一种植物乳杆菌zs2058及其用图
【专利说明】_种植物乳杆菌ZS2058及其用途 【技术领域】
[0001] 本发明属于微生物技术领域。更具体地，本发明涉及一种植物乳杆菌 (Lactobaci1lusplantarum)ZS2058，本发明还涉及所述植物乳杆菌的用途。 【【背景技术】】
[0002] 炎症性肠病（InflammatoryBowelDisease,IBD)是一组慢性、复发性的肠道炎症 疾病，分为溃疡性结肠炎（UlcerativeColitis,UC)和克罗恩病（Crohn'sDisease,⑶），发 病机理尚不明确。但根据目前对IBD发病机理的研究，普遍认为IBD可能与易感基因、粘膜 免疫、肠道微生物和环境四个因素有关，且粘膜免疫在IBD发病过程中具有重要地位。本病 呈世界性分布。近年来，随着人们生活水平的提高以及饮食结构的变化，该病在我国的患 病率正逐年上升。
[0003] IBD严重影响人们的生活质量和身体健康，耗费卫生资源。目前IBD的治疗药物有 抗生素、氨基水杨酸、糖皮质激素、免疫抑制剂（6-MP，AZA，MTX)和生物制剂（infliximab) 等，但副作用大，很难实现IBD长期治疗，如生物制剂infliximab是TNF-a单克隆抗体，能 有效达到IBD的治疗目标，但使用infliximab常见的不良反应有感染、充血性心力衰竭、自 身免疫反应、神经系统病变、肝损害、恶性肿瘤等。所以需要寻找新的IBD预防和治疗新方 法。
[0004] 肠道微生物与人体健康息息相关，且被形象的称为"微生物器官"。利用肠道益生 菌来预防和治疗肠道疾病越来越受到关注。例如CN102210717A公开了含有与丹宁组合的 一种或多种产生丹宁酶的乳杆菌菌株的组合物，所述菌株具有粘附到人肠粘膜上的能力， 该组合物可以用于治疗IBD。肠道益生菌可通过调节粘膜免疫系统，增强肠上皮细胞间的紧 密连接，降低肠道通透性，抑制肠上皮细胞凋亡，改善肠道物理屏障功能，调节肠道菌群平 衡等作用来减轻肠道炎症。乳酸菌是存在于人体肠道内的益生菌，近年来，乳酸菌对结肠炎 治疗的研究报道有增无减，且产生着积极的影响。 【
【发明内容】
】
[0005] [要解决的技术问题]
[0006] 本发明的目的是提供一种植物乳杆菌（Lactobacillusplantarum)ZS2058的用 途。
[0007] [技术方案]
[0008] 本发明是通过下述技术方案实现的。
[0009] 本发明涉及一种植物乳杆菌ZS2058,该菌株已于2006年4月10日在武汉市武昌 珞珈山武汉大学内中国典型培养物保藏中心保藏，其保藏号为CCTCCNo.M206033。
[0010] 本发明还涉及所述的植物乳杆菌（Lactobacillusplantarum)ZS2058在制备用于 治疗、预防或辅助治疗炎症性肠病的药物组合物中的用途。
[0011] 根据本发明的一种优选实施方式，所述的炎症性肠病是溃疡性结肠炎或克罗思 病。
[0012] 根据本发明的另一种优选实施方式，所述的药物组合物是由植物乳杆菌ZS2058 菌剂与在药学上可接受的载体组成的。
[0013] 根据本发明的另一种优选实施方式，所述的植物乳杆菌ZS2058菌剂是将含有所 述植物乳杆菌ZS2058的菌液通过常规冷冻干燥工艺制备所得到的粉剂，它含有K^CFU/g 以上植物乳杆菌ZS2058。
[0014] 根据本发明的另一种优选实施方式，在药学上可接受的载体是一种或多种选自在 药学上通常使用的填充剂、润湿剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂或矫味剂的载体。
[0015] 根据本发明的另一种优选实施方式，所述的药物组合物是颗粒剂、胶囊剂、片剂、 丸剂或口服液剂型。
[0016] 下面将更详细地描述本发明。
[0017] 本发明涉及一种植物乳杆菌（Lactobacillusplantarum)ZS2058,该菌株已于 2006年4月10日在武汉市武昌珞珈山武汉大学内中国典型培养物保藏中心保藏，其保藏号 为CCTCCNo.M206033,已公开于中国发明专利CN200610041191. 1，即该专利中的植物乳杆 菌（Lactobacillusplantarum)ZH008CCTCCNo.M206033。
[0018] 本发明的菌株ZS2058是由江南大学食品生物技术中心菌种保藏库提供的植物乳 杆菌ZH008,采用了包括细菌基因组DNA提取、16SrDNA特异引物PCR扩增、扩增产物纯化、 DNA测序、序列比对等步骤细菌16SrDNA序列测序法进行种属鉴定，确定为植物乳杆菌。
[0019] 本发明的植物乳杆菌ZS2058 (植物乳杆菌ZH008)即具有下述生物学特性：
[0020] 菌体特征：植物乳杆菌ZS2058菌体呈乳白色。
[0021] 菌落特征：植物乳杆菌ZS2058在MRS固体平板上菌落呈凹透镜状突起，光滑、圆 形、乳白色、半透明、直径为1~2mm〇
[0022] 生长特性：在37°C恒温的条件下，让植物乳杆菌ZS2058在MRS培养基中培养约 14h达到对数末期。
[0023] 本发明植物乳杆菌ZS2058的保存方法：lmL菌液离心后移去上清液，再用以体积 计30 %甘油溶液重悬后保藏于温度-80°C的冰箱中。本发明植物乳杆菌ZS2058的培养方 法与培养条件：
[0024] 1、活化培养：
[0025] 培养基制备：植物乳杆菌ZS2058的培养基为MRS培养基，具体组成如下：胰蛋白 胨l〇g、牛肉浸膏l〇g、酵母粉5g、葡萄糖20g、柠檬酸氢二铵2g、醋酸钠5g、磷酸氢二钾2g、 七水硫酸镁〇. 5g、一水合硫酸锰0. 25g与吐温801mL，加水至1000mL。
[0026] 培养条件：在温度37°C下恒温静置培养。
[0027] 培养目标：挑单菌落于液体MRS培养基中，在恒温培养箱中在温度37°C下静置培 养约16h，活化植物乳杆菌ZS2058。
[0028] 2、一级培养：
[0029] 培养基制备：MRS培养基具体组成如下：胰蛋白胨10g、牛肉浸膏10g、酵母粉5g、 葡萄糖20g、柠檬酸氢二铵2g、醋酸钠5g、磷酸氢二钾2g、七水硫酸镁0. 5g、一水合硫酸锰 0. 25g与吐温801mL，加水至1000mL。培养条件：在温度37°C下恒温静置培养。
[0030]培养目标：将上述培养的植物乳杆菌ZS2058以培养基计1 %接种量转接至液体 MRS培养基，如此再转接一代，使植物乳杆菌ZS2058进一步活化，活力更好。
[0031] 3、二级培养：
[0032] 二级培养基是MRS培养基，具体组成如下：胰蛋白胨10g、牛肉浸膏10g、酵母粉 5g、葡萄糖20g、柠檬酸氢二铵2g、醋酸钠5g、磷酸氢二钾2g、七水硫酸镁0. 5g、一水合硫酸 锰0. 25g与吐温801mL，加水至1000mL。
[0033] 培养条件：在温度37 °C下恒温静置培养。
[0034] 培养目标：将上述二级培养中培养好的植物乳杆菌ZS2058以培养基体积计1 %接 种量转接至1LMRS液体培养基中，在温度37°C下在恒温培养箱中静置培养约16h，收集菌 体。
[0035] 本发明还涉及所述的植物乳杆菌ZS2058在制备用于治疗、预防或辅助治疗炎症 性肠病的药物组合物中的用途。
[0036] 所述的炎症性肠病是溃疡性结肠炎或克罗思病。溃疡性结肠炎是一种病因尚不十 分清楚的结肠和直肠慢性非特异性炎症性疾病，病变局限于大肠黏膜及黏膜下层，病变多 位于乙状结肠和直肠，也可延伸至降结肠，甚至整个结肠。病程漫长，常反复发作。克罗恩 病是一种原因不明的肠道炎症性疾病，在胃肠道的任何部位均可发生。克罗恩病临床表现 为腹痛、腹泻、肠梗阻，伴有发热、营养障碍等肠外表现。克罗恩病尚无根本的治愈方法，还 会出现并发症，需手术治疗，而术后复发率很高。
[0037] 所述的药物组合物是由植物乳杆菌ZS2058菌剂与在药学上可接受的载体组成 的。
[0038] 所述的植物乳杆菌ZS2058菌剂是将含有所述植物乳杆菌ZS2058的菌液通过常规 冷冻干燥工艺制备所得到的粉剂，它含有K^CFU/g以上植物乳杆菌ZS2058。
[0039] 在本发明中，植物乳杆菌ZS2058含量的测定方法是常规的MRS平板菌落技术法。
[0040] 根据本发明，在药学上可接受的载体应该是指在药学领域中的常规药物载体，例 如是一种或多种选自在药学上通常使用的填充剂、润湿剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂或矫味 剂的载体。
[0041] 根据本发明，所述的填充剂应该理解是一种用来增加药物与载体重量和体积，以 利于将它们压制成片剂的稀释剂；或者应该理解是用以吸收药物与载体中多余液体成分的 辅料吸收剂。凡是具有这种性能而又不会影响本发明菌剂效果的物质都可以用于本发明， 也都在本发明保护范围之内。具体地，本发明使用的填充剂选自淀粉、鹿糖、乳糖、硫酸钙或 微晶纤维素，优选地选自淀粉、蔗糖或微晶纤维素，更优选地选自淀粉或微晶纤维素。
[0042] 根据本发明，所述的润湿剂应该理解是一种在药物本身无粘性时能够