琼枝麒麟菜多糖在制备抗氧化护肤品中的用图
【技术领域】
[0001] 本发明属于天然产物化学领域，具体涉及一种琼枝麒麟菜多糖在制备抗氧化护肤 品中的用途。
【背景技术】
[0002] 氧化是肌肤衰老的最大威胁，饮食不健康，日晒、压力、环境污染等都能让肌肤自 由基泛滥，从而产生面色黯淡、缺水等氧化现象，人体的抗氧化物质有自身合成，有由食物 供给，也有由周围的环境和氧气引起。我们无时无刻都处在氧化的环境中，所以，无论从健 康层面还是从护肤层面，我们都需要在日常生活中注意抗氧化，尤其是皮肤的抗氧化作用， 需要人们的注意。
[0003] 活性氧（ROS)是生物体内一类活性含氧化合物的总称。主要包括超氧阴离子、羟 自由基和过氧化氢等。在静息条件下，细胞内ROS的水平被控制在很低的范围，但在时间以 及外界环境影响下，例如：暴露于紫外线（UVexposure)或热源（heatexposure)下等，ROS 的量会急剧增多，进一步导致氧化应激和抗氧化防御间平衡失调，从而引起生物膜和大分 子物质发生脂质过氧化损伤，引起细胞损坏，会使皮肤加速衰老，出现斑点，严重影响人体 肌肤的健康。
[0004] 目前，以改善或预防因日晒等生产的皮肤变黑，色素沉淀引起的褐斑、雀斑、抗氧 化等为目的，使用化妆水、乳液、乳膏、美容液、面膜等美白化妆品或抗老化护肤品广泛采用 L-抗坏血酸为有效成分。但是，由于L-抗坏血酸容易被氧化或水解，导致L-抗坏血酸的功 效降低，损害护肤品的品质，对褐斑、雀斑、抗氧化的作用降低，无法满足现代人的需求。因 此，研宄发开出一种有效抗氧化、可以防止皮肤松驰及皱纹产生，改善紫外线引起的皮肤色 素沉淀，淡化老年斑及其它色素斑的护肤品是当前亟需解决的难题。
[0005] 麒麟菜又名海燕窝，是藻类植物药红翎菜科植物麒麟菜或珍珠麒麟菜的藻体，具 有极高的营养价值，分布我国台湾沿岸，日本、马来群岛、印度尼西亚等地。多糖硫酸酯是糖 羟基上带有硫酸基团的多糖，也称硫酸多糖。可经天然提取或硫酸化的结构修饰得到。近 年的研宄证明：多糖硫酸酯无论在体内还是体外，都显示了不同程度的抗氧化活性，尤其与 目前抗氧化护肤品相比，其细胞毒作用小，效果显著，报纸时间长的优点而得到了广泛的关 注，尤其是多糖硫酸酯的抗氧化活性的护肤品前景十分的广阔。
【发明内容】
[0006] 为了解决现有技术抗氧化护肤品中效果不明显，抗氧化效果差的缺陷，本发明的 目的在于提供一种琼枝麒麟菜多糖在制备抗氧化护肤品中的用途，已解决以上缺陷。
[0007] 本发明的琼枝麒麟菜多糖在制备抗氧化护肤品中的用途，所述的琼枝麒麟菜多糖 的的平均分子质量的范围为1000-100000 ;该平均分子质量的范围为1000-100000的琼枝 麒麟菜多糖是通过下述制备方法得到，其包括以下步骤： (1)称取一定量的琼枝麒麟菜，将洗净的琼枝麒麟菜，使琼枝麒麟菜的含水量不超过 8%时用粉粹机粉碎； (2) 将粉粹过后的琼枝麒麟菜浸泡0. 5h，然后用加热回流装置进行热水提取多糖3h; (3) 冷却至35-45°C后收集滤液，滤液用旋转蒸发仪减压浓缩至原滤液体积的2/3 ; (4) 加入3倍体积的95 %的乙醇，并不断搅拌，置4°C冰箱醇沉12h，四层纱布过滤，收 集过滤物，待残余酒精部分挥发后进行冷冻干燥，最终得到的白色纤维状物质即为琼枝麒 麟菜多糖。
[0008] 本发明制备所得的平均分子质量的范围为1000-100000的琼枝麒麟菜多糖为 0 - (1-3) -D-半乳糖-4-硫酸基、a- (1-4) -3,6-内醚-D-半乳糖和a-D- (1-6)-葡萄糖硫酸 醋中的一种或其组合物。
[0009] 本发明所述的抗氧化护肤品包括洁面啫喱、精华素、乳液、原液、爽肤水、面霜和面 膜。
[0010] 本发明所述的抗氧化护肤品优选为爽肤水。
[0011] 另外，本发明的爽肤水原料包括：琼枝麒麟菜多糖1~10份、透明质酸〇. 1~1 份、D-泛醇1~10份、燕麦|3 -葡聚糖1~10份、海藻糖1~10份、尿囊素0. 1~1份、 玫瑰提取物0. 5~5份、1，2-戊二醇1~10份、甘油1~10份、防腐剂0. 05~1份、水加 至100份。
[0012] 进一步的，所述的爽肤水原料优选为：琼枝麒麟菜多糖5份、透明质酸0. 5份、 D-泛醇1份、燕麦0 -葡聚糖5份、海藻糖5份、尿囊素0. 05份、玫瑰提取物2. 5份、1，2-戊 二醇5份、甘油5份、防腐剂0. 05份、水加至100份。
[0013] 此外，本发明还提供了一种制备爽肤水的制备方法，包括以下步骤： (1) 将处方量的琼枝麒麟菜多糖配置为1~lOmg/ml的琼枝麒麟菜多糖溶液； (2) 按照处方量将甘油加入透明质酸中分散，加水溶解，搅拌均匀，得透明质酸溶液； (3) 将海藻糖和尿囊素用水溶解后与步骤（1)得到的透明质酸溶液混合，搅拌均匀，得 混合溶液； (4) 将琼枝麒麟菜多糖溶液、D-泛醇、燕麦0-葡聚糖、玫瑰提取物、1，2-戊二醇和防 腐剂依次加入步骤（3)得到的混合溶液，加水搅拌均匀，即得爽肤水。
[0014] 本发明将提取的琼枝麒麟菜多糖进行单独的细胞试验，所用的细胞为人永生表皮 细胞（HaCaT)。试验结果显示琼枝麒麟菜多糖具有明显的抗氧化活性的效果。将提取的琼 枝麒麟菜多糖进行体外抗氧化机制研宄，试验结果显示，琼枝麒麟菜多糖主要作用于抑制 ROS的产生。
[0015] 总之，本发明的琼枝麒麟菜多糖在制备抗氧化护肤品中的用途，与现有技术相比 具有如下优势： 1) 本发明的琼枝麒麟菜多糖具有明显的抗氧化功能，保湿性优良，具有保质时间长和 抗氧化效果时间持续等优点； 2) 本发明的琼枝麒麟菜多糖为天然制剂，具有保湿、抗氧化，无毒副作用，吸收快，能有 效防止皱纹的生成，延缓皮肤老化，让肌肤充满活力与光泽的优势，有利于该琼枝麒麟菜多 糖护肤品的推广和应用。
[0016]
【附图说明】： 图1为琼枝麒麟菜多糖对HaCaT细胞的细胞毒性试验结果； 图2为维生素C对HaCaT细胞的细胞毒性试验结果； 图3为双氧水对HaCaT细胞的细胞毒性试验结果； 图4为6h时琼枝麒麟菜多糖、维生素C和双氧水对HaCaT细胞的抗氧化活性图； 图5为12h时琼枝麒麟菜多糖、维生素C和双氧水对HaCaT细胞的抗氧化活性图。
【具体实施方式】： 以下通过【具体实施方式】的描述对本发明作进一步说明，但这并非是对本发明的限制， 本领域技术人员根据本发明的基本思想，可以做出各种修改或改进，但是只要不脱离本发 明的基本思想，均在本发明的范围之内。
[0018] 实施例1、本发明琼枝麒麟菜多糖的制备 (1) 称取一定量的琼枝麒麟菜，将洗净的琼枝麒麟菜，使琼枝麒麟菜的含水量不超过 8%时用粉粹机粉碎； (2) 将粉粹过后的琼枝麒麟菜浸泡0. 5h，然后用加热回流装置进行热水提取多糖3h; (3) 冷却至35-45°C后收集滤液，滤液用旋转蒸发仪减压浓缩至原滤液体积的2/3 ; (4) 加入3倍体积的95 %的乙醇，并不断搅拌，置4°C冰箱醇沉12h，四层纱布过滤，收 集过滤物，待残余酒精部分挥发后进行冷冻干燥，最终得到的白色纤维状物质即为平均分 子质量的范围为1000-100000的琼枝麒麟菜多糖。
[0019] 实施例2、本发明的琼枝麒麟菜多糖的细胞毒性试验 1、试验材料 将实施例1制备所得琼枝麒麟菜多糖用纯水配置为lmg/mL的水溶液，保存于-20°C备 用。
[0020] 2、试验方法 将lmg/mL的琼枝麒麟菜多糖水溶液倍比稀释成不同浓度（起始浓度为500yg/mL)，采MTT法测定琼枝麒麟菜多糖的细胞毒性。
[0021] 3、试验结果 如图1所示，当琼枝麒麟菜多糖（EGP)浓度达到500yg/mL时HaCaT细胞的存活率为 74. 85%;如图2所示，阳性对照药物维生素C100yg/mL时HaCaT细胞的存活率达到90%; 如图3所示，双氧水当浓度达到Iyg/mL时HaCaT细胞的存活率达到90% ;从图1、图2和 图3可以看出琼枝麒麟菜多糖对HaCaT细胞的最大无毒浓度最大，对HaCaT细胞的毒害性 最小。
[0022] 实施例3、本发明琼枝麒麟菜多糖的抗氧化活性研宄试验 1、 试验材料 按照实施例1的制备方法，提取平均分子量为45000,单糖硫酸基取代度为2. 13的a-D-(1-6)-葡萄糖硫酸酯的琼枝麒麟菜多糖（EGP)。
[0023] 2、试验方法 2. 1、参照实施例2细胞毒性试验结果，将a-D- (1-6)-葡萄糖硫酸酯的琼枝麒麟菜多糖 制备成起始浓度为240yg/mL的稀释液，采用流式检测试验进行检测试验。
[0024] 2. 2、流式检测试验方法如下： 将处于对数生长期的HaCaT细胞用DMEM生长液调整至细胞密度为2.OXIO5ceIls/ml， 在37°C，过夜。待细胞长成单层后，弃培养液，用灭菌PBS洗1遍，分别设置H2O2组、H202+EGP 组（图 4、图 5 中用 20yg/mL、40yg/mL、80yg/mL、160yg/mL、240yg/mL表示）、VC+H202组、 H2O2组和完全培养基组（图4、图5中用N表示），各加2mlHaCaT细胞液，温度设为37°C(设 置不同药物浓度、同孵