包含PI3Kβ选择性抑制剂和PI3Kα选择性抑制剂的抗肿瘤组合物的制作方法
【专利说明】包含PI3K13选择性抑制剂和PI3Ka选择性抑制剂的抗肿 瘤组合物 阳001] 本发明设及PI3KP抑制剂与PI3Ka抑制剂的组合及其制药用途。
[0002] 憐酸肌醇3-激酶（P13K)是牵设在诸如增殖、细胞存活和细胞转移等诸多细胞功 能中的信号传导分子。PI3K是产生激活若干祀蛋白的第二信使分子的脂质激酶，包括丝氨 酸/苏氨酸激酶，例如PDK1和AKT(也称为P邸）。PI3K分为S种且种类I包含称为P13K曰、 PI3KP、PI3K5 和PI3K丫的四种不同P13K。
[0003] 种类I的PI3K分成两组：种类IA和种类IBPI3K。种类IAPI3K由pllO催化性 (a、P和5同工型）亚单元和p85调节性亚单元之间的异源二聚体组成。
[0004] PI3Ka和P13KP为普遍表达的，并且具有通过酪氨酸激酶受体激活的独特特征。 PI3KP也经G蛋白-偶联的受体所激活（Vanhaesebroecketal.,AnnualReviewofBio chemistiT,vol. 70, 535-602, 2001)。 阳005] 化合物2- {2-[ (2巧-2-甲基-2, 3-二氨-IH-日引噪-1-基]-2-氧代乙基} -6-(吗 嘟-4-基）喀晚-4(3H)-酬（在下文中为化合物（I))是PI3KP同工型的选择性抑制剂。 在使用此化合物处理之后，具有激活PI3K通道的癌细胞（例如，PTEN缺陷型肿瘤细胞（憐 酸醋酶和TE化in同系物基因，在多种晚期癌症中突变）通常经由抑制AktW及Akt下游效 应子的憐酸化、抑制肿瘤细胞增殖和肿瘤细胞死亡诱导来产生应答。 W〇6] 化合物（2巧-Nl-[4-甲基-5-[2-化2,2-;氣-1，1-二甲基乙基）-4-化晚 基]-2-嚷挫基]-1,2-化咯烧二甲酯胺（下文为化合物（II))为PI3Ka同工型（也称为 B化719)的选择性抑制剂。在使用此化合物处理之后，具有激活PI3K通道的癌细胞（PIK3CA 突变的肿瘤细胞）通常经由抑制PI3K祀标例如抑制AktW及Akt下游效应子的憐酸化、抑 制肿瘤细胞增殖和肿瘤细胞死亡诱导来产生应答。
[0007] 更具体地，抑制PTEN缺陷型肿瘤取决于PI3KP传导但是不依赖于PI3Ka传导 (SusanWeeetal.，PNAS, 2008,vol. 105,n。35,P. 13057-13062)。然而，PI3KP抑制剂对 于治疗癌症例如PTEN缺陷型癌症不总是充分的。
[0008] 因此，对向癌症，特别是PTEN缺陷型癌症提供备选的和/或改善的治疗存在需要。
[0009] -般而言，对于治疗癌症的更有效方法和组合物存在持续的需求。还对提供在抑 制肿瘤细胞增殖和/或加速肿瘤细胞死亡中更有效的癌症治疗存在需要。还对患者的毒性 最小化存在需要。对与其它祀向疗法组合的PI3KP抑制剂疗法存在特殊的需求，W希望导 致更高的效率而不实质上增加或甚至保持或减少通常使用的PI3KP抑制剂的剂量。
[0010] 本发明的一个目的是提供新组合产品。
[0011] 本发明的一个目的是提供用于治疗癌症的新组合产品。
[0012] 本发明的一个目的是提供抑制癌细胞增殖和存活的治疗。
[0013] 本发明的另一个目的是提供试剂盒，特别是治疗患癌症的患者的试剂盒。
[0014] 本发明的一个目的是提供药物组合物，特别是用于治疗患癌症的患者的药物组合 物。
[0015] 本发明的另一个目的是提供治疗癌症的方法。
[0016] 本发明因此设及PI3KP抑制剂和PI3Ka抑制剂的组合产品。在一个实施方案中， PI3KP不同于PI3Ka抑制剂。
[0017] 本发明还设及上述组合产品，其用于药物，特别是用于治疗癌症的药物。
[0018] 本发明还设及包含上述组合产品的试剂盒，其特别用于上述用途，用于同时、分开 或依序给药。
[0019] 本发明进一步设及包含上述组合产品的药物组合物。
[0020] 本发明设及治疗方法，包括向患癌症的患者给药上述组合产品。
[0021] 在根据本发明各方面的一个实施方案中，PI3KP抑制剂为对PI3KP具有抑制作 用的化合物。更具体地，它们通常对PI3KP显示出抑制作用，并且对其它同工型即PI3Ka、 PI3K5和PI3K丫具有适度抑制作用或没有抑制作用。
[0022] 在一个实施方案中，它们对PI3KP同工型具有选择性。"选择性PI3KP抑制剂"可 W理解为PI3KP抑制剂相对其它同工型PI3Ka、PI3K5和PI3K丫择优影响特定PI3K0同 工型的能力。PI3KP选择性抑制剂可W具有区分运些同工型的能力，并且因此实质上影响 PI3KP同工型。在一个实施方案中，选择性PI3KP抑制剂不为泛-PI3K抑制剂（pan-P3IK inhibitor)。在一个实施方案中，所述PI3KP抑制剂不抑制mTOR。
[0023]更具体地，在生物化学或细胞实验中，选择性PI3KP抑制剂可W祀向PI3KP， ICso^SOOnM，并且可W相对于其它PI3K同工型PI3Ka、PI3K5和PI3K丫具有选择性， ICw> 250nM.在一个实施方案中，它们可W呈现至少两倍的PI3KP相对其它同工型的抑 制比率。
[0024] 在一个实施方案中，PI3KP抑制剂选自化合物（I)、AZD8186和GSK2636771。在一 个实施方案中，？131(6抑制剂选自化合物（1)、4208186、651(2636771和4206482。在一个 实施方案中，PI3KP抑制剂选自化合物（I)和GSK2636771。 阳0巧]在一个实施方案中，PI3KP抑制剂具有如下定义的结构式（I):
[0026]
[0027] 根据式（I)的PI3KP抑制剂在本申请是指"化合物（I)"。化合物（I)为种类I PI3K的PI3KP同工型的选择性抑制剂。 阳0測化合物（I)可W祀向PI3KP同工型，ICs。为65nM，并且可W相对于其它PI3K同 工型具有选择性，在生物化学实验中在PI3Ka、PI3K5和PI3K丫上的ICs。分别为1188nM、 465nM和高于lOOOOnM。
[0029] 化合物（I)可W不抑制mTOR，更具体地不抑制mTOR，最多至10yM。
[0030] 其选择性也通过将化合物（I)针对一大组的包含超过400种激酶的脂质和蛋白质 激酶进行分析而比较。除了PI3K5和PI3KP同工型，VPS34脂质激酶为显示具有180nM的 亚微摩尔的抑制的唯一激酶；然而，在VPS34上的运个水平的生化活性在使用官能化VPS34 细胞实验（超过10,OOOnM的IC50)的细胞活性中不会翻译。
[0031] 在生化试验中观察到的高水平的PI3KP-同工型选择性于细胞实验中进行证实。
[0032] 为了具体地单独研究式（I)化合物相对各种类IPI3K同工型的细胞活性，AKT在 丝氨酸473残基（pAkt-S473)上的憐酸化的抑制在合适细胞系统（PI3Ka的PIK3CA-突 变的H460肺肿瘤细胞、PI3KP的MEF-3T3-myrpllOP小鼠成纤维细胞过表达激活的 pllOP、PI3K5的MEF-3T3-myrP110 5小鼠成纤维细胞过表达激活的P110 5和PI3K丫 的RAW264. 7小鼠巨隧细胞（在通过C5a刺激AKT憐酸化后））中进行评估，如已经在W下 文献中所描述的（CertalV,化IleyF,Virone-OddosA,DelormeC,KarlssonA,RakAet al.DiscoveryandOptimizationofNewBenzimidazole-andBenzoxazole-Pyrimidone SelectivePI3KPinhibitorsfortheTreatmentofPhosphataseandTENsin homologue(PTEN)-DeficientCancersJ.Med.Qiem. 2012 ;55:4788_4805)。
[0033] 式（I)化合物在依赖于PI3KP的细胞系中可W抑制PI3KP同工型，效能比在 PI3K5 (IC50 为 823nM)上高 26 倍（IC50 为 32nM)。
[0034] 式（I)化合物在细胞和生化试验中于PI3Ka和PI3K丫同工型上可W呈现相同水 平的活性（IC50分别为2, 825和〉3,OOOnM)。 阳03引式（I)化合物在细胞中可W为PI3K0选择性抑制剂。式（I)化合物在PI3K0上 的效能可W分别为在PI3KS、PI3Ka和PI3K丫上的26倍、88倍和超出94倍。
[0036] 化合物（I)的制备、性质和PI3KP抑制能力披露在