抗-催乳素受体抗体制剂的制作方法
【专利说明】抗-催乳素受体抗体制剂
[0001] 相关申请的交叉引用 本申请于2014年3月14日作为PCT国际专利申请提交，且要求享有于2013年3月15 日提交的美国临时专利申请号61/799,629的优先权，所述申请的完整公开内容明确通过 引用并入本文。
[0002] 序列表提交 本申请包括题为"SEQUENCE-LISTING17207-0007W0U1"的作为txt文件的电子格 式的序列表，其于2014年3月13日生成，且具有14. 8千字节（KB)的大小。txt文件 "SEQUENCE-LISTING17207-0007TOU1 "的内容通过引用并入本文。
[0003] 背景 本公开总体涉及广泛浓度范围的抗_催乳素受体抗体制剂，其实质上是等渗的且具有 低粘度，包括可用于皮下和一般性注射施用的制剂。
[0004]催乳素（PRL)是由199个氨基酸构成的多肽激素。PRL属于生长激素（GH)，多肽 激素的胎盘催乳素（PL)家族，且在脑下垂体的催乳素细胞（lactotrophcells)和几种脑 下垂体外组织（诸如淋巴细胞、乳腺上皮细胞、子宫肌层和前列腺）中进行合成。两种不同 的启动子调控脑下垂体和脑下垂体外PRL合成（万避:1051-1055 (2006))。
[0005]PRL结合至PRL受体（PRLR)，PRLR是一种属于1型细胞因子受体超家族的单跨膜 受体你Kiers19:225-268 (1998))。PRLR以三种不同的同种型存在，这三种 同种型是可通过其细胞质尾部的长度进行区别的短、长和中间形式。在配体结合之后，相继 过程导致PRLR活化。PRL经由其结合位点1与一个PRLR分子相互作用且然后经由其结合 位点2吸引第二个受体分子，导致PRLR的活化二聚体。
[0006] PRLR二聚体化导致JAK/STAT(转录的Janus激酶/信号转导子和活化子）途径的 明显活化。在受体二聚体化之后，JAK(主要为JAK2)与受体结合，彼此转磷酸化并活化。此 外，PRLR也被磷酸化且可结合至含有SH2-结构域的蛋白，诸如STAT。受体结合的STAT随后 被磷酸化，从受体解离且转位至细胞核，它们在细胞核中刺激目标基因的转录。此外，已经 描述了PRLR导致的Ras-Raf-MAPK途径活化和细胞质src激酶活化（关于综述， Reviews19: 225-268 (1998))〇
[0007] 已经研究在良性疾病子宫内膜异位症的背景下PRLR-介导的信号传导的作用。 在一项研究中，分析了PRLR在月经期的中晚期增生期过程中子宫内膜异位症患者的异位 子宫内膜样品和正位子宫内膜中的表达模式^1:5-10， 2002)。表明PRLRmRNA存在于79%所分析子宫内膜异位症患者的正位子宫内膜中，而其不 存在于86%子宫内膜异位症患者的子宫内膜异位病灶中。这些数据建议，在正常和子宫内 膜异位组织之间可能的PRLR表达的差异调控。然而，从这些表达数据无法推论PRLR的抑 制可代表一种合适的子宫内膜异位症治疗，特别是因为没有发现PRLR在子宫内膜异位症 病灶中表达 81：5-10 (2002))。
[0008] 正努力开发针对催乳素受体（PRLR)的抗体（包括抗-PRLR单克隆抗体（aPRLR mAb))来阻断PRLR功能。一种此类aPRLRmAb是IgG2抗-PRLRmAb，其正被开发用于子宫 内膜异位症患者的非激素治疗。
[0009] 抗体可经由静脉内、肌肉内和/或皮下注射施用于患者。为了确保患者依从性，期 望肌肉内和皮下注射剂型是等渗的且包括小注射体积（每个注射部位<2ml)。为了降低注 射体积且提供有效剂量，经常以广泛浓度范围（0.l_150mg/mL，包括20mg/ml至150mg/ml范 围内的高浓度）来施用抗体。
[0010] 尽管液体和冻干剂型两者均用于目前市售的抗体药物产品，但冻干形式更经常用 于具有高蛋白浓度的抗体药物产品。高浓度抗体剂型可呈现在制剂（尤其是液体制剂）开 发中的许多挑战。对于抗体浓度接近其表观溶解度限值的制剂，可通过沉淀、胶凝和/或结 晶而发生相分离。在高蛋白浓度，因为可溶性和不可溶性蛋白-蛋白聚集体形成，抗体的稳 定性可变得有问题。高浓度抗体制剂经常是高粘度的，其呈现处理（诸如超滤和无菌过滤） 和注射剂量溶液的困难。且在期望用于意欲用于肌肉内或皮下施用的制剂的高抗体浓度， 需要呈比例的高浓度的稳定剂（诸如蔗糖和氯化钠）以实现长期蛋白稳定性。所得高张溶 液经常因为组织损伤而引起注射疼痛。因此，对于高蛋白浓度制剂的稳定性与重量摩尔渗 透压浓度，经常期望平衡稳定剂的量。
[0011] 概述 本公开提供具有宽广范围抗-PRLR抗体浓度的液体和冻干抗-PRLR抗体制剂，其实 质上为等张且低粘度。除了用于缓冲该制剂的有机盐或无机盐（诸如磷酸盐）以外，该 抗-PRLR抗体制剂实质上不含盐。
[0012] 本文呈现的抗-PRLR抗体制剂在约pH5. 5至约pH6. 5的pH含有约OmM至约30mM 磷酸盐，诸如例如磷酸钠和/或磷酸钾；约50ppm至约200ppm非离子型表面活性剂，诸如例 如聚山梨醇酯（吐温?) 80和/或聚山梨醇酯（吐温?) 20 ;约88mM至约292mM的糖或糖醇， 诸如例如甘露醇、右旋糖、葡萄糖、海藻糖和/或蔗糖；约OmM至约50mM精氨酸；约OmM至约 50mM赖氨酸；约OmM至约270mM甘氨酸或丙氨酸；约OmM至约10mM甲硫氨酸；和约0.lmg/ ml至约150mg/ml的抗-PRLR抗体，包括aPRLR-特异性IgG2单克隆抗体（mAb)。
[0013] 除了用于缓冲制剂的有机盐或无机盐（诸如磷酸盐）以外，每种本文公开的抗体 制剂实质上不含盐，所述抗体制剂容许添加替代稳定剂来维持制剂的等渗（即范围为约 240mmol/kg至约380mmol/kg的重量摩尔渗透压浓度），其由此促进更高程度的患者依从 性。
[0014] 每种本文公开的抗体制剂在22°C-23°C下具有范围为约1至约8mPa-S的低粘度， 其促进处理的简易度，诸如例如改善的超滤和无菌过滤，以及通过注射器针头在施用过程 中的抗体制剂的注射。
[0015] 本文公开的制剂以液体形式或冻干形式在高蛋白浓度下稳定抗体，尤其是 抗-PRLR抗体（包括抗-PRLRIgG2抗体）。
[0016] 各个实施方案的描述 如上所述，本公开提供抗-PRLR抗体制剂，其以液体形式或以冻干形式在期望的储存 条件下稳定广泛范围浓度的抗-PRLR抗体。本文所述的所述制剂包括一种或多种药学可接 受的赋形剂或稳定剂，且在适当pH下包含在缓冲介质中且实质上与生理液等渗。对于全身 施用，注射是一种可能的施用途径，包括肌肉内、静脉内、腹膜内和皮下注射。
[0017] 因为他们的低粘度，本文公开的抗-PRLR抗体制剂可经由（例如）超滤和无菌过 滤进行方便处理且可经由注射（包括静脉内和皮下注射两者）而施用于患者。而且，因为 本文公开的抗-PRLR抗体制剂实质上是等渗的，所以其降低组织损伤或其他不利生理影响 且由此实现有利的患者耐受性且增加的患者依从性。
[0018] 本文所述制剂的特征在于除了用于缓冲该制剂的有机盐或无机盐（诸如磷酸盐） 以外，实质上不存在添加盐，其提供增加其他稳定剂（诸如蔗糖）浓度的灵活性，同时维持 制剂的重量摩尔渗透压浓度以改善体内耐受性且因而增加患者依从性。而且，本文描述的 制剂的低粘度容许方便处理（包括超滤和无菌过滤）以及通过针头注射药物产品溶液。
[0019] 为了解释本说明书的目的，将应用以下定义。在下文所列任一定义与任何其他文 件（包括通过引用并入本文的任何文件）中的该词语的使用冲突的情况下，除非明确表明 相反意义（例如原先使用该术语的文件中），否则，出于解释本说明书和其相关权利要求的 目的，应当以下文所述定义为准。
[0020] 只要适当，以单数使用的术语也将包括复数，且反之亦然。除非另有指明或者使 用"一个/种或多个/种"明显不当，否则使用"一个/种（a) "在本文意指"一个/种或 多个/种"。除非另有指明，否则使用"或"意指"和/或"。"包含（comprise、comprises、 comprising) "、"包括（include、includes、including) "是可互换的且不欲为限制性的。术 语"诸如（suchas)"、"例如（forexample)"和"例如（e.g.)"也不欲为限制性的。例如， 术语"包括"应当意指"包括，但不限于"。此外，当一个或多个实施方案的描述使用术语"包 含"，本领域技术人员应理解在一些特定情况下，一个或多个实施方案可使用语言"基本上 由...组成"和/或"由...组成"来替代描述。
[0021] 如本文所使用，术语"粘度"是指诸如在当通过注射器针头进行注射时施用于患者 的过程中，液体制剂的流动阻力。粘度测量可通过锥板技术使用设定在定义温