-二-氟环辛炔环加成反应方案，其中吸电子氟取代基位于丙炔的位置。图6进一步描绘了连接化合物在具有长度η的烷基或聚合物间隔基的末端包括两个二-氟环辛炔基团。
[0053]在用包括生物正交结合对的固定和连接化合物处理组织后，可进一步处理组织以封端起组织钙化作用的官能团。这种官能团可包括本体组织上的醛基和羧基或由用戊二醛、甲醛或其他含醛化合物处理或暴露组织产生的醛基和羧基。
[0054]因此，在一个优选的实施方式中，特别是在也用戊二醛、甲醛和其他含醛化合物处理组织的实施方式中，方法可进一步包括使用以上描述的固定和双官能连接化合物交联组织后，用封端剂和还原剂处理。
[0055]只要组织可包括残余醛基，可通过使组织与封端剂诸如乙醇胺和还原剂诸如硼氢化钠接触，使组织进行封端过程。示例性封端剂和还原剂和过程在美国专利号7，972，376中描述，其全部内容通过引用并入，如同全部在本文中陈述。
[0056]可选地，组织醛也可被氧化为羧酸，并且羧酸可与醇或胺反应。
[0057]在又进一步实施方式中，在适当催化剂存在下组织官能团可与各种亲核体和/或亲电体反应，如在2013年11月7日提交的美国专利申请序列号14/074,379中描述，其全部内容通过引用并入，如同全部在本文中陈述。
[0058]生物假体组织可进一步经受用无水、非水性或水性丙三醇溶液处理，以如果不完全，也基本上使生物假体组织脱水以干燥储存。
[0059]在优选的实施方式中，无水或非水性溶液包括丙三醇，并且更优选75wt%丙三醇和25wt%乙醇的溶液，并且生物假体组织在丙三醇溶液中被浸泡持续至少一小时。生物假体组织随后被移出并且被放置在干净的通风橱中以允许移除过多的溶液。
[0060]在优选的实施方式中，无水或非水性溶液是丙三醇和C1-C3醇的溶液。其中处理溶液包括按体积计60-95%的丙三醇。生物组织的适当的处理在2011年8月30日授权给Edwards Lifesciences Corp.的美国专利号8，007，992中描述，其全部内容通过引用并入，如同全部在本文中陈述。
[0061]在另一个优选的实施方式中，水性丙三醇溶液可用于使组织部分脱水，如在2003年3月18日授权给The Cleveland Clinic Foundat1n的美国专利号6，534，004中描述，其全部内容通过引用并入，如同全部在本文中陈述。
[0062]如本文所用，术语“干燥”或“脱水”被理解为在用无水、非水性或水性丙三醇溶液处理后包括残余处理溶液或来自周围环境的水分或湿气。
[0063]将脱水的生物假体组织提供在密封包装中，优选在由具有蒂维克(Tyvek)盖子的硬托盘(PETG)组成的双重无菌防渗包装中。密封包装优选不含与组织接触的液体防腐剂溶液。包装在无尘室中密封，并且在100%环氧乙烷中消毒。
[0064]虽然本公开内容描述了生物正交结合对的【具体实施方式】，但是应当理解，其不限于此，并且本公开内容包括进行相互排斥反应并且彼此偶合的任何官能团对。因此，应当理解，虽然【具体实施方式】和具体实施例指示了本发明优选的实施方式，但是其以说明性而非限制性的方式给出。在不偏离本发明的精神的情况下可以在本发明范围内作出其许多变化和改变，并且本公开内容包括所有这种改变。
【主权项】
1.用于交联生物组织的方法，包括: 使所述生物组织与固定化合物接触，所述固定化合物包括第一和第二官能团，所述第一官能团偶合与所述生物组织相关的组织官能团，并且所述第二官能团是生物正交结合对中的一个；和 使所述生物组织暴露至连接化合物，所述连接化合物包括至少两个官能团，所述两个官能团各自包括所述生物正交结合对中的另一个。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述生物正交结合对包括叠氮化物和炔烃。
3.根据权利要求2所述的方法，其中所述暴露在催化剂存在下执行。
4.根据权利要求3所述的方法，其中所述催化剂是铜。
5.根据权利要求4所述的方法，进一步包括在所述暴露后冲洗所述生物组织。
6.根据权利要求2所述的方法，其中所述炔烃被并入具有环张力的环状化合物。
7.根据权利要求6所述的方法，其中所述炔烃是环辛炔。
8.根据权利要求7所述的方法，其中环辛炔包括一个或多个吸电子基团。
9.根据权利要求8所述的方法，其中所述吸电子基团是卤素。
10.根据权利要求9所述的方法，其中所述吸电子基团是氟。
11.根据权利要求9所述的方法，其中所述暴露在不存在催化剂下执行。
12.根据权利要求1所述的方法，其中所述组织官能团是选自下列的一种或多种:胺、轻基、疏基、幾基和幾酸。
13.根据权利要求12所述的方法，其中所述组织官能团是胺。
14.根据权利要求13所述的方法，其中所述第一官能团是醛。
15.根据权利要求1所述的方法，其中所述固定化合物的所述第一官能团选自:异硫氰酸酯、异氰酸酯、磺酰氯、醛、碳二亚胺、酰叠氮、酸酐、氟苯、碳酸酯、N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)、NHS酯、亚氨酸酯、环氧化物和氟苯酯。
16.根据权利要求1所述的方法，其中所述固定化合物是咪唑-1-磺酰叠氮和三氟甲磺酰叠氮中的一种或组合。
17.根据权利要求1所述的方法，其中所述固定化合物和所述连接化合物中的任何一种或二者包括间隔基。
18.根据权利要求17所述的方法，其中所述间隔基不包括与所述生物组织、所述组织官能团或所述生物正交结合对中的任何一个反应的官能团。
19.根据权利要求17所述的方法，其中所述连接化合物包括所述间隔基。
20.根据权利要求17所述的方法，其中所述间隔基是选自分支的或直链的饱和的或不饱和的烃或聚合物中的一种或组合。
21.根据权利要求17所述的方法，其中所述间隔基包括生物活性的和可生物降解的基团中的一种或组合。
22.根据权利要求21所述的方法，其中所述间隔基包括可生物降解的基团，并且其中所述可生物降解的基团是二硫化物。
23.交联生物假体组织，其根据权利要求1所述的方法产生。
【专利摘要】描述了用于处理生物假体组织的方法。该方法包括使生物组织与固定化合物接触，该固定化合物包括第一和第二官能团。第一官能团可与同生物组织相关的组织官能团反应，并且与其偶合。第二官能团是生物正交结合对中的一个。偶合至固定化合物的生物组织随后被暴露至连接化合物。连接化合物包括至少两个官能团，每一个包括生物正交结合对中的另一个。在优选的实施方式中，生物正交结合对是叠氮化物和炔烃。该方法可在催化剂存在下执行，优选铜催化剂。可选地，该方法可在不存在催化剂下执行，其中炔烃被并入环张紧的环状化合物，诸如环辛炔。
【IPC分类】A61L27-54, A61L27-56, A61L27-38
【公开号】CN104797276
【申请号】CN201380059034
【发明人】J·A·本顿
【申请人】爱德华兹生命科学公司
【公开日】2015年7月22日
【申请日】2013年11月13日
【公告号】CA2886281A1, EP2919824A1, US20140134594, WO2014078433A1, WO2014078433A8