聚集诱导发光材料及其制备方法与应用与流程

1.本技术属于材料合成技术领域，尤其涉及一种聚集诱导发光材料及其制备方法与应用。


背景技术：

2.青霉素被发现以前，因感染致病菌致死的人群不计其数。1928年，英国科学家fleming在实验研究中最早发现青霉素，1943年青霉素实现量产，为感染性疾病的治疗带来了曙光。随着链霉素、万古霉素等更多种类抗生素被发现和量产，抗生素滥用现象日益严重，临床长期、广泛和超量的抗生素滥用导致了耐药细菌株及多重耐药细菌株(“超级细菌”)的出现。据统计，多重耐药菌株的医院院内感染率高达8％。发生院内耐药菌感染的多为抵抗力较弱人群，而重症加强护理病房(icu)多重耐药菌株感染是患者的最大死亡威胁。此类人群一旦感染耐药细菌，治疗预后不容乐观。多重耐药菌株的出现对传统抗生素治疗方法带来了巨大挑战，亟需开发一种不易诱发细菌多药耐药的光广谱抗菌药物或制剂，用于临床致病菌(尤其是多重耐药菌)的杀伤与细菌感染治疗。


技术实现要素：

3.本技术的目的在于提供一种聚集诱导发光材料及其制备方法与应用，旨在解决现有技术中材料无法对细菌进行快速标记并迅速杀菌的问题。
4.为实现上述申请目的，本技术采用的技术方案如下：
5.第一方面，本技术提供一种聚集诱导发光材料，聚集诱导发光材料包括采用化学键连接的代谢基团和聚集诱导发光基团，其中，代谢基团包括含有第一不饱和键的d-丙氨酸衍生物，聚集诱导发光基团包括含有第二不饱和键的4-(2-(4-二苯甲胺苯基乙烯)吡啶溴盐衍生物。
6.第二方面，本技术提供一种聚集诱导发光材料的制备方法，包括如下步骤：
7.提供含有第一不饱和键的d-丙氨酸衍生物和含有第二不饱和键的4-(2-(4-二苯甲胺苯基乙烯)吡啶溴盐衍生物；
8.将所述含有第一不饱和键的d-丙氨酸衍生物和所述含有第二不饱和键的4-(2-(4-二苯甲胺苯基乙烯)吡啶溴盐衍生物进行混合处理并进行点击化学反应，得到聚集诱导发光材料。
9.第三方面，本技术提供聚集诱导发光材料应用于标记和杀灭的细菌，其中，所述细菌包括细胞壁含有肽聚糖成分的革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌中的至少一种。
10.第四方面，本技术提供一种杀菌方法，采用聚集诱导发光材料进行杀菌，杀菌方法包括以下步骤：
11.提供待杀菌样品，
12.将待杀菌样品与聚集诱导发光材料混合进行孵育，得到共混液；
13.将共混液进行激光照射处理，得到杀菌后的样品。
14.本技术第一方面提供的聚集诱导发光材料，聚集诱导发光材料包括采用化学键连接的代谢基团和聚集诱导发光基团，其中，提供的代谢基团包括含有第一不饱和键的d-丙氨酸衍生物，其能够特异性结合并大量聚集在细菌细胞壁，实现对细菌进行准定定位、高效标记；提供的聚集诱导发光基团包括含有第二不饱和键的4-(2-(4-二苯甲胺苯基乙烯)吡啶溴盐衍生物，通过代谢基团进行定位标记后，再进行激光照射处理，使聚集诱导发光基团通过激光照射处理产生活性氧基团，实现在定位的细菌进行光动力杀伤，并且，代谢基团和聚集诱导发光基团通过含有的不饱和键进行加成反应以化学键连接，二者连接紧密，可实现对细菌进行快速标记和原位清除，具有检测快速、广谱抗菌、降低耐药等特点，在细菌尤其耐药菌临床治疗中应用前景广阔。
15.本技术第二方面提供的是聚集诱导发光材料的制备方法，该制备方法简单易操作，将提供的含有第一不饱和键的d-丙氨酸衍生物和含有第二不饱和键的4-(2-(4-二苯甲胺苯基乙烯)吡啶溴盐衍生物进行混合后进行点击化学反应，即可得到聚集诱导发光材料，制备过程不需要提供大型仪器设备，同时不许需要提供复杂的反应条件，反应简单，适用于广泛应用。
16.本技术第三方面提供的聚集诱导发光材料应用于标记和杀灭的细菌，由于提供的聚集诱导发光材料包括的代谢基团能够对细胞壁含有肽聚糖成分的革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌中的至少一种进行标记，可实现对细菌进行原位清除，检测速度快，应用效果好。
17.本技术第四方面提供的是一种利用聚集诱导发光材料进行杀菌的杀菌方法，该杀菌方法采用聚集诱导发光材料与细菌进行共孵育，使代谢基团通过合成细胞壁肽聚糖以参与细菌的合成过程，进行特异性标记细菌；再利用激光照射处理引发聚集诱导发光基团形成活性氧基团对细菌进行杀菌作用，实现快速、高效、定点杀菌处理。
附图说明
18.为了更清楚地说明本技术实施例中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
19.图1是本技术实施例提供的聚集诱导发光材料的aie效果图。
20.图2是本技术实施例提供的聚集诱导发光材料对细菌的标记效果图。
21.图3是本技术实施例提供的聚集诱导发光代谢材料活性氧生成效率结果图。
22.图4是本技术实施例提供的聚集诱导发光代谢材料对细菌的光动力杀伤效果图。
具体实施方式
23.为了使本技术要解决的技术问题、技术方案及有益效果更加清楚明白，以下结合实施例，对本技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本技术，并不用于限定本技术。
24.本技术中，术语“和/或”，描述关联对象的关联关系，表示可以存在三种关系，例如，a和/或b，可以表示：单独存在a，同时存在a和b，单独存在b的情况。其中a，b可以是单数或者复数。字符“/”一般表示前后关联对象是一种“或”的关系。
25.本技术中，“至少一个”是指一个或者多个，“多个”是指两个或两个以上。“以下至少一项(个)”或其类似表达，是指的这些项中的任意组合，包括单项(个)或复数项(个)的任意组合。例如，“a,b,或c中的至少一项(个)”，或，“a,b,和c中的至少一项(个)”，均可以表示：a,b,c,a-b(即a和b),a-c,b-c,或a-b-c，其中a,b,c分别可以是单个，也可以是多个。
26.应理解，在本技术的各种实施例中，上述各过程的序号的大小并不意味着执行顺序的先后，部分或全部步骤可以并行执行或先后执行，各过程的执行顺序应以其功能和内在逻辑确定，而不应对本技术实施例的实施过程构成任何限定。
27.在本技术实施例中使用的术语是仅仅出于描述特定实施例的目的，而非旨在限制本技术。在本技术实施例和所附权利要求书中所使用的单数形式的“一种”和“该”也旨在包括多数形式，除非上下文清楚地表示其他含义。
28.本技术实施例说明书中所提到的相关成分的重量不仅仅可以指代各组分的具体含量，也可以表示各组分间重量的比例关系，因此，只要是按照本技术实施例说明书相关组分的含量按比例放大或缩小均在本技术实施例说明书公开的范围之内。具体地，本技术实施例说明书中的质量可以是μg、mg、g、kg等化工领域公知的质量单位。
29.术语“第一“、“第二”仅用于描述目的，用来将目的如物质彼此区分开，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。例如，在不脱离本技术实施例范围的情况下，第一xx也可以被称为第二xx，类似地，第二xx也可以被称为第一xx。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括一个或者更多个该特征。
30.本技术实施例第一方面提供一种聚集诱导发光材料，聚集诱导发光材料包括采用化学键连接的代谢基团和聚集诱导发光基团，其中，代谢基团包括含有第一不饱和键的d-丙氨酸衍生物，聚集诱导发光基团包括含有第二不饱和键的4-(2-(4-二苯甲胺苯基乙烯)吡啶溴盐衍生物。
31.本技术实施例第一方面提供的聚集诱导发光材料，聚集诱导发光材料包括采用化学键连接的代谢基团和聚集诱导发光基团，其中，提供的代谢基团包括含有第一不饱和键的d-丙氨酸衍生物，其能够特异性结合并大量聚集在细菌细胞壁，实现对细菌进行准定定位、高效标记；提供的聚集诱导发光基团包括含有第二不饱和键的4-(2-(4-二苯甲胺苯基乙烯)吡啶溴盐衍生物，通过代谢基团进行定位标记后，再进行激光照射处理，使聚集诱导发光基团通过激光照射处理产生活性氧基团，实现在定位的细菌进行光动力杀伤，并且，代谢基团和聚集诱导发光基团通过含有的不饱和键进行加成反应以化学键连接，二者连接紧密，可实现对细菌进行快速标记和原位清除，具有检测快速、广谱抗菌、降低耐药等特点，在细菌尤其耐药菌临床治疗中应用前景广阔。
32.在一些实施例中，代谢基团与聚集诱导发光基团通过化学键连接形成聚集诱导发光材料。
33.在一些实施例中，代谢基团为含有第一不饱和键的d-丙氨酸衍生物，其中，第一不饱和键包括含氮原子的不饱和键。在一些实施例中，含有第一不饱和键的d-丙氨酸衍生物包括叠氮、四嗪、巯基、炔烃、反式环辛烯或烯烃修饰的d-丙氨酸中的任意一种。提供的代谢基团中含有的d-丙氨酸为细菌细胞壁肽聚糖的合成原料，能够参与细胞壁的合成，通过参与细菌的细胞壁的合成实现对细菌的快速且准确定位，有利于后续对细菌进行杀伤。在一些实施例中，聚集诱导发光基团包括含有第二不饱和键的4-(2-(4-二苯甲胺苯基乙烯)吡
啶溴盐衍生物，其中，第二不饱和键包括含碳原子的不饱和键。在一些实施例中，含有不饱和键的4-(2-(4-二苯甲胺苯基乙烯)吡啶溴盐衍生物包括炔烃、反式环辛烯、烯烃、叠氮、四嗪或巯基修饰的4-(2-(4-二苯甲胺苯基乙烯)吡啶溴盐中的任意一种，提供的聚集诱导发光基团在激光照射下，能够产生活性氧基团对细菌进行光动力杀伤，最终实现对细菌进行快速标记和原位清除。
34.在一些实施例中，聚集诱导发光材料中，代谢基团为3-四嗪-d-丙氨酸，聚集诱导发光基团为1-反式环辛烯-4-(2-(4-二苯甲胺苯基乙烯)吡啶溴盐。
35.在一些实施例中，聚集诱导发光材料的激发光波长为250～500nm；特征性荧光发射光谱为500～900nm。在一些具体实施例中，聚集诱导发光材料的激发光波长包括但不限于250nm、300nm、350nm、400nm、450nm、500nm；特征性荧光发射光谱包括但不限于500nm、550nm、600nm、650nm、700nm、750nm、800nm、850nm、900nm。
36.本技术实施例第二方面提供的一种聚集诱导发光材料的制备方法，包括如下步骤：
37.s01.提供含有第一不饱和键的d-丙氨酸衍生物和含有第二不饱和键的4-(2-(4-二苯甲胺苯基乙烯)吡啶溴盐衍生物；
38.s02.将所述含有第一不饱和键的d-丙氨酸衍生物和所述含有第二不饱和键的4-(2-(4-二苯甲胺苯基乙烯)吡啶溴盐衍生物进行混合处理并进行点击化学反应，得到聚集诱导发光材料。
39.本技术实施例第二方面提供的是聚集诱导发光材料的制备方法，该制备方法简单易操作，将提供的含有第一不饱和键的d-丙氨酸衍生物和含有第二不饱和键的4-(2-(4-二苯甲胺苯基乙烯)吡啶溴盐衍生物进行混合后进行点击化学反应，即可得到聚集诱导发光材料，制备过程不需要提供大型仪器设备，同时不许需要提供复杂的反应条件，反应简单，适用于广泛应用。
40.步骤s01中，提供含有第一不饱和键的d-丙氨酸衍生物和含有第二不饱和键的4-(2-(4-二苯甲胺苯基乙烯)吡啶溴盐衍生物；提供的含有第一不饱和键的d-丙氨酸衍生物和含有第二不饱和键的4-(2-(4-二苯甲胺苯基乙烯)吡啶溴盐衍生物如上文，为了节约篇幅，此处不再进行赘述。
41.在一些实施例中，含有第一不饱和键的d-丙氨酸衍生物和含有第二不饱和键的4-(2-(4-二苯甲胺苯基乙烯)吡啶溴盐衍生物的摩尔比为1：(0.1～10)。控制含有第一不饱和键的d-丙氨酸衍生物和含有第二不饱和键的4-(2-(4-二苯甲胺苯基乙烯)吡啶溴盐衍生物的摩尔比，有利于发生化学点击反应。在一些具体实施例中，含有第一不饱和键的d-丙氨酸衍生物和含有第二不饱和键的4-(2-(4-二苯甲胺苯基乙烯)吡啶溴盐衍生物的摩尔比选自1：0.1，1：0.5，1：1，1：1.5，1：2，1：2.5，1：3，1：3.5，1：4，1：4.5，1：5，1：5.5，1：6，1：6.5，1：7，1：7.5，1：8，1：8.5，1：9，1：9.5，1：10。
42.步骤s02中，将含有第一不饱和键的d-丙氨酸衍生物和含有第二不饱和键的4-(2-(4-二苯甲胺苯基乙烯)吡啶溴盐衍生物进行混合处理并进行点击化学反应，得到聚集诱导发光材料。
43.提供的含有第一不饱和键的d-丙氨酸衍生物和含有第二不饱和键的4-(2-(4-二苯甲胺苯基乙烯)吡啶溴盐衍生物包括的不饱和化学键进行加成反应从而实现连接。
44.在一些实施例中，当代谢基团为3-四嗪-d-丙氨酸，聚集诱导发光基团为1-反式环辛烯-4-(2-(4-二苯甲胺苯基乙烯)吡啶溴盐，将3-四嗪-d-丙氨酸与1-反式环辛烯-4-(2-(4-二苯甲胺苯基乙烯)吡啶溴盐混合处理，3-四嗪-d-丙氨酸中的四嗪基团与1-反式环辛烯-4-(2-(4-二苯甲胺苯基乙烯)吡啶溴盐中的反式环辛烯基团发生狄尔斯-阿尔德环加成反应，合成聚集诱导发光材料。
45.本技术实施例第三方面提供了一种聚集诱导发光材料应用于标记和杀灭的细菌，其中，所述细菌包括细胞壁含有肽聚糖成分的革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌中的至少一种。
46.本技术实施例第三方面提供的聚集诱导发光材料应用于标记和杀灭的细菌，由于提供的聚集诱导发光材料包括的代谢基团能够对细胞壁含有肽聚糖成分的革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌中的至少一种进行标记，可实现对细菌进行原位清除，检测速度快，应用效果好。
47.在一些实施例中，提供细菌包括但不限于大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌种的至少一种。
48.本技术实施例第四方面提供了一种杀菌方法，采用聚集诱导发光材料进行杀菌，杀菌方法包括以下步骤：
49.g01.提供待杀菌样品，
50.g02.将待杀菌样品与聚集诱导发光材料混合进行孵育，得到共混液；
51.g03.将共混液进行激光照射处理，得到杀菌后的样品。
52.本技术实施例第三方面提供的是一种利用聚集诱导发光材料进行杀菌的杀菌方法，该杀菌方法采用聚集诱导发光材料与细菌进行共孵育，使代谢基团通过合成细胞壁肽聚糖以参与细菌的合成过程，进行特异性标记细菌；再利用激光照射处理引发聚集诱导发光基团形成活性氧基团对细菌进行杀菌作用，实现快速、高效、定点杀菌处理。
53.步骤g01中，提供待杀菌样品，待杀菌样品中含有细菌，包括但不限于革兰氏阴性菌或革兰氏阳性菌。
54.步骤g02中，将待杀菌样品与聚集诱导发光材料混合进行孵育，得到共混液。
55.在一些实施例中，孵育的温度为36～37℃，孵育的时间为0.5～12小时。在一些具体实施例中，孵育的温度为37℃，孵育的时间为0.5小时、1小时、1.5小时、2小时、2.5小时、3小时、3.5小时、4小时、4.5小时、5小时、5.5小时、6小时、6.5小时、7小时、7.5小时、8小时、8.5小时、9小时、9.5小时、10小时、10.5小时、11小时、11.5小时、12小时、16小时、18小时、24小时。
56.在一些实施例中，提供的聚集诱导发光材料与待杀菌样品进行混合共孵育，其中，聚集诱导发光材料的浓度为1-1000μmol/l。在一些具体实施例中，聚集诱导发光材料的浓度包括但不限于5μmol/l、10μmol/l、15μmol/l、20μmol/l、25μmol/l、30μmol/l、35μmol/l、40μmol/l、45μmol/l、50μmol/l、55μmol/l、60μmol/l、65μmol/l、70μmol/l、75μmol/l、80μmol/l、85μmol/l、90μmol/l、95μmol/l、100μmol/l、110μmol/l、120μmol/l、150μmol/l、200μmol/l、300μmol/l、400μmol/l、500μmol/l、600μmol/l、700μmol/l、800μmol/l、1000μmol/l。
57.步骤g03.将共混液进行激光照射处理，得到杀菌后的样品。
58.在一些实施例中，激光照射处理的激光强度为10～1000mw/cm2、激光波长为280～
500nm；激光照射处理的事件为1～200分钟。通过激光照射处理，可以生成高浓度的活性氧基团，实现杀菌处理，以提供的聚集诱导发光材料对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均具有优良的标记和杀伤效果，可实现广谱、高效的细菌标记和原位清除，且不易产生耐药。
59.进一步的，聚集诱导发光材料光照后产生的活性氧基团采用活性氧指示剂二氢二氯荧光素(dcfh-da)通过酶标仪进行检测。
60.进一步的，聚集诱导发光材料的光动力杀菌效果通过接受治疗后的细菌生长曲线进行验证。
61.下面结合具体实施例进行说明。
62.实施例a1
63.一种聚集诱导发光材料及其制备方法
64.提供的聚集诱导发光材料为3-四嗪-d-丙氨酸和1-反式环辛烯-4-(2-(4-二苯甲胺苯基乙烯)吡啶溴盐通过化学键连接。
65.聚集诱导发光材料的制备方法，包括如下步骤：
66.提供摩尔比为1：0.1的3-四嗪-d-丙氨酸和1-反式环辛烯-4-(2-(4-二苯甲胺苯基乙烯)吡啶溴盐，
67.将3-四嗪-d-丙氨酸和1-反式环辛烯-4-(2-(4-二苯甲胺苯基乙烯)吡啶溴盐进行混合处理，于室温下进行搅拌混合并进行点击化学反应，得到聚集诱导发光材料。
68.实施例a2
69.一种聚集诱导发光材料及其制备方法
70.提供的聚集诱导发光材料为3-四嗪-d-丙氨酸和1-反式环辛烯-4-(2-(4-二苯甲胺苯基乙烯)吡啶溴盐通过化学键连接。
71.聚集诱导发光材料的制备方法，包括如下步骤：
72.提供摩尔比为1：1.5的3-四嗪-d-丙氨酸和1-反式环辛烯-4-(2-(4-二苯甲胺苯基乙烯)吡啶溴盐，
73.将3-四嗪-d-丙氨酸和1-反式环辛烯-4-(2-(4-二苯甲胺苯基乙烯)吡啶溴盐进行混合处理，于室温下进行搅拌混合并进行点击化学反应，得到聚集诱导发光材料。
74.实施例a3
75.一种聚集诱导发光材料及其制备方法
76.提供的聚集诱导发光材料为3-四嗪-d-丙氨酸和1-反式环辛烯-4-(2-(4-二苯甲胺苯基乙烯)吡啶溴盐通过化学键连接。
77.聚集诱导发光材料的制备方法，包括如下步骤：
78.提供摩尔比为1：3的3-四嗪-d-丙氨酸和1-反式环辛烯-4-(2-(4-二苯甲胺苯基乙烯)吡啶溴盐，
79.将3-四嗪-d-丙氨酸和1-反式环辛烯-4-(2-(4-二苯甲胺苯基乙烯)吡啶溴盐进行混合处理，于室温下进行搅拌混合并进行点击化学反应，得到聚集诱导发光材料。
80.实施例a4
81.一种聚集诱导发光材料及其制备方法
82.提供的聚集诱导发光材料为3-四嗪-d-丙氨酸和1-反式环辛烯-4-(2-(4-二苯甲胺苯基乙烯)吡啶溴盐通过化学键连接。
83.聚集诱导发光材料的制备方法，包括如下步骤：
84.提供摩尔比为1：8的3-四嗪-d-丙氨酸和1-反式环辛烯-4-(2-(4-二苯甲胺苯基乙烯)吡啶溴盐，
85.将3-四嗪-d-丙氨酸和1-反式环辛烯-4-(2-(4-二苯甲胺苯基乙烯)吡啶溴盐进行混合处理，于室温下进行搅拌混合并进行点击化学反应，得到聚集诱导发光材料。
86.实施例a5
87.一种聚集诱导发光材料及其制备方法
88.提供的聚集诱导发光材料为3-四嗪-d-丙氨酸和1-反式环辛烯-4-(2-(4-二苯甲胺苯基乙烯)吡啶溴盐通过化学键连接。
89.聚集诱导发光材料的制备方法，包括如下步骤：
90.提供摩尔比为1：10的3-四嗪-d-丙氨酸和1-反式环辛烯-4-(2-(4-二苯甲胺苯基乙烯)吡啶溴盐，
91.将3-四嗪-d-丙氨酸和1-反式环辛烯-4-(2-(4-二苯甲胺苯基乙烯)吡啶溴盐进行混合处理，于室温下进行搅拌混合并进行点击化学反应，得到聚集诱导发光材料。
92.实施例b1
93.采用实施例a1得到的聚集诱导发光材料进行杀菌处理，杀菌方法包括以下步骤：
94.提供待杀菌样品，
95.将待杀菌样品与聚集诱导发光材料混合进行孵育，得到共混液；其中，孵育的温度为37℃，孵育的时间为0.5小时，聚集诱导发光材料的浓度为10μmol/l；
96.将共混液进行激光照射处理，其中，激光照射处理的激光强度为10mw/cm2，激光波长为280nm；激光照射处理的时间为20分钟，得到杀菌后的样品。
97.实施例b2
98.采用实施例a2得到的聚集诱导发光材料进行杀菌处理，杀菌方法包括以下步骤：
99.提供待杀菌样品，
100.将待杀菌样品与聚集诱导发光材料混合进行孵育，得到共混液；其中，孵育的温度为37℃，孵育的时间为2小时，聚集诱导发光材料的浓度为30μmol/l；
101.将共混液进行激光照射处理，其中，激光照射处理的激光强度为10mw/cm2，激光波长为280nm；激光照射处理的时间为20分钟，得到杀菌后的样品。
102.实施例b3
103.采用实施例a3得到的聚集诱导发光材料进行杀菌处理，杀菌方法包括以下步骤：
104.提供待杀菌样品，
105.将待杀菌样品与聚集诱导发光材料混合进行孵育，得到共混液；其中，孵育的温度为37℃，孵育的时间为3小时，聚集诱导发光材料的浓度为50μmol/l；
106.将共混液进行激光照射处理，其中，激光照射处理的激光强度为10mw/cm2，激光波长为280nm；激光照射处理的时间为20分钟，得到杀菌后的样品。
107.实施例b4
108.采用实施例a4得到的聚集诱导发光材料进行杀菌处理，杀菌方法包括以下步骤：
109.提供待杀菌样品，
110.将待杀菌样品与聚集诱导发光材料混合进行孵育，得到共混液；其中，孵育的温度
为37℃，孵育的时间为0.5小时，聚集诱导发光材料的浓度为80μmol/l；
111.将共混液进行激光照射处理，其中，激光照射处理的激光强度为10mw/cm2，激光波长为280nm；激光照射处理的时间为20分钟，得到杀菌后的样品。
112.实施例b5
113.采用实施例a5得到的聚集诱导发光材料进行杀菌处理，杀菌方法包括以下步骤：
114.提供待杀菌样品，
115.将待杀菌样品与聚集诱导发光材料混合进行孵育，得到共混液；其中，孵育的温度为37℃，孵育的时间为0.5小时，聚集诱导发光材料的浓度为120μmol/l；
116.将共混液进行激光照射处理，其中，激光照射处理的激光强度为10mw/cm2，激光波长为280nm；激光照射处理的时间为20分钟，得到杀菌后的样品。
117.性质测试
118.(一)新型聚集诱导发光材料的aie特性验证
119.1)将聚集诱导发光材料(tda)用四氢呋喃溶解，配置母液，浓度为2mm；
120.2)吸取母液，配置成乙醚体积比分别为0％、10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％的四氢呋喃/乙醚的混合溶液；
121.3)将这些混合溶液依次在白光灯和紫外灯下拍照。
122.(二)新型聚集诱导发光材料对细菌的标记效果评价
123.1)取200μl od600值为0.5的菌悬液，与终浓度为20μm的聚集诱导发光材料在37℃摇床中振荡孵育2小时；
124.3)将混合溶液在7000转/分的转速下离心15分钟，洗涤2次，
125.4)磷酸盐缓冲液(pbs)重悬，并将菌液稀释10倍；静置于八孔小室，最后置于激光共聚焦显微镜(zeiss lsm 710)下进行成像；
126.5)激光共聚焦显微镜下观察并拍摄照片，探针选择488nm的荧光激发波长，500-700nm的荧光发射波长区域。
127.(三)聚集诱导发光材料的活性氧生成效率检测
128.1)将od600为0.5的bcg悬液与终浓度为20μm的聚集诱导发光材料，37℃摇床中振荡孵育2小时，其中摇床转速设置为110转/分；
129.2)将混合溶液在7000转/分的转速下离心15分钟，洗涤2次；
130.3)pbs(磷酸盐缓冲液)重悬，加入dcfh-da活性氧指示剂；
131.4)迅速在白光灯下光照0、4、8、12、16、20分钟；
132.5)置于酶标仪下检测dcfh-da的荧光强度，选择488nm的荧光激发波长，525nm的荧光发射波长。
133.(四)新型聚集诱导发光材料的杀菌效果性能评价
134.1)将od600为0.5的bcg悬液与终浓度为20μm tda于37℃摇床中振荡孵育2小时；
135.2)将混合溶液在7000转/分的转速下离心15分钟，洗涤2次；
136.3)7h9培养基重悬，采用100w白光灯照射细菌溶液30分钟，然后将溶液置于37℃摇床中振荡培养；
137.4)振荡1、2、4、8、12小时后，分别测量菌液的od600值。
138.结果分析
139.(一)新型聚集诱导发光材料的aie特性验证
140.实验结果如图1所示，四氢呋喃溶液是tda的良溶剂，而乙醚是tda的不良溶剂，tda在100％四氢呋喃溶液中没有荧光信号，随着乙醚体积不断增加，tda荧光信号逐渐增强，结果表明聚集诱导发光代谢材料具有优良的聚集诱导发光特性。
141.(二)新型聚集诱导发光材料对细菌的标记效果评价
142.实验结果如图2所示，结果表明，聚集诱导发光代谢荧光探针成功标记细菌(绿色代表探针标记荧光信号)，具有极强的荧光信号，可用于细菌的检测。
143.(三)聚集诱导发光材料的活性氧生成效率检测
144.实验结果如图3所示，随着光照时间增加，dcfh-da荧光强度显著增强，表明聚集诱导发光代谢材料具有高的活性氧产生效率，可用于光动力杀菌。
145.(四)新型聚集诱导发光材料的杀菌效果性能评价
146.实验结果如图4所示，聚集诱导发光材料在激光照射下，具有优异的抗菌性能，其体外抑菌率可达85％以上。
147.以上实施例结果表明，本发明提供的聚集诱导发光材料，具有聚集诱导发光特性和光动力杀菌性能，可用于细菌的快速检测和原位清除。
148.以上所述仅为本技术的较佳实施例而已，并不用以限制本技术，凡在本技术的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本技术的保护范围之内。