用于预防或治疗神经精神疾病或衰老中的认知功能障碍和情绪紊乱的低聚半乳糖组合物的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及用于预防或治疗发生在人的神经精神疾病或障碍中的或者衰老中的 认知功能障碍和/或情绪紊乱的包含低聚半乳糖（G0S)混合物的组合物。还涉及通过向个 体口服施用有效量的包含低聚半乳糖混合物的组合物来预防或治疗发生在神经精神疾病 或障碍中的或者衰老中的认知功能障碍和/或情绪紊乱的方法。
【背景技术】
[0002] 疾病的预防是指药物组合物的能力，或者是指治疗不仅预防疾病发生如风险因子 减低、而且还阻滞其进展并减少其一旦建立的后果（Ref:adapted from Glossary of Terms used in Health for All Series. WHO, Geneva, 1984)〇
[0003] -级预防针对的是防止最初的发病，而二级和三级预防力图阻滞或妨碍现有的疾 病并减少复发的出现和慢性疾病的建立。
[0004] 认知功能障碍是指智力功能的损失，如思考、记忆和推理，严重程度足以干扰个体 的日常活动。这可见于衰老和痴呆患者，特别见于患有阿尔茨海默病的人群。认知功能的 损伤可影响思考、集中、构思、推理和记忆的能力。
[0005] 神经精神疾病或障碍是指引起精神症状的生物体脑疾病或神经系统疾病。它们包 括常见于老年患者的焦虑症和抑郁症。
[0006] Gryan, J F 和 Dinan, T G 的综述（Nature Review/Neuroscience ：13：701~712 ； (2012))中记载了对无菌动物和暴露于病原菌感染、益生菌或抗生素药物的动物的研究是 如何表明肠道菌群对调节焦虑、情绪、认知和疼痛起作用的。
[0007] 益生菌定义为如果摄取则可为宿主赋予健康益处的活菌。
[0008] Bravo, J A等人论证了益生菌鼠李糖乳杆菌（Lactobacillus rhamnosus)被小 鼠摄取时的抗抑郁和抗焦虑样特性（参见Proc Nath Acad Sci USA ;108;16050-16055; (2011))〇
[0009] Burnet, P W J建议，使用选择性抗菌剂和益生元（prebiotics)来增加肠道固有的 乳杆菌和双歧杆菌的菌株的进一步研究可对动物和人的行为和神经生理输出起作用（参 见 Proc. Natl. Acad. Sci. USA ;E175 ; (2012))。
[0010] 益生元被定义为不易消化的食品成分，通过选择性刺激结肠中的一种或有限数量 的细菌的生长和/或活性而有利地影响宿主，从而使宿主的健康得到改善。低聚半乳糖 (G0S)和低聚果糖（F0S)为抵抗哺乳动物胃肠消化酶、并由特殊的结肠细菌发酵的益生元 的实例。
[0011] 现已发现，向哺乳动物如人口服施用包含低聚半乳糖的混合物的组合物可导致与 位于胃肠道的神经元的直接相互作用，反过来可导致N-甲基-D-天冬氨酸受体（NMDARs) 水平的意料之外的增长。具体地，在脑的皮质和海马部中均发现了 NMDAR NRI蛋白和/或 mRNA的水平升高，以及在海马中发现了 NMDAR NR2A蛋白。这表明包含此类混合物的组合物 可有益于预防或治疗发生在神经精神疾病或障碍中的或者衰老中的认知功能障碍和/或 情绪紊乱。
[0012] 还发现口服施用G0S组合物降低了皮质醇的分泌。由于皮质醇响应应激而释放， 因此这表明该组合物可减少作为焦虑症和抑郁症症状的皮质醇过度分泌。
[0013] 该低聚半乳糖的混合物含有二糖（Gal 0 1-3)-Glc ;Gal (0 1-3)-Gal ; Gal(01-6)-Gal;Gal(al-6)-Gal;三糖 Gal(01-6)-Gal(01-4)-Glc; Gal ( 0 1-3) -Gal ( 0 1-4) -Glc ;四糖 Gal ( 0 1-6) -Gal ( 0 1-6) -Gal ( 0 1-4) -Glc 和五糖 Gal ( 0 1-6)-Gal (0 1-6)-Gal (0 1-6)-Gal (0 1-4)-Glc。
[0014] 该低聚半乳糖的混合物公开于EP 1 644 482,记载了能够产生半乳糖苷酶活性的 双歧双岐杆菌（Bifidobacterium bifidum)的新菌株，该酶活性将乳糖转化为该低聚半乳 糖的新混合物。该新混合物已显示出在肠道中具有益生元和抗炎性质。
[0015] 该低聚半乳糖的混合物以名称Bimuno (注册商标）商业销售，并且可从Clasado Ltd (Milton Keynes, UK)获得。
【发明内容】
[0016] 根据本发明的一个方面，提供一种包含如上所述的低聚半乳糖的混合物的组合 物，其用于预防或治疗发生在神经精神疾病或障碍中的或者衰老中的认知功能障碍和/或 情绪紊乱。
[0017] 根据本发明的第二方面，提供如上所述的低聚半乳糖的混合物在制备用于预防或 治疗发生在神经精神疾病或障碍中的或者衰老中的认知功能障碍和/或情绪紊乱的药物 中的用途。
[0018] 认知功能障碍可为由衰老、痴呆或精神分裂症引起的认知减退或损伤。神经精神 疾病可为抑郁症或焦虑症。焦虑症覆盖了一类常见精神疾病的几种不同形式，常见的精神 疾病的特征在于，基于真实或想象的事件对未来的不确定性的过度迷思（rumination)、担 忧、不安、忧虑和恐惧，这可能影响生理和心理健康。
[0019] 还根据本发明的另一方面，提供一种预防或治疗发生在神经精神疾病或障碍中的 或者衰老中的认知功能障碍和/或情绪紊乱的方法，所述方法包括向个体如人施用有效量 的包含如上所述的低聚半乳糖的混合物的组合物。有效量的低聚半乳糖组合物优选每日以 单剂量施用或可选地以间隔几小时如间隔4至12小时、优选间隔6至10小时、最优选间隔 8小时的两次分开剂量施用。
[0020] 优选地，低聚半乳糖的混合物的组合物每日以冻干的粉剂、片剂、胶囊剂、液体制 剂如糖浆剂或软锭剂的形式口服施用。
[0021] 已知为Bimuno的产品包含至少49%的干物质作为低聚半乳糖混合物。组合物的 其余部分可包含非活性组分例如葡萄糖、半乳糖、乳糖、阿拉伯胶、麦芽糖糊精和柠檬酸。
[0022] 粉剂组合物优选在1. 65g至20g的粉剂组合物中包含1. 35g至9. 6g的低聚半乳 糖，优选在2. 5g至10g的粉剂中包含1. 96g至4. 9g的低聚半乳糖，最优选在3. 0g至5. 5g 的粉剂中包含2. 7g至2. 75g的低聚半乳糖。可将组合物添加到饮料（优选热饮）中，或者 洒在食品上（例如洒在早餐谷类食品上）。组合物还可作为成分添加到各种食品和饮料中， 例如果汁、果汁饮料、7K、咖啡、酸奶、谷类食品、面包、蛋糕和饼干等。
[0023] 可选地，可以以糖浆剂或锭剂（脱水糖浆剂）提供低聚半乳糖，其中非活性组分可 包含葡萄糖、半乳糖、乳糖和柠檬酸。糖浆剂的日剂量可为在2. lg至25. 29g的糖浆剂组合 物中包含1. 35g至9. 6g的低聚半乳糖，优选在3. 0g至12. 9g的糖衆剂中包含1. 96g至4. 9g 的低聚半乳糖，最优选在4. lg至7. 25g的糖衆剂中包含2. 7g至2. 75g的低聚半乳糖。
[0024] 本发明的低聚半乳糖组合物具有抗焦虑性、减少下丘脑_垂体轴的活性（应激激 素分泌）并减少脑中的炎症反应。因此，Bimuno G0S可有益于焦虑症（如担心、失眠），抑 郁症，由细菌脑膜炎、单纯性疱疹脑炎引起的或发生在阿尔茨海默病中的脑部炎症的治疗 或预防。Bimuno G0S还可改善衰老、痴呆和精神分裂症的认知损伤。此外，G0S组合物可有 益于母体感染对发育中的胎儿脑的有害影响。
[0025] 将参考下列实施例和附图进一步描述本发明。
【附图说明】
[0026] 图1A示出大鼠额叶皮质和海马提取物中F0S和G0S对BDNF蛋白水平的作用。
[0027] 图1B示出大鼠额叶皮质和海马提取物中F0S和G0S对NRI亚单位（subunit)水 平的作用。示出蛋白提取物中NRI和肌动蛋白免疫反应性的免疫印迹图像。
[0028] 图2A示出大鼠额叶皮质和海马提取物中F0S和G0S对NR2A亚单位水平的作用。 示出蛋白提取物中NR2A亚单位和0 -肌动蛋白免疫反应性的免疫印迹图像。
[0029] 图2B示出大鼠额叶皮质和海马提取物中F0S和G0S对NR2B亚单位水平的作用。 示出蛋白提取物中NR2B和0 -肌动蛋白免疫反应性的免疫印迹图像。
[0030] 图3A至3D为口服施用水（A, B)、F0S(C，D)或G0S(E，F)之后大鼠海马中BDNF(A、 C、E)和NRI亚单位（B、D、F)mRNA表达的代表性自动放射照片。箭头描绘了表达增加，箭头 的头（arrow head)表示降低的表达。DG =齿状回，CA1和CA3 =海马的阿蒙氏角（cornu ammons)分区（subfield)。比例尺=200 y M0
[0031] 图4A至4D示出齿状回（DG)以及海马的CA1和CA3(阿蒙氏角）分区中F0S和 G0S 对 BDNF、NRI、NR2A 和 NR2B mRNA 水平的作用。
[0032] 图5示出摄取F0S (A组）、G0S (C组）和安慰剂（B组）之后对健康成人的皮质醇 分泌的作用。
[0033] 图6A示出脂多糖（LPS)注射后对喂水小鼠的运动（locomotor)活动的作用。
[0034] 图6B示出G0S如何摧毁LPS对运动活动的作用。
[0035] 图7示出如埋珠试验（marble burying test)所示，对LPS处理后的小鼠的自然 挖掘和掩埋行为的作用。
[0036] 图8示出对LPS处理后对小鼠焦虑行为的作用。延迟（A)=从暗部（应激少）向 亮部（应激多）区移动所花费的时间。延迟越长=应激越多/探究行为越少。光下时间 (B)=在亮区花费的时间。时间越长=焦虑越少。
[0037] 图9示出LPS注射24后小时对小鼠额叶皮质中细胞因子水平的作用。
[0038] 图10示出LPS注射24后小时对小鼠血浆中细胞因子水平的作用。
[0039] 图11示出BG0S对健康大鼠认知表现的作用。
【具体实施方式】
[0040]实施例1
[0041] 将冻干粉剂组合物包装在'粘贴包（stick-pack) '中并且每5. 5g成品包含：
[0042]
[0043]
[0044]实施例2
[0045]每7. 25g成品糖浆剂组合物包含：
[0046]
[0047]实施例3
[0048] 供给益牛元对中枢脑源件神经营养闵子（BDNF)和N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA) 夸体亚单位的作用的体内研究。
[0049] 材料和方法
[0050] 益生元施用
[0051] 所有大鼠实验根据英国内政部准则（