一种盐酸头孢噻呋脂质体冻干剂及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及兽药技术领域，尤其涉及一种盐酸头孢噻呋脂质体冻干剂及其制备方 法。
【背景技术】
[0002] 盐酸头孢噻呋是具有兽用第3代头孢类抗生素，抗菌谱广、抗菌活性强，具有稳定 的内酰胺环，不易产生耐药性及交叉耐药性，对革兰氏阳性菌、阴性菌及一些厌氧菌都 具有很强的抗菌活性。盐酸头孢噻呋在临床上广泛用于防治牛、马、猪、羊的细菌感染性疾 病。国内外的主要头孢噻呋产品有头孢噻呋钠盐的粉针剂以及盐酸头孢噻呋的混悬剂。因 需频繁注射给药，其造成的应激反应会影响药物的疗效、抑制动物的生长和免疫功能。因 此，开发稳定的长效制剂，以减少给药次数、降低应激反应，使血药浓度平稳，提高药物的利 用率。脂质体作为药物的载体，将药物包裹后可改善药物的理化性质，降低刺激性，使药物 平稳释放。目前国内未见盐酸头孢噻呋脂质体的报道。
[0003] 脂质体是一种由磷脂分子构成的双分子结构的新型药物载体，能选择性的运转药 物，控制药物的释放度，保护药物分子免遭血流中的酶等成分的降解，防止因代谢而造成的 药效下降，延长有效血药浓度时间，提高生物利用度。聚乙二醇（PEG)作为一种亲水的多 聚体，可以为脂质体提供一种的空间障碍，使得脂质体表面更加稳定，即形成稳定脂质体 (SL)。SL易停留在毛细管丰富而且通透性高的部位，如感染或损伤的内皮组织，其毛细血管 的通透性增强。这就使得SL可用于抗感染药物的载体。脂质体在发挥它优势的同时，也存 在一定的局限性。由卵磷脂和胆固醇等组成的传统脂质体属于热力学不稳定体系，在水性 介质中稳定差，包封的药物易泄露，在体内外的弱稳定性限制了其作为药物载体的应用。
[0004] 冻干技术全称是真空冷冻干燥技术，是将药物溶液在体系共熔点以下预冷冻成固 体，然后在适度的真空度和温度条件下使冰升华，从而除去其中水分的一种干燥技术。与 其他干燥方法相比，冻干技术具有药品不变质、易长期储存、脱水彻底、易复水再生、易进行 无菌操作等优点。冻干脂质体既可以单独制备、储存，又可以有效延长药品在体内的作用时 间，提高药品在体内的生物利用度。本发明将盐酸头孢噻呋脂质体包被后冷冻干燥，可将其 制备成冻干粉避免磷脂和药物的水解，粒子聚集、融合及药物泄漏等问题，以提高制剂的长 期稳定性。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是提供一种盐酸头孢噻呋脂质体冻干剂及其制备方法。该制剂可用 于防治由革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌以及一些厌氧菌引起的牛、马、猪、羊细菌感染性疾 病，制备方法简单，性质稳定，疗效显著。
[0006] 本发明采取的技术方案是： 本发明的盐酸头孢噻呋脂质体冻干剂的原料的重量份组成如下： 盐酸头孢噻呋 3~10份 卵磷脂 15~100份 胆固醇 15~100份 聚乙烯醇2000 4. 5~13. 5份。
[0007] 作为优选的技术方案之一：的盐酸头孢噻呋脂质体冻干剂的原料的重量份组成如 下： 盐酸头孢噻呋 4份 卵磷脂 20份 胆固醇 20份 聚乙烯醇2000 5份。
[0008] 作为优选的技术方案之二：本发明的盐酸头孢噻呋脂质体冻干剂的原料的重量份 组成如下： 盐酸头孢噻呋 6. 5份 卵磷脂 45. 5份 胆固醇 23份 聚乙烯醇2000 6份。
[0009] 作为优选的技术方案之三：本发明的盐酸头孢噻呋脂质体冻干剂的原料的重量份 组成如下： 盐酸头孢噻呋 8份 卵磷脂 40份 胆固醇 40份 聚乙烯醇2000 10份。
[0010] 本发明的盐酸头孢噻呋脂质体冻干剂的制备方法的具体步骤如下： (1) 脂质体的制备： 分别将卵磷脂、胆固醇用氯仿或乙醚中的一种或两种溶解，将盐酸头孢噻呋用甲醇溶 解，将两种溶液混合，混合均匀后置于梨形烧瓶中，减压旋转蒸发至梨形烧瓶内壁形成一层 均匀薄膜，将聚乙二醇2000,溶于pH 7. 0的磷酸盐缓冲溶液中，然后倒入烧瓶中，缓慢振摇 至膜全部洗下为止，得脂质体混悬液，置超声仪中超声至半透明溶液，0. 45 μ m滤膜过滤，装 于试剂瓶中，密闭，低温保存，即得盐酸头孢噻呋脂质体； (2) 冻干： 步骤（1)中得到的脂质体混悬液，加入冻干保护剂，混匀，分装与西林瓶中，冷冻后放入 冷冻干燥机中冻干，即得载有盐酸头孢噻呋的脂质体冻干剂。
[0011] 步骤（2)中，所述的冻干保护剂为葡萄糖、海藻糖和甘露醇中的一种或几种，加入 量与盐酸头孢噻呋的重量比为3~6 :3~10。
[0012] 作为优选的技术方案之四：步骤（2)中，所述的冻干保护剂的加入量与盐酸头孢 噻呋的重量比为4 :4。
[0013] 作为优选的技术方案之五：步骤（2)中，所述的冻干保护剂的加入量与盐酸头孢 噻呋的重量比为5 :6. 5。
[0014] 作为优选的技术方案之六：步骤（2)中，所述的冻干保护剂的加入量与盐酸头孢 噻呋的重量比为4 :8。
[0015] 本发明以卵磷脂和胆固醇为脂质分子膜载体；加入聚合分子聚乙二醇2000,使得 脂质体空间稳定。
[0016] 作为优选的技术方案之七：每100mL脂质体中含有盐酸头孢噻呋4g，卵磷脂20g， 胆固醇20g，聚乙二醇2000 5g ;脂质体冻干时加入冻干保护剂4g。
[0017] 作为优选的技术方案之八：每100mL脂质体中含有盐酸头孢噻呋6. 5g，卵磷脂 45. 5g，胆固醇23g，聚乙二醇2000 6g ;脂质体冻干时加入冻干保护剂5g。
[0018] 作为优选的技术方案之九：每100mL脂质体中含有盐酸头孢噻呋8g，卵磷脂40g， 胆固醇40g，聚乙二醇2000 IOg ;脂质体冻干时加入冻干保护剂4g。
[0019] 作用用途：主要用于革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌引起的呼吸道疾病。
[0020] 用法用量：以头孢噻呋计。肌内注射：一次量，每Ikg体重，猪3~5mg，一日1次， 连用3~4日。
[0021] 不良反应：①极少数病畜对头孢噻呋过敏。
[0022] 头孢噻呋有一定的肾毒性。
[0023] 可能引起胃肠道菌群紊乱或二重感染。
[0024] 注意事项：①本品用注射用水或稀释液稀释后使用，现用现配。
[0025] ②不宜冷冻。
[0026] 发生过敏反应的动物需及时注射肾上腺素进行解救。
[0027] 置儿童无法触及处。
[0028] 有青霉素和头孢菌素类药物过敏史的工作人员禁止接触本品。
[0029] 本发明的积极效果如下： 本发明首次揭示了盐酸头孢噻呋脂质体冻干剂及其制备方法，该脂质体包封率好，月旨 质体冻干剂经过长期稳定考察，稳定性良好；复溶后在液体介质中分散性好、性状稳定。通 过临床疗效试验证明与混悬剂相比，此脂质体冻干剂给药体内循环时间延长，对细菌感染 引起的猪呼吸道的疗效确切。
[0030]
【具体实施方式】
[0031] 为了使本发明实现的技术手段、达成目的易于明白了解，而结合具体进一步阐述 本发明。
[0032] 实施例1 一种盐酸头孢噻呋脂质体冻干剂，100mL脂质体和冻干保护剂按照以 下组分配比： 盐酸头孢噻呋 3g 卵磷脂 15g 胆固醇 15g 聚乙二醇2000 5g 磷酸盐缓冲液 补充至全量 冻干保护剂 3g ① 分别称取卵磷脂、胆固醇，用氯仿或乙醚中的一种或两种溶解； ② 称取盐酸头孢噻呋，用甲醇溶解，制成澄清溶液； ③ 将步骤①和步骤②的到的两种溶液混合，混合均匀后置于梨形烧瓶中，减压旋转蒸 发至梨形烧瓶内壁形成一层均匀薄膜； ④ 将聚乙二醇2000,溶于磷酸盐缓冲溶液中，然后倒入梨形烧瓶中，缓慢振摇至膜全部 洗下为止，得脂质体混悬液，置超声仪中超声至半透明溶液，0. 45 μ m滤膜过滤，装于试剂瓶 中，密闭，低温保存，即得盐酸头孢噻呋脂质体。
[0033] ⑤冻干：取步骤④中得到的脂质体混悬液，加入冻干保护剂，混匀，分装与西林瓶 中，冷冻后放入冷冻干燥机中常规冻干条件下冻干。即得载有盐酸头孢噻呋的脂质体冻干 剂。
[0034] 实施例2 -种盐酸头孢噻呋脂质体冻干剂，100mL脂质体和冻干保护剂按照以 下组分配比： 盐酸头孢噻呋 6. 5g 卵磷脂 45. 5g 胆固醇 23g 聚乙二醇2000 6g 磷酸盐缓冲液 补充至全量 冻干保护剂 5g ① 分别称取卵磷脂、胆固醇，用氯仿或乙醚中的一种或两种溶解； ② 称取盐酸头孢噻呋，用甲醇溶解，制成澄清溶液； ③ 将步骤①和步骤②得到的两种溶液混合，混合均匀后置于梨形烧瓶中，减压旋转蒸 发至梨形烧瓶内壁形成一层均匀薄膜； ④ 将聚乙二醇2000,溶于磷酸盐缓冲溶液中，然后倒入梨形烧瓶中，缓慢振摇至膜全部 洗下为止，得脂质体混悬液，置超声仪中超声至半透明溶液，0. 45 μ m滤膜过滤，装于试剂瓶 中，密闭，低温保存，即得盐酸头孢噻呋脂质体。
[0035] ⑤冻干：取步骤④中得到的脂质体混悬液，加入冻干保护剂，混匀，分装与西林瓶 中，冷冻后放入冷冻干燥机中常规冻干条件下冻干。即得载有盐酸头孢噻呋的脂质体冻干 剂。
[0036] 实施例3 -种盐酸头孢噻呋脂质体冻干剂，100mL脂质体和冻干保护剂按照以 下组分配比： 盐酸头孢噻呋 8g 卵磷脂 60g 胆固醇 60g 聚乙二醇2000 IOg 磷酸盐缓冲液 补充至全量 冻干保护剂 6g ① 分别称取卵磷脂、胆固醇，用氯仿或乙醚中的一种或两种溶解； ② 称取盐酸头孢噻呋，用甲醇溶解，制成澄清溶液； ③ 将步骤①和步骤②得到的两种溶液混合，混合均匀后置于梨形烧瓶中，减压旋转蒸 发至梨形烧瓶内壁形成一层均匀薄膜； ④ 将聚乙二醇2000,溶于磷酸盐缓冲溶液中，然后倒入梨形烧瓶中，缓慢振摇至膜全部 洗下为止，得脂质体混悬液，置超声仪中超声至半透明溶液，0. 45 μ m滤膜过滤，装于试剂瓶 中，密闭，低温保存，即得盐酸头孢噻呋脂质体。
[0037] ⑤冻干：取步骤④中得到的脂质体混悬液，加入冻干保护剂，混匀，分装与西林瓶 中，冷冻后放入冷冻干燥机中常规冻干条件下冻干。即得载有盐酸头孢噻呋的脂质体冻干 剂。
[0038] 实施例4 一种盐酸头孢噻呋脂质体冻干剂，100mL脂质体和冻干保护剂按照以 下组分配比： 盐酸头孢噻呋 IOg 卵磷脂 90g 胆固醇 60g 聚乙二醇2000 I