用于治疗癌症的方法和组合物的制作方法
【专利说明】
[0001] 本申请为申请号为200980118768. 6、申请日为2009年3月24日、发明名称为"用 于治疗癌症的方法和组合物"的专利申请的分案申请。
[0002] 相关申请
[0003] 本申请要求享有2008年3月27日提出的申请序列号为61/039, 987和2009年3 月23日提出的申请序列号为12/408,864的美国临时申请的优先权，在此将其全部引入本 文。
技术领域
[0004] 本发明通常涉及表现出协同抑制癌症生长和/或增殖的联合疗法。更具体地，本 发明涉及包括联合治疗（combination therapy)的试剂盒、组合物和方法，所述联合治疗将 偏亚砷酸钠或三氧化二砷以及抑制端粒的第二细胞毒性剂例如顺铂或紫杉烧，应用于治疗 包括实体瘤和白血病在内的癌症。
【背景技术】
[0005] 化学疗法，即将抗肿瘤剂全身用药使其通过血液循环系统流经全身，多年来单独 和经常结合外科手术和/或放射治疗广泛应用于治疗各种癌症。
[0006] 现在，有多种抗肿瘤剂成功地应用于治疗癌症。然而，为获得更有效和低毒性制 剂，研究仍在继续。
[0007] 例如，用铂配合物抗肿瘤剂，例如顺-二氨二氯铂（II)(顺铂）治疗癌症患者，在 最近十年迅速增长。顺铂是一种抗肿瘤剂，其被证实能有效地治疗多发的恶性肿瘤，包括睾 丸癌、卵巢癌、膀胱癌、头颈癌以及某些肺癌。特别地，顺铂被证实能特别有效地治疗具有长 端粒的癌细胞。顺铂归类为前药，且一旦活化，它与DNA中的亲核位点相互作用，主要产生 嘌呤-嘌呤链内交联。该基因毒性应激激活信号传送通道，在大部分细胞中导致DNA合成 停止和程序性细胞死亡。不幸的是，顺钼化学疗法最初的成功在许多病例中由于癌症复发 而经常维持短暂。铂类化学疗法的潜力被几种因素限制，包括危险的副作用、有限的溶解度 以及内在的或者后天获得的抗性。因此，需要新疗法来治疗癌症患者。
[0008] 如同顺钼，抗癌剂阿霉素和紫杉烧例如紫杉醇、larotaxel、orataxel、tesetaxel 和多西紫杉醇，被认为结合于端粒或妨碍端粒酶。这些抗癌剂常规应用于治疗膀胱癌、前列 腺癌、肺癌、乳腺癌、卵巢癌和其它实体瘤以及白血病。然而，如同顺铂，他们的效果常受外 部因素限制。
[0009] 砷化合物作为治疗剂的应用最近正经历重新启用，特别是在肿瘤学领域。研究 表明特定的砷化合物能有效对抗恶性肿瘤例如急性早幼粒细胞白血病（APL)(三氧化二 砷）或泌尿生殖器癌（偏亚砷酸钠）。参考Shen，Z. X. et al. Blood 1997 ;89:3354-3360 ; Soignet, S. L. et al. N Engl. J. Med. 1998 ;339:1341-1348 ;TO2006121280A1。在美国展开 了应用三氧化二砷治疗APL患者的临床试验，研究了不同砷化合物的作用机理来达成对无 机砷的合理利用。参考 Chou, W. C. et al. J. Clin. Invest. 2001 ;108:1541-1547 !Senior K.Drug Discovery Today 2002;7:156-157。
[0010] 在这些临床试验中，据报道通过导入活性氧簇和PML-RARa融合蛋白降解，三氧化 二砷通过激活程序性细胞死亡发挥抗肿瘤效果（参见Chou等人的研究）。最近，其疗效与 转录人类端粒酶基因（hTERT)逆转录酶亚基的抑制和随后端粒缩短的感应以及染色体不 稳定性建立了联系（参见Chou等和Senior的研究，同上）。
[0011] 类似地，研究表明偏亚砷酸钠使hTERT基因转录失活，且能够缩短人类癌细胞端 粒，表明其为端粒毒物。然而，偏亚砷酸钠在治疗具有短端粒的癌症中最为有效。
[0012] 因此，仍需要一种改进的方法和组合物来治疗包括实体瘤、白血病和转移 (metastasis)的癌症。
【发明内容】
[0013] 将偏亚砷酸钠（NaAsO2)或者三氧化二砷与顺铂、阿霉素和/或紫杉烷例如多西紫 杉醇、larotaxel、orataxel、tesetaxel或紫杉醇（paclitaxel)混合施用，可以有效治疗癌 症和/或预防转移。本发明涉及包括偏亚砷酸钠和/或三氧化二砷与顺铂、阿霉素或者紫 杉烧（例如紫杉醇、larotaxel、orataxel、tesetaxel或者多西紫杉醇或者它们的混合物） 的组合物、试剂盒和方法（例如联合治疗）。本发明的组合物、试剂盒和方法可以应用于预 防、干扰和/或治疗在此公开的肿瘤类疾病。
[0014] 本发明的一方面，提供了用于对患者治疗实体瘤、白血病或者转移的方法，包括向 所述患者施用治疗量的选自偏亚砷酸钠和三氧化二砷的砷化合物和治疗量的顺铂。在一种 实施方式中，砷化合物为偏亚砷酸钠，其可通过口服施用，而顺铂通过注射施用。在其他实 施方式中，治疗的癌症为肺癌或乳癌或者卵巢癌。
[0015] 在本发明特定的实施方式中，偏亚砷酸钠和/或三氧化二砷以有效治疗量施用给 正在经受以顺铂、阿霉素、紫杉醇、多西紫杉醇或者它们的混合物进行抗癌治疗的患者。
[0016] 本发明另一方面提供试剂盒，所述试剂盒包括多种有效治疗剂量 (therapeutically effective dosages)的偏亚砷酸钠和/或三氧化二砷和顺钼、阿霉素 和/或紫杉烧（例如larotaxel、orataxel、tesetaxel、多西紫杉醇或者紫杉醇）。在一种 实施方式中，所述试剂盒包括口服剂形式的偏亚砷酸钠和非口服制剂的顺铂和/或紫杉烷 (例如larotaxel、orataxel、tesetaxel、紫杉醇或者多西紫杉醇）。在另一种实施方式中， 将偏亚砷酸钠和/或三氧化二砷和顺钼、阿霉素、larotaxel、orataxel、tesetaxel、多西紫 杉醇和/或紫杉醇配制为注射施用。
[0017] 本发明另外提供包括有效治疗量的（a therapeutical Iy effective amount of) 偏亚砷酸钠或者混合有有效治疗量的顺铂的三氧化二砷的组合物。
[0018] 正如本发明所主张，应理解前述的概述和后述的具体描述仅为例示性和解释性 的，并非是对本发明的限制。
【附图说明】
[0019] 图IA为施用顺铂（菱形）单剂和同时施用顺铂与偏亚砷酸钠混合物（方形）的 A549细胞系生长曲线图；结果来自MTT增殖检测；
[0020] 图IB为在A549细胞中偏亚砷酸钠与顺铂混合物的联合指数（Cl)效果印迹 (blot) (Fa-组分效果）；
[0021 ] 图IC为在H460细胞中偏亚砷酸钠与顺铂混合物的联合指数（Cl)效果印迹 (Fa-组分效果），Cl < 1显示有协同作用；Cl = 1为加成的；Cl > 1为对抗的。
【具体实施方式】
[0022] 使用本发明的试剂盒、组合物或者方法（例如联合治疗）可以实现协同抗癌效果 以达到最大治疗性利益，并且能够改善疗法的耐受性从而降低因使用了较高剂量或者较长 期单一疗法（即单独使用每种化合物的疗法）而产生副作用的风险。因此，本发明的组合 物、试剂盒和方法可以实现使用低剂量的每种化合物（例如低剂量的砷化合物或顺铂），从 而使每种化合物的逆作用降低（例如降低砷化合物或癌症药物例如顺铂的副作用）。次优 的剂量能提供改善的安全范围，还能够降低达到预防和治疗所需的药物成本。应用砷化合 物与顺铂、阿霉素、多西紫杉醇和/或紫杉醇或者其它紫杉烷混合物的协同治疗还能提供 改善的便利性，并可以产生增强的顺应性（enhanced compliance)。联合治疗的优势还包括 对于降解和新陈代谢的高稳定性、作用的长耐受性和/或在特别低的剂量下作用的长耐受 性或有效性。
[0023] 在特定方面，本发明涉及试剂盒，尤其涉及包括药物合剂的试剂盒，所述药物合剂 包括偏亚砷酸钠和/或三氧化二砷和顺铂或其它细胞毒性抗癌剂，例如阿霉素、多西紫杉 醇或紫杉醇以及上述细胞毒性抗癌剂的混合物，可选地与药学上可接受的载体、赋形剂或 媒介物（vehicles)混合。
[0024] 本发明治疗癌症的方法包括混合施用给需要该治疗的哺乳动物有效量的砷化合 物和顺铂或者其它抑制或干扰端粒的细胞毒性抗癌剂（例如紫杉烷）。砷化合物或砷化合 物混合物可以在施用顺铂或其它这样的细胞毒性抗癌剂之前、之后或者同时施用。例如，可 以施用一日剂量的砷