用于海虱侵染治疗的西拉菌素的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明描述使用西拉菌素（selamectin)治疗鱼中的海虱侵染的组合物和方法。
【背景技术】
[0002] 海虱是鱼虱科（Caligidae)管口水蚤目（Siphonostomatoida)中的寄生甲壳 类/桡足类，它们以宿主海鱼的粘液、表皮组织和血液为食。Johnson等人，Parasitol Res (2002) 88:789 - 796。海虱是普遍存在的寄生虫，特别是在鲑鱼上，且当大量存在时可导 致严重疾病并最终导致宿主死亡。在存在高度集中的鱼类种群的养鱼场中，海虱可对储苗 (stock)造成毁灭性的影响。
[0003] 2006年，鲑鱼的总海洋产量为170万吨，价值84亿美元。参见2008年粮农组织 渔业和水产养殖信息及统计服务（FAO Fisheries and Aquaculture Information and Statistics Service 2008)、1950 年到 2006 年水产养殖产量（Aquaculture Production 1950 - 2006)。现有的数据表明，海虱成本为€0? I到€0? 2kg 1鱼。Mark J Costello,海虱 对鲑鱼养殖业的全球经济成本（The global economic cost of sea lice to the salmonid farming industry) Journal of Fish Diseases，v. 32(1)，第 115至 118 页（2009) D然而，如 果没有治疗措施，海虱将使行业花费多至少四倍且很有可能增加到如造成对储苗的显著直 接和间接死亡率的水平^Mustafa等人，Canadian Veterinary Journal 42,54 _ 56(2001)。 对海虱成本的现存区域估计范围从大西洋加拿大的4%生产值到苏格兰的7到10^^ Rae 等人，Pest Management Science 58, 515 - 520 (2002)。显然，上述 Costello 等人表明对这 些国家来说，6%鱼产量值的成本受海虱影响。
[0004] 迄今为止，可用抗海虱侵染的治疗方案已非常有限，即SUCE? (大环内酯一苯 甲酸埃玛菌素（emamectin benzoate);美国专利号US 6, 486, 128 BI)，其为可用的唯一显著口服商业治疗。其它杀体外寄生虫化合物已被探索，诸如那些描述在美国专利号US 8, 128, 943 B2和美国专利号US 6, 538, 031 Bl中的化合物，但是还没有出现基于这些公开 的成功治疗剂。另外，已对靶向海虱中存在抗原的疫苗组合物进行研究，但是也还没有出现 使用疫苗途径的产品。
[0005] 因此，SUCF/已被广泛使用，且因此，在海虱种群中的显著耐药性已经出现，被 认为与它的大环内酯结构相关，其发生在由大环内酯靶向的其它寄生虫疾病状态中。
[0006] 因此，需要一种能够治疗鱼（特别是养殖鱼种群）的海虱侵染的新颖制剂，其为安 全且选择性地针对靶寄生虫和能够治疗显示埃玛菌素耐药性的海虱种群。
[0007] 西拉菌素是一种用作狗和猫的局部杀寄生虫剂和驱肠虫剂的大环内酯。西拉菌 素（一种属于阿维菌素（avermectin)类的化合物）的抗寄生虫活性公开于国际专利申请 W01994/15944(实例5)中，且目前在市场上以商标名Revo丨uti〇n:R_作为伴侣动物（狗和 猫）用的局部浇泼。
[0008] 类似于西拉菌素，埃玛菌素也是一种阿维菌素衍生物和大环内酯。因此，人们将预 期针对埃玛菌素所观测到的海虱耐药性会与西拉菌素共存。本发明出乎意料地证实，西拉 菌素克服许多与埃玛菌素/SUGEk'相关的缺点和耐药性机制，部分是由于其效价。
【发明内容】
[0009] 本发明描述包含西拉菌素的组合物，其用于治疗鱼的寄生虫侵染，特别是体外寄 生虫。更特定地来说，所述寄生虫是海虱。因此，根据本发明，提供一种治疗或预防鱼的海 虱侵染的方法，其包括向所述鱼或直接向海虱施用西拉菌素及其兽医上可接受的盐。
[0010] 在本发明的另一方面，西拉菌素能够治疗埃玛菌素（emamectin)耐药性的海虱。 在本发明的又一方面，西拉菌素能够治疗天然（na_〖ve):海虱和埃玛菌素耐药性的海虱两 者。
[0011] 在本发明的又一方面，所述寄生虫侵染是体外寄生虫侵染。仍更特定地来 说，所述体外寄生虫是桡足类；具体来说，所述桡足类是海虱。在本发明的另一方面， 所述海虱是疮痂鱼虱属（Lepeophtheirus)或鱼虱属（Caligus)种，具体来说，鲑疮痂 鱼虱(Lepeophtheirus salmonis)、Caligus celmensi、短鱼虱(Caligus curtus)、杜 氏鱼虱（Caligus dussumieri)、伸长鱼虱（Caligus elongates)、长尾鱼虱（Caligus Iongicaudatus)、智利鱼虱（Caligus rogercresseyi)或 Caligus stromii〇
[0012] 在本发明的又一方面，所述鱼是养殖鱼。在本发明的另一方面，所述鱼选自由鲤 鱼、金枪鱼、罗非鱼、鳕鱼、比目鱼、鳟鱼以及鲑鱼组成的组。更特定地来说，所述鱼是海鱼。 仍然更特定地来说，所述鱼是鲑鱼。
[0013] 在本发明的一方面，所述西拉菌素组合物是固体组合物。特定地来说，将西拉菌素 与至少一种兽用可接受的固体载剂混合以制备浓缩混合物，所述浓缩混合物随后可通过将 大量兽用固体载剂添加到所述混合物来稀释。任一固体西拉菌素组合物可与鱼饲料混合。
[0014] 在另一方面，本发明是针对一种固体组合物，其包含：约50 %到95 %玉米淀粉、约 5%到15%预胶化玉米淀粉、约1%到10%防止粘合的崩解剂（特别是微晶纤维素）、以及 约0. 1 %到5 %西拉菌素。在又一方面，所述组合物包含：约70 %到90 %玉米淀粉、约8 %到 12%预胶化玉米淀粉、约3%到7%防止粘合的崩解剂（特别是微晶纤维素）、以及约0. 1% 到3%西拉菌素。在又一方面，所述组合物包含约85%玉米淀粉、约10%预胶化玉米淀粉、 约5%微晶纤维素、以及约0. 2%到1%西拉菌素，且更特定地来说，约0. 3到0. 5%西拉菌 素。类似地，这些固体玉米淀粉组合物可与鱼饲料混合以获得治疗上有效量的西拉菌素。所 述固体西拉菌素组合物可另外包含抗氧化剂。
[0015] 在本发明的另一方面，所述固体组合物，特定来说，所述玉米淀粉组合物可与鱼饲 料组合物以及油、溶剂或其混合物混合，以便于西拉菌素组合物在用药前粘附到所述饲料 组合物。
[0016] 在本发明的另一方面，所述西拉菌素组合物是液体组合物。特定地来说，所述液体 组合物包含西拉菌素以及油、溶剂或其混合物中的至少一者。
[0017] 在另一方面，本发明是针对一种液体组合物，其包含油、西拉菌素和任选的至少一 种抗氧化剂。在又一方面，所述油选自植物油、鱼油或其它油中的至少一者。在本发明的一 方面，所述油是Miglyol且所述抗氧化剂是丁基化羟基茴香醚（BHA)和/或丁基化羟基甲 苯（BHT)。在本发明的又一方面，所述miglyol是miglyol 812。所述液体西拉菌素组合物 可与鱼饲料混合以获得治疗上有效量的西拉菌素。
[0018] 在另一方面，本发明是针对一种液体组合物，例如，Revolution' Revo丨ution#包含至少一种溶剂中的约60mg/mL和120mg/mL西拉菌素。所述组合物另外 包含至少一种抗氧化剂。在与鱼饲料混合前，所述Revolution^产品可用油、溶剂或其混 合物进行稀释，以获得治疗上有效量的西拉菌素。
[0019] 治疗上有效的口服剂量范围在约0. 5到700 y g/kg/天，更特定地5到300 y g/kg/ 天，更特定地20到200 y g/kg/天，以及甚至更特定地50到150 y g/kg/天，以及甚至更特 定地100 yg/kg/天。给药持续时间可从几小时或几天到两年。
[0020] 在本发明的另一方面，本发明提供一种液体和固体组合物，其包含与用于给鱼口 服的鱼饲料混合的西拉菌素。更特定地来说，所述饲料组合物包含脂肪、营养素、碳水化合 物和蛋白质中的至少一者。所述饲料组合物与所述固体西拉菌素组合物或所述液体西拉菌 素组合物混合。在一方面，所述饲料组合物是丸粒。通过混合将所述液体或固体西拉菌素 组合物添加至所述丸粒。所述固体西拉菌素组合物与鱼饲料以及油、溶剂或其混合物混合， 以确保所述西拉菌素组合物粘附到所述鱼饲料。
[0021] 在本发明的又一方面，西拉菌素是通过将所述鱼浸没（即，浴治疗）于包含西拉 菌素和水的溶液中而施用给所述鱼。基于总的浴体积计，设想西拉菌素的浓度范围为约 0? OOlppm到约200ppm，优选地约Ippm到约200ppm，更优选地约IOppm到约150ppm，甚至更 优选地约20ppm到约lOOpprn。在施用期间西拉菌素的浓度取决于治疗的方式和持续时间 以及被治疗的鱼的年龄和情况。典型的浸没时间范围是约15分钟到约4小时，特定地来说 约30分钟到约1小时。可将西拉菌素溶解或悬浮于所述鱼和海虱的周围水中。所述浴可 含有本领域已知的用于制备水溶液的其它常用赋形剂，例如，稳定剂、消泡剂、粘度调节剂、 粘合剂和增稠剂。
[0022] 在本发明的又一方面，西拉菌素注入所述鱼中。更特定地来说，西拉菌素是经腹膜 内（IP)或经肌肉内（頂）注入鱼中。
[0023] 在本发明的又一方面，