角豆胚芽提取物与咖啡因的组合作为减肥活性剂的美容用图【专利说明】角豆胚芽提取物与咖啡因的组合作为减肥活性剂的美容用途发明领域[0001]本发明涉及美容剂的领域，并更具体地涉及美容减肥方法的领域。它涉及角豆(CeratoniasiliquaL.)胚芽提取物与咖啡因或其衍生物的组合作为减肥活性剂的美容用途。本发明还涉及角豆胚芽提取物与咖啡因或其衍生物的组合用于增加水甘油通道蛋白的表达和促进脂肪细胞中所包含的甘油三酯的消除的美容用途。[0002]本发明还涉及美容护理的方法，其包括将在含有生理学上可接受的介质的组合物中的角豆胚芽提取物与咖啡因或其衍生物的组合在身体或者面部的至少一部分皮肤上局部施用，以获得减肥作用，并更具体地以减少局部过量的体脂。[0003]发明背景[0004]皮下脂肪组织位于下皮。它是一种结缔组织，其中主要是脂肪细胞，所述结缔组织以直径为约5mm的叶（lobe)形式排列，由细小的连接桥（fineconnectivebridge)分隔。各脂肪细胞包含基本上含有甘油三酯并且直径可为40-120μm的大量脂质泡。[0005]可认为脂肪组织是不断更新的动态储蓄泡，其平衡饮食摄入与身体的能量需求。因此，脂肪细胞确保脂质的合成、蓄积和释放。该过程依赖于激素，例如胰岛素或瘦素。[0006]脂质合成或脂肪生成源自于葡萄糖和饮食来源的甘油三酯。相反地，在脂解期间，储存在脂肪细胞中的甘油三酯可被水解，以释放脂肪酸、甘油以及甘油单酯和甘油二酯。[0007]由此释放的非酯化脂肪酸可以在血液中循环，然后可用于身体其它细胞的能量需求，或很快被脂肪细胞再使用，以再次通过脂肪生成产生甘油三酯。[0008]如果在体内发生促进脂肪生成的持续失调，则储存在脂肪细胞中的脂质的量增加，导致体脂块的增生，并更具体地导致局部体脂过量的外观。实际上，在成人中，在性激素的作用下，脂肪组织根据性别而不同地分布，并形成轮廓。脂肪组织在女性的胸部、髋部、臀部和大腿蓄积，并在男子的项部和肩部蓄积。另外，局部过量的体脂经常与皮肤的改变相关，其导致微凹（dimpled)或"橙皮"外观。这种局部过量的体脂目前被认为是没有吸引力的，受影响的人们可能想要通过使用美容方法来改善其皮肤的外观和轮廓。[0009]因此，已经鉴定出对脂解或脂肪生成有作用，意图用于减肥作用的多种活性剂。在它们中，可举出以下物质：[0010]-黄嘌呤碱（黄嘌呤衍生物），例如茶碱、咖啡因、可可碱（在专利FR2609395、FR267401中描述），使用它们促进脂肪细胞的脂肪分解活性的作用。[0011]-合成肽，例如序列为Arg-Gly-Ser-NHd^ic(在专利FR2858769中描述），或序列为Pro-Leu-Asp-Thr-Ala-Lys-Val-Arg-Leu-Gln的狀（在专利FR2879924中描述），使用它们在线粒体中使辅酶的再氧化与ADP磷酸化成ATP之间解偶联的作用。[0012]-植物提取物，例如掌形藻属（Palmaria)或红皮藻属（Rhodymenia)的海藻提取物(在专利FR2887447中描述）、二叶银杏（gingkobiloba)提取物（参见专利FR2669537)，或大豆黄酮或异黄酮（在专利WO01/64177中描述）。[0013]然而，这些产品随时间通常具有温和的或有限的效能。因此，提供具有作为减肥活性剂的显著效能的新活性美容剂是重要的。[0014]用于解决技术问题的方案在于角豆胚芽提取物与咖啡因或其衍生物的组合的美容用途。发明人的确已证明，角豆胚芽提取物作用于水甘油通道蛋白，从而促进脂解期间从脂肪细胞释放的甘油的转运。该提取物与咖啡因或其衍生物（已知其增加脂解）的组合使得能够获得具有显著特性的减肥活性剂。[0015]水通道蛋白是在细胞和内部环境之间运载水和溶液中的小分子的一类跨膜蛋白质。水通道蛋白可以分为两个不同的亚组：只能够转运水的水通道蛋白，以及除了能够转运水还能够转运甘油的水甘油通道蛋白。[0016]在该第二亚组中，鉴定水甘油通道蛋白7位于人脂肪细胞膜中，并且在储存脂肪的代谢中起到重要作用（MarikoHara-Chikuma等人，Progressiveadipocytehypertrophicityinaquaporin_7deficientmice,J.Biol.Chem.,vol.280,no.16,2005年4月22日）。[0017]因此，水甘油通道蛋白的具体特性使它们成为促进包含在脂肪细胞中的脂质的消除的有利的生物目标。[0018]"脂质的消除"是指导致甘油从脂肪细胞排出的脂解的现象。[0019]本发明以及所得的优点会在阅读说明书后更好地理解。【
发明内容】[0020]首先，本发明涉及角豆胚芽提取物与咖啡因或其衍生物的组合作为减肥活性剂的美容用途。[0021]根据本发明使用的角豆胚芽提取物与咖啡因或其衍生物的组合特别提供以下优占.[0022]-它增加脂解，[0023]-它增加水甘油通道蛋白的表达，[0024]-它促进脂质的消除以及甘油从脂肪细胞的排出，[0025]-它减少局部过量的体脂，[0026]-它减弱皮肤的"橙皮"外观。[0027]因此，在本发明的意义上的"减肥活性剂"是指角豆胚芽提取物与咖啡因或其衍生物的组合，其用于减少过量的局部体脂，所述过量的局部体脂被认为是没有吸引力的，并经常与皮肤的微凹或"橙皮"外观相关。[0028]角豆种子（长角豆属（Ceratonia)植物），更具体地所述种子的胚乳部分由于其丰富的半乳甘露聚糖含量，以"角豆胶"的名字被广泛用于食品工业。胚芽是种子中蛋白质含量最高的部分，并可被容易地分离。[0029]已记载通过酶法水解获得角豆胚芽蛋白提取物（J.Parrado等人，BioresourceTechnology99,2008)。然而，该提取物具有太高的植物激素（内分泌干扰物）浓度，以至于在美容剂中不可使用。[0030]为了实施本发明，可使用本领域技术人员已知的任何提取或纯化方法，例如在欧洲专利申请EP0689771中描述的方法。[0031]"肽提取物"是指主要由肽化合物代表的化合物的混合物，其存在于大量的水或其它溶剂、极性或这些溶剂的混合物的溶液中。[0032]"肽化合物"是指存在于本发明的肽提取物中的蛋白质片段和肽。[0033]"局部施用"是指将本发明的活性剂或包含其的组合物在皮肤或粘膜的表面上施用和涂布。[0034]"生理学上可接受的"是指适合与皮肤或粘膜接触而不引起毒性反应或不耐受的任何化合物。[0035]"局部过量的体脂"是指皮下脂肪组织的肥大部位，其可具有"橙皮"外观。[0036]在下面的描述中，术语"用于减肥作用的活性剂"和"角豆胚芽提取物与咖啡因或其衍生物的组合"会被可互换地使用。[0037]本发明的角豆胚芽提取物可以通过提取植物来源的蛋白质，随后通过释放生物活性的肽化合物的受控水解来获得。[0038]在美容剂中使用肽提取物，特别是低分子量的肽提取物具有许多优点。除了产生之前在起始蛋白质混合物中不存在的肽化合物这一事实之外，水解和纯化使得能够获得具有更高稳定性的混合物，获得更易于再次制备并且在美容剂中不引起变态反应的组合物。[0039]为了进行提取，使用角豆（长角豆属的植物）种子胚芽。可使用本领域技术人员已知的任何提取或纯化方法来制备本发明的提取物。例如，受控水解使得能够释放肽化合物。以下是为了实施本发明可以但不是必需的：或者提取有关的蛋白质，然后将其水解，或者对原始提取物进行水解，然后纯化肽化合物。[0040]在第一步骤中，研磨包含在种子中的胚芽以获得粉末或碎粉。可将由此获得的粉末首先通过纤维素酶处理，以促进糖的消除，特别是不溶性多糖。[0041]然后，根据修改的常规方法（Osborne,T.B.，TheVegetableProteins,2ndEdition.Longmans,GreenandCo.，London,1924)进行胚芽蛋白质的提取；将研磨的角豆胚芽在包含不溶性吸附剂聚乙烯聚吡咯烷酮（PVPP)产品（0.01-20%)的碱性溶液中悬浮；事实上，已知随后的水解和纯化通过该方法变得容易。特别是，与蛋白质相互作用的酚类物质的浓度明显降低。然后，可通过改变离子强度或通过酸化介质来使蛋白质沉淀，由此使得能够消除可溶性组分和核酸。然后，用有机溶剂（例如乙醇或甲醇）洗涤沉淀物，然后通过真空干燥来蒸发溶剂。将富含蛋白质的沉淀置于水或其它溶剂的溶液中，由此构成提取物的更纯的形式。[0042]所述提取也可以在中性或酸性介质中进行，仍然是在聚乙烯聚吡咯烷酮的存在下。在过滤步骤之后，然后采用常规的沉淀剂（例如盐（氯化钠、硫酸铵）或有机溶剂（醇、丙酮））来进行沉淀步骤。可将所获得的沉淀物通过放置在水或其它溶剂的溶液中透析来从沉淀剂中分离。[0043]在离心和过滤步骤之后收集包含蛋白质、碳水化合物和可能包含的脂当前第1页1 2 3 4