用于口服肠溶制剂制备的具有促肠吸收作用的利拉鲁肽盐的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于医药领域，具体涉及用于口服肠溶制剂制备的具有促肠吸收作用的利 拉鲁肽盐，明显改善利拉鲁肽口服吸收生物利用度。在糖尿病治疗中的应用。
【背景技术】
[0002] 糖尿病是常见病，多发病，其患病率正随着人们生活水平的提高，人口老龄化、生 活方式的改变而迅速增加。据统计我国现有糖尿病患者九千多万，其中II型糖尿病患者占 90%左右，II型糖尿病的发病正趋向低龄化。糖尿病已成为居心血管病和肿瘤之后的第三 大非传染性疾病，给社会和经济带来沉重的负担。因此找到安全有效的降血糖及防治糖尿 病并发症的药物具有重要意义。
[0003] 利拉鲁肽，英文通用名为Liraglutide，是一种人工合成的人胰高血糖素样肽-1 类似物，由31个氨基酸残基构成，其氨基酸序列为：H-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser -Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys(N-ε-(Ν-α -Palmitoyl-L-y-glu tamyl)) -Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Arg-Gly-Arg-Gly-〇H。利拉鲁肽是将天然 GLP-1 分子第34位赖氨酸被精氨酸取代，第26位赖氨酸上增加一个由谷氨酸介导的16碳棕榈酰 脂肪酸侧链，使其在保留天然功效的同时延长其酰化产物与蛋白结合时间，克服GLP-I易 降解的缺点。该药物是由丹麦诺和诺德公司研制，2009年7月首次在欧盟上市。2010年1 月，在日本上市。2010年1月25日，美国食品与药物管理局（FDA)批准利拉鲁肽在美国上 市。2011年4月13日，获中国食品药品监督管理局批准，用于治疗成人II型糖尿病。2011 年10月9日，正式在中国上市。该药的商品名"诺和力"，适用于单用二甲双胍或磺脲类药 物最大可耐受剂量治疗后血糖仍控制不佳的患者，与二甲双胍或磺脲类药物联合应用，可 以对血糖进行有效的控制。目前，利拉鲁肽已于2014年12月23日获得美国FDA批准用于 减肥。利拉鲁肽目前的给药方式均采用皮下注射给药。
[0004] 口服给药是最普遍最易于被接受的给药方式。但对很多药物来说，口服给药的吸 收效率并不好。比如蛋白、多肽、多糖、核酸等生物活性大分子由于酶降解、吸收差或不稳定 等因素，通常不能口服给药。肠腔里生理环境复杂，药物在肠腔中的总量还会由于水解、代 谢、胃肠道酶降解以及药物由血浆向胃肠道的排泌而减少。因此，口服仍有许多问题需要解 决。
[0005] 成盐是改善药物分子理化性质、提高其成药性的有效手段之一，可改变药物的溶 解性，改善其依从性，提高其稳定性，减少其不良反应。由于利拉鲁肽含有棕榈酰侧链，亲脂 性较强，亲水性较差，所以，为了改善其溶解性，本发明研究了利拉鲁肽盐。
[0006] 肠道吸收促进剂与透过性差的药物共同服用时，会增加药物的通过性，进而提高 其生物利用度。采用吸收促进剂促进药物的吸收是比较普遍的方法（B. J. Aungst，J. Pharm. Sci. ，2000,89(4) :429-442)。
[0007] 目前，肠道促吸收剂有很多类型，其中中链脂肪酸及其盐是常用的一类，其主要包 括辛酸钠、癸酸钠、十二碳酸钠、月桂酸钠和油酸钠等。其中，癸酸钠是一种低毒且有效的吸 收促进剂，并作为栓剂用于临床，是一种被批准在药品中使用的促吸收剂。其促吸收机理主 要是通过与膜的结合，使膜的结构产生紊乱，同时与细胞间紧密连接处的各种离子产生螯 合作用，导致肌动蛋白微丝收缩而暂时打开上皮紧密连接，调节紧密连接的孔径促进吸收， 增加旁细胞转运。癸酸钠的这种螯合作用造成的肠细胞损伤具有可逆性，在停药后可迅速 恢复，毒性较小，癸酸钠促进药物在肠道的吸收效果确切。（癸酸钠增强黄连素对II型糖尿 病治疗作用及作用机制研究，2011年，吉林大学，吕晓艳）
[0008] 利拉鲁肽是否能够口服应用，利拉鲁肽成盐后是否可以提高口服生物利用度，是 否能够制备成肠溶制剂进行口服，现有技术没有报道，为此，本发明将利拉鲁肽与肠吸收促 进剂结合成盐，以利拉鲁肽盐作为药物活性成分，制备出一种利拉鲁肽肠溶制剂，取得了意 想不到的效果。
【发明内容】
[0009] 本发明提供用于口服肠溶制剂制备的具有促肠吸收作用的利拉鲁肽盐，目的在于 通过利拉鲁肽与肠吸收促进剂成盐，改善利拉鲁肽在肠道内的吸收，提高血药浓度，改善生 物利用度，从而能广泛应用于临床。本发明采用的技术方法是：
[0010] 本发明所述利拉鲁肽盐是利拉鲁肽与肠吸收促进剂反应形成的盐，所述肠吸收促 进剂选自：癸酸钠、癸酸钾、苯磺酸、十二烷基苯磺酸钠、十二烷基苯磺酸钾、辛酸钠、辛酸 钾、月桂酸钠、月桂酸钾、油酸钠、油酸钾。优选癸酸钠，癸酸钾。
[0011] 本发明所述利拉鲁肽与肠吸收促进剂成盐的方法是，利拉鲁肽与肠吸收促进剂经 高效制备液相转盐制备成盐，两者的摩尔比为1:0.1-5。
[0012] 所述制备方法优选如：将利拉鲁肽和癸酸盐成盐，两者的摩尔比为1:0. 1-5,优选 1:0. 5-2. 5〇
[0013] 本发明的利拉鲁肽盐，优选利拉鲁肽癸酸钠，利拉鲁肽辛酸钠，利拉鲁肽月桂酸 钠。
[0014] 本发明得到的利拉鲁肽盐加入适当的药用辅料如淀粉、糊精、乳糖、微晶纤维素、 滑石粉、交联羧甲基纤维素钠混合均匀，可制成相应的片剂、胶囊剂、颗粒剂、微丸剂等制 剂，优选的是口服肠溶制剂，本发明所述制剂是以本发明的利拉鲁肽盐作为药物活性成分， 根据制剂学常规技术制备成口服药物制剂，特别是口服肠溶制剂，如片剂、颗粒剂包裹上肠 溶衣，胶囊采用肠溶胶囊等。
[0015] 本发明进行了大量药学研究及药效动物实验研究。研究表明，本发明的利拉鲁肽 盐口服肠溶制剂稳定性良好，载药量大，影响因素试验条件无明显降解、聚集，且体内安全 性良好。本发明所采用的制备方法简单，工艺条件易控制，适于大规模工业化生产，并易于 得到质量稳定的产品，批间差异小，便于质量控制。利拉鲁肽口服肠溶制剂组降糖率不明 显；利拉鲁肽盐的使用可以明显的改善利拉鲁肽药物在肠道的吸收，提高血药浓度，改善利 拉鲁肽的生物利用度，增强疗效。其中利拉鲁肽癸酸盐口服肠溶制剂组与皮下注射组降糖 率基本相当，效果最优。
[0016] 含利拉鲁肽癸酸盐口服肠溶制剂生物利用度明显高于利拉鲁肽口服制剂，生物利 用度在31%。
[0017] 为了说明的方便，现将文中所有的特殊词汇作以说明，无特殊说明的情况下均按 以下内容进行理解：
[0018] 利拉鲁肽盐：利拉鲁肽盐指利拉鲁肽与癸酸钠、癸酸钾、苯磺酸、十二烷基苯磺酸 钠、十二烷基苯磺酸钾、辛酸钠、辛酸钾、月桂酸钠、月桂酸钾、油酸钠、油酸钾所形成的盐， 在本专利的情况下利拉鲁肽与选自癸酸钠、癸酸钾、苯磺酸、十二烷基苯磺酸钠、十二烷基 苯磺酸钾、辛酸钠、辛酸钾、月桂酸钠、月桂酸钾、油酸钠、油酸钾任何一项的化合物形成的 复合物或混合物也称为利拉鲁肽盐。
[0019] Hpmc :羟丙基甲基纤维素
[0020] 以下通过实验数据进一步说明本发明的有益效果：
[0021] 利拉鲁肽盐口服肠溶制剂的稳定性考察
[0022] 取实施例2、实施例3、实施例4、实施例5制备的利拉鲁肽盐制剂各3份，分别置光 照（4500 ±500) lx、高温（40 ±2) °C及高湿（70 ±5) %条件下放置10天，分别于第5天、10 天时取样，观察其外观，测定主药含量。各制剂外观无显著改变，实施例2-4主药含量等无 显著差异，制剂中利拉鲁肽无明显降解、聚集等现象。第5天、10天时取样得到的各制剂主 药含量数据见表1，其中主药含量以实验品实测主药含量与对照品实测主药含量的百分比 表不。
[0023] 表1各放置条件5天、10天主药含量对比
[0025] 由上表可见，实施例2、实施例3、实施例4制备的利拉鲁肽盐口服肠溶制剂稳定性 较强，高温、高湿、光照条件下放置10天，主药含量无显著减少。实施例5制备的利拉鲁肽 未成盐口服肠溶制剂主要含量下降明显。表明成盐后制剂稳定性明显增加。
[0026] 利拉鲁肽盐口服肠溶制剂的体外释药试验
[0027] 精密称取实施例2、实施例3、实施例4、实施例5制备的利拉鲁肽肠溶制剂于不同 的溶出杯中，加入PH6. 8的磷酸盐缓冲液，胰蛋白酶，37°C条件下以100转/分钟搅拌，分别 于第15min、30min、45min、60min从溶液中吸取Iml测定利拉鲁肽含量，计算利拉鲁肽的累 积释放量。结果见下表，表中释放量以累计释放的利拉鲁肽占样品制剂中利拉鲁肽含量的 百分比表示。
[0028] 表2不同利拉鲁肽盐口服肠溶制剂60min内主药释放量对比
[0029]
[0030] 由表可见，制备的利拉鲁肽盐口服肠溶制剂60min后溶出大部分主药，释放作用 明显，利拉鲁肽成盐样品释放主药量明显高于未成盐利拉鲁肽。不同利拉鲁肽盐口服肠溶 制剂60min内主药释放量趋势对比详见图1。
[0031] 采用不同利拉鲁肽盐口服肠溶制剂对体内生物利用度的影响，配方中分别含利拉 鲁肽盐（癸酸盐、辛酸盐、月桂酸盐）6mg、海藻糖30mg的口服肠溶制剂，并与空白组、皮下注 射组、利拉鲁肽口服肠溶制剂组进行对比。
[0032] 表3组别及给药情况
[0034] 表4不同利拉鲁肽制剂体内生物利用度对比
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[0036] 结果表明：含利拉鲁肽癸酸盐口服肠溶制剂生物利用度明显高于其他利拉鲁肽口 服制剂，生物利用度在31%