氮化硼、共聚物微球，例如硅氧烷树脂 微珠。
[0032] 本发明组合物的油相可以包含一种或多种蜡、树胶或其混合物。蜡包括基于烃的 蜡、氟蜡和/或硅氧烷蜡，并且可以来源于植物、矿物、动物和/或合成来源。合适的蜡包括 蜂蜡、巴西棕榈蜡、小烛树蜡、石蜡、微晶蜡、地蜡；合成蜡包括聚乙烯蜡、含有C16-45的硅 氧烷蜡。树胶一般为聚二甲基硅氧烷或羧甲基纤维素钠或提取物类，并且半固体物质一般 为基于烃的化合物，如羊毛脂及其衍生物。
[0033] 可以将本发明的组合物配制成任何合适的产品形式。这类产品形式包括，但不限 于气溶胶型喷雾剂、霜剂、乳液、固体、液体、分散体、泡沫、凝胶、化妆水、摩丝、软膏、粉剂、 贴剂、润发油、溶液、手按栗型喷雾剂、棒状物、面膜和湿纸巾。可以将本发明的组合物通过 本领域众所周知的各种方法便利地用于制备或作为化妆品、皮肤病学或药物局部施用产 品。
[0034] 本发明的皮肤外用剂组合物可以包括一种或多种下列成分：抗过敏剂、抗微生物 剂、抗氧化剂、螯合剂、着色剂去色素剂、润肤剂、乳化剂、表皮脱落剂、成膜剂、香料、保湿 剂、昆虫驱避剂、润滑剂、药物活性剂、增湿剂、耐光剂、防腐剂、护肤剂、皮肤渗透增强剂、防 晒剂、稳定剂、表面活性剂、增稠剂、粘度调节剂、维生素或其任意组合。
【具体实施方式】
[0035] 为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明 进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本发明，并不用于限 定本发明。
[0036] 本发明中，特别优选香芸火绒草（LeontopodiumhaplophylloidesHand.Mazz.) 进行抗氧化、抗衰老等功效的研究和应用。新鲜的香芸火绒草与干燥后的香芸火绒草相比， 完全保留了有效成分，使其能够充分发挥出功效，所以本发明采用鲜香芸火绒草为原料进 行研究，实际应用中也可以选择干燥后的香芸火绒草为原料。
[0037] 实施例1香芸火绒草提取物的制备
[0038] 方法I:
[0039] 取香芸火绒草干燥粉末100g，室温下以70%乙醇9001111_5001超声提取2次，每次 30min，滤液合并得约1700ml，取滤液蒸干，得到香芸火绒草粗提物5. 13g;
[0040] 方法II:
[0041] 取香芸火绒草干燥粉末100g，室温下以70%乙醇9001111_5001超声提取2次，每次 30min，滤液合并得约1700ml，将滤液减压回收溶剂至无醇味，过AB-8树脂，依次以30 %乙 醇，50%乙醇和70%乙醇洗脱，分别收集各流份，各约400ml，蒸干，分别得到香芸火绒草粗 提物2. 64g，30%乙醇洗脱部位0.83g和70%乙醇洗脱部位0.59g。
[0042] 实施例2香芸火绒草提取物对人成纤维细胞增殖的影响
[0043] 按照实施例1制备的香芸火绒草30%和70%乙醇洗脱部位，用去离子水配制成 0. 02%浓度溶液，加入到人成纤维细胞培养液中，以不含样品的去离子水为空白对照。培养 48小时后，用MTT法对细胞染色后，用酶标仪测定550nm处吸光度，评估对人成纤维细胞的 增殖作用，空白对照的增殖率为100%，增殖率高于120%为对细胞有增殖作用。
[0044] 表1香芸火绒草各洗脱部位对人成纤维细胞增殖的影响
[0045]
[0046] 由表1可知，在本发明中使用的香芸火绒草提取物均对人成纤维细胞增殖具有促 进作用，其中70%乙醇洗脱部位对人成纤维细胞增殖的促进作用最强。
[0047] 实施例3香芸火绒草提取物的抗氧化活性检测
[0048] 将实施例1中制备的香芸火绒草提取物，用DPPH法测定其清除自由基活性。测定 步骤为：将香芸火绒草提取物分别用去离子水配制成水溶液，移取2mL于10mL具塞试管中， 加入2mLDPPH乙醇溶液（2X10 4m〇l/L)，充分混匀，室温静置，30min后用分光光度计测定 517nm波长的吸光度A517(以乙醇为参比）；同时测定2mLDPPH溶液与2mL乙醇混合后的吸 光度A。，以及2mL提取液与2mL乙醇溶液混合后的吸光度A。，平行测定三次，取平均值，根据 以下公式计算自由基清除率。
[0049] 自由基清除率=Q-AfAoVAjX100%。
[0050] 计算结果如表2所示。
[0051] 表 2
[0052]
[0053] 由表1可知，香芸火绒草提取物具有优异的自由基清除作用，作为抗氧化剂是有 用的。因此，可以将香芸火绒草提取物配合在皮肤外用剂中，作为防止肌肤老化、维持年轻 健康的肌肤状态的抗氧化活性物使用。
[0054] 实施例4香芸火绒草提取物的抗老化活性检测
[0055] 将实施例1制备的香芸火绒草提取物，分别溶于去离子水，配制成水溶液，用于测 定弹性蛋白酶抑制活性。测定方法按照文献（Am.J.Pharmacol.Toxicol.，2009, 4, 127-129) 方法进行，测定步骤为：在96孔板中加入10yL样品溶液和130yL含有1. 015mM反应底物 Succ-Ala-Ala-Ala-p-硝基酰替苯胺的0? 1MTris-Cl缓冲溶液（pH8. 0)，在25°C下温育5 分钟，加入15yL弹性蛋白酶溶液（0. 5U/ml)，继续在25°C下温育30min，然后用酶标仪测 定410nm波长的吸光度A41。。用去离子水替换样品水溶液，作为参比溶液同样测定吸光度， 测试结果见表2。
[0056] 弹性蛋白酶活性抑制率计算公式为：抑制率（％ ) = ('-(Am-BD/^XIOO%，其 中A。是参比溶液的吸光度，A41。是样品溶液的吸光度，B是样品空白溶液的吸光度。
[0057] 表 3
[0058]
[0059] 由表3可知，香芸火绒草提取物具有抑制弹性蛋白酶活性的作用，其中，香芸火绒 草70%乙醇部位的抑制作用最强，可以将香芸火绒草提取物配合在皮肤外用剂中，作为防 止肌肤老化、维持年轻健康的肌肤状态的抗老化剂使用。
[0060] 实施例5含有香芸火绒草提取物的皮肤外用剂
[0061] 取实施1中制备的香芸火绒草提取物，用于皮肤外用剂的制备。所述皮肤外用剂 优选为化妆品组合物，例如化妆水、精华液、乳霜等。所述香芸火绒草香芸火绒草提取物在 皮肤外用剂中的重量百分比是〇. 0001-3,优选0. 5-3。以下是香芸火绒草花提取物在皮肤 外用剂中的具体应用的实施例。以下各表中表示无添加。
[0062] 实施例6含有香芸火绒草提取物的化妆水
[0063] 取香芸火绒草提取物，用于制备具有抗衰老、美白作用的化妆水，所述化妆水含有 的组分如表4所示：
[0064] 表 4
[0065]
[0067] 实施例7含有香芸火绒草提取物的精华液
[0068] 取香芸火绒草提取物，用于制备具有抗衰老、美白作用的精华液，所述精华液含有 的组分如表5所不：
[0069] 表 5
[0070]
[0072] 实施例8含有香芸火绒草提取物的乳液/霜
[0073] 取香芸火绒草提取物，用于制备具有抗衰老、美白作用的乳液/霜，所述乳液/霜 含有的组分如表6所不：
[0074] 表 6
[0075]
[0077] 以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精 神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1. 一种香芸火绒草提取物的制备方法，其特征在于，所述的制备方法包括以下两种方 法中的任意一种： 方法I: 将香芸火绒草干燥粉末以体积浓度为50-80 %的乙醇溶液超声提取1-2次，每次 0. 2-1. 5小时，固液分离得滤液，将滤液合并蒸干，得香芸火绒草粗提物；其中，所述香芸火 绒草干燥粉末与所述乙醇溶液的质量体积比为（I :8)-(1 :15)g/mL; 方法II : (1)将香芸火绒草干燥粉末以体积浓度为50-80%的乙醇溶液超声提取1-2次，每次 0. 2-1. 5小时，固液分离得滤液；其中，所述香芸火绒草干燥粉末与所述乙醇溶液的质量体 积比为（I :8)-(1 :15)g/mL ;(2)将所述滤液减压回收溶剂至无醇味，上样到大孔树脂填充 柱，依次用溶剂I、溶剂II和溶剂III洗脱，分别收集洗脱液，再脱除溶剂后，相应地得到洗 脱部位A、洗脱部位B和洗脱部位C，即可；其中，所述溶剂I为体积浓度25-35 %的乙醇溶 液，所述溶剂II为体积浓度45-55%的乙醇溶液，所述溶剂III为体积浓度65-75%的乙醇 溶液。2. 如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，方法I和方法II步骤（1)中，所述的提 取为超声提取，所述的超声提取的温度为室温，超声提取的时间为〇. 5小时，超声提取的次 数为2次。3. 如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，方法II步骤⑵中，所述的大孔树脂填 充柱为AB-8树脂填充柱。4. 一种如权利要求1-3中任一项所述的制备方法制得的香芸火绒草提取物。5. 如权利要求4所述的香芸火绒草提取物具有抗氧化作用。6. 如权利要求4所述的香芸火绒草提取物具有抗衰老作用。7. -种如权利要求4所述的香芸火绒草提取物在制备皮肤外用剂时作为抗老化活性 成分、或者，抗氧化活性成分的应用。8. 如权利要求7所述的应用，其特征在于，所述香芸火绒草提取物在皮肤外用剂组合 物中的重量百分比是0. 0001-3,较好的重量百分比是0. 5-3。
【专利摘要】本发明公开了一种香芸火绒草提取物及其制备方法和应用，所述的制备方法为：将香芸火绒草干燥粉末以体积浓度为50-80％的乙醇溶液超声提取1-2次，每次0.2-1.5小时，固液分离得滤液，将滤液合并蒸干，得香芸火绒草粗提物；其中，所述香芸火绒草干燥粉末与所述乙醇溶液的质量体积比为(1：8)-(1：15)g/mL；所述香芸火绒草提取物具有很好的美白和抗衰老功效，可用于化妆品、保健食品和医药领域，尤其是可应用于化妆品中。
【IPC分类】A61Q19/08, A61Q19/02, A61P17/18, A61P39/06, A61Q19/00, A61Q5/12, A61K36/28, A61K8/97
【公开号】CN105106266
【申请号】CN201510481850
【发明人】章漳, 黄晓青, 方兆华, 李慧, 张佳伟, 陈明华
【申请人】伽蓝（集团）股份有限公司
【公开日】2015年12月2日
【申请日】2015年8月7日