一种普洱茶提取物在制备预防醉酒药物中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及普洱茶提取物的新用途，特别涉及一种普洱茶提取物在制备预防醉酒 及解酒药物中的应用。
【背景技术】
[0002] 普洱茶原产地主要在云南的思茅地区和西双版纳，随着经济的发展，人们保健意 识的增强，普洱茶因其滋味醇厚回甘，陈香独特的优良品质和其对人体的特殊保健功效引 起全社会的关注和重视，产品深受消费者的青睐。
[0003] 以茶来解酒精中毒，已是人们早已熟识并广泛用于日常生活中。普洱茶性温和耐 贮藏，适于烹用或泡饮。我国古代不少史籍有很多关于普洱茶功效的记载。茶的"醒酒"作 用，早在三国（魏）张楫《广雅》中就有记载，《本草纲目拾遗》《瓯江逸志》《采茶录》等也有 所言及。另外，《本草纲目》与《仁斋直指方》等，则称为"解酒"。饮茶可以醒酒，不但在中国 自古盛行，在国外也颇享盛誉。如日本古籍记载，日本镰将军实因宿醉而猛烈头痛，多方治 疗无效，荣西法师以浓茶劝饮才得顿愈。《中国茶叶大辞典》列举茶的十大功效，一助消化， 二消除脂肪、胆固醇，三除口臭，四解渴、解酒，五治便秘，六减肥，七提神醒脑，八利尿，九抗 辐射，十抗癌。
[0004] 目前对普洱茶研究主要集中在普洱茶具有降血糖血脂减肥功效，普洱茶提取物具 有抗基因毒性、抗病毒以及抗菌活性，普洱茶具有提高免疫力作用，普洱茶具有防治心血管 疾病作用，普洱茶提取物有很大的潜力作为NO清除剂以及抗氧化剂，但目前尚无对普洱茶 解酒功效的系统研究。
[0005] 由于目前消费习惯只是以茶叶冲泡饮用，功效成分受冲泡次数、冲泡温度、冲泡时 间等影响而造成溶出差异，不能完全利用。
[0006] 本发明经过研究找到了通过使用普洱茶提取物进行解酒的方法，包括饮用时间及 饮用量。
【发明内容】
[0007] 本发明提供普洱茶提取物在制备预防醉酒和解酒的药物或食品中的应用。
[0008] 本发明所述的普洱茶提取物是将普洱茶原茶经过溶剂提取加工得到的提取物。
[0009] 本发明优选的普洱茶原茶是未加工的生茶或加工所得的熟茶。
[0010] 本发明优选的普洱茶提取物是通过水提或醇提得到的普洱茶提取物。特别优选的 是水提物。比如采用以下方法：
[0011] 步骤1，普洱茶叶加水煎煮，浓缩至一定比重；
[0012] 步骤2,浓缩液离心，离心液浓缩，干燥，即得。
[0013] 优选的，本发明所述普洱茶提取物由下述制备方法得到：普洱茶加水煎煮1-5次， 煎煮时间每次〇. 5-5小时，每次加水总倍数5-50倍，提取液浓缩、干燥即得。其中，浓缩液 还可以经过两次离心，离心液浓缩得浓缩膏，浓缩膏干燥即得提取物。优选地，提取液浓缩 前用40-300目筛过滤。
[0014] 更优选，所述普洱茶提取物由下述制备方法得到：普洱茶，加水剧烈沸腾煎煮提取 1-5次，总煎煮时间0. 5-5小时，加水总倍数5-50倍，提取液40-300目过滤，滤液浓缩至茶 叶：浓缩液=1 :〇. 5~1 :10,浓缩液二次离心，二次离心液浓缩至比重I. 01 - 1. 4,浓缩膏 干燥即得提取物。
[0015] 本发明采用剧烈沸腾有利于有效成分的转化和溶出，该工艺路线可保障成品的冷 水溶解后的澄明度，该工艺路线降低了后期离心的工作量，该工艺路线成本较低、可产业 化、质量稳定可控。
[0016] 本发明所述普洱茶提取物包括下述重量百分含量的有效成分：
[0017] 茶多酚12-55% ; 茶褐素12-30%; 咖啡因 6-Ii %; 茶多糖 15-40%;
[0018] 其中四种有效成分的重量百分含量之和小于100%。
[0019] 优选地，所述普洱茶提取物包括下述重量百分含量的有效成分：
[0020] 茶多酚20-50%;
[0021] 茶褐素 咖啡因 6-10%; 茶多糖 17-30%;
[0022] 其中四种有效成分的重量百分含量之和小于100%。
[0023] 本发明所述的应用，包括：
[0024] 普洱茶提取物具有预防醉酒和解酒的效果，在实验剂量及时间范围内，可明显提 高胃和肝中ADH、ALDH活性，降低全血乙醇浓度和乙醛浓度，减少乙醇的吸收，降低血清中 AST/ALT，提高小鼠对酒精的耐受能力，缩短醉睡时间，降低MDA浓度，提高GSH浓度，同时降 低脂肪变性油红〇染色评分。说明普洱茶提取物具有预防醉酒和解酒的作用，是通过影响 酒精代谢、对酒精性肝损伤有保护作用、可以保护中枢神经系统而起到解酒作用。
[0025] 具体包括：
[0026] 1、普洱茶提取物在0· 5-1. 5g. kg 1 (鼠，换算人剂量为0· 04g. kg LO. 12g. kg 3剂 量及0-60min范围内，可明显提高胃和肝中ADH、ALDH活性，降低全血乙醇浓度和乙醛浓度， 减少乙醇的吸收。
[0027] 2、普洱茶提取物可以降低血清中AST/ALT，提高小鼠对酒精的耐受能力，缩短醉睡 时间。
[0028] 3、普洱茶提取物通过影响酒精代谢，可以保护中枢神经系统而起到预防醉酒和解 酒作用，有效的剂量为〇. 5-1. 5g. kg 1 (鼠，换算人剂量为0. 04g. kg LO. 12g. kg 3。最大剂 量是2g. kg \优选的有效剂量是0. 5-1. 5g. kg \最优剂量是1.0 g. kg 1 (换算人剂量为：最 大剂量是〇· 16g. kg \优选的有效剂量是0· 04g. kg LO. 12g. kg \最优剂量是0· 08g. kg 3。
[0029] 4、在0.5-1. 0g. kg1 (鼠，换算人剂量为0· (MgAg1-0.0 8g. kg 4剂量范围内，普洱 茶提取物的低、中剂量组肝匀浆中MDA浓度低于模型对照组，低、中剂量组GSH浓度高于模 型对照组，并且脂肪变性油红〇染色评分均低于模型组，说明普洱茶提取物对酒精性肝损 伤起辅助保护作用。
[0030] 本发明还包括，含有上述普洱茶提取物的组合物，包括药物或食品组合物，本发明 所述的食品包括保健食品，包括但不限于以下食品形式：饮料、乳制品、糕点、糖果、面包等。 [0031 ] 本发明的药物组合物，其中含有本发明的提取物，其在组合物中所占重量百分比 可以是0. 01-99. 99%，其余为药物可接受的载体。本发明的药物组合物，以单位剂量形式存 在，所述单位剂量形式是指制剂的单位，如片剂的每片，胶囊的每粒胶囊，口服液的每瓶，颗 粒剂每袋等。
[0032] 本发明的药物组合物可以是任何可药用的剂型，这些剂型包括：片剂、糖衣片剂、 薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、胶囊剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、口服液、口含剂、颗粒剂、冲剂、丸 剂、散剂、膏剂、丹剂、混悬剂、粉剂、溶液剂、注射剂、栓剂、软膏剂、硬膏剂、霜剂、喷雾剂、滴 剂、贴剂。本发明的制剂，优选的是口服剂型，如：胶囊剂、片剂、口服液、颗粒剂、丸剂、散剂、 丹剂、霄剂等。
[0033] 本发明的药物组合物，其口服给药的制剂可含有常用的赋形剂，诸如粘合剂、填充 剂、稀释剂、压片剂、润滑剂、崩解剂、着色剂、调味剂和湿润剂，必要时可对片剂进行包衣。 [0034] 适用的填充剂包括纤维素、甘露糖醇、乳糖和其它类似的填充剂。适宜的崩解剂包 括淀粉、聚乙烯吡咯烷酮和淀粉衍生物，例如羟基乙酸淀粉钠。适宜的润滑剂包括，例如硬 脂酸镁。适宜的药物可接受的湿润剂包括十二烷基硫酸钠。
[0035] 可通过混合，填充，压片等常用的方法制备固体口服组合物。进行反复混合可使活 性物质分布在整个使用大量填充剂的那些组合物中。
[0036] 口服液体制剂的形式例如可以是水性或油性悬浮液、溶液、乳剂、糖浆剂或酏剂， 或者可以是一种在使用前可用水或其它适宜的载体复配的干燥产品。这种液体制剂可含 有常规的添加剂，诸如悬浮剂，例如山梨醇、糖浆、甲基纤维素、明胶、羟乙基纤维素、羧甲基 纤维素、硬脂酸铝凝胶或氢化食用脂肪，乳化剂，例如卵磷脂、脱水山梨醇一油酸酯或阿拉 伯胶；非水性载体（它们可以包括食用油），例如杏仁油、分馏椰子油、诸如甘油的酯的油性 酯、丙二醇或乙醇；防腐剂，例如对羟基苯甲酯或对羟基苯甲酸丙酯或山梨酸，并且如果需 要，可含有常规的香味剂或着色剂。
[0037] 对于注射剂，制备的液体单位剂型含有本发明的活性物质和无菌载体。根据载体 和浓度，可以将此化合物悬浮或者溶解。溶液的制备通常是通过将活性物质溶解在一种载 体中，在将其装入一种适宜的小瓶或安瓿前过滤消毒，然后密封。辅料例如一种局部麻醉 剂、防腐剂和缓冲剂也可以溶解在这种载体中。为了提高其稳定性，可在装入小瓶以后将这 种组合物冰冻，并在真空下将水除去。
[0038] 本发明的药物组合物，在制备成药剂时可选择性的加入适合的药物可接受的载 体，所述药物可接受的载体选自：甘露醇、山梨醇、焦亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠、盐 酸半胱氨酸、巯基乙酸、蛋氨酸、维生素 C、EDTA二钠、EDTA钙钠，一价碱金属的碳酸盐、醋 酸盐、磷酸盐或其水溶液、盐酸、醋酸、硫酸、磷酸、氨基酸、氯化钠、氯化钾、乳酸钠、木糖醇、 麦芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇、硅衍生物、纤维素及 其衍生物、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、土温80、琼脂、碳酸钙、碳酸氢钙、表面活性 剂、聚乙二醇、环糊精、β -环糊精、磷脂类材料、高岭土、滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁等。
[0039] 本发明的组合物在使用时根据病人的情况确定用法用量，可每日服三次，每次 1-20剂，如：1-20袋或粒或片。
[0040] 以下对名词术语进行解释：
[0041] 翻正反射：是指清醒状态下的动物处于不正常体位时，可通过一系列动作将体位 恢复常态的反射活动。
[0042] 例如，观察小鼠的翻正反射：用手轻轻地将小鼠侧卧或仰卧，小鼠能立即翻正体 位、恢复正常姿势，说明翻正反射存在；将小鼠置于背卧位时，如超过30-60秒不能翻正者， 即认为翻正反射消失，进入睡眠。
[0043] 解酒的时间-效应曲线：本研究分别选择给药后60min、45min、30min、15min、 5min、0min灌胃白酒，测定酒后30min、2h、3h的全血中乙醇和乙醛浓度、肝脏和胃中ADH和 ALDH活性、血清中AST/ALT，小鼠的耐受时间和醉睡时间为指标，并与空白组、模型组比较， 评价普洱茶提取物的解酒效果，目的为探索不同给药时间-效应之间的关系。
[0044] 解酒的剂量-效应曲线：不同的给药剂量往往会影响药物的作用效果，本研究分 别选择不同剂量的普洱茶提取物灌胃给药，30min后灌胃白酒，测定酒后30min、2h、3h的全 血中乙醇和乙醛浓度、肝脏和胃中ADH和ALDH活性、血清中AST/ALT，观察记录小鼠的耐受 时间和醉睡时间，并与空白组、模型组、绿茶组相比较，评价不同剂量普洱茶珍的作用效果， 探索不同给药剂量-效应之间的关系。
[0045] 以下通过实验数据进一步说明本发明的有益效果：
[0046] 以下实验中所述普洱茶珍即用本发明优选的制备方法制备的普洱茶提取物，如实 施例1中的提取物。
[0047] 实验一：解酒时效关系研究
[0048] 本部分拟研究饮酒前不同时间给药，通过观察小鼠翻正反射消失和恢复时间，测 定全血中乙醇和乙醛浓度，肝脏和胃中的乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶活性，以及AST/ALT来 评价普洱茶珍的解酒效果，绘制普洱茶珍解酒的时间-效应曲线。1材料与方法
[0049] I. 1实验动物
[0050] 昆明种小鼠，20g±5g，560只，雌雄各半，由北京维通利华实验动物技术有限公司 提供，合格证号SCXK (京）2012-0001。
[0051] 1 · 2仪器、药品与试剂
[0052] PB153-S 精密电子天平（METTLER TOLEDO,瑞士）；352 酶标仪（芬兰 Labsystems Multiskan MS) ;AC8 洗板机（芬兰 Thermo Labsystems) ;3_18K 高速离心机（美国 SIGMA); TEKMAR7000顶空进样器（瓦里安3800GC);色谱专用氢气发生器（HG-Model300A，天津色谱 科学技术公司）；GNP-9080隔水式恒温培养箱；全自动生化分析仪（TOSHIBA TBA-120FR); 灌胃针；秒表；毛细管；印pendorf管（I. 5ml、0. 5ml);微量可调加样器（0· 5~10μ 1，20~ 200 μ 1，德国Eppendorf);匀浆机（Τ25高速分散机，ΙΚΑ，德国）。
[0053] 普洱茶珍（云南天士力帝泊洱生物茶集团有限公司，批号：2010F01) ;56度红星 二锅头（规格：500ml/瓶，批号20120820,北京红星股份有限公司生产）；小鼠乙醇脱氢酶 ELISA试剂盒（批号：201301，武汉基因美生物科技有限公司）；小鼠乙醛脱氢酶ELISA试剂 盒（批号：201301，武汉基因美生物科技有限公司）；天冬氨酸氨基转移酶（AST)测定试剂 盒（批