至少6、至少8、至少10、至少12、至少14或至少16个周期。剂量可以高达 24mg/kg。示例性的使用剂量可以包括 lmg/kg、2mg/kg、3mg/kg、4mg/kg、5mg/kg、6mg/kg、 7mg/kg、8mg/kg、9mg/kg、10mg/kg、llmg/kg、12mg/kg、13mg/kg、14mg/kg、15mg/kg、16mg/kg、 17mg/kg、18mg/kg、19mg/kg、20mg/kg、22mg/kg 以及 24mg/kg。优选剂量是 4、6、8、9、10、12、 14、16或18mg/kg。普通技术人员将认识到，多种因素如年龄、一般健康状况、具体器官功能 或重量以及先前疗法对于具体器官系统（例如骨髓）的效果可以在选择免疫缀合物的最佳 剂量时加以考虑，并且施用的剂量和/或频率可以在治疗过程中增加或减少。剂量可以视 需要重复，在少至4至8个剂量之后观察到肿瘤缩小的证据。本文所公开的最佳剂量和施 用方案在人受试者中显示出人意料的优良功效和降低的毒性，这不能从动物模型研宄中预 测到。令人惊讶地，优良的功效允许治疗先前被认为耐受一种或多种标准抗癌疗法的肿瘤， 所述标准抗癌疗法包括母体化合物CPT-11，在体内由其衍生出SN-38。
[0024] 本发明方法可以包括使用CT和/或PET/CT或MRI以按规定的时间间隔测量肿瘤 反应。还可监测肿瘤标记物如CEA(癌胚抗原）、CA19-9、AFP、CA 15. 3或PSA的血液水平。 剂量和/或施用方案可以根据成像和/或标记物血液水平的结果视需要进行调整。
[0025] 本发明要求保护的组合物及方法的惊人结果是对高剂量抗体-药物缀合物的出 人意料的耐受性，甚至在重复输注时也如此，仅观察到相对低级的恶心与呕吐毒性，或可应 付的嗜中性白细胞减少症。进一步惊人的结果是缺乏抗体-药物缀合物的积聚，不同于具 有缀合至白蛋白、PEG或其他载体的SN-38的其它产物。积聚缺乏与改善的耐受性以及即 使在重复或增加给药之后的严重毒性缺乏有关。这些惊人结果允许剂量及递送方案的最佳 化，具有出乎意料高的功效及低毒性。要求保护的方法在具有先前耐药性癌症的个体中提 供15%或以上、优选20%或以上、优选30%或以上、更优选40%或以上的实体肿瘤尺寸的 缩小（如通过最长直径来测量）。普通技术人员将认识到，肿瘤尺寸可以通过以下多种不同 技术来测量，如总肿瘤体积、在任何维度上的最大肿瘤尺寸或在若干维度上的尺寸测量组 合。这可以使用标准放射性操作如计算机断层摄影术、超声波检查法和/或正电子发射断 层摄影术来完成。测量尺寸的手段与观察用免疫缀合物治疗减小肿瘤尺寸（优选地造成肿 瘤的消除）的趋势相比是次要的。
[0026] 虽然免疫缀合物可以周期性弹丸注射施用，但在替代实施方案中，免疫缀合物 可以通过连续输注抗体-药物缀合物来施用。为了提高免疫缀合物在血液中的Cmax 并延长PK，连续输注可以例如通过留置导管来施用。这类装置在本领域中是已知的， 如 HICKMAN?、BROVIAC? 或 PORT-A-CATH?.导管（参见，例如 Skolnik 等 人，Ther Drug Monit 32:741-48,2010)并且可以使用任何这类已知的留置导管。多种连 续输注泵也是本领域中已知的并且可以使用任何这类已知的输注泵。连续输注的剂量范围 可以在每日0. 1与3. Omg/kg之间。更优选地，这些免疫缀合物可以在2至5小时、更优选 地2-3小时的相对较短时间内通过静脉内输注施用。
[0027] 在特别优选的实施方案中，免疫缀合物及给药方案在耐受标准疗法的患者中是有 效的。例如，hMN-14-SN-38免疫缀合物可以向对依立替康（SN-38的母体试剂）的先前疗法 无反应的患者施用。令人惊讶的是，耐依立替康的患者可以对hMN-14-SN-38显示部分或甚 至是完全反应。免疫缀合物特异性地靶向肿瘤组织的能力可以通过改进治疗剂的靶向和增 强其递送来克服肿瘤抗性。或者，抗CEACAM5免疫缀合物如hMN-14可以与抗CEACAM6免疫 缀合物如hMN-3或hMN-15共同施用。其它抗体-SN-38免疫缀合物与替代的标准治疗性处 理相比可以显示类似的改进功效和/或降低的毒性，并且不同SN-38免疫缀合物的组合或 SN-38-抗体缀合物与缀合至放射性核素、毒素或其它药物的抗体的组合可以提供甚至更改 进的功效和/或降低的毒性。具体优选的受试者可以是转移性结肠癌患者、三阴性乳腺癌 患者、HER+、ER+、黄体酮+乳腺癌患者、转移性非小细胞肺癌（NSCLC)患者、转移性胰腺癌 患者、转移性肾细胞癌患者、转移性胃癌患者、转移性前列腺癌患者或转移性小细胞肺癌患 者。
【附图说明】
[0028] 图1.用MAb-CL2A-SN_38缀合物的带有Capan 1人胰腺癌的无胸腺裸小鼠的体内 疗法。
[0029] 图2.用MAb-CL2A-SN_38缀合物的带有BxPC3人胰腺癌的无胸腺裸小鼠的体内疗 法。
[0030] 图3.用hMN-14-CL2A-SN-38缀合物的带有LS174T人结肠癌的无胸腺裸小鼠的体 内疗法。
[0031] 图4.带有GW-39肺转移性疾病的hMN14-CL-SN-38治疗小鼠的存活曲线。
[0032] 图5.hRS7-SN_38 ADC在若干实体肿瘤-异种移植物疾病模型中的治疗功效。 hRS7-CL2-SN-38和hRS7-CL2A-SN-38 ADC治疗的功效在带有人非小细胞肺、结肠直肠、胰 腺以及鳞状细胞肺肿瘤异种移植物的小鼠中加以研宄。所有的ADC及对照都以所指示的量 (表示为每剂量SN-38的量；长箭头=缀合物注射，短箭头=依立替康注射）来施用。（A) 带有Calu-3肿瘤的小鼠 （N = 5-7)是用hRS7-CL2-SN-38每4天注射一次，总共注射4次 (q4dX 4)。⑶带有COLO 205肿瘤的小鼠 （N = 5)是用ADC注射8次（q4dX 8)或者用依 立替康的MTD每两天注射一次，总共注射5次（q2dX 5)。（C) Capan-I (N = 10)或（D)带有 BxPC-3肿瘤的小鼠（N= 10)是用所指示的试剂治疗，每周两次，持续4周。（E)除每周两次 给予ADC持续4周之外，带有SK-MES-I肿瘤（N = 8)的小鼠接受CPT-11的MTD (q2dX 5)。
[0033] 图6.依帕珠单抗（Emab) -SN-38与维妥珠单抗（Vmab) -SN-38缀合物在皮下Ramos 模型中的比较功效。向肿瘤平均值大约是〇. 35cm3 (0. 20-0. 55cm3)的裸小鼠 （N = 10只/ 组）施用0. 25或0. 5mg每种缀合物，每周两次，持续4周。
[0034] 图7.在带有皮下Ramos肿瘤的裸小鼠中Emab抗⑶22-SN-38缀合物（实线）对 比不相关的拉贝珠单抗（Lmab)-SN-38缀合物（虚线）的特异性。向动物腹膜内给予缀合 物的剂量，每周两次，持续4周。给予A、B及C每剂量75、125及250 μ g的每种缀合物（基 于22g的平均重量分别是54. 5、91及182g/kg的SN-38)。基于进展时间（TTP)的存活至 3. 0cm3,肿瘤起始于0. 4cm3的平均尺寸。比较Emab-SN-38与Lmab-SN-38缀合物的中值存 活（示出）的P值显示于每个图中。C.另一组动物的存活曲线（灰色实线），向所述动物 每周一次腹膜内注射依立替康（6. 5g/剂量；SN-38等效物大致与250-g剂量的Emab-SN-38 缀合物相同）。
[0035] 图8.在施用IMMU_130(拉贝珠单抗-NS-38)之前患者的先前治疗史。先前治疗 包括IV期CRC结肠切除术/肝切除术（部分肝叶）、肝转移的射频消融疗法、肺转移的楔形 切除术以及用依立替康/奥沙利钼、Folfirinox、Folfirinox+贝伐单抗、贝伐单抗+5-FU/ 甲酰四氢叶酸、FolFiri、Folfiri+西妥昔单抗及西妥昔单抗单独进行的化学疗法。患者通 过每隔一周缓慢IV输注总共17个治疗剂量来接受16mg/kg IMMU-132的剂量。
[0036] 发明详述
[0037] 定义
[0038] 在随后的描述中，使用许多术语并且提供以下定义以便了解要求保护的主题。在 本文中未明确定义的术语是根据其一般及普通含义来使用。
[0039] 除非另作说明，二±或二赴是指"一个（种）或更多个（种）"。
[0040] 本文所用的术语愈意指一个值加或减十个百分比（10% )。举例来说，"约100"是 指在90与110之间的任何数值。
[0041] 如本文所用的抗並是指全长（即天然存在的或由正常免疫球蛋白基因片段重组 工艺形成的）免疫球蛋白分子（例如IgG抗体）或免疫球蛋白分子的抗原结合部分，如抗 体片段。抗体或抗体片段可以在要求保护的主题的范围内被缀合或另外被衍生化。这类抗 体包括但不限于1861、1862、1863、1864(及1864亚型）以及18八同种型。如以下所用，缩 写"MAb"可以可交换地用于指示抗体、抗体片段、单克隆抗体或多特异性抗体。
[0042] 抗体片段是抗体如F (ab' ) 2、F (ab) 2、Fab '、Fab、Fv、scFv (单链Fv)、单结构域抗 体（DAB或VHH)及其类似物的一部分，包括以上所引用的IgG4的一半分子（van derNeut Kolfschoten 等人（Science 2007 ;317(14S印t) :1554-1557)。不考虑结构，使用的抗体片 段与由完整抗体识别的相同抗原结合。术语"抗体片段"还包括合成的或基因工程化蛋白， 其通过结合至特定抗原以形成复合物来发挥抗体作用。例如，抗体片段包括由可变区组成 的分离的片段，如由重链和轻链的可变区组成的"Fv"片段及其中轻链与重链可变区通过肽 接头（"scFv蛋白"）连接的重组单链多肽分子。片段可以不同的方式构建以产生多价和 /或多特异性结合形式。
[0043] 裸抗体通常是不缀合至治疗剂的整个抗体。裸抗体可以由例如Fc依赖性功能如 补体结合（CDC)及ADCC (抗体依赖性细胞毒性）展现治疗性和/或细胞毒性作用。然而， 其它机制如细胞凋亡、抗血管生成、抗转移性活性、抗粘附活性、抑制异型或同型粘附以及 干扰信号传导途径也可提供治疗性作用。裸抗体包括多克隆及单克隆抗体、天然存在的或 重组抗体，如嵌合的、人源化或人抗体及其片段。在一些情况下，"裸抗体"也可能是指"裸" 抗体片段。如本文所定义，"裸"与"非缀合"同义并且是指不连接或缀合至治疗剂。
[0044] 嵌合抗体是重组蛋白，其含有抗体重链和轻链两者的可变结构域,包括来源于一 个物种的抗体、优选啮齿动物抗体、更优选鼠科抗体的互补决定区（CDR)，但抗体分子的恒 定结构域来源于人类抗体。对于兽医应用来说，嵌合抗体的恒定结构域可以来源于其它物 种，如灵长类动物、猫或狗。
[0045] 人源化抗体是其中来自一个物种的抗体的CDR(例如鼠科抗体）从鼠科抗体的可 变重链和轻链转移到人可变重链和轻链结构域（构架区）中的重组蛋白。抗体分子的恒定 结构域来源于人抗体的那些恒定结构域。在一些情况下，人源化抗体的构架区的特定残基 (特别是接触或接近于CDR序列的那些）可以被修饰，例如被置换为来自原始鼠科、啮齿动 物、低于人的灵长类动物或其它抗体的相应残基。
[0046] 人抗体为例如从转基因小鼠中获得的抗体，所述转基因小鼠已被"工程化"以响 应于抗原挑战而产生人抗体。在此技术中，将人重链基因座和轻链基因座的元件引入