包含至少一种透明质酸和抗坏血酸磷酸酯镁的经灭菌组合物的制作方法
【专利说明】包含至少一种透明质酸和抗坏血酸磯酸I旨读的经灭菌组合 物
[0001] 透明质酸已在美容领域中使用了超过十五年，在该领域，其被证明是无害且有效 的。目前，在美容填充凝胶或填料市场中使用最广泛的产品为基于来自生物发酵的交联透 明质酸的凝胶。
[0002] 来自生物发酵的透明质酸在例如填充皱纹、黏弹性补充（viscosuppl细lentation， viscosupplementation)、眼科治疗或尿失禁治疗领域中的用途被更加认可和理解，该是因 为其天然存在于人体中，且更特别地存在于真皮、滑液和角膜中，使得副作用导致的风险最 小化。
[0003] 为了改善该些透明质酸制剂和/或赋予其特别的特性，可向该些制剂添加多种添 加剂。
[0004] 无论是在添加阶段或灭菌阶段直接地添加还是随时间例如在储存期间添加，向制 剂添加添加剂的一个主要缺点是其流变性和/或黏弹性或其稳定性的潜在劣化。
[0005] 抗坏血酸（也称为维生素C)是参与多种生物学过程（例如胶原蛋白的合成和某 些氨基酸的代谢）的强抗氧化剂。遗憾的是，维生素C在水溶液中不稳定，因而不能用于在 水中配制的透明质酸制剂中。其一些衍生物，抗坏血酸磯酸醋盐（常规地称为磯酸抗坏血 酸醋盐）在水性制剂中是稳定的。
[0006] 因此，理论上可将该些衍生物并入到透明质酸制剂中。
[0007] 二甲基讽是强抗炎剂，其抑制由外源物导致的变态反应，能够保护角质形成细胞 和成纤维细胞免受紫外福照的不良作用，并且抑制细胞因子的作用。
[000引因此，考虑该些制剂用于填充皱纹或黏弹性补充，并入二甲基讽也是有利的。
[0009] 包含透明质酸和抗坏血酸磯酸醋盐的很多组合物已有描述，尤其是化妆品组合 物，例如LVMH的专利申请W01996/19099或CHISS0 Co巧oration的专利申请GB 2 228 197 中描述的组合物，但是对大部分来说，该些组合物为其中透明质酸不是主要成分、透明质酸 量与抗坏血酸磯酸醋盐量的比值一般小于1的组合物。此外，该些组合物用于表面使用，而 不用于黏弹性补充或填充，并因此不进行灭菌操作。
[0010] AMWAY Co巧oration的W02000/71094中也描述了另一些组合物，该些组合物与上 述专利申请中描述的制剂表现出相同的特征，并且尽管确定了抗坏血酸磯酸醋盐的目的， 但是未教导可用抗坏血酸磯酸醋盐配制用于填充或用于黏弹性补充的、其中主要成分为透 明质酸的产品。
[001U 但是，ALLERGAN的专利申请W02011/086458中描述了用于填充皱纹或黏弹性补充 且经过灭菌的组合物，该些组合物包含透明质酸W及相对于组合物重量的按重量计0. 6% 至2%的量的维生素C衍生物，例如抗坏血酸2-葡糖巧、抗坏血酸磯酸醋钢或抗坏血酸磯酸 醋儀。
[0012] 根据专利权人，包含抗坏血酸2-葡糖巧的组合物可提供稳定的制剂，并且当抗坏 血酸2-葡糖巧浓度升高时，其稳定性提高（参见实施例6)。
[0013] 认为包含2%抗坏血酸磯酸醋钢的制剂是稳定的（实施例5)。
[0014] 但是，专利权人描述了包含相对于组合物总重量的按重量计2%量的抗坏血酸磯 酸醋儀的组合物在经历高压蒸气灭菌后变得不稳定（参见实施例4);然而，却未公开所述 组合物中透明质酸的含量，因此无法计算[HA]/[MAP]比值且不能利用和重复结果。
[001引 Q-M邸的专利申请WO 2012/104419描述了旨在用于填充皱纹或用于黏弹性补充 且经受灭菌的可注射组合物。该些组合物包含透明质酸、局部麻醉剂和0. 01至Img/mL量 的抗坏血酸衍生物，例如特别是抗坏血酸磯酸醋钢、抗坏血酸磯酸醋儀或抗坏血酸2-葡糖 巧。
[0016] 在该些组合物中，抗坏血酸衍生物的存在防止或减轻了局部麻醉剂在灭菌期间对 组合物黏度和/或弹性的不良作用。实际上，该专利申请描述了，添加局部麻醉剂后，组合 物的黏度和弹性分量（composantes 6lastiques，elastic component)G'均显著提高。
[0017] 该专利申请明确说明，相对于不含抗坏血酸的相同组合物，含有抗坏血酸衍生物 的组合物的稳定性未得到提高，并且添加抗坏血酸衍生物可导致组合物的稳定性发生稍微 降低。
[0018] 实例表明添加抗坏血酸磯酸醋儀能够抵消利多卡因对交联透明质酸组合物的弹 性的影响。在此情况下，组合物的弹性在加入抗坏血酸磯酸醋儀后有所降低。
[0019] 另一些实例表明，添加抗坏血酸磯酸醋儀能够抵消利多卡因对非交联透明质酸组 合物的黏度的影响。在此情况下，组合物的黏度在添加抗坏血酸磯酸醋儀后有所降低。
[0020] CARBYLAN BIOSURGERY的专利申请W0 2009/005790描述了用在用于例如黏弹性 补充之可注射或可植入制剂或用于生物医学应用之黏性组合物中的组合物。该些组合物 经受灭菌，并且包含经包含琉基官能团之取代基化学修饰的透明质酸和抗坏血酸或其衍生 物，例如抗坏血酸钢或栋桐酷抗坏血酸醋/盐。
[0021] 包含经修饰之透明质酸的该些组合物表现出提高的稳定性。
[0022] 鉴于上述现有技术中的教导，完全令人吃惊和意外的是，已证明相对于单独包含 交联透明质酸的组合物，包含交联透明质酸之组合物中小于或等于1 %量的抗坏血酸磯酸 醋儀在灭菌后提高或保持了弹性分量G'的流变特性。
[0023] 如实例中所证明，该种作用在包含抗坏血酸磯酸醋钢的组合物中未观察到。
[0024] 此外，申请人已表明，包含非交联透明质酸之组合物中小于或等于1%的量的抗坏 血酸磯酸醋儀在灭菌后能够保持组合物的黏度，并且相对于单独包含非交联透明质酸的组 合物，在灭菌后提高或保持了弹性分量G'流变特性。
[0025] 因此，本发明提供了灭菌后流变性提高或保持的包含透明质酸和抗坏血酸磯酸醋 儀的组合物。
[0026] 在一个实施方案中，当透明质酸是交联的时，相对于不包含抗坏血酸磯酸醋儀的 组合物，根据本发明的组合物在灭菌后显示出提高的流变性值。
[0027] 本发明提供了包含单独的或混合物中的交联或非交联的至少一种透明质酸或其 盐W及抗坏血酸磯酸醋盐的组合物、用于制备所述组合物的方法及其配制用于填充皱纹之 组合物或黏弹性补充组合物的用途。
[002引本发明提供了一种无菌的组合物，其包含单独的或混合物中的至少一种透明质酸 或其生物学上可接受的盐W及抗坏血酸磯酸醋儀，透明质酸或其盐的量[HA]与抗坏血酸 磯酸醋儀的量[MAP]的质量比[HA]/[MA門大于或等于1，抗坏血酸磯酸醋儀的量为相对于 所述组合物总重量的按重量计0. 001 %至1 %，其中弹性分量G'在灭菌后保持或提高，并且 为 5 至 400Pa。
[0029] 在一个实施方案中，弹性分量G'在灭菌后保持或提高，并且为5至350Pa。
[0030] 在一个实施方案中，弹性分量G'在灭菌后保持或提高，并且为50至300Pa。
[0031] 在一个实施方案中，通过高压蒸汽对所述组合物进行灭菌。
[0032] 在一个实施方案中，通过环氧己烧对所述组合物进行灭菌。
[0033] 在一个实施方案中，通过用丫射线福照对组合物进行灭菌。
[0034] 单独的或混合物中的透明质酸或其生物学上可接受的盐意指单独的或混合物中 的交联或非交联透明质酸，任选地单独地或在混合物中通过取代进行化学修饰。
[0035] 在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含单独的或混合物中的至少一种非交 联透明质酸或其盐。
[0036] 在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含单独的或混合物中的至少一种交联 透明质酸或其盐。
[0037] 在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含单独的或混合物中的至少一种共交 联透明质酸或其盐。
[003引在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含单独的或混合物中的至少一种通过 取代进行化学修饰的透明质酸或其盐。
[0039] 在一个实施方案中，透明质酸是钢盐或钟盐的形式。
[0040] 在一个实施方案，根据本发明的组合物的透明质酸或其盐的量[HA]与抗坏血酸 磯酸醋儀的量[MAP]的质量比[HA]/[MA門为10至30。
[0041] 在一个实施方案，根据本发明的组合物的透明质酸