关节郁火，消肿止痛。三药共用，仅防君臣之药行气过盛伤血、瘀血日久发热变毒,促使溢出脉外血化水利尿而出,佐药具有清热化瘀而不伤正气,渗透利水化瘀而通经络。地龙以其为血肉有情，穿透之性优于本草，故其可通经活络，为佐助之用。妙用出壳之小鸡血肉有情之品,益气补精生肌,引药入骨肉血脉为使药。使药物通过皮肤直接作用于病所,发挥诸药之功。纵观全方组成,君臣佐使,相得益彰,诸药合用可使腠理疏通,气血流畅,活血消肿兼顾养血凉血,散瘀止痛不忘壮骨(与软骨)生新。临床观察显示,鸡胚地龙膏在应于骨关节炎急性发作期，用药第4-5天后,患者疼痛、肿胀情况与治疗前比较已经有明显好转,具有较为明显的镇痛消炎消肿作用,这可能是通过改善微循环,影响组织细胞分泌的活性介质,促进局部炎性因子的代谢,阻止血小板的聚集、血管收缩及血栓形成,减少组织损伤,增强组织的修复能力而达到的。该药是一种治疗骨关节炎急性期，软组织损伤、关节周围诸筋脉、骨骼疼痛较为理想的药物。
20.本方是治疗骨关节炎的外用制剂，适用于因膝骨关节炎导致的关节及膝周疼痛、活动不利乃至关节活动动受限、膝关节轻及中度肿胀。
21.从安全性、稳定性和疗效方面出发，本发明选用外用膏剂来制备药物制剂。硬膏剂制备过程中膏药勿太过或不及，如不及则功效难求，太过则影响膏药黏度。下丹注意掌握火候和剂量大小，温度低影响丹油化合，其色不泽。大火易燃，丹量小则膏嫩，易流失起不到固定作用。丹量大则膏老，质脆而不粘，贴敷易脱落。而橡胶膏剂和凝胶膏剂加入的药材先经过乙醇提取，乙醇量、提取时间与次数均会影响有效成分的提出率，若加乙醇量不足,则有可能造成溶媒不能浸过处方药材,而如果加热提取的时间不够,则药材成分没能充分提取出来,影响药材的浸出率。加热提取时间过长，温度过高，则会导致有效成分的分解。反而降低药材的提取率。发明人经过实验研究证明：药材经过2-3次加热熬炼基本上能把有效成分溶解出来。
22.与现有技术相比，本发明选用鸡胚、地龙、补骨脂、烫骨碎补、冰片、栀子、泽兰、白芷、马钱子、秦艽、伸筋草、豨莶草、土茯苓、白屈菜组方，该发明为水族验方，并得到国家科技部项目的支持，具有行气活血，通络伸筋，消肿止痛的功效，通过在受伤的骨头、关节、软组织上外包膏药，适用于关节疼痛、局部淤肿，关节屈伸不利的骨关节炎人群，制成的药物疗效显著，具有安全、无毒副作用、作用方便、药性稳定、止痛效果佳的优点，达到了发明目的。
23.以下通过实施例进一步说明本发明，但不作为对本发明的限制。
具体实施方式：
24.实施例1：
25.处方：鸡胚1000g、地龙500g、补骨脂500g、烫骨碎补500g、冰片100g、栀子600g、泽兰400g、白芷200g、马钱子100g、秦艽500g、伸筋草500g、豨莶草500g、土茯苓500g、白屈菜300g。
26.工艺：按照处方比例称取各药材(除冰片)，粉碎成粗粉；另取2倍量的麻油微热后，加入药材粗粉(除冰片)，加热并不断搅拌，直至药料炸至表面深褐色内部焦黄为度；温度达220度，炸好后捞去药渣，去渣后的油为药油；取上药油继续熬炼，待油温度上升到320度，改用中火熬炼，直到取少许药油滴于水中，不散开成珠状即可；药油炼成后，离火下制成量50％的红丹，边加边搅动，搅成粘稠的膏体，膏药不粘手，拉丝不断即得膏药；膏药制成后放入冷水中浸泡去火毒，每一日换一次水，连续七日；膏药团置于容器中，在文火上熔化，加入按照处方比例制成细粉的冰片，均匀涂布在膏药布上，即得硬膏剂。
27.用法用量：外用，先将膏药背敷在热水壶(杯)外或酒精灯、蜡烛的微火上熨烤化开，等膏药不烫皮肤时再贴于患处，可持续贴1-2周。
28.实施例2：
29.处方：鸡胚500g、地龙100g、补骨脂100g、烫骨碎补100g、冰片10g、栀子200g、泽兰50g、白芷20g、马钱子10g、秦艽100g、伸筋草100g、豨莶草100g、土茯苓100g、白屈菜80g。
30.工艺：按照处方比例称取各药材(除冰片)，用6倍量50％乙醇浸泡0.5h，于80℃回流提取2次，每次2小时，两次提取液液合并，混匀，浓缩成原药液的80％时，趁热过滤，滤液浓缩至80℃时相对密度为1.20-1.30的浸膏；另取10倍量的生橡胶，在50℃干燥后，切成条块，在炼胶机中塑炼成网状薄片，摊开放冷，消除静电后，浸于适量汽油中浸泡20小时，待完全溶胀成凝胶状后移人打膏机中，搅拌3小时后，分次加人制成量2％凡士林、5％羊毛脂、
10％氧化锌和1％松香制成塞质，再加人浸膏和按照处方比例制成细粉的冰片，搅拌均匀，涂膏，快速干燥后加衬、切割及包装，即得橡胶膏剂。
31.用法用量：外用，直接贴于患处，贴好后可以适当热敷5分钟，可持续贴1-2周。
32.实施例3：
33.处方：鸡胚650g、地龙100g、补骨脂800g、烫骨碎补550g、冰片50g、栀子300g、泽兰800g、白芷20g、马钱子190g、秦艽900g、伸筋草900g、豨莶草900g、土茯苓900g、白屈菜650g。
34.工艺：按照处方比例称取各药材(除冰片)，用8倍量50％乙醇浸泡0.5h，于80℃回流提取3次，每次1小时，三次提取液液合并，混匀，浓缩成原药液的80％时，趁热过滤，滤液浓缩至80℃时相对密度为1.20-1.30的浸膏，该浸膏加入制成量50％的水，备用；另取聚丙烯酸钠20g、明胶10g和微粉硅胶2g混合均匀后加入甘油30g，混合物倒入浸膏中，按照处方比例制成细粉的冰片均匀涂于无纺布上，厚度约1.5mm左右，烘干0.5h，室温固化48h，盖上背衬层，密封包装，即得凝胶膏剂。
35.用法用量：外用，撕开背衬层后，直接贴于患处，可持续贴1-2周。
36.实施例4：
37.处方：鸡胚1500g、地龙900g、补骨脂900g、烫骨碎补900g、冰片190g、栀子1000g、泽兰800g、白芷500g、马钱子120g、秦艽700g、伸筋草500g、豨莶草500g、土茯苓300g、白屈菜250g。
38.工艺：按照处方比例称取各药材(除冰片)，粉碎成粗粉；另取2倍量的麻油微热后，加入药材粗粉(除冰片)，加热并不断搅拌，直至药料炸至表面深褐色内部焦黄为度；温度达180度，炸好后捞去药渣，去渣后的油为药油；取上药油继续熬炼，待油温度上升到360度，改用中火熬炼，直到取少许药油滴于水中，不散开成珠状即可；药油炼成后，离火下制成量60％的红丹，边加边搅动，搅成粘稠的膏体，膏药不粘手，拉丝不断即得膏药；膏药制成后放入冷水中浸泡去火毒，每一日换一次水，连续七日；膏药团置于容器中，在文火上熔化，加入按照处方比例制成细粉的冰片，均匀涂布在膏药布上，即得硬膏剂。
39.用法用量：外用，先将膏药背敷在热水壶(杯)外或酒精灯、蜡烛的微火上熨烤化开，等膏药不烫皮肤时再贴于患处，可持续贴1-2周。
40.实施例5：
41.处方：鸡胚1000g、地龙600g、补骨脂100g、烫骨碎补700g、冰片190g、栀子500g、泽兰200g、白芷155g、马钱子100g、秦艽250g、伸筋草600g、豨莶草900g、土茯苓550g、白屈菜400g。
42.工艺：按照处方比例称取各药材(除冰片)，用4倍量50％乙醇浸泡0.5h，于80℃回流提取2次，每次1小时，两次提取液液合并，混匀，浓缩成原药液的80％时，趁热过滤，滤液浓缩至80℃时相对密度为1.20-1.30的浸膏；另取10倍量的生橡胶，在50℃干燥后，切成条块，在炼胶机中塑炼成网状薄片，摊开放冷，消除静电后，浸于适量汽油中浸泡20小时，待完全溶胀成凝胶状后移人打膏机中，搅拌3小时后，分次加人制成量2％凡士林、5％羊毛脂、10％氧化锌和1％松香制成塞质，再加人浸膏和按照处方比例制成细粉的冰片，搅拌均匀，涂膏，快速干燥后加衬、切割及包装，即得橡胶膏剂。
43.用法用量：外用，直接贴于患处，贴好后可以适当热敷5分钟，可持续贴1-2周。
44.实施例6：
45.处方：鸡胚550g、地龙800g、补骨脂150g、烫骨碎补900g、冰片80g、栀子250g、泽兰750g、白芷300g、马钱子190g、秦艽700g、伸筋草800g、豨莶草900g、土茯苓300g、白屈菜500g。
46.工艺：按照处方比例称取各药材(除冰片)，用10倍量50％乙醇浸泡0.5h，于80℃回流提取3次，每次1.5小时，三次提取液液合并，混匀，浓缩成原药液的80％时，趁热过滤，滤液浓缩至80℃时相对密度为1.20-1.30的浸膏，该浸膏加入制成量50％的水，备用；另取聚丙烯酸钠20g、明胶10g和微粉硅胶2g混合均匀后加入甘油30g，混合物倒入浸膏中，按照处方比例制成细粉的冰片，均匀涂于无纺布上，厚度约1.5mm左右，烘干0.5h，室温固化48h，盖上背衬层，密封包装，即得凝胶膏剂。
47.用法用量：外用，撕开背衬层后，直接贴于患处，可持续贴1-2周。
48.本发明进行了大量的实验研究，以下为本发明实验研究的结果：
49.实验例：药效学研究
50.一、抗炎作用试验：
51.1.实验动物和材料
52.动物：sd大鼠，spf级，6～8周龄，体重180～220g，由贵州医科大学实验动物中心提供：scxx(黔)2018-0001；实验动物使用许可证：syxk(黔)2014-001。按照国际实验动物保健和使用指导原则常规饲养，环境温度23～27℃，湿度50％～60％。试剂：戊巴比妥钠，木瓜蛋白酶(sigma，p3250-5g)，水合氯醛，青鹏软膏(青海省通天河藏药制药有限责任公司)；elisa试剂盒(南京建成)；多功能酶标仪(美国biotek)。
53.2实验方法
54.2.1动物分组：sd大鼠60只，体重210-230g，spf环境进行饲养，适应性饲养7d，无不适反应后将sd大鼠随机分为6组，即空白对照组、膝骨性关节炎模型组、阳性对照组、本专利发明药实施例1低剂量组、本专利发明药实施例1中剂量组、本专利发明药实施例1高剂量组，共6组，每组10只。
55.2.2大鼠膝骨性关节炎模型的构建：对于模型组和药物组大鼠，使用木瓜蛋白酶注射到大鼠关节腔。无菌条件下，用适量水合氯醛麻醉大鼠，将浓度为4％(w/v)的木瓜蛋白酶溶液0.2ml注射至大鼠双膝关节腔内，每隔2d注射一次，共注射2周，膝关节出现肿胀，功能活动障碍为造模成功。空白对照组注射生理盐水到关节腔。
56.2.3药物处理：模型制备成功后，进行相应的药物治疗，根据人鼠换算出服药量，每只大鼠按照体重贴患处给药，2次/日。空白对照组大鼠给药蒸馏水贴于患处；膝骨性关节炎模型组给予蒸馏水贴于患处；阳性对照组药物剂量为0.25ml；本专利发明硬膏剂按照实施例1低剂量、中剂量、高剂量组分别用贴剂量为0.125ml、0.25ml、0.5ml的本发明药实施例1贴于大鼠膝骨性关节炎模型大鼠患处。6组大鼠分别于建造模型成功给药后4周进行处理。
57.2.4观察和指标检测：期间观察大鼠一般情况(毛发光泽度、食量、体重、活动度、步态、精神状况等)。于药物处理4周后检测相关指标：动物麻醉后，采用腹腔静脉取血，离心后-80℃保存备用。检测血清细胞因子白介素(il)-4、il-10、il-1β、肿瘤坏死因子-α(tnf-α)水平以及超氧化物歧化酶(sod)和丙二醛(mda)水平；将全部大鼠进行处死后对其双后膝关节周围消毒，将1ml注射用水经膝关节两侧进针，通过髌上韧带插入关节腔内反复抽吸，尔后取出关节积液，离心，-80℃保存备用。分别取各组上清检测主要炎症因子il-1β、tnf-α
和基质金属蛋白酶-3(mmp-3)的含量变化；采用elisa法检测各因子，操作步骤参照试剂盒说明书进行。
58.3实验结果
59.3.1大鼠造模后一般情况：木瓜蛋白酶注射1d后大鼠均出现精神异常，反应迟钝，双下肢肿胀，活动不利。
60.3.2结果采用均数
±
标准差表示，采用spss20.0软件对数据进行统计分析。血清和关节腔积液相关因子结果如表1和表2所示。从结果可以看出，与模型组相比，对照组、实施例1低、中、高剂量组均有显著性差异(p《0.05)，显示阳性对照组和实施例组都呈现较好的抗炎效果，且实施例1中、高剂量组的抗炎效果显著高于阳性对照组，提示本专利发明药物获得较好的抗炎效果。
61.表1各实验组血清中相关因子含量的比较(n＝10)
[0062][0063]
表2各实验组关节腔积液中相关因子含量的比较(n＝10)
[0064][0065]
4结论
[0066]
用本专利发明药对膝骨性关节炎sd大鼠动物模型进行干预，测试药物的抗炎效果。结果显示本发明药物组合能减轻膝骨关节炎大鼠关节肿胀、皮温升高等症状，改善鼠膝关节功能，并通过降低il-1β、il-18、tnf-α、mda和mmp-3的浓度，升高il-10、sod的浓度，减轻炎症，延缓膝骨关节炎进展，提示实施例药物具有抗模型动物骨性关节炎的作用，适用于
骨关节炎的预防和治疗。
[0067]
二、镇痛消炎作用试验
[0068]
(一)醋酸扭体实验
[0069]
1实验动物和材料：spf级昆明种小鼠，体重20
±
2g，由贵州医科大学实验动物中心提供，实验动物使用许可证：syxk(黔)2014-001。青鹏软膏(青海省通天河藏药制药有限责任公司)
[0070]
2实验方法：常规适应性喂养小鼠1周后，将小鼠随机分为5组，每组10只，分别为空白对照组、阳性对照组、实施例1低剂量组、实施例1中剂量组、实施例1高剂量组。用脱毛膏涂于小鼠背部脊柱两侧(1cm
×
1cm)以脱毛，5分钟后，用纱布擦洗干净。空白对照组小鼠不作处理；低、中、高剂量实施例1鸡胚地龙膏组涂抹量分别为0.125ml/只、0.25ml/只、0.5ml/只涂于小鼠剃毛处皮肤上；阳性对照组涂抹青鹏软膏0.25ml/只，以纱布固定。全部小鼠每天涂抹1次，连续涂药10d。于第10d各组小鼠腹腔注射0.6％醋酸0.02ml/g，随即记录小鼠在30min内发生的扭体次数，计算镇痛百分率：镇痛百分率(％)＝(空白对照组扭体次数-给药组扭体次数)/空白对照组平均扭体次数
×
100％。
[0071]
3实验结果：以均数
±
标准差表示结果，结果见表3。
[0072]
表3各组小鼠对冰醋酸的扭体次数及镇痛率比较(n＝10)
[0073][0074]
4结论本发明药物提供的中药组合物由鸡胚、地龙、补骨脂、烫骨碎补等药物组成，所获得的膏剂具有良好的药效，由上述实验可知，本发明膏剂对于镇痛具有明显的效果。
[0075]
(二)二甲苯致小鼠耳肿胀实验
[0076]
1实验动物和分组与(一)操作相同。5组小鼠均每天涂药1一次，连续涂药10d。
[0077]
2实验方法：于第10d药物干预后30min，将二甲苯涂于小鼠右耳两面各30μl，左耳作为对照，涂二甲苯30min后采取颈椎脱臼法处死小鼠，沿耳廓基线剪下两耳，用直径8mm打孔器分别在同一部位打下圆耳片，电子天平称取质量，计算肿胀度与肿胀抑制率。肿胀度＝右耳片重-左耳片重。肿胀抑制率＝(空白对照组平均肿胀度-给药组平均肿胀度)/空白对照组平均肿胀度
×
100％。
[0078]
3实验结果：以均数
±
标准差表示结果，如表4所示。
[0079][0080]
4结论：本发明以昆明种小鼠测试药物的消肿效果，由上述实验结果可知，本专利发明药物对消炎消肿有明显的疗效，且安全无副作用。