一种用于治疗浅表性胃炎的藏药组合物及其应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种治疗浅表性胃炎的藏药组方，属于藏药领域。
【背景技术】
[0002] 慢性浅表性胃炎（CSG)是由各种不同病因引起的胃黏膜病变，以胃黏膜层中浆细 胞及淋巴细胞等慢性炎症细胞浸润为主要表现，并伴有胃黏膜的萎缩性改变，是临床上最 多见的慢性胃病，目前尚无特效的治疗方法。
[0003] 六味安消散是藏医学经典验方，已有100多年的历史，目前收载于《中国药典》 2010年版一部。其配方组成为藏木香50g、大黄200g、山奈100g、北寒水石（煅）250g、诃子 150g、碱花300g，主要用于脾胃不和、积滞内停所致的胃痛胀满、消化不良、便秘、痛经。碱花 为主含碳酸钠的分枝状结晶，可消滞，用于胃寒，消化不良。六味安消散方中碱花用量很大， 为主药。
【发明内容】
[0004] 本发明的一个目的是提供一种用于治疗慢性浅表性胃炎的藏药组合物。
[0005] 本发明所述的藏药组合物，由下列重量份的原料药制成的活性组分组成：藏木香 50份、大黄200份、山奈100份、煅北寒水石250份、诃子150份。
[0006] 本发明的活性组分可以是所述原料药粉碎后的细粉；也可以将所述原料药中的藏 木香、大黄、山奈、诃子采用常规方法提取、干燥后，加入煅北寒水石，共同粉碎成细粉制得。
[0007] 本发明的另一个目的是提供所述藏药组合物在制备治疗慢性浅表性胃炎药物中 的应用。可在所述的藏药组合物的活性组分中加入制备不同剂型时药剂学允许的各种常规 辅料，如崩解剂、润滑剂、粘合剂等以常规的中药制剂方法，制备成任何一种常用口服剂型， 如散剂、丸剂、胶囊剂、颗粒剂、片剂等。
[0008] 本发明的有益效果：
[0009] 通过对大鼠慢性浅表性胃炎的药效学试验表明，模型大鼠使用本发明的藏药组合 物后，体重有显著的增长，与正常组无差异（P> 0.05);能有效抑制胃黏膜炎症而减少胃黏 膜病理性损伤，促进胃循环血流量，降低血清GAS的含量，抑制G细胞活化，从而减少胃酸分 泌，保护胃黏膜损伤部位，本组方用于治疗慢性浅表性胃炎有良好的效果。
【附图说明】
[0010] 图1为正常大鼠胃黏膜电镜扫描图；
[0011] 图2为CSG模型大鼠胃黏膜电镜扫描图；
[0012] 图3为维酶素片治疗CSG大鼠胃黏膜电镜扫描图；
[0013] 图4为六味安消散治疗CSG大鼠胃黏膜电镜扫描图；
[0014] 图5为新组方1组治疗CSG大鼠胃黏膜电镜扫描图；
[0015] 图6为新组方2组治疗CSG大鼠胃黏膜电镜扫描图。
【具体实施方式】
[0016] 实施例1
[0017] 取藏木香50g、大黄200g、山奈100g、北寒水石（煅）250g、诃子150g，共同粉碎成 细粉，混匀，分装，即得散剂1。
[0018] 实施例2
[0019] 藏木香50g、大黄200g、山奈100g、北寒水石（煅）250g、诃子150g。以上5味，除 北寒水石（煅）外，其余藏木香等4味，加水煎煮2次，第一次2小时，第二次1小时，滤过， 滤液合并，浓缩成稠膏，加入适量淀粉，混匀，干燥，加入北寒水石（煅），共同粉碎成细粉， 混匀，分装，即得散剂2。
[0020] 实验例、对大鼠慢性浅表性胃炎的药效学试验
[0021] 1试验材料
[0022] 1. 1 动物
[0023] SD大鼠，体重200±20g，SPF级，雌雄各半，6周龄，由山东中医药大学实验动物中 心提供。
[0024] 1. 2药品及试剂
[0025] 维酶素片（批号：141009,北海阳光药业有限公司）；大鼠胃泌素（GAS)试剂盒（批 号：201209)、大鼠胃动素（MTL)elisa试剂盒（批号：201209,Bio-swamp公司）；胃蛋白酶 测试盒（批号：20121011，南京建成生物工程研宄所）；水合氯醛（批号：20101002,天津市 科密欧化学试剂开发中心）；2,4,6_三硝基酚（批号：20110904,广州化学试剂厂）；PBS缓 冲液试剂包（批号：AR0030,博士德生物工程有限公司）。各药材均由金诃藏药股份有限公 司提供。其它试剂均为分析纯或采用分析纯临时配置。
[0026] 1. 3主要仪器
[0027] UV-2450型岛津紫外分光光度计；岛津AUW220D电子天平；YP10002小动物电子 称（上海佑科仪器仪表有限公司）；HC3018R高速冷冻离心机（安徽中科科学仪器有限公 司）；TDL-40B低速大容量离心机（上海安亭科学仪器厂）；ML191激光多普勒血流计、 Powerlabl6/30十六道生理信号采集系统（澳大利亚Adinstruments公司）；6219酸度计 (上海任氏电子有限公司）；EG1160组织病理包埋仪、RM2135组织病理切片机（德国Leica 公司）；ECLIPSETi-S电子显微镜（日本Nikon公司）；BH-2光学显微镜（日本Olympus公 司）；S-3000N扫描电镜（日本Hitachi公司）；iMARK酶标仪（美国Bio-Rad公司）。
[0028] 2试验方法
[0029] 2. 1大鼠慢性浅表性胃炎（CSG)模型复制
[0030] SPF级SD大鼠，200±20g，雌雄各半。适应性饲养7天后，剔除不合格动物，随机 分为正常对照组，模型复制组。模型复制组每天0. 02%氨水自由饮用，同时配合饥饱失常 (1天禁食，2天饱食）复制慢性浅表性胃炎模型。分别于造模开始后在第60d、80d、100d随 机抽取大鼠进行胃组织病理学检测，以出现CSG胃组织的病理改变判定模型复制成功，于 造模后100天模型复制成功。
[0031] 2. 2分组及给药模型复制组大鼠随机分组：新组方1组（实施例1所得散剂1);新 组方2组（实施例2所得散剂2);六味安消散组；阳性药物维酶素片对照组；模型对照组， 并和正常对照组一同进入试验。正常对照组及模型对照组每天灌胃与药物组等体积水，其 它组分别灌胃相应药物溶液，连续灌胃30天，每天一次，2. 0ml/100g体重。给药量分别为：
[0032] 维酶素片对照组：0? 035g/100g
[0033] 新组方1组及新组方2组：0. 09g原药材/100g
[0034] 六味安消散组：0? 09g/100g
[0035] 2. 3统计与分析
[0036] 结果以，；！S表示，数据釆用SPSS17. 0软件进行分析。
[0037] 3评价指标
[0038] 3. 1大鼠一般生理状况及体重变化观察
[0039] 给药期间，每天观察大鼠饮食、进水情况及动物一般生理状况，记录异常表现，测 定给药后15、30天大鼠体重。以体重净增加值为评价指标，按以下公式计算：
[0040] 体重净增加（Ag)=给药后体重一给药前体重。
[0041] 3. 2胃黏膜损伤情况观察
[0042] 幽门环下0. 3cm处结扎肠管，由食道向胃腔注入lOmlpH7. 2-7. 6的PBS溶液，随 即食道结扎，取出胃并浸泡于冰水中。15min后沿胃大弯剪开暴露胃腔，去除内容物，记录胃 黏膜损伤情况。胃黏膜损伤率（％ )=胃黏膜损伤面积/胃黏膜总面积*100%
[0043] 3. 3胃组织病理检查
[0044] 实验周期结束后，处死大鼠，胃组织用10%甲醛溶液固定并进行常规石蜡包埋， 切片，经HE染色，以慢性炎症程度、活动性程度、变形及间质充血水肿程度三个作为评分指 标，每项均为正常（_)、轻度（+)、中度（++)、重度（+++)，最终以胃体部和幽门部两者评分之 和为炎性评分结果：
[0045] 正常0分；轻度1-4分；中度5-8分；重度9分以上
[0046] 3. 4胃黏膜扫描电镜观察
[0047] 沿胃大弯剪开后取0. 5cm2幽门部，pH7. 2-7. 6PBS缓冲盐溶液振荡洗涤3次，每次 3min，随即放入2. 5%戊二醛溶液中，4°C固定4h以上。随后，胃组织梯度酒精脱水、醋酸异 戊酯置换，真空干燥、喷金，S-3000N扫描电镜下观察，记录500、1000、2000倍下胃黏膜及上 皮细胞形态。
[0048]3. 5胃黏膜上皮细胞功能评价
[0049] 胃组织石蜡切片后，釆用阿利新兰-糖蛋白结合法（AB-PAS)染色，高倍生物显微 镜下（400X)，记录幽门部和幽门部各区3个独立观察面（每个观察面至少有6个以上连续 直线排列的表面上皮细胞）。显微镜及软件观察上皮细胞粘蛋白分泌状态，其中酸性黏液呈 蓝色（IPP软件以红色标记），混合性黏液呈紫红色（IPP软件黄色标记）和上皮细胞呈淡红 色（IPP软件以绿色标记）。按以下公式计算上皮细胞粘蛋白指数和酸性粘蛋白指数：
[0050] 上皮细胞粘蛋白指数（％ )=(酸性黏液面积+混合黏液面积/上皮细胞面 积）X100%
[0051] 酸性粘蛋白指数（％ )=(酸性黏液面积/上皮细胞面积）X100%
[0052] 3. 6胃蛋白酶活性及pH测定
[0053] 大鼠用10%水合氯醛（0. 35ml/100g)麻醉后仰位姿势，垫高头部以高于胃位置， 幽门下0. 3cm处结扎。5小时后，剪开结扎处并用10ml离心管收集5小时胃液，4000rpm/ min离心15min，吸取上清液测量体积并转入2.OmlEP管，离心lOmin，取上清液按试剂盒说 明书测定胃蛋白酶活性，酸度计及精密pH试纸测定pH值。
[0054] 3. 7胃微循环血流量测定
[0055] 大鼠麻醉后仰位姿势，左最后助骨下0. 3-0. 5cm被毛，剪开皮肤及肌肉层，剪短胃 小弯处系膜充分暴露胃体，在胃左动脉食管支3-4间用激光多普勒血流计针式探头测定胃 体部微循环血流量（测试时，生理盐水纱布保持胃体湿润），在胃体部与幽门部交界处（避 开大动脉、静脉），测定幽门部血流量。
[0056] 3. 8胃泌素（GAS)、胃动素（